新冠肺炎核酸检测人员考核试题及答案

新冠肺炎核酸检测人员考核试题及答案一、单项选择题（每题2分，共40分）1.新冠病毒核酸检测中，咽拭子采样时应擦拭的主要部位是（）A.舌尖B.软腭C.双侧扁桃体及咽后壁D.悬雍垂2.核酸检测样本采集后，若不能立即送检，需在4℃条件下保存的最长时间为（）A.6小时B.12小时C.24小时D.48小时3.实验室进行新冠病毒核酸提取时，生物安全柜的紫外线消毒时间应不少于（）A.15分钟B.30分钟C.45分钟D.60分钟4.以下哪种情况不属于样本采集的“无效样本”（）A.采样拭子头未接触咽后壁B.样本管标签与信息系统登记不符C.样本保存液体积为1.5ml（标准2-3ml）D.采样后2小时内完成送检5.新冠病毒核酸检测实验室的污染区主要功能是（）A.试剂准备B.样本处理与核酸提取C.扩增反应体系配制D.扩增产物分析6.使用全自动核酸提取仪时，若出现“磁珠残留”报警，最可能的原因是（）A.样本量不足B.裂解液未充分混匀C.磁珠与核酸结合时间过短D.洗涤液添加量过多7.核酸检测结果判读时，若Ct值为38且扩增曲线不典型，应（）A.直接判定为阳性B.判定为阴性C.重新采样检测D.报告“检测结果不确定”8.采样人员穿戴防护服时，最后一步应完成（）A.戴护目镜B.戴N95口罩C.检查防护服密封性D.戴手套9.新冠病毒核酸检测中，内标（内参）的主要作用是（）A.验证扩增体系有效性B.提高检测灵敏度C.区分不同变异株D.减少交叉污染10.样本转运箱的消毒应使用（）A.75%乙醇擦拭B.500mg/L含氯消毒液喷洒C.2000mg/L含氯消毒液擦拭D.紫外线照射30分钟11.咽拭子采样时，患者出现刺激性咳嗽，采样人员应（）A.立即后退避开B.暂停采样待患者平复C.快速完成采样后离开D.要求患者佩戴口罩后继续12.实验室高压蒸汽灭菌的标准条件是（）A.100℃，30分钟B.121℃，15分钟C.134℃，5分钟D.160℃，2小时13.以下哪种情况不会导致假阴性结果（）A.采样时患者处于感染早期（病毒载量低）B.样本保存温度过高（>25℃）超过6小时C.扩增仪温度校准偏差（±0.5℃）D.提取试剂过期但未出现沉淀14.核酸检测实验室的“三区两缓”中，“两缓”指（）A.试剂准备区与样本处理区缓冲间、样本处理区与扩增区缓冲间B.清洁区与污染区缓冲间、污染区与半污染区缓冲间C.办公区与实验区缓冲间、实验区与废弃物处理区缓冲间D.阳性对照区与阴性对照区缓冲间、扩增区与分析区缓冲间15.采样时若患者口腔有出血，正确的处理是（）A.更换采样拭子继续采样B.暂停采样并记录，更换防护装备后重新采样C.用生理盐水冲洗患者口腔后采样D.增加采样深度确保采集到足量样本16.核酸检测质量控制中，阴性对照出现扩增曲线，最可能的原因是（）A.引物设计错误B.样本交叉污染C.扩增仪升温速率过慢D.提取试剂中混入阳性核酸17.新冠病毒RNA保存液（非灭活型）的主要成分是（）A.胍盐B.福尔马林C.生理盐水D.病毒运输培养基（VTM）18.实验室发生样本管破裂泄漏时，应首先（）A.用吸水纸覆盖泄漏区域B.喷洒2000mg/L含氯消毒液C.关闭生物安全柜风机D.报告实验室负责人19.鼻拭子采样时，拭子插入深度应为（）A.鼻尖到耳垂距离的1/2B.鼻尖到耳屏距离的1/3C.鼻尖到外耳道口距离的2/3D.无明确要求，以接触鼻黏膜为准20.核酸检测报告中，“Ct值”的含义是（）A.循环阈值，指荧光信号达到设定阈值时的扩增循环数B.浓度阈值，指核酸浓度达到检测下限的临界值C.交叉阈值，指阳性与阴性结果的分界值D.校正阈值，指仪器自动校正后的荧光强度值二、多项选择题（每题3分，共30分，少选、错选均不得分）1.新冠病毒核酸检测采样人员的个人防护装备应包括（）A.医用防护口罩（N95及以上）B.护目镜或防护面屏C.一次性隔离衣或防护服D.双层乳胶手套（内层非粉、外层无粉）2.实验室核酸提取环节的质量控制要点包括（）A.提取试剂的效期与储存条件B.样本与试剂的加样体积准确性C.磁珠转移过程中是否有丢失D.提取后核酸的浓度与纯度（A260/A280比值）3.样本采集时需核对的信息包括（）A.受检者姓名、身份证号B.采样时间、采样类型（咽/鼻拭子）C.样本管编号与信息系统登记号D.受检者近期是否接种新冠疫苗（48小时内）4.实验室生物安全操作规范包括（）A.操作前用75%乙醇消毒生物安全柜台面B.离心管需加盖后再放入离心机C.废弃的采样拭子直接投入黄色医疗废物袋D.实验结束后用紫外线消毒生物安全柜30分钟5.导致核酸检测假阳性的常见原因有（）A.扩增产物污染（气溶胶）B.阳性对照与样本同时处理时操作不当C.提取试剂中混入外源性核酸D.样本保存液被污染6.咽拭子采样的正确操作包括（）A.受检者头部微仰，嘴张大，发“啊”音B.拭子越过舌根，擦拭双侧扁桃体及咽后壁3-5次C.采样过程中避免拭子触碰受检者牙齿、舌头或口腔黏膜D.采样后立即将拭子头浸入保存液，折断柄部并旋紧管盖7.实验室废弃物处理要求包括（）A.感染性废物需双层黄色医疗废物袋封装B.废弃的核酸提取磁珠属于化学性废物C.高压蒸汽灭菌后的废物需标注“已灭菌”D.废液需用2000mg/L含氯消毒液浸泡30分钟后排放8.核酸检测实验室的环境监测内容包括（）A.各功能区的压差（污染区<-10Pa，缓冲区<-5Pa）B.空气洁净度（万级或十万级）C.紫外线灯的辐照强度（≥70μW/cm²）D.地面与台面的微生物菌落数（≤5CFU/皿）9.采样时遇到婴幼儿，正确的处理方式有（）A.由家长固定婴幼儿头部，避免晃动B.采样动作轻柔，减少刺激C.若婴幼儿哭闹不配合，可改为鼻拭子采样D.采样后给予安抚，避免剧烈哭闹导致呕吐10.核酸检测结果审核的要点包括（）A.检测方法与试剂是否符合国家批准要求B.质控品结果是否在允许范围内（阴性对照无扩增，阳性对照Ct值≤30）C.样本信息与检测结果是否一一对应D.异常结果（如单靶标阳性、Ct值接近临界值）的复核记录三、判断题（每题1分，共10分，正确打“√”，错误打“×”）1.核酸检测样本转运时，转运箱内需放置冰袋，使箱内温度维持在2-8℃。（）2.采样人员脱防护服时，应先脱手套，再摘护目镜，最后脱防护服。（）3.实验室扩增区可同时进行阳性样本处理和扩增产物分析。（）4.鼻拭子采样时，若一侧鼻腔有出血，可换至另一侧鼻腔继续采样。（）5.核酸提取时，若样本量不足（<0.1ml），可通过增加提取次数提高检测灵敏度。（）6.实验室发生样本泄漏时，消毒后需用无菌拭子涂抹泄漏区域，进行环境核酸检测确认。（）7.受检者采样前30分钟内吸烟、饮酒不会影响检测结果。（）8.核酸检测试剂的校准品用于验证检测系统的准确性，质控品用于监测检测过程的稳定性。（）9.采样管标签模糊时，可直接在原标签上覆盖新标签，无需重新核对信息。（）10.实验室工作人员出现发热症状时，应立即停止工作并进行核酸检测，结果阴性后方可返岗。（）四、简答题（每题6分，共30分）1.简述新冠病毒核酸检测中“咽拭子采样”的操作要点及注意事项。2.实验室如何预防核酸扩增产物污染（气溶胶污染）？请列出至少4项措施。3.核酸检测结果出现“单靶标阳性”（如ORF1ab阳性、N基因阴性）时，应如何处理？4.采样过程中，若发现受检者为新冠肺炎确诊病例的密接者（未佩戴口罩），采样人员应采取哪些应急措施？5.简述实验室“样本接收与登记”的质量控制流程。五、案例分析题（每题10分，共20分）案例1：某实验室在进行新冠核酸检测时，发现同一批次10份样本中，5份样本的Ct值为35-38（N基因），且扩增曲线呈拖尾现象，其余样本结果均为阴性，质控品（阴性对照无扩增，阳性对照Ct=25）结果正常。问题：分析可能导致该现象的原因，并提出处理建议。案例2：采样人员在社区采样时，一名受检者突然告知“昨天刚接种了新冠疫苗（灭活疫苗）”，并担心影响检测结果。问题：采样人员应如何回应？需告知受检者哪些注意事项？--答案一、单项选择题1.C2.C3.B4.D5.B6.B7.C8.C9.A10.C11.B12.B13.C14.A15.B16.D17.D18.A19.C20.A二、多项选择题1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABD5.ABCD6.ABCD7.ACD8.ABCD9.ABCD10.ABCD三、判断题1.√2.×（正确顺序：先摘护目镜/面屏，再脱防护服，最后脱手套）3.×（扩增区仅用于扩增反应和产物分析，不得处理样本）4.√5.×（样本量不足应重新采样，不可通过增加提取次数弥补）6.√7.×（吸烟、饮酒可能刺激咽喉部，影响采样质量）8.√9.×（标签模糊需重新核对信息并更换新标签，确保唯一性）10.×（需隔离并检测，结果阴性且排除感染后经审批返岗）四、简答题1.操作要点：（1）受检者头部微仰，嘴张大，发“啊”音，充分暴露咽后壁；（2）采样拭子越过舌根，快速擦拭双侧扁桃体隐窝、咽后壁3-5次；（3）避免拭子触碰牙齿、舌头或口腔黏膜；（4）采样后立即将拭子头垂直浸入保存液，折断柄部并旋紧管盖，避免保存液外溢。注意事项：（1）每采1人更换1次手套或消毒手；（2）采样前后检查保存液体积（2-3ml）及样本管完整性；（3）对婴幼儿、昏迷等无法配合者，需协助固定头部，动作轻柔；（4）采样过程中若受检者咳嗽、打喷嚏，采样人员应保持安全距离（≥1米）。2.预防措施：（1）严格分区操作，扩增区与其他区域物理隔离，避免交叉；（2）使用带滤芯的吸头，防止气溶胶吸入移液器；（3）扩增反应管应在生物安全柜内开启，避免剧烈震荡；（4）定期对实验室环境（尤其是扩增区）进行核酸污染监测（如用无核酸酶水擦拭台面后检测）；（5）实验结束后，用10%次氯酸钠溶液擦拭台面，紫外线照射30分钟；（6）阳性对照与样本分开处理，阳性对照最后加入。3.处理流程：（1）复核原始数据，确认扩增曲线是否符合阳性判定标准（Ct值≤40且曲线有明显指数增长期）；（2）若复核后仍为单靶标阳性，需重新提取原样本核酸进行检测；（3）若二次检测结果一致，需结合受检者流行病学史、临床症状综合判断；（4）建议受检者重新采样检测（优先鼻拭子），并采集血清进行抗体检测；（5）按规定报告“单靶标阳性”，并注明需结合临床综合判断。4.应急措施：（1）立即暂停采样，要求受检者佩戴医用外科口罩（若未佩戴）；（2）采样人员退至安全距离（≥2米），保持通风；（3）更换外层手套，用75%乙醇消毒防护面屏；（4）记录受检者信息（姓名、联系方式、密接情况），上报采样点负责人；（5）该受检者样本需单独封装，标注“密接者样本”，优先送检；（6）采样结束后，对该受检者采样区域用2000mg/L含氯消毒液擦拭消毒。5.质量控制流程：（1）核对样本管信息（编号、姓名、采样时间）与送检单、信息系统是否一致；（2）检查样本保存状态：保存液无泄漏、样本无凝固或变色、温度记录（2-8℃）符合要求；（3）记录样本接收时间，若超过保存时限（4℃≤24小时，-20℃≤7天）需备注“超时样本”；（4）对不合格样本（标签错误、保存液不足、严重溶血等）登记并退回，要求重新采样；（5）样本交接双方签字确认，保存记录至少3年。五、案例分析题案例1：可能原因：（1）样本病毒载量极低（处于感染早期或恢复期），导致扩增信号弱；（2）采样质量不佳（拭子未充分接触感染部位），样本中病毒核酸量少；（3）提取过程中核酸丢失（如磁珠转移不完全、洗涤次数过多）；（4）扩增体系中Mg²+浓度偏低或引物探针效率下降（试剂接近效期）；（5）扩增仪孔间温度差异（个别孔温度偏差导致扩增效率降低）。处理建议：（1）复核原样本的扩增曲线，确认是否为有效阳性（排除引物二聚体干扰）；（2）重新提取原样本核酸，用同一试剂或更换另一厂家试剂检测；（3）若二次检测仍为Ct值35-38，建议受检者重新采样（优先鼻拭子）；（4）对实验室环境（提取区、