2025病原生物学微生物鉴定试题及答案

2025病原生物学微生物鉴定试题及答案一、单项选择题（每题1分，共30分。每题只有一个最佳答案，请将正确选项字母涂黑）1.某腹泻患儿粪便标本直接涂片见大量革兰阳性、卵圆形、芽生、有假菌丝的微生物，最可能的鉴定试验是A.触酶试验B.尿素酶试验C.芽管形成试验D.氧化酶试验答案：C2.在麦康凯平板上形成无色、透明、直径1mm、不发酵乳糖菌落，氧化酶阴性，赖氨酸脱羧酶阳性，该菌最可能是A.伤寒沙门菌B.弗劳地枸橼酸杆菌C.志贺菌D.摩根菌答案：A3.下列哪项试验可用于鉴别金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌A.新生霉素敏感试验B.凝固酶试验C.6.5%NaCl生长试验D.杆菌肽敏感试验答案：B4.布鲁菌属的“卫星现象”是指A.需X因子B.需V因子C.需CO₂D.靠近葡萄球菌划线处菌落增大答案：D5.疑为侵袭性曲霉感染，首选的初代培养基是A.沙氏葡萄糖琼脂B.马铃薯葡萄糖琼脂C.察氏培养基D.含氯霉素沙氏琼脂答案：D6.下列哪种病毒可引起“玫瑰疹”样皮疹并可在外周血单个核细胞中建立潜伏感染A.HHV6B.HHV7C.HHV8D.VZV答案：A7.关于艰难梭菌毒素检测，下列哪项描述正确A.细胞毒试验靶细胞为VeroB.毒素A/B胶体金法可区分A⁻B⁺株C.GDH抗原阳性即可确诊D.毒素B可使CHO细胞圆缩答案：D8.某患者痰标本在BCYEα平板上形成灰白色、湿润、有虹彩边缘菌落，革兰阴性细杆菌，尿素酶强阳性，最可能的病原是A.鲍曼不动杆菌B.嗜肺军团菌C.百日咳鲍特菌D.流感嗜血杆菌答案：B9.下列哪项不是白念珠菌的表型特征A.厚膜孢子形成B.45℃生长C.氯化三苯四氮唑还原红色D.芽管试验阳性答案：C10.关于碳青霉烯酶表型确证试验，下列组合正确的是A.EDTA+亚胺培南→MetalloβlactamaseB.硼酸+美罗培南→KPCC.氯唑西林+厄他培南→OXA48D.3氨基苯基硼酸→NDM答案：B11.某脓液标本厌氧培养48h出现“面包屑”样菌落，Gram阳性棒状，触酶阴性，吲哚阳性，最可能是A.痤疮丙酸杆菌B.迟钝真杆菌C.梭形梭菌D.产气荚膜梭菌答案：A12.下列哪种寄生虫卵具有明显“肩峰”结构A.蛔虫受精卵B.鞭虫卵C.蛲虫卵D.钩虫卵答案：B13.关于结核分枝杆菌快速培养系统，下列哪项正确A.BACTECMGIT960采用荧光淬灭原理B.报告阳性即代表活菌>10⁵CFU/mLC.需加入PANTA抑制杂菌D.培养基含对硝基苯甲酸答案：C14.某患者外周血厚涂片吉姆萨染色见红细胞内“戒指”样小体，大小1.5μm，偏于一侧，最可能是A.恶性疟原虫早期滋养体B.间日疟原虫晚期滋养体C.卵形疟原虫裂殖体D.三日疟原虫配子体答案：A15.关于诺如病毒检测，下列哪项描述错误A.RTqPCR为参考方法B.抗原ELISA灵敏度>95%C.基因Ⅰ群主要感染人D.临床标本首选粪便答案：B16.某脑脊液标本墨汁负染色见圆形、厚壁、出芽、有宽阔荚膜的酵母样细胞，最可能的生化特征是A.尿素酶阴性/37℃生长B.尿素酶阳性/37℃生长C.酚氧化酶阳性/25℃生长D.不发酵葡萄糖答案：B17.下列哪项不是产单核李斯特菌的鉴定要点A.冷增菌4℃B.伞状运动C.CAMP试验阳性D.氧化酶阳性答案：D18.关于HPV分型检测，下列哪项技术可同时提供致癌风险信息A.二代测序B.反向线点杂交C.实时荧光PCRD.质谱答案：B19.某伤口分泌物涂片见革兰阳性粗大杆菌，无芽孢，菌体呈“栅栏”排列，培养需L半胱氨酸，最可能是A.炭疽芽孢杆菌B.棒状杆菌属C.红斑丹毒丝菌D.产气荚膜梭菌答案：C20.关于ESBL确证试验，CLSI推荐的双纸片法抑菌圈直径差值阈值为A.≥3mmB.≥5mmC.≥7mmD.≥10mm答案：B21.下列哪种立克次体可在无细胞培养基中生长A.普氏立克次体B.莫氏立克次体C.恙虫病东方体D.贝纳柯克斯体答案：D22.某患者角膜刮片10%KOH湿片见分枝分隔菌丝，45°角分枝，最可能是A.曲霉B.镰刀菌C.赛多孢D.毛霉答案：A23.关于VRE表型检测，下列哪项正确A.万古霉素MIC≥8mg/L为耐药B.肠球菌含vanA基因对替考拉宁敏感C.纸片扩散法抑菌圈≤14mm即报告耐药D.自动化系统无需复核答案：C24.某腹泻患者粪便TCBS平板出现黄色、扁平、2mm菌落，氧化酶阳性，赖氨酸脱羧酶阴性，最可能是A.霍乱弧菌B.副溶血弧菌C.拟态弧菌D.河弧菌答案：B25.关于SARSCoV2变异株检测，下列哪项突变位点与奥密克戎BA.5亚型高度相关A.L452RB.E484KC.P681RD.N501Y答案：C26.某患者支气管灌洗液培养7天后出现白色干燥菌落，Gram阳性球菌，改良抗酸阳性，最可能是A.诺卡菌B.链霉菌C.棒状杆菌D.红球菌答案：A27.关于阴道毛滴虫实验室诊断，下列哪项描述正确A.吉姆萨染色可查包囊B.培养基需加入兔血清C.4℃可长期保存活虫D.PCR灵敏度低于湿片答案：B28.下列哪项不是大肠埃希菌O157:H7的表型特征A.山梨醇阴性B.葡萄糖醛酸酶阳性C.赖氨酸脱羧酶阳性D.不发酵棉子糖答案：B29.某患者血培养报阳，涂片见革兰阴性球杆菌，需CO₂，生长缓慢，尿素酶强阳性，最可能的鉴定路径是A.布鲁菌→氧化酶+B.嗜血杆菌→X+V因子C.巴斯德菌→氧化酶+D.军团菌→BCYE答案：A30.关于真菌药敏试验CLSIM38A2，下列哪项描述正确A.曲霉推荐24h判读B.念珠菌用RPMI1640pH7.0C.终点判读为100%抑制D.米卡芬净MIC折点与EUCAST一致答案：B二、配伍题（每题1分，共20分。每组选项可重复选用，但每题只有一个最佳答案）A.触酶阳性B.氧化酶阳性C.动力25℃阳性D.动力37℃阳性E.葡萄糖发酵产酸产气31.肺炎克雷伯菌（）32.铜绿假单胞菌（）33.产单核李斯特菌（）34.奇异变形杆菌（）35.鲍曼不动杆菌（）答案：31E32B33C34D35AA.芽管形成B.厚膜孢子C.假菌丝D.脲酶强阳性E.酚氧化酶36.新生隐球菌（）37.白念珠菌（）38.曲霉（）39.毛孢子菌（）40.赛多孢（）答案：36D37A38E39B40CA.万古霉素耐药基因B.碳青霉烯酶基因C.红霉素耐药基因D.甲氧西林耐药基因E.四环素耐药基因41.mecA（）42.vanA（）43.bla_KPC（）44.ermB（）45.tetM（）答案：41D42A43B44C45EA.葡萄糖发酵B.乳糖发酵C.H₂S产生D.吲哚产生E.尿素酶46.大肠埃希菌（）47.奇异变形杆菌（）48.伤寒沙门菌（）49.肺炎克雷伯菌（）50.弗劳地枸橼酸杆菌（）答案：46B47E48C49B50A三、填空题（每空1分，共20分）51.结核分枝杆菌细胞壁脂质成分中，_________可刺激机体产生迟发型超敏反应，其纯化蛋白衍生物简称_________。答案：索状因子/PPD52.真菌细胞壁主要多糖为_________和_________，其中_________是曲霉GM试验靶抗原。答案：β葡聚糖/几丁质/半乳甘露聚糖53.产ESBLs菌株对_________类抗生素水解活性可被_________抑制，CLSI推荐确证药物为_________与_________。答案：氧亚氨基/克拉维酸/头孢他啶/头孢他啶克拉维酸54.诺卡菌属改良抗酸染色呈_________，其细胞壁含_________酸，与结核分枝杆菌区别要点为_________。答案：弱阳性/分枝菌/触酶强阳性及45℃生长55.疟原虫在蚊体内的有性阶段称为_________，在人体内红细胞外期寄生于_________细胞，红细胞内期裂殖子释放导致_________热型。答案：配子体/肝/间歇56.霍乱毒素由_________亚单位结合GM1神经节苷脂，_________亚单位进入胞内激活_________酶，导致cAMP升高。答案：B/A/腺苷酸环化57.新生隐球菌荚膜主要成分为_________，其酚氧化酶在_________培养基上产生_________色素。答案：葡糖醛酸木糖甘露聚糖/咖啡酸玉米meal/棕黑58.艰难梭菌毒素B使Rho蛋白_________化，导致细胞_________凋亡，实验室可用_________细胞系检测。答案：糖基/圆缩/CHO59.肺炎链球菌奥普托欣敏感试验抑菌圈≥_________mm为敏感，其耐药机制主要为_________蛋白变异，可用_________基因PCR确证。答案：14/PBP/ply60.阴道毛滴虫运动细胞器为_________，其能量代谢主要依赖_________酶，实验室培养最适pH为_________。答案：鞭毛/氢/6.0四、简答题（每题8分，共40分）61.试述耐碳青霉烯类肠杆菌科（CRE）的表型确证流程，并说明各方法优缺点。答案：（1）纸片扩散法：采用美罗培南+硼酸（KPC）、美罗培南+EDTA（金属酶），观察≥5mm增强即阳性；优点简便，缺点无法区分型别。（2）CarbaNP试验：裂解菌液+亚胺培南+酚红，产酸变黄<60min；优点快速、成本低，缺点对低水平表达株灵敏度下降。（3）mCIM/eCIM：美罗培南悬液与指示菌共培养，抑菌圈≤19mm为阳性；eCIM加入EDTA区分金属酶；CLSI推荐，可定量。（4）Hodge试验：待检菌与敏感大肠埃希菌交叉划线，见增强生长为阳性；操作繁琐，已逐步淘汰。（5）分子方法：XpertCarbaR、LAMP可检KPC、NDM、VIM、IMP、OXA48；高灵敏度，可直接用肛拭子，但成本高。综合建议：初筛用CarbaNP或mCIM，阳性保存菌株送测序，医院感染控制以分子结果为准。62.比较白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌的四种关键生化反应结果，并说明临床意义。答案：白念珠菌：芽管+，厚膜孢子+，葡萄糖产气+，45℃生长+；最常见定植与感染，对氟康唑敏感。热带念珠菌：芽管，蔗糖发酵+，45℃生长+，MTT还原强阳性；易形成生物膜，可致侵袭性真菌血症，对氟康唑MIC升高。光滑念珠菌：芽管，蔗糖，45℃生长，尿素酶；对棘白菌素天然敏感，但易获得性耐药，需MIC监测。克柔念珠菌：芽管，蔗糖，45℃生长，尿素酶+；对氟康唑天然耐药，经验用药需选棘白菌素。快速区分可避免经验性氟康唑治疗失败，降低死亡率。63.描述结核分枝杆菌GeneXpertMTB/RIFUltra检测原理，并说明其与传统固体培养的优缺点。答案：原理：超声裂解标本释放DNA，采用半巢式实时PCR扩增rpoB81bp核心区，探针覆盖5个分子信标，熔解曲线分析突变即RIF耐药；内参为枯草芽孢杆菌孢子监控提取抑制。优点：2h出结果，生物安全要求低，灵敏度比GXP高17%，对涂阴培阳标本检出率>90%，可同时报告RIF耐药，适合基层。缺点：不能检测异烟肼、氟喹诺酮耐药，成本约28美元/份，对非结核分枝杆菌（NTM）可假阳性，仍需培养法获得菌株用于全基因组测序与药敏复核。传统固体培养：LJ培养需48周，灵敏度5080%，但可获全药敏谱，费用低，适合资源有限地区；两者互补。64.阐述诺如病毒GⅡ型RTqPCR引物设计策略，并列举抑制物控制方法。答案：策略：（1）靶区选择：衣壳蛋白VP1高度保守N/S结构域，GenBank比对>5000条，设计简并引物覆盖GⅡ.1Ⅱ.17；（2）探针：TaqManMGB探针，5’FAM3’NFQ，跨探针引物二级结构ΔG>2kcal/mol；（3）扩增子长度<120bp，GC%4555%，Tm5860℃，引物末端为G/C；（4）加入RNA内参（MS2噬菌体）监控提取与扩增效率；（5）采用dUTP/UNG防污染体系。抑制物控制：①稀释模板1:10；②使用SDS蛋白酶K磁珠法去除多糖胆盐；③加入0.1%BSA或T4gp32增强聚合酶抗抑制；④内参Ct>35重提；⑤采用内部阳性对照（IPC）探针HEX标记，区分真阴性。65.说明高毒力肺炎克雷伯菌（hvKP）与传统经典肺炎克雷伯菌（cKP）的微生物学及临床差异，并列出实验室快速筛查方案。答案：微生物学差异：hvKP拉丝试验>5mm，携带质粒编码铁载体（rmpA、rmpA2、iroBCDN、iucABCD），黏液表型，常K1/K2血清型；cKP拉丝阴性，以KPC、NDM耐药为主。临床差异：hvKP好发于社区健康青年，引起肝脓肿、眼内炎、脑膜炎，病死率<5%但转移灶高；cKP多为医院获得，致VAP、血流感染，耐药率高，病死率>30%。筛查方案：（1）拉丝试验：过夜培养菌落用接种环提拉>5mm为阳性，灵敏度92%，特异度95%；（2）PCR：采用iroB与rmpA双基因，30min快速提取+LAMP，阳性预示高毒力；（3）MALDITOF：建立hvKP谱库，峰值m/z7150、9680为标志，2min完成；（4）显色培养基：ChromIDCARBA检测碳青霉烯酶，结合拉丝可区分hvKP耐药株；（5）全基因组：平均核苷酸一致性≥95%，携带≥4个铁载体基因即可确认。对拉丝阳性菌株应报告“hvKP可能”，提醒临床加强影像随访与口服喹诺酮预防转移灶。五、案例分析题（每题15分，共30分）66.病史：45岁男性，肝移植术后第18天，突发高热39.8℃，血压下降，PCT18ng/mL，血培养两瓶报阳，涂片见Gram阳性球菌，链状排列。24h后平皿形成0.5mm灰白色、β溶血、湿润菌落，触酶阴性，CAMP试验阳性，PYR阴性，胆汁七叶苷阳性，奥普托欣6mm，万古霉素MIC4mg/L。问题：（1）给出最可能的菌种与鉴定路径；（5分）（2）解释奥普托欣抑菌圈缩小的机制；（3分）（3）列出对该菌有效的三种药物及剂量；（3分）（4）如何区分该菌与无乳链球菌、肠球菌？（4分）答案：（1）化脓链球菌（Streptococcuspyogenes，A群链）；路径：Gram阳性链状+触酶阴+CAMP阳+PYR阴+LancefieldA抗原乳胶凝集。（2）奥普托欣抑菌圈缩小与高浓度胆汁、生理盐水有关，需用5%羊血MH琼脂，纸片含量5μg，24h判读；移植后免疫抑制导致菌落小，溶血弱，易误判。（3）青霉素G4MUq4hiv、头孢曲松2gq12hiv、克林霉素600mgq8hiv（大环内酯耐药率>30%）。（4）无乳链球菌：CAMP阳性但PYR阳性、胆汁七叶苷阴、LancefieldB；肠球菌：触酶阴、胆汁七叶苷阳、PYR阳、万古霉素耐药常见、LancefieldD；可用PYR、胆汁七叶苷、Lancefield快速乳胶区分。67.病史：28岁女性，妊娠26周，持续头痛、低热37.8℃，颈抵抗（+），脑脊液清亮，WBC120×10⁶/L（淋巴90%），蛋白0.8g/L，糖2.0mmol/L（同步血糖5.2mmol/L），墨汁负染色见圆形、出芽、荚膜宽厚酵母。培养3天后出现棕黑色菌落，尿素酶强阳性，API20CAUX：葡萄糖+、乳糖、蔗糖、棉子糖、卫矛醇、37℃生长+、42℃生长+。问题：（1）给出病原菌名称与血清型推断；（3分）（2）解释脑脊液糖降低机制；（3分）（3）列出对该菌敏感的三种抗真菌药物及中枢穿透率；（4分）（4）制定该孕妇的分娩与新生儿管理方案。（5分）答案：（1）新生隐球菌格鲁比变种（Cryptococcusgattii，血清型B/C），棕黑菌落提示酚氧化酶阳性，与C.neoformans区别。（2）隐球菌荚膜抑制吞噬，大量酵母消耗葡萄糖，同时炎症介质增加糖酵解，导致脑脊液糖降低。（3）两性霉素B脂质体（0.7mg/kg/d，CSF/血<10%）、氟胞嘧啶（100mg/kg/d分4次，CSF/血>75%）、氟康唑（400mg/d，CSF/血>70%）；诱导期联合两性霉素B+氟胞嘧啶2周，巩固期氟康唑8周。（4）妊娠中期抗真菌治疗收益大于风险；继续妊娠，避免氟胞嘧啶（致畸），改用两性霉素B单药诱导；分娩方式无特殊，新生儿出生后取脐血、胎盘、耳道、胃液真菌培养；若阳性给予氟康唑预防6mg/kg/d×6周；母婴随访1年，每2月行血清CrAg检测。六、综合应用题（30分）68.某三甲医院2024年第四季度ICU发生3例碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌（CRAB）血流感染，时间相距<7d，药敏谱完全一致（亚胺培南、美罗培南、头孢他啶/阿维巴坦均耐药，替加环素MIC0.5mg/L，舒巴坦MIC16