2026年生物技术员生物样品分析与检验技术应用题库

2026年生物技术员生物样品分析与检验技术应用题库一、单选题（每题2分，共20题）1.在进行血浆中药物浓度测定时，哪种方法通常不需要预处理的样品是？A.高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）B.气相色谱-质谱法（GC-MS）C.酶联免疫吸附测定（ELISA）D.毛细管电泳法（CE）2.在处理生物样本时，若需要长期储存血清样本，最佳储存条件是？A.-20℃冷冻保存B.室温保存C.4℃冷藏保存D.酸性条件下储存3.在进行细胞培养物中蛋白质定量时，Bradford法与BCA法的主要区别在于？A.测定原理不同B.操作复杂度不同C.适用样品类型不同D.灵敏度不同4.若需检测尿液中微量生物标志物，哪种检测技术最适合？A.流式细胞术（FCM）B.微流控芯片技术C.离子交换色谱法D.毛细管电泳-质谱联用（CE-MS）5.在免疫印迹（WesternBlot）实验中，封闭步骤的主要目的是？A.增强信号强度B.减少非特异性结合C.提高抗体亲和力D.去除样本中的杂质6.进行基因测序时，二代测序（NGS）技术的优势在于？A.高通量测序B.高精度长读长C.单样本测序成本低D.操作简便7.在进行酶联免疫吸附测定（ELISA）时，若出现背景高的情况，可能的原因是？A.抗体浓度过高B.封闭不充分C.样本干扰D.酶标板污染8.在进行细胞凋亡检测时，AnnexinV-FITC/PI双染法的主要原理是？A.检测细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻B.检测细胞DNA片段化C.检测细胞内活性氧水平D.检测细胞表面受体表达9.在进行液相色谱-质谱联用（LC-MS）分析时，选择反相柱（C18）的原因是？A.适用于极性化合物分离B.适用于非极性化合物分离C.稳定性高D.流动相选择灵活10.在进行生物标志物检测时，如何减少批次间差异？A.使用统一标准品B.增加样本量C.优化检测方法D.以上都是二、多选题（每题3分，共10题）1.在进行生物样本前处理时，以下哪些方法可用于去除样本中的内源性干扰物质？A.蛋白酶K消化B.固相萃取（SPE）C.甲醇沉淀D.离心沉淀2.在进行蛋白质组学分析时，以下哪些技术可用于蛋白质鉴定？A.质谱（MS）B.酶联免疫吸附测定（ELISA）C.蛋白质印迹（WesternBlot）D.液相色谱-质谱联用（LC-MS）3.在进行细胞毒性试验时，以下哪些指标可用于评估细胞损伤？A.MTT法B.LDH释放试验C.HCS（高通量细胞成像）D.细胞计数法4.在进行基因表达分析时，以下哪些方法可用于检测mRNA水平？A.qPCRB.NorthernBlotC.RNA测序（RNA-Seq）D.RT-PCR5.在进行生物样品储存时，以下哪些因素会影响储存效果？A.温度B.湿度C.光照D.样本类型6.在进行免疫荧光检测时，以下哪些步骤是必要的？A.样本固定B.封闭内源性过氧化物酶C.一抗孵育D.二抗孵育7.在进行代谢组学分析时，以下哪些技术可用于检测小分子代谢物？A.液相色谱-质谱联用（LC-MS）B.气相色谱-质谱联用（GC-MS）C.核磁共振（NMR）D.红外光谱（IR）8.在进行生物样本处理时，以下哪些方法可用于蛋白质富集？A.固相萃取（SPE）B.免疫亲和磁珠C.盐析D.超滤9.在进行生物标志物验证时，以下哪些指标可用于评估方法的可靠性？A.精密度（CV）B.准确度（回收率）C.线性范围D.检测限（LOD）10.在进行生物样本分析时，以下哪些因素会导致结果偏差？A.样本处理不当B.试剂污染C.仪器漂移D.操作者误差三、判断题（每题1分，共10题）1.在进行酶联免疫吸附测定（ELISA）时，酶标板的清洗次数会影响结果准确性。（√）2.在进行基因测序时，二代测序（NGS）技术只能检测已知序列。（×）3.在进行细胞凋亡检测时，AnnexinV-FITC阳性且PI阴性表示细胞处于早期凋亡状态。（√）4.在进行生物样本储存时，-80℃冷冻是最佳储存条件。（√）5.在进行蛋白质定量时，Bradford法适用于碱性蛋白质。（×）6.在进行免疫荧光检测时，封闭不充分会导致背景高。（√）7.在进行代谢组学分析时，GC-MS适用于极性小分子检测。（×）8.在进行生物标志物验证时，检测限（LOD）越高越好。（×）9.在进行液相色谱-质谱联用（LC-MS）分析时，流动相pH值会影响分离效果。（√）10.在进行细胞毒性试验时，MTT法只能检测活细胞。（√）四、简答题（每题5分，共5题）1.简述高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）在生物样品分析中的优势。2.解释酶联免疫吸附测定（ELISA）中“封闭”步骤的作用。3.描述细胞凋亡检测中AnnexinV-FITC/PI双染法的原理及结果判读。4.列举三种减少生物样本分析批次间差异的方法。5.简述在进行蛋白质组学分析时，蛋白质鉴定常用的技术有哪些。五、论述题（每题10分，共2题）1.结合实际应用，论述生物样本前处理的重要性及其常见方法。2.阐述生物标志物验证的必要性，并说明常用的验证指标和方法。答案与解析一、单选题1.A-解析：LC-MS/MS适用于直接分析血浆样本中的药物及其代谢物，无需复杂预处理。GC-MS对极性化合物分离效果差；ELISA需要抗体和底物反应；CE适用于小分子分离，但灵敏度不如MS/MS。2.A-解析：-20℃冷冻可抑制酶活性，防止样本降解，适用于长期储存。室温易导致蛋白质变性；4℃仅适用于短期保存；酸性条件下可能影响某些蛋白质稳定性。3.A-解析：Bradford法基于蛋白质与考马斯亮蓝结合显色，而BCA法基于还原性氨基酸与Cu2+反应显色，测定原理不同。两者操作复杂度相近，适用样品类型均限于蛋白质，但Bradford法更灵敏。4.B-解析：微流控芯片技术适用于微量样本检测，可集成多种检测步骤，适合尿液中微量生物标志物检测。FCM用于细胞分析；离子交换色谱法用于分离；CE-MS适用于高精度检测，但操作复杂。5.B-解析：封闭步骤可阻断抗体与样本无关位点结合，减少非特异性吸附，提高检测特异性。增强信号强度是显色步骤作用；提高抗体亲和力是抗体优化问题；去除杂质是前处理步骤。6.A-解析：NGS技术通过高通量测序实现大量样本并行分析，是当前主流测序方法。长读长是三代测序特点；单样本成本低是数字PCR优势；操作简便性因技术不同而异。7.B-解析：封闭不充分会导致抗体非特异性结合，使背景高。抗体浓度过高会直接导致信号高；样本干扰需优化提取方法；酶标板污染需清洗或更换。8.A-解析：AnnexinV-FITC结合磷脂酰丝氨酸外翻的细胞，PI染色区分活细胞和死细胞，用于检测早期凋亡。DNA片段化检测是TUNEL法；活性氧检测需ROS探针；受体表达检测是流式细胞术。9.B-解析：C18反相柱适用于分离非极性化合物，因疏水相互作用为主。极性化合物常用HILIC柱；稳定性高是材料特性；流动相选择灵活是反相柱优势，但主要原因是分离非极性化合物。10.D-解析：减少批次间差异需统一标准品、优化方法、增加样本量等综合措施。单一方法无法完全消除差异。二、多选题1.A,B,C,D-解析：蛋白酶K消化降解蛋白质；SPE去除杂质；甲醇沉淀浓缩目标物；离心去除沉淀。2.A,D-解析：质谱和LC-MS用于蛋白质鉴定；ELISA和WesternBlot用于定量。3.A,B,C,D-解析：MTT法检测活细胞；LDH释放试验检测细胞膜损伤；HCS通过图像分析细胞状态；细胞计数法评估细胞数量。4.A,C,D-解析：qPCR和RNA-Seq检测mRNA水平；NorthernBlot已较少使用；RT-PCR可检测mRNA但灵敏度低于qPCR。5.A,B,C,D-解析：温度影响酶活性；湿度影响样本降解；光照导致氧化；样本类型决定储存条件。6.A,B,C,D-解析：样本固定是基础；封闭阻断非特异性结合；一抗和二抗特异性结合。7.A,B,C-解析：LC-MS和GC-MS用于代谢物检测；NMR和IR主要用于结构鉴定。8.A,B,C-解析：SPE和免疫亲和磁珠用于富集；盐析和超滤用于分离。9.A,B,C,D-解析：精密度、准确度、线性范围和检测限是评估方法可靠性的关键指标。10.A,B,C,D-解析：样本处理不当、试剂污染、仪器漂移和操作者误差均会导致结果偏差。三、判断题1.√-解析：ELISA中封闭不充分会导致抗体非特异性结合，使背景高，影响结果准确性。2.×-解析：NGS技术可进行全基因组测序，无需已知序列。3.√-解析：AnnexinV-FITC阳性表示细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻，PI阴性表示细胞未通透，为早期凋亡。4.√-解析：-80℃可抑制酶活性，防止样本降解，是长期储存最佳条件。5.×-解析：Bradford法适用于酸性蛋白质，因考马斯亮蓝在酸性条件下与蛋白质结合更稳定。6.√-解析：封闭不充分会导致抗体非特异性结合，使背景高。7.×-解析：GC-MS适用于非极性小分子检测，极性分子需用LC-MS。8.×-解析：检测限（LOD）越低越好，表示方法灵敏度越高。9.√-解析：流动相pH值影响离子化程度，进而影响分离效果。10.√-解析：MTT法通过活细胞线粒体还原MTT显色，死细胞无法还原。四、简答题1.高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）在生物样品分析中的优势-高灵敏度：可检测痕量生物标志物；-高选择性：可同时检测多种化合物；-高通量：适用于大规模样本分析；-定量准确性高：结合内标或标准曲线可实现精确定量。2.酶联免疫吸附测定（ELISA）中“封闭”步骤的作用-阻断抗体与样本无关位点结合，减少非特异性吸附；-提高检测特异性，降低背景噪声。3.细胞凋亡检测中AnnexinV-FITC/PI双染法的原理及结果判读-原理：AnnexinV-FITC结合磷脂酰丝氨酸外翻的细胞，PI染色区分活细胞和死细胞；-结果判读：-FITC阳性/PI阴性：早期凋亡；-FITC阳性/PI阳性：晚期凋亡或细胞坏死；-FITC阴性/PI阴性：活细胞；-FITC阴性/PI阳性：死细胞。4.减少生物样本分析批次间差异的方法-使用统一标准品校准仪器；-优化检测方法，如优化试剂浓度和孵育时间；-增加样本量，提高统计学可靠性。5.蛋白质组学分析中常用的蛋白质鉴定技术-质谱（MS）；-液相色谱-质谱联用（LC-MS）；-蛋白质印迹（WesternBlot）。五、论述题1.生物样本前处理的重要性及其常见方法-重要性：生物样本成分复杂，前处理可去除干扰物质，富集目标分子，提高检测准确性和灵敏度。-常见方法：-提取：液-液萃取、固相萃取（SPE）；-