病理技术考试题及答案(题库版)

病理技术考试题及答案(题库版)一、单项选择题（共50题，每题1分）1.病理技术中最常用的固定液是（）。A.95%乙醇B.10%中性缓冲福尔马林C.Carnoy固定液D.Zenker固定液2.在常规石蜡包埋过程中，组织块经过脱水、透明后，浸入的介质是（）。A.乙醇B.二甲苯C.石蜡D.丙酮3.苏木精-伊红染色（H&E）中，苏木精染液通常呈（）。A.酸性B.碱性C.中性D.不确定4.为了显示组织中的糖原，最常用的染色方法是（）。A.PAS染色法B.Masson三色染色法C.油红O染色法D.刚果红染色法5.免疫组化染色中，最常用的抗原修复方法是（）。A.酶消化法B.微波加热法（柠檬酸缓冲液或EDTA）C.冷冻法D.紫外线照射法6.脱钙过程中，常用的脱钙液是（）。A.10%硝酸B.5%醋酸C.生理盐水D.75%酒精7.冰冻切片制备中，最常用的包埋剂是（）。A.石蜡B.OCT胶C.琼脂D.明胶8.下列哪种固定液对染色体固定效果较好，常用于骨髓活检？（）A.10%福尔马林B.Bouin固定液C.乙醇D.甲醛-酒精固定液9.组织切片经苏木精染色后，为了使细胞核着色清晰，通常使用的分化液是（）。A.1%盐酸酒精B.氨水C.乙醇D.伊红染液10.在常规H&E染色中，细胞质被染成什么颜色？（）A.蓝色B.红色C.紫色D.黄色11.下列关于脱水剂乙醇的描述，错误的是（）。A.脱水能力强B.可硬化组织D.可直接与石蜡混合12.网状纤维染色常用的染色剂是（）。A.伊红B.硝酸银C.苏丹IIID.甲苯胺蓝13.免疫组化染色中，DAB显色后的阳性结果通常呈（）。A.蓝色B.红色C.棕黄色D.绿色14.组织块取材后，固定液的体积应是组织块体积的（）。A.1-2倍B.5-10倍C.20-30倍D.50倍以上15.透明剂二甲苯的主要作用是（）。A.脱水B.置换乙醇并使组织透明C.染色D.固定16.常规石蜡切片厚度通常为（）。A.1-2μmB.3-5μmC.8-10μmD.20-30μm17.细胞学涂片固定中，常用的固定液是（）。A.95%乙醇B.10%福尔马林C.丙酮D.甲醇18.Masson三色染色中，胶原纤维通常被染成（）。A.红色B.蓝色C.绿色D.黄色19.抗酸染色中，结核杆菌被染成（）。A.蓝色B.红色C.黑色D.黄色20.下列哪种情况不适合使用冰冻切片？（）A.术中快速病理诊断B.脂肪组织染色C.酶的组织化学定位D.需要长期保存的档案标本21.组织切片中出现“展片不均”或有“裂纹”，最常见的原因是（）。A.蜡块太冷B.蜡块太热C.切片刀钝D.水温太高22.用来显示嗜银颗粒的染色方法是（）。A.Giemsa染色B.Grimelius染色C.AB-PAS染色D.普鲁士蓝染色23.在免疫荧光技术中，常用的荧光素是（）。A.HRPB.FITCC.DABD.AP24.为了消除内源性过氧化物酶对免疫组化的干扰，通常使用（）。A.正常羊血清封闭B.3%H₂O₂孵育C.Tris缓冲液冲洗D.PBS缓冲液冲洗25.脱水不彻底的组织，在切片时容易出现（）。A.切片碎裂B.切片过厚C.切片卷曲D.组织空洞26.HE染色中，造成细胞核呈灰蓝色或蓝色不鲜艳的原因是（）。A.分化过度B.分化不足C.脱水过度D.透明过度27.乙型肝炎表面抗原（HBsAg）免疫组化染色阳性部位通常在（）。A.细胞核B.细胞膜C.细胞质D.间质28.普鲁士蓝染色主要用于显示（）。A.铜沉积B.钙沉积C.铁沉积D.脂褐素29.切片刀的研磨角度通常为（）。A.10°-15°B.20°-25°C.30°-35°D.45°30.在电子显微镜技术中，常用的固定液是（）。A.10%福尔马林B.2.5%戊二醛C.95%乙醇D.甲醇31.组织块从低浓度到高浓度乙醇梯度脱水，主要目的是（）。A.节省试剂B.防止组织收缩变形C.加快脱水速度D.增加组织硬度32.下列哪种染色法用于显示肥大细胞？（）A.甲苯胺蓝染色B.瑞氏染色C.巴氏染色D.抗酸染色33.免疫组化中，一抗孵育的最佳温度通常是（）。A.4℃B.37℃C.室温（18-25℃）D.60℃34.石蜡切片脱蜡至水，第一步操作是（）。A.100%乙醇IB.二甲苯IC.95%乙醇D.蒸馏水35.显示真菌最常用的特殊染色是（）。A.PAS染色B.网状纤维染色C.弹性纤维染色D.Masson染色36.细胞凋亡检测中，TUNEL法的原理是检测（）。A.蛋白质表达B.DNA断裂C.RNA表达D.糖原变化37.封固剂中性树胶的溶剂通常是（）。A.乙醇B.二甲苯C.水D.丙酮38.下列哪种固定液穿透力最强？（）A.苦味酸B.甲醛C.重铬酸钾D.四氧化锇39.常规病理技术中，组织块的厚度一般不超过（）。A.0.1cmB.0.3cmC.0.5cmD.1.0cm40.在HE染色中，伊红是（）。A.细胞核染料B.细胞质染料C.两者都是D.两者都不是41.为了防止组织在脱水过程中过度硬化，高浓度乙醇的时间应（）。A.延长B.缩短C.不变D.视情况而定42.下列关于冰冻切片的描述，正确的是（）。A.细胞结构比石蜡切片更清晰B.不能做免疫组化C.适用于脂质检测D.操作步骤比石蜡切片多43.骨组织脱钙后，必须进行下列哪项处理才能判断脱钙终点？（）A.冲洗B.针刺法C.再次固定D.染色44.免疫组化染色中，设置阳性对照的目的是（）。A.节省试剂B.检测抗原是否存在C.验证染色系统的有效性D.减少背景染色45.黏液卡红染色主要显示（）。A.酸性黏液B.中性黏液C.两者都是D.两者都不是46.切片时产生“皱褶”的主要原因是（）。A.切片刀角度过大B.组织块过硬C.蜡块边缘不整齐或切片刀有缺口D.切片速度过快47.下列哪种缓冲液常用于免疫组化的抗原修复？（）A.PBSB.枸橼酸盐缓冲液（pH6.0）C.Tris-HClD.碳酸缓冲液48.在瑞氏染色中，缓冲液的最适pH值为（）。A.5.5B.6.4-6.8C.7.2-7.4D.8.049.显微镜油镜使用的油是（）。A.石蜡油B.香柏油C.甘油D.橄榄油50.组织芯片制作过程中，受体蜡块通常需要打孔，孔径一般为（）。A.0.5mmB.1.0-2.0mmC.5.0mmD.10mm二、多项选择题（共30题，每题2分）1.常规病理技术包括哪些主要步骤？（）A.取材B.固定C.脱水、透明、包埋D.切片、染色、封固2.下列哪些属于混合固定液？（）A.10%中性缓冲福尔马林B.Bouin液C.Carnoy液D.95%乙醇3.组织固定的目的包括（）。A.防止组织自溶B.防止细菌腐败C.保存组织抗原性D.使组织硬化便于切片4.常用的脱水剂有（）。A.乙醇B.丙酮C.正丁醇D.二甲苯5.下列哪些情况会导致组织脱水不净？（）A.乙醇浓度不够B.脱水时间过短C.组织块过厚D.室温过低6.常用的透明剂有（）。A.二甲苯B.苯C.氯仿D.香柏油7.石蜡切片机的主要组成部分包括（）。A.切片刀B.蜡块夹持器C.标本传送装置D.厚度调节旋钮8.常规HE染色中，导致细胞核染色过深（呈黑色）的原因有（）。A.苏木精染色时间过长B.分化不足C.苏木精浓度过高D.胞浆着色影响9.免疫组化染色中，产生非特异性背景染色的原因有（）。A.内源性生物素B.一抗浓度过高C.孵育时间过长D.血清封闭不充分10.常用的细胞核复染液有（）。A.苏木精B.甲基绿C.伊红D.DAPI11.下列哪些染色法用于显示纤维？（）A.Masson三色染色B.网状纤维染色C.弹性纤维染色D.PAS染色12.冰冻切片的缺点包括（）。A.切片厚度较厚B.组织结构不如石蜡切片清晰C.不易长期保存D.设备昂贵13.组织切片中出现“气泡”的原因可能是（）。A.烤片温度过高B.封固剂混入空气C.盖玻片未放平D.组织脱水不彻底14.下列哪些属于特殊染色？（）A.抗酸染色B.吉姆萨染色C.普鲁士蓝染色D.HE染色15.免疫组化染色中，抗原修复的方法包括（）。A.高压加热修复B.微波炉修复C.胰酶消化修复D.胃蛋白酶消化修复16.脱钙时应注意的事项包括（）。A.脱钙液要足量B.每日更换脱钙液C.脱钙后必须彻底冲洗D.随时检查脱钙程度17.病理技术中常用的封固剂有（）。A.中性树胶B.甘油明胶C.水溶性封固剂D.加拿大树胶18.下列关于组织取材的描述，正确的有（）。A.取材要快B.取材部位要准确C.组织块大小要适中D.不同组织应分开包埋19.影响免疫组化染色结果的因素包括（）。A.抗体的浓度和孵育时间B.抗原修复方式C.组织固定时间D.切片厚度20.常用的显示脂质的染色方法有（）。A.苏丹III染色B.油红O染色C.刚果红染色D.PAS染色21.下列哪些固定液含有苦味酸？（）A.Bouin液B.Zenker液C.Carnoy液D.Helly液22.病理实验室常用的安全防护措施包括（）。A.穿戴防护服和手套B.通风橱操作有毒试剂C.废液分类处理D.定期检查仪器设备23.造成石蜡切片“连片”或“展不开”的原因有（）。A.水温过低B.蜡边过窄C.切片刀过钝D.组织太硬24.下列哪些染色用于鉴别细胞类型？（）A.免疫组化CK染色B.免疫组化Vimentin染色C.免疫组化LCA染色D.HE染色25.常规脱水程序中，乙醇浓度梯度通常设置为（）。A.75%B.85%C.95%D.100%26.组织块在透明过程中出现“收缩”或“变脆”，可能是因为（）。A.二甲苯中混入水分B.透明时间过长C.组织脱水不彻底D.温度过高27.免疫组化常用的显色底物有（）。A.DABB.AECC.NBT/BCIPD.伊红28.下列关于苏木精染液的配制，正确的是（）。A.需要氧化成熟B.可用氧化剂如氧化汞C.配制后可立即使用D.储存液可长期保存29.细胞学检查的优点包括（）。A.操作简单B.设备要求低C.可早期发现肿瘤D.能观察组织结构30.数字病理扫描技术的优势包括（）。A.标本可永久数字化存储B.便于远程会诊C.可进行定量分析D.完全替代传统显微镜三、判断题（共30题，每题1分）1.福尔马林固定液穿透力强，固定均匀，是病理学的万能固定液。（）2.组织块越大，固定液穿透的时间越短。（）3.脱水剂的浓度必须由低到高，否则会引起组织强烈收缩。（）4.二甲苯不仅可以透明，还可以溶解石蜡。（）5.冰冻切片不能用于常规诊断，只能用于科研。（）6.HE染色中，分化是指将细胞核上过染的颜色褪去。（）7.免疫组化染色中，PBS缓冲液的主要作用是维持pH值和提供离子环境。（）8.脱钙后的组织可以直接进行包埋，无需特殊处理。（）9.所有的免疫组化抗体都需要进行抗原修复。（）10.细胞质中的嗜酸性物质易被碱性染料着色。（）11.组织切片的厚度与染色深浅成正比。（）12.Bouin固定液对染色体和糖原固定效果好，且不需水洗。（）13.网状纤维染色中，氨水液的作用是敏化。（）14.内源性过氧化物酶主要存在于红细胞、粒细胞和巨噬细胞中。（）15.封固时，树胶太稠容易产生气泡，太稀容易溢出。（）16.切片刀的刀刃越锋利，切片质量越好，使用寿命越长。（）17.组织芯片技术可以在一张切片上同时观察多个组织样本。（）18.荧光显微镜需要使用特殊的激发光源和滤光片。（）19.病理技术中，所有的废弃试剂都可以直接倒入下水道。（）20.乙醇既是脱水剂，也是固定剂。（）21.PAS染色阳性结果呈紫红色。（）22.免疫组化阳性对照切片不显色，说明实验失败。（）23.冰冻切片中，组织如果冻结有冰晶，会严重影响细胞形态。（）24.常规石蜡包埋时，温度应控制在60℃左右。（）25.酸性固定液（如Zenker液）固定后的组织，染色前必须脱酸。（）26.刚果红染色用于显示淀粉样物质，且在偏振光显微镜下呈苹果绿双折射。（）27.酶组织化学实验中，组织固定时间越长，酶活性保留越好。（）28.液基细胞学技术（TCT）相比传统涂片，提高了标本的阳性检出率。（）29.病理诊断是疾病诊断的金标准。（）30.显微镜的分辨率与物镜的数值孔径（NA）成正比，与光波波长成反比。（）四、填空题（共20空，每空1分）1.病理技术学的主要研究内容包括：固定技术、________技术、包埋技术、切片技术、________技术和封固技术。2.常规H&E染色中，H代表________，E代表________。3.组织固定的基本原理是通过化学试剂与蛋白质发生________，从而使蛋白质凝固。4.免疫组化技术中，辣根过氧化物酶（HRP）的常用显色底物是________，显色结果通常呈________色。5.石蜡切片机切片时，组织块应固定在________上，切片刀应安装在________上。6.脱钙完全的判定标准是：针刺组织________，且无________感。7.显示脂肪组织常用________染色，脂肪滴被染成________色。8.网状纤维染色中，使用的银染液是________，网状纤维呈________色。9.为了减少免疫组化的非特异性染色，通常在使用一抗前用________血清进行封闭。10.组织块从固定液取出后，进入脱水程序前，必须进行________。11.冰冻切片中，为了防止组织产生冰晶，通常采用________法或________法处理组织。12.电子显微镜样品制备中，常用的包埋介质是________。13.病理技术中，常用的组织透明剂是________，它既能置换乙醇，又能溶解石蜡。14.Masson三色染色中，肌纤维被染成________色，胶原纤维被染成________色。15.抗原修复主要有两种机制：________和________。五、名词解释（共10题，每题3分）1.固定2.脱水3.透明4.免疫组织化学5.抗原修复6.冰冻切片7.网状纤维8.脱钙9.细胞学涂片10.嗜酸性六、简答题（共5题，每题5分）1.简述10%中性缓冲福尔马林（NBF）的配制原理及其在病理技术中的优势。2.简述常规石蜡切片（HE染色）的基本流程及各步骤的主要目的。3.简述免疫组化染色中产生非特异性背景染色的常见原因及解决方法。4.简述冰冻切片制作中产生冰晶的原因及其预防措施。5.简述病理技术人员在进行取材和固定时应注意的事项。七、综合分析题（共3题，每题10分）1.某病理技术员在进行一批淋巴结活检标本的HE染色时，发现切片中细胞核染色淡，结构模糊，而细胞质染色鲜艳。请分析可能的原因是什么？并提出相应的解决方案。2.在进行乳腺癌HER2免疫组化检测中，发现阳性对照组织切片着色清晰，但待测组织切片完全未着色（阴性），且组织形态结构完好。请分析导致该现象的可能原因有哪些？（请至少列出5点）3.某实验室在进行骨组织标本处理时，因急需报告，采用了强酸快速脱钙法。脱钙后进行常规脱水、包埋、切片及HE染色。镜下观察发现：细胞核形态尚可，但细胞质染色不均，且组织切片上有许多细小的空洞，组织结构松散。请分析出现这些问题的原因，并说明在骨组织脱钙过程中应注意哪些原则以避免此类问题。答案与解析一、单项选择题1.B解析：10%中性缓冲福尔马林（NBF）穿透力强，固定均匀，对大多数抗原保存较好，且能防止福尔马林色素生成，是病理最常用的固定液。解析：10%中性缓冲福尔马林（NBF）穿透力强，固定均匀，对大多数抗原保存较好，且能防止福尔马林色素生成，是病理最常用的固定液。2.C解析：组织经脱水、透明后，必须进入熔化的石蜡中浸蜡，使石蜡渗入组织内部，以便于包埋支撑。解析：组织经脱水、透明后，必须进入熔化的石蜡中浸蜡，使石蜡渗入组织内部，以便于包埋支撑。3.B解析：苏木精是染细胞核的染料，属于碱性染料（媒染剂作用下带正电荷），易与带负电荷的核酸结合。解析：苏木精是染细胞核的染料，属于碱性染料（媒染剂作用下带正电荷），易与带负电荷的核酸结合。4.A解析：PAS（过碘酸-雪夫反应）染色是显示多糖（如糖原、黏液）和糖蛋白的经典方法。解析：PAS（过碘酸-雪夫反应）染色是显示多糖（如糖原、黏液）和糖蛋白的经典方法。5.B解析：微波加热（柠檬酸缓冲液pH6.0或EDTApH9.0）是目前最常用、效果最确切的抗原修复方法。解析：微波加热（柠檬酸缓冲液pH6.0或EDTApH9.0）是目前最常用、效果最确切的抗原修复方法。6.A解析：10%硝酸是强脱钙剂，脱钙速度快，适用于较大的骨组织。解析：10%硝酸是强脱钙剂，脱钙速度快，适用于较大的骨组织。7.B解析：OCT（OptimalCuttingTemperature）胶是冰冻切片专用的包埋剂，支持组织并在低温下凝固。解析：OCT（OptimalCuttingTemperature）胶是冰冻切片专用的包埋剂，支持组织并在低温下凝固。8.B解析：Bouin液（苦味酸-甲醛-醋酸）对染色体、核仁固定极佳，且收缩小，常用于造血系统活检。解析：Bouin液（苦味酸-甲醛-醋酸）对染色体、核仁固定极佳，且收缩小，常用于造血系统活检。9.A解析：1%盐酸酒精是标准的分化液，用于去除组织上过染的苏木精及胞浆中的着色。解析：1%盐酸酒精是标准的分化液，用于去除组织上过染的苏木精及胞浆中的着色。10.B解析：伊红是酸性染料，使细胞质（嗜酸性）着红色。解析：伊红是酸性染料，使细胞质（嗜酸性）着红色。11.D解析：乙醇与石蜡不互溶，必须经过二甲苯过渡。解析：乙醇与石蜡不互溶，必须经过二甲苯过渡。12.B解析：网状纤维是嗜银纤维，硝酸银染色是其核心步骤。解析：网状纤维是嗜银纤维，硝酸银染色是其核心步骤。13.C解析：DAB（二氨基联苯胺）是HRP最敏感的显色底物，产物呈棕黄色沉淀。解析：DAB（二氨基联苯胺）是HRP最敏感的显色底物，产物呈棕黄色沉淀。14.C解析：固定液体积应至少是组织体积的20倍，以保证固定液充足和渗透均匀。解析：固定液体积应至少是组织体积的20倍，以保证固定液充足和渗透均匀。15.B解析：二甲苯既能置换组织中的乙醇，又能溶解石蜡，同时使组织折光率与玻璃接近而呈透明状。解析：二甲苯既能置换组织中的乙醇，又能溶解石蜡，同时使组织折光率与玻璃接近而呈透明状。16.B解析：常规石蜡切片厚度为3-5μm，在此厚度下细胞结构重叠少，透光性好。解析：常规石蜡切片厚度为3-5μm，在此厚度下细胞结构重叠少，透光性好。17.A解析：95%乙醇穿透快，能较好保存细胞形态和抗原，是细胞学涂片的首选固定液。解析：95%乙醇穿透快，能较好保存细胞形态和抗原，是细胞学涂片的首选固定液。18.B解析：在Masson三色染色中，胶原纤维通常被染成蓝色（苯胺蓝），肌纤维红色。解析：在Masson三色染色中，胶原纤维通常被染成蓝色（苯胺蓝），肌纤维红色。19.B解析：抗酸染色（Ziehl-Neelsen法）中，结核杆菌和麻风杆菌等抗酸杆菌被染成红色，背景蓝色。解析：抗酸染色（Ziehl-Neelsen法）中，结核杆菌和麻风杆菌等抗酸杆菌被染成红色，背景蓝色。20.D解析：石蜡切片质量稳定，适合长期保存；冰冻切片虽然快，但长期保存形态易变差。解析：石蜡切片质量稳定，适合长期保存；冰冻切片虽然快，但长期保存形态易变差。21.A解析：蜡块太冷，石蜡收缩，切片展开时易碎裂或皱缩不均。解析：蜡块太冷，石蜡收缩，切片展开时易碎裂或皱缩不均。22.B解析：Grimelius银染用于显示内分泌细胞中的嗜银颗粒。解析：Grimelius银染用于显示内分泌细胞中的嗜银颗粒。23.B解析：FITC（异硫氰酸荧光素）发黄绿色荧光，是应用最广的荧光素。解析：FITC（异硫氰酸荧光素）发黄绿色荧光，是应用最广的荧光素。24.B解析：3%H₂O₂能破坏组织内的内源性过氧化物酶活性，防止DAB非特异性显色。解析：3%H₂O₂能破坏组织内的内源性过氧化物酶活性，防止DAB非特异性显色。25.D解析：脱水不净，组织中残留水分，进入石蜡后会形成不均匀的蜡块，切片时组织空洞。解析：脱水不净，组织中残留水分，进入石蜡后会形成不均匀的蜡块，切片时组织空洞。26.A解析：分化过度导致细胞核结合的苏木精被过多洗去，颜色变淡。解析：分化过度导致细胞核结合的苏木精被过多洗去，颜色变淡。27.B解析：HBsAg是病毒表面抗原，主要表达在受感染肝细胞的细胞膜上（呈环状）或胞浆。解析：HBsAg是病毒表面抗原，主要表达在受感染肝细胞的细胞膜上（呈环状）或胞浆。28.C解析：普鲁士蓝反应（Perls）是显示三价铁（含铁血黄素）的特异性反应。解析：普鲁士蓝反应（Perls）是显示三价铁（含铁血黄素）的特异性反应。29.B解析：切片刀的研磨角度通常为20°-25°，角度过大切片卷曲，过小切片震动。解析：切片刀的研磨角度通常为20°-25°，角度过大切片卷曲，过小切片震动。30.B解析：戊二醛是电镜标准的初级固定剂，对超微结构保存极佳。解析：戊二醛是电镜标准的初级固定剂，对超微结构保存极佳。31.B解析：梯度脱水是为了避免组织因剧烈渗透压变化而收缩或变形。解析：梯度脱水是为了避免组织因剧烈渗透压变化而收缩或变形。32.A解析：甲苯胺蓝是异染性染料，可将肥大细胞颗粒染成紫红色。解析：甲苯胺蓝是异染性染料，可将肥大细胞颗粒染成紫红色。33.C解析：室温孵育最方便，也可4℃过夜以增加敏感性；37℃较少用除非特殊优化。解析：室温孵育最方便，也可4℃过夜以增加敏感性；37℃较少用除非特殊优化。34.B解析：切片进入水浴前，必须先脱蜡，第一步是二甲苯。解析：切片进入水浴前，必须先脱蜡，第一步是二甲苯。35.A解析：真菌细胞壁含多糖，PAS染色呈阳性（紫红色）。解析：真菌细胞壁含多糖，PAS染色呈阳性（紫红色）。36.B解析：TUNEL法通过标记DNA断裂末端的3'-OH来检测凋亡细胞。解析：TUNEL法通过标记DNA断裂末端的3'-OH来检测凋亡细胞。37.B解析：中性树胶是溶于二甲苯的树脂，需与切片中的二甲苯互溶才能封固。解析：中性树胶是溶于二甲苯的树脂，需与切片中的二甲苯互溶才能封固。38.B解析：甲醛穿透力最强，约1mm/h；苦味酸最慢。解析：甲醛穿透力最强，约1mm/h；苦味酸最慢。39.C解析：常规固定厚度一般不超过0.5cm（5mm），以保证固定液充分穿透。解析：常规固定厚度一般不超过0.5cm（5mm），以保证固定液充分穿透。40.B解析：伊红是酸性染料，主要染细胞质。解析：伊红是酸性染料，主要染细胞质。41.B解析：高浓度乙醇吸水性强，易致组织过度硬化，时间应缩短。解析：高浓度乙醇吸水性强，易致组织过度硬化，时间应缩短。42.C解析：冰冻切片不经有机溶剂处理，保留了组织内的脂质，适用于脂质染色。解析：冰冻切片不经有机溶剂处理，保留了组织内的脂质，适用于脂质染色。43.B解析：针刺法是临床最简便的判断脱钙终点的方法，感觉无阻力即脱钙完全。解析：针刺法是临床最简便的判断脱钙终点的方法，感觉无阻力即脱钙完全。44.C解析：阳性对照用于验证整个染色系统（试剂、操作）是否有效。解析：阳性对照用于验证整个染色系统（试剂、操作）是否有效。45.B解析：黏液卡红（Mucicarmine）主要显示中性黏液和上皮黏液（如癌中的黏液），呈红色。解析：黏液卡红（Mucicarmine）主要显示中性黏液和上皮黏液（如癌中的黏液），呈红色。46.C解析：蜡块边缘不整齐或刀刃有缺口，会导致切片在展开时受力不均产生皱褶。解析：蜡块边缘不整齐或刀刃有缺口，会导致切片在展开时受力不均产生皱褶。47.B解析：柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）是应用最广泛的修复液。解析：柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）是应用最广泛的修复液。48.B解析：瑞氏染色对pH敏感，最适pH为6.4-6.8，偏酸红细胞偏红，偏碱偏蓝。解析：瑞氏染色对pH敏感，最适pH为6.4-6.8，偏酸红细胞偏红，偏碱偏蓝。49.B解析：香柏油折光率与玻璃相近（n=1.515），能减少光线散射，提高分辨率。解析：香柏油折光率与玻璃相近（n=1.515），能减少光线散射，提高分辨率。50.B解析：组织芯片阵列孔径一般为1.0-2.0mm，太小代表性不足，太大失去高通量意义。解析：组织芯片阵列孔径一般为1.0-2.0mm，太小代表性不足，太大失去高通量意义。二、多项选择题1.ABCD解析：涵盖从取材到封固的全过程。解析：涵盖从取材到封固的全过程。2.BC解析：Bouin（甲醛-苦味酸-醋酸）和Carnoy（乙醇-氯仿-冰醋酸）是经典混合固定液。解析：Bouin（甲醛-苦味酸-醋酸）和Carnoy（乙醇-氯仿-冰醋酸）是经典混合固定液。3.ABCD解析：固定是为了防止自溶腐败、保存成分（抗原/酶）并赋予组织硬度。解析：固定是为了防止自溶腐败、保存成分（抗原/酶）并赋予组织硬度。4.ABC解析：乙醇、丙酮、正丁醇均为常用脱水剂。解析：乙醇、丙酮、正丁醇均为常用脱水剂。5.ABCD解析：浓度低、时间短、块厚、温度低都会导致脱水不彻底。解析：浓度低、时间短、块厚、温度低都会导致脱水不彻底。6.ABC解析：二甲苯、苯、氯仿均为常用透明剂，苯毒性大。解析：二甲苯、苯、氯仿均为常用透明剂，苯毒性大。7.ABCD解析：均为切片机核心部件。解析：均为切片机核心部件。8.ABCBC解析：染色过久、分化不足、浓度过高都会导致核过染。解析：染色过久、分化不足、浓度过高都会导致核过染。9.ABCD解析：内源性生物素、抗体过浓、时间过长、封闭不足均会导致背景染色。解析：内源性生物素、抗体过浓、时间过长、封闭不足均会导致背景染色。10.ABD解析：苏木精、甲基绿、DAPI均为核染料。解析：苏木精、甲基绿、DAPI均为核染料。11.ABC解析：Masson（胶原）、网状纤维、弹性纤维染色均为纤维染色。解析：Masson（胶原）、网状纤维、弹性纤维染色均为纤维染色。12.ABC解析：冰冻切片厚度较大（5-10μm），结构不如石蜡精细，且长期保存易褪色。解析：冰冻切片厚度较大（5-10μm），结构不如石蜡精细，且长期保存易褪色。13.BC解析：封固时操作不当混入空气或盖玻片未压平易产生气泡。解析：封固时操作不当混入空气或盖玻片未压平易产生气泡。14.ABC解析：HE是常规染色，其他为特殊染色。解析：HE是常规染色，其他为特殊染色。15.ABCD解析：热修复（高压、微波）和酶修复（胰酶、胃酶）是两大类方法。解析：热修复（高压、微波）和酶修复（胰酶、胃酶）是两大类方法。16.ABCD解析：脱钙需足量、勤换、冲洗、检查。解析：脱钙需足量、勤换、冲洗、检查。17.ABCD解析：均为常用封固剂，水溶性用于荧光等特殊染色。解析：均为常用封固剂，水溶性用于荧光等特殊染色。18.ABCD解析：取材要求准确、快速、大小适宜、分类处理。解析：取材要求准确、快速、大小适宜、分类处理。19.ABCD解析：抗体浓度、修复方式、固定时间、切片厚度均影响IHC结果。解析：抗体浓度、修复方式、固定时间、切片厚度均影响IHC结果。20.AB解析：苏丹III和油红O是显示中性脂肪的染色剂。解析：苏丹III和油红O是显示中性脂肪的染色剂。21.ABD解析：Bouin、Zenker、Helly均含苦味酸。解析：Bouin、Zenker、Helly均含苦味酸。22.ABCD解析：生物安全、环境保护、设备维护是实验室安全核心。解析：生物安全、环境保护、设备维护是实验室安全核心。23.AB解析：水温低蜡边硬不展，蜡边窄切片易粘在一起。解析：水温低蜡边硬不展，蜡边窄切片易粘在一起。24.ABC解析：CK（上皮）、Vim（间叶）、LCA（淋巴）是常用的鉴别标记物。解析：CK（上皮）、Vim（间叶）、LCA（淋巴）是常用的鉴别标记物。25.ABCD解析：标准梯度为75%-85%-95%-100%。解析：标准梯度为75%-85%-95%-100%。26.ABC解析：进水、时间过长、脱水不净均可导致组织在透明中受损。解析：进水、时间过长、脱水不净均可导致组织在透明中受损。27.ABC解析：DAB、AEC（HRP底物），NBT/BCIP（AP底物）。解析：DAB、AEC（HRP底物），NBT/BCIP（AP底物）。28.ABD解析：苏木精需氧化成熟（自然氧化或化学氧化），氧化汞是强氧化剂。解析：苏木精需氧化成熟（自然氧化或化学氧化），氧化汞是强氧化剂。29.ABC解析：细胞学简单、快速、可早期筛查，但缺乏组织结构。解析：细胞学简单、快速、可早期筛查，但缺乏组织结构。30.ABC解析：数字病理便于存储、会诊和定量，但尚未完全替代传统显微镜。解析：数字病理便于存储、会诊和定量，但尚未完全替代传统显微镜。三、判断题1.对解析：NBF是通用标准固定液。解析：NBF是通用标准固定液。2.错解析：组织越大，穿透越慢，中心固定越晚。解析：组织越大，穿透越慢，中心固定越晚。3.对解析：梯度脱水防止渗透压剧变引起组织收缩。解析：梯度脱水防止渗透压剧变引起组织收缩。4.对解析：二甲苯是石蜡的溶剂。解析：二甲苯是石蜡的溶剂。5.错解析：冰冻切片广泛用于术中快速病理诊断。解析：冰冻切片广泛用于术中快速病理诊断。6.对解析：分化即褪去多余染料。解析：分化即褪去多余染料。7.对解析：PBS提供稳定的pH和离子环境，维持抗体活性。解析：PBS提供稳定的pH和离子环境，维持抗体活性。8.错解析：脱钙后必须充分冲洗以去除酸，否则影响染色。解析：脱钙后必须充分冲洗以去除酸，否则影响染色。9.错解析：部分抗原在福尔马林中未被遮蔽，无需修复。解析：部分抗原在福尔马林中未被遮蔽，无需修复。10.错解析：嗜酸性物质易被碱性染料（如伊红）着色，这是命名的历史原因（嗜酸性=喜酸=染酸色=红）。解析：嗜酸性物质易被碱性染料（如伊红）着色，这是命名的历史原因（嗜酸性=喜酸=染酸色=红）。修正说明：此处逻辑容易混淆。嗜酸性指细胞质特性，易与酸性染料（伊红）结合。题目说“易被碱性染料着色”是错误的。修正说明：此处逻辑容易混淆。嗜酸性指细胞质特性，易与酸性染料（伊红）结合。题目说“易被碱性染料着色”是错误的。11.错解析：切片越厚，染液渗透越慢，通常着色越浅。解析：切片越厚，染液渗透越慢，通常着色越浅。12.错解析：Bouin液含苦味酸（黄色），染色前必须用酒精或水洗去，否则背景黄。解析：Bouin液含苦味酸（黄色），染色前必须用酒精或水洗去，否则背景黄。13.错解析：氨水液的作用是促进还原银析出（显色），敏化通常用敏化剂（如高锰酸钾）。解析：氨水液的作用是促进还原银析出（显色），敏化通常用敏化剂（如高锰酸钾）。14.对解析：这些细胞富含内源性过氧化物酶。解析：这些细胞富含内源性过氧化物酶。15.对解析：树胶稠度影响封固质量。解析：树胶稠度影响封固质量。16.错解析：刀刃越锋利切片越好，但过于锋利反而容易产生刀痕，需适度。解析：刀刃越锋利切片越好，但过于锋利反而容易产生刀痕，需适度。17.对解析：TMA高通量特点。解析：TMA高通量特点。18.对解析：荧光原理需要特定光源和滤片。解析：荧光原理需要特定光源和滤片。19.错解析：废液需分类无害化处理，严禁直排。解析：废液需分类无害化处理，严禁直排。20.对解析：高浓度乙醇（>80%）有固定作用。解析：高浓度乙醇（>80%）有固定作用。21.对解析：PAS阳性呈紫红色。解析：PAS阳性呈紫红色。22.对解析：阳性对照不显色，证明系统失效，实验不可信。解析：阳性对照不显色，证明系统失效，实验不可信。23.对解析：冰晶会破坏细胞器结构。解析：冰晶会破坏细胞器结构。24.错解析：常规石蜡包埋熔点通常在56-60℃，左右太低硬度不够，太高组织易烤焦。解析：常规石蜡包埋熔点通常在56-60℃，左右太低硬度不够，太高组织易烤焦。25.对解析：含酸固定液（如Zenker）含铬酸或汞，需脱酸（去汞）处理。解析：含酸固定液（如Zenker）含铬酸或汞，需脱酸（去汞）处理。26.对解析：刚果红淀粉样物质偏振光下呈苹果绿双折射。解析：刚果红淀粉样物质偏振光下呈苹果绿双折射。27.错解析：固定会抑制或破坏酶活性，时间越长活性越低。解析：固定会抑制或破坏酶活性，时间越长活性越低。28.对解析：TCT去除了血液黏液，细胞集中，阳性率高。解析：TCT去除了血液黏液，细胞集中，阳性率高。29.对解析：病理诊断，尤其是肿瘤诊断，通常被视为临床诊断金标准。解析：病理诊断，尤其是肿瘤诊断，通常被视为临床诊断金标准。30.对解析：显微镜分辨率公式D=0.61λ四、填空题1.脱水；染色2.苏木精；伊红3.交联（或化学结合）4.DAB；棕黄5.标本头（或组织块持钳）；刀座6.无阻力；砂砾7.苏丹III（或油红O）；橘红（或红）8.硝酸银；黑9.正常非免疫（如山羊或兔）10.水洗（或冲洗）11.速冻；防止冰晶（或蔗糖/甘油保护）12.环氧树脂（Epon812等）13.二甲苯14.红；蓝（或绿）15.热修复；酶修复五、名词解释1.固定：将组织浸入化学试剂（固定液），使细胞内蛋白质沉淀或交联，从而终止细胞生命活动，防止自溶和腐败，保持组织和细胞原有形态与结构的过程。2.脱水：利用脱水剂（如乙醇）置换组织内的水分，为后续透明和石蜡浸入创造条件，因为透明剂和石蜡均不与水相溶。3.透明：组织经脱水后，利用透明剂（如二甲苯）置换出组织中的脱水剂，使组织折光率接近玻璃，呈现透明状态，并利于石蜡渗入。4.免疫组织化学：利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记在抗体上的显色剂（如荧光素、酶、金属离子等）显色，从而确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质）的存在、定位和相对含量的技术。5.抗原修复：在免疫组化染色中，通过加热或酶消化等方法，打破福尔马林固定造成的蛋白质交联，暴露被遮蔽的抗原表位，以提高抗体检测敏感性的技术。6.冰冻切片：利用低温冷冻技术使组织变硬，在冰冻切片机上直接进行切片的方法。具有制片速度快、能较好保存脂质和酶活性等优点，常用于术中快速诊断。7.网状纤维：网状纤维是直径较细（3型胶原蛋白）、分支状交织成网的纤维，主要存在于网状结缔组织中，HE染色中不可见，需银染显示（黑色）。8.脱钙：去除骨组织或钙化病灶中钙盐的过程，以便于组织变软，能够进行常规切片处理。9.细胞学涂片：将采集的细胞样本（如脱落细胞、穿刺细胞）直接涂布在载玻片上，经固定染色后在显微镜下观察细胞形态的病理技术。10.嗜酸性：指细胞或组织内的某种结构对酸性染料（如伊红）有亲和力，易被染成红色的特性，通常与其富含蛋白质（碱性氨基酸）有关。六、简答题1.简述10%中性缓冲福尔马林（NBF）的配制原理及其在病理技术中的优势。配制原理：由40%甲醛原液与磷酸盐缓冲液（PBS）混合配制而成。通常取100ml40%甲醛+900mlPBS（pH7.4）。磷酸盐缓冲液的作用是中和甲醛氧化产生的甲酸，维持pH值中性。配制原理：由40%甲醛原液与磷酸盐缓冲液（PBS）混合配制而成。通常取100ml40%甲醛+900mlPBS（pH7.4）。磷酸盐缓冲液的作用是中和甲醛氧化产生的甲酸，维持pH值中性。优势：优势：(1)穿透力强，固定均匀。(2)对组织收缩小，形态保存好。(3)能较好地保存大多数抗原的免疫活性，适用于免疫组化。(4)防止甲醛色素（黑褐色颗粒）的生成，避免干扰镜下观察。2.简述常规石蜡切片（HE染色）的基本流程及各步骤的主要目的。(1)取材与固定：选取病变组织，固定以防止自溶。(2)脱水：由低到高乙醇，去除组织水分。(3)透明：二甲苯置换乙醇，使组织透明并兼容石蜡。(4)浸蜡与包埋：石蜡渗入组织内部，包埋成蜡块提供支撑。(5)切片：切片机切成薄片（3-