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文档简介
第5章家畜繁殖技术
[教学内容与学时分配]
【教学内容】公畜生殖生理,母畜生殖生理,采精,精液品质检查,输精。
【学时分配】14学时。
[教学目标]
1.清楚母畜的发情周期阶段,精液的组成成分。
2.掌握不同母畜的发情特点,并能进行发情鉴定、确定最佳配种时机。
3.熟练运用各种家畜的采精器械,掌握各种采精方法,熟练进行采精。
4.能判断精液的品质等级,正确进行精液稀释。
5.会采用各种方法保存精液。
6.掌握不同家畜的输精方法,能熟练进行输精。
[教学重难点]
【重点】
1.母畜发情特点。
2.母畜发情鉴定。
3.采精方法。
4.精液稀释技术。
5.精液品质检查。
6.人工输精方法。
【难点】
1.发情鉴定。
2.采精和输精。
[教学方法]多媒体教学,配图片或动画
[教学过程]
第1一2课时
授课内容第一节母畜的生殖生理
教学目标
1.熟悉母畜的初情期、性成熟、初配年龄。
2.掌握母畜的发情周期、发情持续期及排卵时间及类型。
3.了解母畜的发情季节、卵子结构及其生理。
资料单
第一节母畜生殖生理
一、母畜的性发育阶段
在胚胎期性分化阶段,母畜原始性腺的皮层发育为卵巢,沃尔夫氏管没有雄激素的支持
而退化,苗勒氏管则发育成雌性生殖道。性机能的发育,经历发生、发展至衰老的过程
(一)初情期
1.概念指母畜第一次出现发情和排卵的时期。此此时母畜虽有发情表现,配种也可
能怀孕,但山于生殖器官尚处于继续生长发育阶段,其发情表现、发情周期和妊娠过程一般
不完全。子畜体重达到成年体重的1/3时,即可达到初情期。
2.母畜初情期的年龄正常情况下,母畜初情期的年龄为:牛6〜12月龄,马、驴12
月龄,猪3〜6月龄,羊4〜8月龄,兔3〜4月龄。
(二)性成熟
1.概念指母畜生殖器官发育基本完善,发情与排卵正常,具备繁殖能力的年龄。但
此时,母畜全身各组织器官的发育还未成熟,不宜配种。此期,子畜体重约达成年体重的
50%。
2.母畜的性成熟年龄各种母畜性成熟的年龄是:牛8〜14月龄,马、驴12~18月龄,
猪5〜8月龄,羊6〜10月龄,兔3〜5月龄。
(三)初配年龄
1.概念即适宜于第一次配种的子畜年龄。适宜的初配年龄应根据身体的发育状况而
定,过早配种不但影响母畜自身发育,而且会造成后代发育不良或难产;过迟配种则不能充
分发挥母畜的作用,减少经济收益,而且母畜宜与肥胖,降低生殖功能。通常子畜体重达到
成年体重的70%时,即可用于初配。
2.母畜初配的年龄牛1.5〜5岁,马、驴2.5〜3岁,猪8〜10月龄,羊1〜1.5岁,
兔4〜7月龄。
(四)繁殖年限
即母畜终止繁殖的年限。一般为:牛15〜22岁,马、驴20〜25岁,猪10〜15岁,羊
8〜10岁,兔3〜5岁。
二、母畜的发情
(-)发情与发情季节
1.发情指母畜达到性成熟后,在繁殖季节所发生的周期性性活动和性行为现象。其
主要表现是:
(1)卵巢卵泡发育并有成熟卵子排出。
(2)生殖道黏膜充血,子宫颈和阴唇肿胀并牌出黏液。
(3)行为精神不安,食欲减退,鸣叫跑栏,频频排尿,相互爬跨,寻求交配等。
2.发情季节母畜的发情可分为季节性多次发情和全年多次性发情两种类型。
(1)季节性多次发情指母畜的发情在每年的特定季节内出现,并在该季节中表现为多
次发情。马和绵羊属于该类型,其中马的发情季节多为3—7月份;绵羊多为9—11月份。
(2)全年多次发情即母畜在一年四季内均可出现发情并可配种。牛和猪属于此类型。
(-)发情周期
指母畜发情表现出的周期性变化。通常把两次发情间隔的时间叫做一个发情周期。根据
母畜生殖器官和精神状态的变化特点,发情周期可分为发情持续期和休情期两个阶段。
1.发情持续期即发情开始至发情结束所持续的时间。是集中表现发情征状的阶段。
2.间情期即母畜两次发情间的间隔时期。
3.母畜发情周期和发情持续期时间母畜发情周期和发情持续期的长短因畜种、品利
个体、年龄及营养水平不同而异。各种家畜的发情周期和发情持续期如下表:
各种家畜的发情周期和发情持续期
期别牛马驴绵羊山羊猪兔
发周平均天数21212317202116
期情范围18-2415-2514-3612-2112-2418-2315-17
发情持续期1-1.55-74-61-1.51-22-31-2
(三)产后发情
产后发情是指母畜分娩后出现的第一次发情。奶牛一般在产后1个月左右出现,多表现
为安静发情;马在产后1周左右出现,且此时配种受胎率较高,俗称“配血驹”或“热配”;
羊-•般在产后2〜3个月即羔羊断奶后出现发情;部分母猪在产后3-6d出现发情,但多不排
卵,大部分母猪在仔猪断奶后3〜5d正常发情配种。
三、卵泡发育与排卵
(一)卵子的形态与结构
家畜的卵子为圆球形,直径约120〜180微米。其结构由外向内依次为放射冠、透明带、
卵黄膜、卵黄和卵核。受精时,透明带和卵黄膜之间出现一空腔,称为卵黄周隙,其内含有
极体。
(-)卵泡发育
母畜卵巢上的卵泡是由内部的卵母细胞和其周围的卵泡细胞组成的。母畜出生后,卵巢
中的原始卵泡髓着母畜年龄的增长而发育。卵泡发育时,除了少数的卵泡生长发育、成熟及
排卵外,大量的卵袍在发育过程中闭锁、退化而消失。根据卵泡的形态特点,卵泡的发育可
为以下4个阶段。
1.初级卵泡由卵原细胞和其周围的一层卵泡细胞组成,卵原细胞与卵泡细胞间无卵
泡膜和卵泡腔。排列在卵巢皮质层周围。
2.次级卵泡特点是卵母细胞体积增大,卵泡细胞增值为多层;随着卵泡的生长发育,
卵母细胞与卵泡细胞之间形成一层透明膜,称为透明带。
3.生长卵泡由次级卵泡继续发育而成。此阶段,卵泡细胞的颗粒层细胞逐渐分离,
形成一个腔隙,称卵泡腔;卵泡腔内渗入大量液体,叫卵泡液;随着卵泡液的增多,卵母细
胞被推向一侧,形成一个小丘,称为卵丘。
4.成熟卵泡由生长卵泡继续发育而来。此阶段,卵泡腔增大到整个卵巢皮质部,卵
泡突出于卵巢表面,即将破裂排卵。
(三)排卵
1.定义指卵巢上发育成熟的卵泡破裂,将其中的卵母细胞排出并形成黄体的过程。
2.排卵类型根据家畜的排卵特点,排卵可分为自发性排卵和诱发性排卵两种类型。
(1)自发性排卵指卵巢上的卵泡发育成熟后,即自行破裂排卵,并自动形成黄体。马、
牛、羊、猪等家暂属于此类型。
(2)诱发性排卵卵巢上的卵泡发育成熟后,只有在雄性交配刺激下才能引起排卵,并
形成黄体。兔、骆驼、貂、猫等属于此类型。
3.排卵时间与排卵数
(1)排卵时间马,发情终止前24〜36小时;牛,发情终止后8〜12小时;羊,发情
终止时;猪,发情停止前6〜10小时;兔,在交配刺激后6〜12小时。
(2)排卵数牛、马等大家畜,每次1枚,个别的可排2枚;绵羊每次1〜3枚;山羊
1〜5枚;猪10〜25枚。
(四)黄体的形成与退化
成熟卵泡破裂排卵后,卵巢在卵泡处先形成红体,再形成黄体;黄体可分为妊娠黄体和
周期黄体,二者最后萎缩退化形成白体,即黄体退化。
1.红体与黄体成熟卵泡破裂排卵后,卵泡膜血管破裂,血液流入排空的卵泡腔内形
成凝血块,称为红体;此后,红体逐渐被吸收,卵泡内膜凹陷形成皱褶,卵泡膜细胞增生变
黄叫做黄体。
2.妊娠黄体与周期黄体排卵后,如果母畜受精怀孕,黄体增大并分泌孕激素,维持
妊娠,直到分娩泌乳,叫妊娠黄体;排卵后,如果母畜未受精怀孕,卵巢上所形成的黄体不
分泌孕激素,而逐渐退化,叫做周期黄体。
3.黄体退化与白体周期黄体和产后的妊娠黄体,最后萎缩变性而退化;退化的黄体
被结缔组织所代替并呈白色,叫做白体。白体的出现标志着下一个发情周期的开始。
随堂练习
1.名词:发情、发情周期、发情持续期、排卵、红体、黄体、妊娠黄体、周期黄体、
白体。
2.各种母畜的性成熟年龄与初配年龄?
3.各种母畜的发情周期和发情持续期?
4.卵子的结构及卵泡发育的4个阶段?
5.母畜排卵的类型与排卵时间?
6.黄体的形成与退化?
第3-4课时
授课内容母畜的发情鉴定
教学目标
1.了解母畜发情的概念、意义和方法。
2.掌握猪、羊、牛、马的发情鉴定技术。
资料单
第一节母畜的生殖生理
一一母畜的发情鉴定
一、发情鉴定概述
(-)概念
指通过观察母畜外部表现、阴道变化和直肠触膜卵巢卵泡发育程度,来判定母畜是否发
情和发情程度的方法。
(二)意义
发情鉴定的意义在于:判定母畜是否发情,发情所处的阶段及排卵时间,从而准确确定
对母畜适时配种的时间,提高母畜的受胎率。
(三)方法
1.外部观察法即通过观察母畜发情期间的精神状态、食欲、行为和生殖道变化,判
定母畜是否发情及发情阶段的方法。此法适用于各种家畜。
2.阴道检查法指利用开窒器打开母畜阴道,借助光源观察子宫颈口的开张情况、阴
道黏膜颜色和黏液分泌情况,确定是否母畜发情及发情阶段的方法。此法一般作为发情鉴定
的辅助方法。
3.试情法用结扎输精管或阴茎倒转术的试情公畜进行试情,根据母畜对公畜的反映
情况来判断母畜是否发情的方法。多用于牛和羊的发情鉴定。
4.直肠检查法检查人员将手臂伸入母畜直肠内,隔着直肠触摸卵巢上的卵泡发育情
况,进行发情鉴定的方法。此法适应于大家畜。
二、猪的发情鉴定
猪的发情鉴定常用外部观察法,结合压背法。
母猪发情时,精神极度不安,尖叫,食欲减退,在圈舍内往复跑动、跳圈、寻找公堵。
阴唇充血肿胀、湿润,阴门中有黏液流出。发情盛期,爬跨其他猪,愿意接近公堵,公猪爬
跨时表现为安静不动。
用手按压母猪背部时,表现站立不动,尾上翘,塌腰弓背。用手臂向前推动母猪时表现
为不逃逸,并有向后的反作用力。另外,发情母猪嗅到公猪的尿液味或听到公猪的求偶声时,
也表现呆立不动或做寻找状。
三、羊的发情鉴定
羊的发情表现不明显,且发情时间短,多采用试情法。具体方法为:将试情公羊(结扎
输精管或带试情兜布)按公、母1比40的比例,每日一次或两次定时放人母羊群中,接受公
羊爬跨者为发情母羊。为子更好地识别出发情母羊,可在试情公羊腹部装上标示器或在胸部
装上颜料囊,当公羊爬跨母羊时,便将颜色印在母羊臀部上,从而能将发情母羊挑选出来。
四、牛的发情鉴定
母牛的发情鉴定常用外部观察法和试情法,结合阴道检查法,必要时进行直肠检查。
(-)外部观察法
母牛发情时,表现为精神兴奋不安、阵叫、食欲减退、互相追逐,爬跨、泌乳量下降,
有时弯腰弓背举尾、尿频、外阴部充血肿胀并流出粘液,初期黏液量少而稀薄;盛期量大而
浓稠,呈纤缕状或玻璃棒状:末期黏液量减少、混浊而浓稠,最后变为乳白色,常黏于阴唇、
尾根和臀部形成结痂。
(-)试情法
试情法有三种:
一是白天将结扎输精管的公牛放入母牛群中,夜间公母分开,由牧工根据公牛追逐爬跨
情况,以及母牛接受爬跨的程度来判断母牛的发情情况;
二是将试情公牛接近母牛,如母牛喜靠公牛,并作弯腰弓背姿势,表示可能发情。
三是下腭标记笔法,用容量0.54千克左右的壶状物固定牛笼头上,壶中装满液体油剂
染料,壶的中部有一滚动的圆珠装置(与圆珠笔原理相似)。试情公牛戴上笼头,圆珠正好位
于下脖的下面,当公牛爬跨从母牛腰部滑下时,其下腭便拖下一条色线。壶中的染料一周加
一次即可,比较方便。
母牛和试情公牛比例为30:1时,发情鉴定率最高,达95%。
(三)阴道检查法
用左手拇指和食指(或中指)将阴唇分开,以右手持开腌器把柄,斜向前上方插入阴门。
当开腔器的前1/3进入阴门后,改成水平方向插入阴道,打开开瞳器,使其把柄向下,借助
反光镜或手电筒光线检查阴道黏膜的色泽及湿润程度、子宫颈部的颜色及形状、黏液的量、
黏度和气味,以及子宫颈管是否开张和开张程度。检查完后稍微合拢开腌器抽出。
注意消毒要严密,操作要仔细,防止粗暴。
(四)直肠检查法
1.方法将母牛牵人保定栏内保定后,将尾巴拉向•侧。检查人员将指甲剪短磨光,挽
起衣袖,用温水清洗手臂并涂抹润滑剂,站在母牛正后方。五指并拢呈锥形,缓慢旋转伸人
母牛肛门内,进入直肠,排出宿粪。手掌展平,掌心向下,在骨盆腔中部慢慢下压并左右抚
摸,找到软骨棒状的子宫颈,沿着子宫颈前移,可摸到角间沟和子宫角,顺着子宫角大弯向
外侧可找到卵巢,把卵巢握到手中,用手指肚感觉卵巢的形状、大小及卵巢上卵泡的发育阶
段。按同样的方法可触摸另一侧卵巢。
2.注意事项直肠检查时,应该小心谨慎,避免粗暴。如遇到母牛努责时,应暂时停
止检查,等待直肠收缩缓解时再行操作。直肠中的宿粪较多时可一次排出,其方法为:手臂
伸人直肠后向上抬起,使空气进入,然后手掌稍侧立向前慢慢推动,使粪便蓄积,刺激直肠
收缩。当母牛出现排便反射时,应尽力阻止,当排便反射强烈时,慢慢将手臂退出。如粪便
较稀时,也可将直肠内的手臂向身体侧靠拢,使粪便从直肠与手臂的缝隙排出。
3.卵泡发育判断
牛的卵泡发育可分为4个时期,即出现期、发育期、成熟期和排卵期。
第一期(卵泡出现期):卵巢体积比静止期稍增大,一触摸时卵泡发育处为一个软化点,
直径可达0.5〜0.7cm。此期母牛已开始出现发情,约持续10小时。
第二期(卵泡发育期):卵泡直径增加至1~1.5cm,并突出于卵巢表面,触摸时感觉卵
泡光滑有弹性,内部略有波动。此期是母牛发情外部表现的盛期,持续约10〜12小时。
第三期(卵泡成熟期):卵泡不再增大,卵泡液增多,泡壁变薄,紧张性增强,有一触即
破之感。此期可持续约6〜8小时,母牛外观发情征状趋于结束。
第四期(排卵期):卵泡成熟后破裂,卵泡液流出,卵子也随之排出d卵巢上的排卵部
位形成凹陷,卵泡壁变得松软,捏之有两层皮的感觉。排卵约在母牛发情表现结束后10h。
排卵后6-8h形成黄体。初生黄体直径约0.6〜0.8cm,触之有肉样感觉。
五、马的发情鉴定
常用直肠检查法。术者站在母马的侧后方,五指并拢呈锥状,缓慢伸入直肠内,排出
宿粪。当手到达直肠狭窄部后,掌心向月欠窝处靠拢并左右抚摸,找到卵巢后,将其握在手中,
体会卵巢上卵泡的发育情况。
在触摸卵巢过程中,要注意卵巢与粪球的区别,切勿把粪球当卵巢。卵巢表面光滑,
有肉样感觉,指压有弹性,排卵窝明显,用力触压时母马有痛感,表现为回头顾腹或后肢踏
地;粪球往往多个聚在一起,表面裔粗糙感觉,无排卵窝,指压往往变形或碎裂。
马的卵泡发育可分为6个时期,即出现期、发育期、成熟期、排卵期、空腔期和黄体生
成期。
第一期(卵泡出现姐):卵巢一端或某一部分稍有增大,触之坚硬、光滑而无弹性。本
期约维持1〜3小时。
第二期:(卵抱发育期):卵泡体积逐渐增大,常突出于卵巢表面呈半球形,直径约3〜
5cm,表面光滑,波动感觉不明显,弹性较大。本期约维持1〜3d,母马发情表现逐渐明显。
第三期(卵泡成熟期):卵泡体积增至最大。占据卵巢体积的2/3左右,卵泡壁变薄,
泡液增多,紧张性增强。前半期,卵泡表现为弹性强、波动弱;后半期,卵泡表现为弹性弱,
波动强,有触即破之感。本期约维持1〜2d,母马发情表现非常明显,处于发情盛期。本
期是配种的适宜时期。
第四期:(排卵期):卵泡成熟后破裂,卵泡液逐渐流出,卵子也随即排出。卵巢上的
排卵部位触之形成凹陷,卵泡壁变得松软。从卵泡液逐渐流出至排空约需1〜3小时,也有
的成熟卵泡在触摸过程中突然破裂排空,体积骤然变小。
第五期(空腔期):卵泡液流尽,卵泡腔凹陷,卵巢体积明显变小,形状不规则,有两
层皮的感觉。此期母马发情表现已消失。
第六期(黄体形成期):大约在排卵后6〜8小时,形成黄体,触摸时有肉样感觉。
A~~
随堂练习
1.母畜发情鉴定有何意义?鉴定方法有哪儿种?
2.母猪的外部观察法?
3.羊的试情法?
4.牛的试情法与阴道检查法?
5.直肠检查法的方法与注意事项?
第5-6课时
授课内容第二节公畜的生殖生理
教学目标
1.了解公畜的性成熟、性行为和初配年龄。
2.熟悉公畜的精子与精液生理。
资料单
第二节公畜生殖生理
一、公畜的性发育与性行为
(-)性成熟
1.概念公畜的性成熟是指幼龄公畜发育到,定时期,生殖器官发育完善,开始表现性
行为、能产生成熟的生殖细胞、具备第二性征和正常繁殖能力的时期。此时,一旦与母畜交
配可使母畜怀孕。
2.公畜的性成熟年龄出生后猪5〜8个月,牛10〜18个月,马、驴18〜24个月,绵
(山)羊6〜10个月,骆驼24〜36个月,家兔3〜4个月。
(二)体成熟与初配年龄
公畜性成熟后,虽然已具备了繁殖能力,而且具有性行为,但还未达到体成熟,尚处于
生长发育阶段,因此•般还不适宜于配种。
1.体成熟体成熟是指家畜基本上达到生长发育完成的时期。在正常情况下,各种公
畜的正常体成熟年龄为:猪9〜12个月,牛2〜3年,马、驴3〜4年,绵(山)羊12〜15个
月,骆驼5〜6年,家兔6〜8个月。
2.初配年龄指第一次适宜于配种的年龄。公畜的初配年龄一般大于母畜,通常在体
成熟或接近体成熟时期;一般在体重达到成年体重的70%以上时,即可用于初配。各种公
畜的初配年龄为:猪10个月,牛2.5岁,马、驴3.5岁,绵(山)羊1.5岁,骆驼5.5岁,家
兔8个月
(三)性行为
1.概念性行为是指由动物体内和体外的特殊刺激引起的性反应。它是动物的一种特殊
行为表现。引起公畜性行为发动的动力及程序是感官刺激一神经冲动f性激素分泌f行为表
现。
2.表现公畜的性行为为定式型,表现程序为性激动、求偶、勃起、爬跨、交配、射
精、交配结束等过程。整个过程,牛、羊所需时间较猪和马短。
二、精液及其生理特性
精液是公畜在性交时由生殖器官排出的黏稠液体,由精子和精清两部分组成。精子悬
浮在黏性的精清中,就像血球分布在血浆中一样。
(-)精液的理化特性
1.色泽正常精液,牛、羊为淡黄色,猪、马为乳白色。所有动物的精液均不透明。
2.气味正常精液无味或稍带腥臊味,但无臭味和其他气味。
3.黏稠度取决于精子密度,密度大黏稠度高,否则反之。
4.比重与精子密度有关,牛、羊精液比重最大,马、猪精液较小。
5.渗透压正常精液的渗透压为0.55-0.65。渗透压对配置稀释液关系甚大。
6.酸碱度新采精液的PH值在7左右,其中牛、羊精液略偏酸性,猪、马精液略偏碱
性。
(二)精子及其生理特点
1.精子的发生精子在睾丸中形成的全过程称为精子发生。其过程是在垂体分泌的促
卵泡素和促黄体素,以及睾丸间质细胞产生的雄激素调节和控制下进行的。各种家畜精子发
生的持续时间为:猪45〜50天,羊49〜50天,牛60天,马、驴49〜55天。但应说明,睾
丸中的精子发生是持续的,每时每刻都有一批新精子在开始发生。精子发生后在附军中成熟
存贮。
2.精子的结构正常精子呈蝌蚪状,由头、颈、尾三部分组成,长度约60um左右。
(1)头部扁圆锥形,由核和顶体构成。核内主要是染色质;顶体覆盖于核的上部又
叫精子帽,内含顶体素和透明质酸酶,在受精过程中具有重要作用。
(2)颈部在头的基部,由2—3颗中心粒和原纤维素构成。颈部是精子最脆弱的部位,
易断离成有头无尾精子。
(3)尾部包括主段、中段和末段,有许多原纤维组成。是精子的运动器官。
3.精子的代谢精子具有呼吸作用、果糖分解作用和抗凝集作用。
(1)呼吸作用精子在有氧情况下,具有很强的呼吸能力。精子呼吸能力越强,消耗
能量就越大,死亡也越快。因此,在保存精液时,应尽量减少与空气接触,降低精子温度,
体高酸度,使其呼吸作用降低,以减少能量消耗,延长精子寿命。
(2)果糖分解作用精子在无氧条件下,可通过分解果糖获得能量。睾丸中无果糖分
泌物,所以精子不活动;当精子通过尿生殖道时,副性腺分泌物含有果糖,而使精子能活动。
这就是冻精稀释液中必须加果糖的原因。
(3)抗凝集作用精子的脂蛋白膜带有阴电荷,同性电荷相互排斥,因此在粘度很大
的精清中,不凝集成块,而保持各自的独立存在。
4.精子的运动精子是非常活跃的细胞,它能依靠尾部的摆动而运动。在光学显微镜
下观察,精子有三种运动形式。
(1)直线运动在适宜的条件下,精子一般呈直线前进运动。在40℃以内的温度下,
温度越高直线前进运动越快。直线运动表示精子活力和受精能力最强。
(2)摆动即头部左右摇摆,前进运动很慢,受精能力很弱。
(3)转圈运动精子围绕一处作圆周运动,不能直线向前型进,无受精能力。
5.精子的存活时间因温度、环境及保存方法不同而异。在雄性生殖器官内,精子存
活时间约40天左右,最长可存活60天以上;在雌性生殖道内,精子存活时间约为40小时
左右;射出后精子的存活时间,受家畜品种、温度、保存方法、酸碱度、稀释液种类等因素
影响较大,一般说,精子活力好、保存温度和PH值降低,可延长存活时间;冷冻保存精液
可使精子保存的时间无限的延长。
(三)精清及其生理特点
精清是附睾和附性腺的分泌物,为黏稠的液体。是精液的主要成分,占精液量的90%
以上。
1.精清的组成
(1)无机成分主要有水、钾、钠、钙、镁、氯、磷和氮。阳离子以钾为主,常以柠檬
酸盐形式存在,维持精液的渗透压;阴离子以氯和磷酸根为主,维持对精子的缓冲作用。
(2)糖类主要是果糖,其次是葡萄糖、山梨醇和肌醇,来源于精囊腺和输精管壶腹部
的分泌物,是精子活动能源。
(3)柠檬酸来自精囊腺的分泌物,是种重要的缓冲剂,可防止或延长精液的凝固。
(4)甘油磷酸胆碱来自附睾的分泌物,功能是供给精子能量,但只有在母畜生殖道内
才能被利用。
(5)抗坏血酸(维生素C)其含量与精子受精有关,含量高的受精能力也高。
2.精清的生理功能
(1)稀释精子作用由附睾排出的精子经与精清混合稀释才能射精。
(2)营养作用离体精子依靠精清获得营养。
(3)缓冲作用有利于精子的生存和活动。
(4)凝固和液化作用牛羊精子密度大,一般不凝固;猪、马、驴、兔的精子密度小,
射出的精液先液化而后又部分凝固。凝固可在母畜子宫颈部形成阴道栓,防止精液倒流。
(5)刺激作用精清刺激母畜阴道和子宫肌收缩,推动精子在母畜生殖道内运行。
三、影响精子存活的外界因素
外界许多因素能刺激或抑制精子的代谢和生活力,从而影响精子的存活时间。
(-)温度
精子维持正常生命活动的温度时体温,即37〜38℃。高温使精子的代谢和活力增强,
加快能量消耗,精子在短时间内死亡;温度达到55℃时精子立即死亡;。〜10℃的低温可降
低精子代谢,延长精子寿命,但需缓慢降温到0〜10℃,否则可使精子冷休克,失去活力;
0℃以下为超低温,其中0〜-50C的温度是精子生存的有害温区,-15〜-25℃是最有害
的危险温区;而一79〜―196C可使精子的代谢和活动基本停止,处于休眠状态,是精液长
期保存的温度。
(二)酸碱度
精子在一定的酸碱度(pH)溶液中才能生存,最适合精子生存的pH为7.0左右。在弱酸
性环境中,精于活力受到抑制,但能延长存活时间;在弱碱性溶液中精子活力最强,但死亡
也快。因而.,一般保存精液除给予低温条件外,还需偏低的pH环境。
(三)光照和辐射
精子对光照反射十分敏锐,直射日光能刺激精子,使其运动增强,而散射日光影响较小。
日光中的紫外线和红外线会缩短精子寿命,损害其受精能力。因此;处理精液应在室内进行,
并放在棕色的玻璃(瓶)内,避免阳光照射。
(四)渗透压
精子只有在等渗溶液中才能生存,并保持正常的形态和受精能力。低渗溶液可使发生膨
胀、尾部卷曲,有时呈现后退运动;高渗溶液则是精子内部水分渗出而发生皱缩,尾部呈锯
齿状弯曲,精子运动缓慢。因此,进行精液稀释时,稀释液必须与精液浓度相当。
(五)药品
向精液或稀释液中加入适量抗生素、磺胺类药物,能抑制精液中病原微生物繁殖,从而
延长精子的存活时间;但消毒药品对精子有害。所以,人工授精所用的器械既要清洁无菌,
又要避免残留药物混入精液。有挥发性或特殊气味的药物,其气味也能危害精子,
----------A
随堂练习
i.名词:性成熟、体成熟、性行为、初配年龄。
2.各种公畜的性成熟年龄与初配年龄。
3.精液的组成及其理化特性。
4.精子的结构及其运动形式。
5.精清的组成成分及精清的生理功能。
6.影响精子存货的外界因素。
第7-8课时
授课内容第三节采精
教学目标
1.了解采精的准备过程。
2.掌握家畜假阴道的组成、安装及使用方法。
3.熟悉牛、羊、猪的采精方法及家畜的采精频率。
资料单
第三节采精
一、采精前的准备
(-)场地准备
采精应有专门的场地,要求宽敞明亮、平坦、清洁、安静,靠近精液处理室,并设有采
精架等设施。
(-)台畜准备
台畜是供公畜爬跨的台架,可以是真台畜也可以是假台畜。真台畜一般为体格健壮、健
康无病、性情温顺的发情母畜;假令畜是用钢筋、木料、橡塑制品、棉絮和同种畜皮制成的
类母畜。
(三)假阴道准备
假阴道是模仿母畜阴道的生理条件设计的一种采精工具。
1.构造各种家畜的假阴道外形、大小有所差异外,其组成基本相同。均由外壳、内
胎、集精杯(瓶、管)、活塞、固定胶圈构成。
2.安装先检查外壳和内胎是否有裂口、破损、沙眼等。将内胎的粗糙面朝外,光滑
面朝里放入外壳内,用内卷法和外翻法将内胎套在外壳上,用胶圈固定,要求松紧适度,不
扭曲。
3.消毒使用前半小时,用70%的酒精棉球由内向外,对内胎进行涂抹消毒;待酒精
气味挥发后,用生理盐水冲洗一遍即可使用。
4.灌水由注水孔注入45℃左右的温水,水量为内外壳容量的2/3,盖好胶塞。
5.涂油用玻璃棒蘸取少量液体石蜡或凡士林,由里向外在内胎上均匀涂抹,深度为
外壳长度的1/2左右。
6.吹气山气孔吹入气体,并用调节阀调节假阴道内的压力,使假阴道入口处呈“糖
三角”状。
7.测温用水温计测定假阴道中间部位的温度,采精温度为38—40℃。
(四)公畜准备
公畜必须有良好的体况,充分的性兴奋和性欲,无疾病和恶癖。在每次采精前,需彻底
清洗公畜的阴茎和包皮。
(五)术者准备
采精员应技术熟练,动作敏捷。操作前要求脚穿长筒胶靴,着紧身工作服,指甲剪短磨
光,清洗消毒受臂。
二、采精方法
(-)假阴道采精法
采精时,采精员右手持假阴道蘸再台畜的右后方,当公畜爬跨台畜的瞬间,迅速用左手
托起阴茎,将其导入假阴道内,公畜射精完毕后,使假阴道自然脱离阴茎,精液流入集精杯
中,取下集精杯,送精液处理室处理。该方法适用于各种家畜的采精。
(-)手握采精法
用于公猪的采精。方法是:采精员蹲在台猪右侧,当公猪爬跨台猪时,左手握成空拳,
使公畜阴茎插入空拳内,让其自然转动片刻,再握紧阴茎的螺旋部不让龟头转动,;当阴经
充分勃起后,顺势向前牵拉,手指有节奏的进行弹性松握,引起公畜射精;右手持集精瓶收
集精液。公猪射精约经数10分钟,并分3—4次射出,每次持续5—7分钟;第一次射出的
精液精子少,可不收集。
(三)注意事项
1.采精时,要注意安全,特别是大家畜采精。
2.善待公畜,不可施暴。
3.公牛、羊对假阴道的温度较敏感,应特别注意调温;将阴茎导入假阴道时,且勿用
手抓握阴茎;公牛、羊射精时间极短,只有几秒钟,当公畜用力向前一冲时即表示射精,因
此,要求采精者动作迅速。
4.公马、驴对假阴道的压力更敏感,且阴茎在假阴道内抽动时间较长,故要固定好假
阴道,并使假阴道入口端向阴茎方向倾斜施压。当公马驴头部下垂,啃啖台畜髻胛,臀部肌
肉和肛门有节律颤抖时即表示射精,此时需使假阴道向集精杯方向倾斜,以免精液倒流。
三、采精频率
适宜的采精频率是保障公畜生殖功能和身体健康的基本要求,也是获得优良精液的基
础。采精频率应根据公畜产生精子的数量来决定,各种家畜适宜的采精频率如下表
各种家畜的采精频率
畜别每次射精量/cm每次射出精子总数/亿每周采精次数/次每周射出精子总数/亿
T-6-1050-1502-4150-400
绵羊0.8-1.216-367-25200-400
山羊0.5—1.515-607-20250-350
猪150-300300-6002-51000-1500
马30-100100-1502-6150-400
驴20-8030-1002-6100-300
兔0.5-2.03.0-7.02-66-42
随堂练习
1.什么叫人工授精?有何好处?
2.假阴道的结构、安装与要求。
3.采精的方法。
4.采精应注意的问题。
第9-10课时
授课内容第四节精液品质的检查
教学目标
1.熟悉精液的基本特性及精液的外观性状检查方法。
2.熟悉精子活力的概念以及检查方法。
3.掌握用血细胞计数法检查精子的密度。
4.明确出精子形态检查的项目及意义。
资料单
第四节精液品质检查
一、精液的外观性状检查
1.采精量采精后将精液盛装在有刻度的试管或精液瓶中,可测出精液量的多少。猪
和马的精液应用4-6层的消毒纱布过滤或离心处理,除去胶状物质。各种家畜的采精都有一
定范围,精液量与正常差异较大,应查明原因,及时调整采精方法或对公畜进行治疗。
2.颜色精液一般为乳白色或灰白色,精子密度越大,精液的颜色越深。牛、羊的精
液呈乳白或厚乳白色,有时呈淡黄色。马、猪的精液为淡乳白或灰白色。若精液呈红色,说
明混有鲜血。精液呈褐色,是混有陈血。精液呈淡黄色则是混有脓汁或尿液。颜色异常的精
液应废弃,立即停止采精,查明原因,及时治疗。
3.气味正常精液略带有腥味,牛、羊精液除具有腥味外,另有微汗脂味。气味异常
往往伴有颜色的变化。
4.云雾状牛、羊的精液精密度大,放在玻璃容器中观察,精液呈上下翻滚状态,像
云雾一样。称为云雾状。这是精子运动活跃的表现。云雾状明显可用“+++”表示;较明显
用“++”表示;不明显用“+”表示。
二、精子活力检查
精子活力又称活率,是指精液中作直线运动的精子占整个精子数的百分比。活力是精
液检查最重要指标之一,在采精后、稀释前后、保存和运输前后、输精前都要进行检查。
(一)检查方法
检查精子活力需借助显微镜,放大200—400倍,把精液样品放在镜下观察。
1.平板压片取1滴精液于载玻片上,盖上盖玻片,放在镜下观察。此法简单、操方便,
但精液易干燥,检查应从速。
2.悬滴法取1滴精液于盖玻片上,迅速翻转使精液形成悬滴,置于凹玻片的凹窝内,
即制成悬滴玻片。此法精液较厚,检查结果可能偏高。
(二)评定
评定精子活力多采用“十级一分制”,如果精液中有80%的精子作直线运动,精子活
力计为0.8;如有50%的精子作直线运动,活力计为0.5,以此类推。评定精子活力的准确
度与经验有关,具有主观性,检查时要多看几个视野,取平均值。
牛、羊及猪的浓份精液精子密度较大;为观察方便,可用等渗溶液如生理盐水等稀释后
再检查•温度对精子活力影响较大,为使评定结果准确,要求检查温度在37c左右,显微
镜需有恒温装置。
三、精子的密度检查
精子密度是指单位体积(1m)精液内所含有精子的数目,是评定精液晶质的重要指标之
O
1.估测法估测法通常结合精子活力检查来进行。精子间的间隙小于一个精子长度为
密;建系相当于一个精子长度为中等:大于一个精子长度为稀。这种方法能大致估计精于的
密度,主观性强,误差较大。
2.血细胞计数法用血细胞计数法定期对公畜的精液进行检查,可较准确地测定精子
密度。血细胞计数器中有一计算室和两个稀释用的吸管,红细胞吸管能对精液进行100或
200倍稀释,适合于牛、羊精液检查;白细胞吸管能对精液进行10或20倍稀释,适合于猪
和马的精液检。红细胞计算板上的计算室的高度为0.1mm,边长1mm,为一正方形,由25
个中方格组成,每一中方格分为16个小方格。
检查时,用3%的NaCl对精液进行稀释并杀死精子。于显微镜下,从25个中方格中选
取四角和中央5个计数,对于压线的精子,以精子头部为准,采用“上计下不计,左计右不
计”的方法计数,最后按公式进行计算,公式是:1ml原精液中的精子总数=5个中方格内
精子数X5(25个中方格)X10(Imnf内精子数)X1000(Im^lOOOmm3)X稀释倍数
3.光电比色法现世界各国普遍应用于牛、羊精液的密度测定。此法快速、准确、操作
简便。其原理是根据精掖的透光性,精于密度越大,透光性就越差。
事先将原精液稀释成不同倍数,用血细胞计数法计算精于密度,从而制成精液密度标准
管,然后用光电比色计测定其透光度,根据透光度求每相差1%透光度的级差精子数,编制
成精子密度对照表备用。测定精液样品时,将精液稀释80—100倍,用光电比色计测定其透
光值,查表即可得知精子密度。
四、精子的其他检查
1.精子的畸形率检查凡形态和结构不正常的精于都属畸形精子。通常精子畸形率,牛、
猪不超过18%,羊不超过14%;马不超过12%。如果畸形精子超过20%则视为精液品质不
良,不能用做输精。
2.精于顶体异常率检查精子顶体异常会导致受精障碍。顶体异常有膨胀、缺损、脱落
等。当精子顶体异常率超过14%,受精能力就会明显下降。
检查精子顶体异常率的方法是:先把精液制成抹片,干燥后用95%的酒精固定,水洗
后用姬姆萨液染色1.5〜2小时,再水洗干燥,用树脂封装放在镜下1000倍观察,随机观察
500个精子,计算顶体异常率。
3.精子生存时间和生存指数检查精子的生存时间和生存指数与受精能力有关,也是鉴
定精液处理效果的一种方法。
精子生存时间是指精子总的存活时间,检查时将精液置于一定的温度下,每隔8〜12h
检查精子活力,直至无活动精子为止。所有间隔时间累加后减去最后两次间隔时间的一半即
为精子的生存时间。生存指数是指相邻两次检查的间隔时间与平均活力的乘枳之和。精子生
存时间越长,生存的指数越大,说明精子活力就强,精液晶质好。
q---------A
随堂练习
1.精液的外观性状检查项目及方法。
2.精子活力检查和精子密度检查的方法。
3.精子的其他检查项目。
第11T2课时
授课内容第五节精液稀释
教学目标
1.了解精液稀释的目的。
2.熟悉稀释液的成分及其作用。
3.掌握稀释液的配制方法及注意事项。
4.能准确地确定精液稀释倍数。
5.能正确、规范地进行精液稀释。
资料单
第五节精液稀释
一、精液稀释与目的
精液稀释是采精及精液品质检查后,向精液中添加的适合精于体外存活并保持受精能力
的液体。精液稀释的目的是:
1.扩大精液量,增加一次采精量的可配母畜数。
2.通过向精液中添加营养物质和保护剂,可延长精子在体外的存活时间。
3.便于精液保存和运输。
二、稀释液的成分及作用
(-)稀释剂
稀释剂主要用以扩大精液容量,要求所选用的药液必须与精液具有相同的渗透压。严格
地讲,凡向精液中添加的稀释液都具有扩大精液容量的作用,均属稀释剂的范畴,但各种物
质添加各有其主要作用,一般用来单纯扩大精液量的物质有等渗的氯化钠、葡萄糖、蔗糖溶
液等。
(-)营养剂
主要为精子体外代谢提供养分,补充精子消耗的能量。如糖类、奶类、卵黄等。
(三)保护剂
1.缓冲物质精子在体外不断进行代谢,随着代谢产物(乳酸和CO?等)的累积,精液的
pH逐渐下降,甚至会发生酸中毒,使精子不可逆地失去活力。因此,有必要向精液中添加
一定量的缓冲物质,以平衡酸碱度。常用的缓冲剂有柠檬酸钠、酒石酸钾钠、磷酸二氢钾等。
近些年,生产单位采用三羟甲基氨基甲烷(Tris)作为缓冲剂,效果较理想。
2.降低电解质浓度副性腺中C/、Mg"等强电解质含量较高,刺激精子代谢和运动加
快,在自然繁殖中无疑有助于受精,但这些强屯解质又能促进精于早衰、精液保存时间缩短。
为此,需向精液中加入非电解质或弱电解质,以降低精液电解质的浓度。常用的非电解质和
弱电解质有各种糖类、氨基乙酸等。
3.抗冷物质在精液保存过程中,常进行降温处理,如温度发生急剧变化,会使精子遭
受冷休克而失去活力。发生冷休克的原因使精子内部的缩醛磷脂在低温下冻结凝固,影响精
子正常代谢,出现不可逆的变性死亡。因此,在保存的稀释液中加入抗冷物质,使精子免受
伤害。常用的抗冷休克物质有卵黄•、奶类等。
4.抗冻物质在精液冷冻保存过程中,精液由液态向固态转化,对精子的危害较大,
不使用抗冻剂,冷冻精液就不能成功。一般常用甘油和二甲基亚矶(DMSO)作为抗冻剂。
5.抗菌物质在采精和精液处理过程中,虽严格遵守操作规程,也难免使精液受到细
菌的污染,况且稀释液中含营养物质较丰富,给细菌繁殖提供了较好条件。细菌过度繁殖不
但影响精液品质,输精后也会使母畜生殖道感染,造成不孕。常用的抗菌物质有青霉素、链
霉素、氨基苯磺胺等。
(四)其他添加剂
除上述三种成分以外,另向精液中添加的、起某种特殊作用的微量成分都属其他添加剂
的范畴。
1.激素类向精液中添加催产素、前列腺E型等,能促进母畜子宫和输卵管的蠕动,有
利于精子运行,提高受胎率。
2.维生素类某些维生素如B„B?、Biz、C、E等具有改进精子活力,提高受胎率的作用。
3.酶类过氧化氢酶能分解精液中的过氧化氢,提高精子活力;B-淀粉酶能促进精子
获能等。
另外,向精液中添加有机酸、无机酸类进行常温保存;加入抗氧化剂、提高精子括力的
精氨酸、咖啡因;区分精液种类的染料等都属此类。
三、稀释液的配制
1.稀释液应现用现配,如配制后确需保存,经消毒、密封后放入冰箱中最多能保存2〜
3d。
2.配制稀释液的器具,用前必须洗净并严格消毒,用稀释液冲洗后才能使用。
3.配制稀释液的蒸储水要新鲜,最好现用现制。
4.所用药品要纯净,一般使用分析纯制剂。药品称量要准确,经溶解、过滤、消毒后
方能使用。
5.卵黄要取自新鲜鸡蛋,待稀释液消毒冷却后加入。
6.奶粉的颗粒比较大,溶解时先用等量蒸储水调成浆糊状,然后加蒸储水至需要量,
用脱脂棉过滤后放人90〜95℃的水浴中消毒lOmin。
四、精液稀释方法
精液稀释应在采精后立即进行。采精后把精液迅速置于30℃的保温瓶中,以防温度的
变化。稀释时把精液和稀释液同时放在30℃的环境中,将稀释液和精液的沮度调整一致,
井在30℃的水浴中进行稀释。稀释时把稀释液沿着精液容器的壁慢慢加入精液中,边加入
边搅拌。如需高倍稀释,应先做3〜5倍的低倍稀释,然后再高倍,以防稀释打击。
五、精液的稀释倍数
精液稀释倍数的确定应依据母畜每次受精所需的有效精子数、稀释液的种类等。公牛
的精液一般进行10〜40倍稀释,公猪的精液一般做2〜4倍稀释。
现以公牛精液稀释倍数的计算方法举例如下:
有一头黑白花种公牛一次采得鲜精11ml,经检查,精子活力为0.7,密度是12亿/
ml。如为母牛输精时要求有效精于数不少于3000万,输精量为0.25ml,本次采得的精液
处理后,能为多少头母牛输精?
解:1ml原精液中的有效精子数=12亿/mlX0.7=8.4亿/ml。
1ml稀释后的精液中的有效精子数=0.3亿+0.25ml=1.2亿/ml
稀释倍数=8.4亿/ml4-1.2亿/ml=7(倍)
输精母牛头数=11mix7(倍)+0.25ml=308(头)
答:本次采得的精液能为300余头母牛输精。
rn--------------------------
随堂练习
1.精液稀释的目的。
2.稀释液的成分与作用。
3.稀释液的配制应注意的问题。
4.精液稀释的方法。
5.精液的稀释倍数与计算。
第13-14课时
授课内容第六节精液保存
教学目标
1.明确确精液低温保存的原理,掌握精液低温保存的方法。
2.明确精液常温保存的原理,掌握常温保存的处理手段。
3.明确精液冷冻保存的原理,掌握冷冻精液的制作方法。
资料单
第六节精液保存
精液稀释后即可进行保存。通过保存,可延长精子在体外的存活时间,便于使用和运
输。现行的精液保存方式有3种,即常温(15〜25℃)保存、低温(0〜5C)保存和冷冻(一79〜
196℃)保存。常温和低温保存是液态,故称液态保存。
一、精液的常温保存
常温保存的温度在15〜25℃之间,温度允许有一定变动,所以又称为变温保存或室温
保存。常温保存所需设备简单,特别适合猪的精液。
(一)原理
常温保存是通过增加酸度,降低精液的pH来抑制精子的代谢活动,以减少其能量消耗。
酸性在一定范围内是可逆抑制,通常把pH调整到6.35左右。
(二)方法
1.向稀释液中充入二氧化碳,如伊利尼变温稀释液(IVT)。
2.利用精子本身在代谢中产酸,自行调节pH,如康奈尔大学稀释液(CUE)。
3.向稀释液中加入有机酸,如己酸稀释液(CME)。
常温保存的稀释液除降低pH使精于代谢减慢外,还依靠给精子补充足够的养分,同时
加入抗菌物质以抑制细菌的孳生。有的还在稀释液中加入缓冲物质;有的加入明胶以阻止精
子运动。
二、精液低温保存
(一)原理
在体温状态下,精子的代谢正常,当温度降低时,精子的代谢活动减慢,当温度降至0〜
5℃,精于的代谢较弱,几乎处于休眠状态。此时精子的物质代谢和能量代谢均降到较低水
平,废物累积减少,且此温下不利微生物的繁殖,故可达到保存目的。
(二)方法
精液进行低温保存时,应采取逐步降温的方法,并使用含卵黄的稀释液,以防冷休克。
首先把稀释后的精液按一个输精量(羊10〜20个输精量)分装至一个容器中,封口,再
包以数层棉花或纱布,最外层用塑料袋扎紧,防止水分渗入。把包装好的精液放到0〜5℃
的低温环境中,经1〜2h,精液即降至0〜5℃。在保存过程中,要维持温度的恒定,防止升
温。如特殊情况或运输可用广口保温瓶进行,在保温瓶中加7〜8成满的冰块,把包装好的
精液放在冰块上盖好,注意定期添加冰块。如无冰源,可采用化学致冷法,在冷水中加入一
定量的氯化筱或尿素,可使水温达2〜4℃。
三、精液冷冻保存
精液冷冻保存是利用液氮(T96℃)或干冰(-79℃)作冷源:将精液处理后冷冻起来,达
到长期保存的目的。精液冷冻保存是人工授精工作的一大进步,由于保存时间的延长,使精
液的使用不受地区的限制,从而加快了家畜品种的育成和改良速度。
(一)精液冷冻保存的原理
精子在超低温下,其代谢几乎停止,以生命相对静止状态保存下来,当温度回升后,
又能复苏且具有受精能力。其理论依据是玻璃化假说和甘油保护学说。
1.玻璃化假说物质的存在形式有气态、液态和固态,其中固态又分为结晶态和玻璃
态。在不同的温度条件下,这两种形式可以相互转化。
(1)结晶态当精液的温度由冰点(0℃)逐渐降到-60℃左右时,精液中的水分由液
态变成固态,其结构按几何图式进行有序排列,冰晶颗粒大而均匀,叫做结晶态或冰晶化。
精液在形成结晶态时,由于缓慢降温,精清中的水逐渐形成冰茬儿,精子被排斥到没有冻结
的那部分精液中,形成高渗液,造成精子内外渗透压差距增大,使精子失水干固而死亡;同
时由于冰晶在扩展移动中,对精子长生机械压力,破坏精子原生质表层和内部结构,也可引
起精子死亡。因此,缓慢降温形成冰晶化是造成精子死亡的主要原因。
(2)玻璃态指当精液山低温骤然降到-60C度以下,精液变成固态时,其结构图式进
行无序排列,冰晶颗粒细小而均匀,叫做玻璃态(化)。精液在形成玻璃化时,由于快速降
温,精清中的水分,在精子周围迅速形成一层玻璃化膜,将精子保护起来,同时使精子迅速
进入休眠状态;当解冻快速升温时,则玻璃态又可跨越结晶态直接变为液态,使精子复苏而
恢复受精能力。
经试验证明,在0〜60℃是冰晶形成的温度区域,而且在逐渐降温的条件下才能形成。
降温越慢,冰晶形成越大,尤以T5〜25c为甚。玻璃化必须在-60〜-250C的低温区域内,
经快速降温,迅速越过冰晶化而形成。
2.甘油保护学说快速降温可使精液跨越结晶态进入玻璃态,但急剧降温会造成精子
冷休克。研究表明,向稀释液中添加甘油,不但可增强精子的抗冻能力,而且又可防止冰晶
化和精子冷休克。
甘油又名丙三醇,分子式CH?(OH)-CH2(OH)-CH2(OH),为高热能脂肪家族,其3
个羟基(OH)为亲水基团,可与精液中的水结合,限制和干扰水分子的晶格排列,而产生冰
晶;其煌链为疏水基团,朝向精子,可阻止精子的内外水分相互渗透,从而使精子保护在玻
璃化膜中。
但是,甘油浓度高时,对精子有危害作用,应掌握甘油的用量。一般牛冷冻精液中甘
油通常加入5%〜7%。
除甘油外,其他多羟化合物如二甲基亚网(DMSO)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、糖类等
都具有抗冻作用。
(二)精液冷冻技术
牛的精液冷冻已普及,现以牛精液冷冻为例,将精液冷冻制作技术叙述如卜:
1.采精及精液品质搂查精液冷冻效果与精液品质密切相关。做好采精的准备和操作,
争取获得优质的精液。
2.精液稀释根据冻精的种类、分装剂型和稀释倍数的不同,精液的稀释方法也不尽
一致,现生产中多采用一次或两次稀释法。
一次稀释法:将含有甘油、卵黄等的稀释液按一定比例加入精液中,适合于低倍稀释。
两次稀释法:为避免甘油与精子接触时间过长而造成的危害,采用两次稀释法较为合理。
首先用不含甘油的稀释液(第一液)对精于进行最后稀释倍数的半倍稀释,然后把该精液连同
第二液一起降温至0-5°C(全程lh左右),并在此温下作第二次稀释。
3.降温平衡采用一次稀释法,由于稀释温度为30℃,需经l—2h缓慢降温至0-5C,
以防冷休克的发生。平衡是降温后,把稀释后的精液放置在0-5℃的环境中停留2-4h,使甘
油充分渗入精于内部,起到膜内保护剂作用的过程。
4.精液的分装现行冻精常采用颗粒、细管和袋装等分装方法。
(1)颗粒冻精将精液滴冻在经液氮致冷的金属网或塑料板上,冷冻后制成0.1ml左
右的颗粒。颗粒冻精曾在牛中广泛应用,现多用于马、绵羊及野生动物的冻精剂型,具有成
本低、制作方便等优点,但不易标记,解冻麻烦,易受污染。
(2)细管冻精把平衡后的精液分装到塑料细管中,细管的•端塞有细线或棉花,其间
放置少量聚乙烯醇粉(吸水后形成活塞),另一端封口,冷冻后保存。细
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