2026年病理学技术考试备考冲刺模拟试卷含答案解析

2026年病理学技术考试备考冲刺模拟试卷含答案解析一、单项选择题（A1/A2型题）：以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案。1.在常规病理技术中，最常用的固定液是（）。A.95%乙醇B.4%中性甲醛（福尔马林）C.Zenker液D.Carnoy液E.Bouin液2.关于苏木精-伊红（H&E）染色中苏木精染液的pH值，下列说法正确的是（）。A.酸性B.中性C.碱性D.强酸性E.强碱性3.组织块在进行石蜡包埋时，石蜡的熔点通常选择在（）。A.45~50℃B.52~56℃C.58~62℃D.65~70℃E.75~80℃4.脱钙过程中，为了检查脱钙是否结束，最常用的物理方法是（）。A.称重法B.穿刺法C.X线摄片法D.化学测定法E.肉眼观察法5.在免疫组化染色中，最常用的抗原修复方法是（）。A.酶消化法B.微波加热法C.高压加热法D.冷冻复苏法E.紫外线照射法6.下列哪种染色法主要用于显示结缔组织中的纤维成分，特别是网状纤维？（）A.Masson三色染色法B.PAS染色法C.网状纤维染色法（Gomori银染）D.油红O染色法E.刚果红染色法7.导致切片出现“裂纹”或“破碎”的最常见原因是（）。A.组织脱水过度B.组织脱水不足C.切片刀过钝D.包埋石蜡温度过低E.染色时间过长8.在常规石蜡切片技术中，切片的最佳厚度通常为（）。A.1~2μmB.3~5μmC.8~10μmD.12~15μmE.20~30μm9.乙醇作为固定液，其主要缺点是（）。A.穿透力慢B.使组织收缩C.不能保存糖原D.引起严重的组织硬化和脆性E.价格昂贵10.下列哪种试剂是常规H&E染色中常用的“分化液”？（）A.伊红染液B.盐酸酒精C.氨水D.Scott自来水E.氢氧化钠11.在冷冻切片技术中，组织温度通常控制在（）。A.-5~-10℃B.-15~-25℃C.-30~-40℃D.-50~-60℃E.-80~-90℃12.为了显示组织中的脂质，应选用的固定液是（）。A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.锇酸E.苦味酸13.免疫组化染色中，内源性生物素活性较高时，容易导致背景染色，解决方法是使用（）。A.正常山羊血清封闭B.TritonX-100处理C.卵白素/生物素阻断试剂盒D.增加一抗浓度E.缩短孵育时间14.常规病理技术中，组织透明所使用的试剂是（）。A.乙醇B.甲醛C.二甲苯D.丙酮E.冰醋酸15.关于脱水剂的浓度梯度，下列哪项设置最为合理？（）A.70%→80%→95%→100%B.50%→70%→90%→100%C.80%→90%→95%→100%D.75%→85%→95%→100%E.60%→80%→95%→100%16.在HE染色中，细胞核被染成蓝色，细胞质被染成红色，这是因为（）。A.细胞核含酸性基团，与苏木精结合B.细胞核含碱性基团，与苏木精结合C.细胞质含酸性基团，与伊红结合D.细B和C都对E.细胞核含碱性基团，与伊红结合17.下列哪种特殊染色用于鉴别淀粉样物质？（）A.刚果红染色B.普鲁士蓝染色C.VonKossa染色D.抗酸染色E.粘液卡红染色18.病理技术人员在配置Harris苏木精染液时，需要加入氧化剂，通常使用的是（）。A.碘酸钠B.氯化汞C.过氧化氢D.重铬酸钾E.高锰酸钾19.组织切片中出现“空洞”或“气泡”，最可能的原因是（）。A.组织固定不充分B.脱水不彻底C.透明时间过长D.融蜡或包埋时混入空气E.切片机速度过快20.在电镜技术中，用于超薄切片的染色剂通常是（）。A.苏木精和伊红B.醋酸铀和柠檬酸铅C.甲基绿和派洛宁D.吉姆萨染色E.瑞氏染色21.关于PAS染色（过碘酸-雪夫反应），其染色的化学基础是（）。A.蛋白质的羧基B.脂肪的不饱和键C.糖类的乙二醇基D.核酸的磷酸基E.纤维素的羟基22.在免疫荧光技术中，常用的荧光素是（）。A.HRP（辣根过氧化物酶）B.AP（碱性磷酸酶）C.FITC（异硫氰酸荧光素）D.DAB（二氨基联苯胺）E.AEC（3-氨基-9-乙基咔唑）23.组织块取材后，应立即投入固定液中，固定液的体积应为组织体积的（）。A.1~2倍B.5~10倍C.15~20倍D.50倍以上E.100倍24.下列哪种情况最适合使用冷冻切片？（）A.保存细胞内微细结构B.快速术中病理诊断C.显示脂肪组织D.长期保存组织标本E.进行核酸原位杂交25.显微镜油镜使用的香柏油折光率约为（）。A.1.0B.1.33C.1.52D.1.65E.1.7026.在免疫组化SP法（链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法）中，SP复合物中的酶通常是（）。A.葡萄糖氧化酶B.碱性磷酸酶C.辣根过氧化物酶D.β-半乳糖苷酶E.过氧化氢酶27.为了防止组织在脱水过程中收缩或硬化过度，低浓度乙醇（如70%~80%）的处理时间应（）。A.尽可能短B.尽可能长C.与高浓度乙醇时间一致D.无需处理E.视组织大小而定，通常较长以利水分置换28.下列关于“细胞凋亡”的形态学描述，错误的是（）。A.细胞体积缩小B.染色质凝聚C.形成凋亡小体D.细胞膜破裂，内容物外溢E.无炎症反应29.在病理技术质量控制中，HE染色细胞核着色灰蓝，分化不佳，最常见的原因是（）。A.苏木精陈旧氧化不足B.分化时间过短C.蓝化液pH过低D.伊红浓度过高E.脱水不净30.进行革兰染色时，革兰阳性菌被染成（）。A.红色B.蓝色C.黑色D.黄色E.绿色31.若要配置10%的中性福尔马林固定液（即4%甲醛），需要将40%的甲醛原液如何稀释？（）A.1份原液加9份水B.1份原液加4份水C.2份原液加8份水D.4份原液加6份水E.10份原液加90份水32.病理档案室中，石蜡块的保存温度通常要求在（）。A.室温即可B.4℃C.-20℃D.-80℃E.液氮温度33.在组织切片中，若见到大量红细胞呈鲜红色，背景干净，这通常是使用了哪种固定液？（）A.Zenker液B.甲醛液C.乙醇液D.Bouin液E.Carnoy液34.下列哪种染色剂属于“媒染剂”，能与组织成分结合形成不溶性复合物从而提高染色效果？（）A.伊红YB.苏木精C.明矾（钾明矾/铵明矾）D.盐酸酒精E.二甲苯35.关于原位杂交技术（ISH），下列叙述正确的是（）。A.检测蛋白质表达水平B.检测DNA或RNA序列C.只能使用放射性探针D.不需要蛋白酶消化E.杂交温度必须低于Tm值20℃以上36.在制作教学切片或需要长期保存的切片时，最后一步封固常用的封片剂是（）。A.甘油B.树脂（中性树胶）C.甘油明胶D.水溶性封片剂E.加拿大树胶37.组织块从低浓度酒精向高浓度酒精移动时，如果发生跳跃（如从70%直接跳入100%），会导致（）。A.组织收缩加剧B.组织膨胀C.脱水更彻底D.节省时间E.染色更好38.脱钙液中加入三氯乙酸或氯化铝的目的是（）。A.加速脱钙B.缓冲脱钙液的酸度，减少组织损伤C.沉淀蛋白质D.增加组织硬度E.杀灭细菌39.显微镜物镜的数值孔径（NA）决定了（）。A.放大倍数B.分辨率C.视野亮度D.焦距深度E.工作距离40.在Masson三色染色中，肌纤维通常被染成（）。A.红色B.蓝色C.绿色D.黑色E.黄色41.免疫组化染色中出现“边缘效应”，即切片边缘组织着色深，中央着色浅或不着色，主要原因是（）。A.抗体浓度过高B.抗体浓度过低C.染色过程中切片干燥D.封片剂气泡E.DAB显色时间过长42.下列关于“核浆比”的描述，正确的是（）。A.正常细胞的核浆比通常大于肿瘤细胞B.恶性肿瘤细胞的核浆比通常增大C.仅指细胞核的直径D.仅指细胞质的面积E.在所有炎症细胞中都增大43.组织透明不完全时，石蜡无法进入组织，会导致（）。A.切片碎裂B.切片难以展平C.组织中出现白色云雾状斑点D.染色不均E.细胞核模糊44.为了显示组织中的含铁血黄素，常用的染色（）。A.普鲁士蓝反应B.PAS染色C.Masson染色D.吉姆萨染色E.瑞氏染色45.在PCR技术中，TaqDNA聚合酶的最适温度大约是（）。A.37℃B.55℃C.72℃D.95℃E.4℃46.常规石蜡切片机，粗调节轮每转一圈，切片推进距离通常是（）。A.1μmB.10μmC.50μmD.100μmE.200μm47.下列哪种固定液对糖原保存效果最好？（）A.甲醛B.乙醇C.Carnoy液（甲醇-冰醋酸-氯仿）D.Bouin液E.Zenker液48.在HE染色中，如果细胞核着色过深，呈黑色，且细胞质也染成灰蓝色，这属于（）。A.分化过度B.脱核过度C.染色过深D.蓝化不足E.伊红沉淀49.全自动脱水机设定的程序中，最后一步通常是（）。A.100%乙醇B.二甲苯ⅠC.二甲苯ⅡD.石蜡ⅠE.石蜡Ⅲ50.关于“生物安全柜”的使用，错误的是（）。A.处理潜在感染性标本时必须使用B.工作前需提前运行风机5-10分钟C.操作时脸部应处于操作口上方D.紫外线杀菌灯不能代替表面消毒E.柜内物品摆放应尽量靠后，不影响气流二、多项选择题（X型题）：以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择两个或两个以上最佳答案。51.常规组织固定液的目的是（）。A.防止组织自溶B.防止细菌腐败C.使组织硬化便于切片D.保存组织抗原性E.增强某些染色的着色能力52.下列哪些因素会导致切片出现“皱褶”？（）A.切片刀刃口有缺口B.组织块过硬C.蜡块边缘与刀刃不平行D.展片水温过低E.切片速度过慢53.免疫组化染色中，降低背景染色的措施包括（）。A.使用正常非免疫血清封闭B.适当降低一抗浓度C.增加洗涤时间和次数D.使用内源性酶阻断剂E.缩短DAB显色时间54.关于Carnoy固定液的描述，正确的是（）。A.由纯乙醇、冰醋酸和氯仿组成B.穿透力极快C.固定同时能沉淀糖原和核酸D.对细胞核固定良好E.组织收缩明显55.病理技术中常用的脱水剂包括（）。A.乙醇B.丙酮C.正丁醇D.二甲苯E.环己酮56.下列哪些属于特殊染色？（）A.HE染色B.抗酸染色C.网状纤维染色D.免疫荧光染色E.PAS染色57.石蜡切片中，组织块包含骨组织时，处理方法正确的是（）。A.必须先进行脱钙处理B.脱钙后需流水冲洗C.脱钙时间越长越好D.可使用弱酸脱钙以保护结构E.脱钙后可直接脱水无需水洗58.显微镜维护中，下列操作正确的是（）。A.油镜使用后用擦镜纸擦拭B.光学镜头可用手触摸C.防止潮湿和霉菌D.移动显微镜时应握持镜臂E.下降物镜时应从侧面观察，防止压碎玻片59.关于苏木精染液的“成熟”，下列说法正确的是（）。A.新配制的苏木精染液不能立即使用B.成熟过程是氧化过程C.可自然成熟，也可加入氧化剂人工成熟D.成熟后染液颜色变深E.成熟后染液呈酸性60.分子病理诊断中常用的技术包括（）。A.PCRB.FISH（荧光原位杂交）C.测序技术D.流式细胞术E.SouthernBlot三、判断题：请判断下列各题的正误，正确的划“√”，错误的划“×”。61.在病理技术中，所有的固定液都能很好地保存细胞内的脂质。（）62.冷冻切片的染色效果通常优于石蜡切片，结构更清晰。（）63.伊红是酸性染料，能使细胞质着色。（）64.组织脱水必须从低浓度到高浓度依次进行，不可逆序。（）65.免疫组化染色中，一抗和二抗的孵育通常都在室温下进行，不能在37℃进行。（）66.Masson三色染色中，胶原纤维被染成蓝色。（）67.病理诊断报告书一经发出，如发现错误，可直接在原报告上涂改并盖章。（）68.环氧树脂（Epon）主要用于电镜标本的包埋。（）69.组织切片中如果出现黑色银盐沉淀，可能是由于甲醛液被氧化产生甲酸污染所致。（）70.细胞凋亡和细胞坏死在形态学上无法区分。（）71.在HE染色中，分化步骤是用弱酸（如盐酸酒精）去除组织上过染的苏木精。（）72.组织块的大小对于固定和脱水没有影响，可以随意取材。（）73.数字病理切片（WSI）是利用全自动扫描仪将传统玻片数字化。（）74.普鲁士蓝染色是一种显示钙盐的特殊染色。（）75.PCR反应中，变性步骤通常设置在95℃。（）四、名词解释：请简要解释下列名词。76.核浆比77.脱钙78.抗原修复79.人工假象80.术中冷冻切片诊断五、简答题：请简要回答下列问题。81.简述常规石蜡切片技术（HE染色）的基本流程。82.在免疫组化染色中，出现非特异性背景染色的常见原因有哪些？83.简述苏木精-伊红（H&E）染色的染色原理。84.为什么组织在脱水前必须用流水冲洗？如果冲洗不彻底会产生什么后果？85.简述病理技术质量控制（QC）在HE染色中包括哪些关键环节？六、综合分析题：根据题干提供的信息，回答问题。86.某病理科技术员在进行一批组织标本的脱水处理时，因脱水机故障，导致组织在95%乙醇中停留了过长时间（比常规时间多出24小时），随后转入100%乙醇和二甲苯，并完成包埋。在切片和HE染色后，显微镜下观察发现组织细胞收缩严重，细胞间隙增宽，核浆比失调，且切片较脆，容易碎裂。(1)请分析造成上述现象的主要原因。(2)针对这种情况，在后续的实验操作中应如何调整或预防？87.某实验室在进行乳腺癌ER（雌激素受体）免疫组化染色时，发现阳性对照组织（已知阳性的乳腺癌组织）着色清晰，核棕黄色，但患者的组织切片中未见阳性着色，且背景很干净。同时，技术人员发现苏木精复染后的细胞核形态清晰。(1)根据结果分析，可能的原因是什么？（至少列出三点）(2)为排除问题，下一步应采取哪些排查措施？参考答案与详细解析一、单项选择题1.【答案】B【解析】4%中性甲醛（10%中性福尔马林）因其穿透力强、固定均匀、对组织收缩小且能较好地保存抗原，是病理学技术中最常用的固定液。乙醇收缩大，Zenker、Carnoy、Bouin等属于特殊固定液，用于特定目的。2.【答案】C【解析】苏木精为碱性染料（媒染剂作用下），其带正电荷的染色阳离子与细胞核中带负电荷的核酸（DNA）结合。为了促进这种结合，苏木精染液通常呈碱性或微碱性，且在染色后需要用“蓝化”液（如自来水或稀氨水）使染色变蓝，这需要在碱性环境中进行。3.【答案】C【解析】石蜡的熔点需高于室温以保证切片硬度，但不能过高以免损伤切片机或烫伤组织。常规软组织包埋最常用的石蜡熔点为56~62℃。熔点过低（如52℃以下）在夏季室温高时蜡块易变软；熔点过高（65℃以上）用于硬组织或无需切片的标本。4.【答案】B【解析】穿刺法是检查脱钙终点最简便、常用的物理方法。用细针针刺骨组织，若无阻力感，说明脱钙完成。称重法、X线法也可用但不常用；化学测定法（测定钙离子）较繁琐。5.【答案】B【解析】热诱导抗原修复（HIAR）是目前最常用的方法，包括微波加热、高压加热、水浴等。其中微波加热法因其操作简便、效果稳定而被广泛采用。酶消化法为冷修复，现多作为辅助手段。6.【答案】C【解析】网状纤维染色法（Gomori银染）利用嗜银性，将网状纤维染成黑色，用于显示网状纤维支架。Masson显示胶原和肌肉，PAS显示糖原，油红O显示脂质，刚果红显示淀粉样物。7.【答案】A【解析】组织脱水过度（在高浓度乙醇中时间过长）会导致组织严重收缩、变硬、变脆，切片时易出现裂纹、碎裂。脱水不足会导致切片无法展平或有空洞。8.【答案】B【解析】常规病理诊断使用的石蜡切片厚度为3~5μm。1~2μm用于半薄或特殊高精度观察；8~10μm以上通常用于特殊染色（如组化、酶标）或观察细胞层次。9.【答案】B【解析】乙醇作为固定液，其主要缺点是能使组织收缩（高浓度时更明显），且不能沉淀核蛋白（导致核染色不佳）。它穿透力快，能沉淀白蛋白，且能保存糖原和尿酸。10.【答案】B【解析】在H&E染色中，分化是指用酸性分化液（如0.5%~1%盐酸酒精）去除组织上过多结合的苏木精，使核着色清晰且胞质不染成蓝色。11.【答案】B【解析】冷冻切片时，恒温冷冻切片机的箱体温度通常设定在-15~-25℃左右。温度过高组织发软无法切片，温度过低组织易碎裂。CO2冷冻或半导体冷冻时组织头温度更低。12.【答案】D【解析】锇酸（四氧化锇）是固定脂质的最佳固定液，能使脂质不被溶解并具有电子密度（电镜下黑色）。甲醛、乙醇、丙酮等都会抽提或破坏脂质。13.【答案】C【解析】在使用ABC法或SP法（生物素-亲和素系统）时，组织（特别是肝、肾、脾）内源性生物素丰富，会与试剂结合导致非特异性背景。必须使用卵白素/生物素阻断试剂盒预先封闭。14.【答案】C【解析】二甲苯是最常用的透明剂，它既能溶解石蜡又能与乙醇互溶，折光率与组织接近，使组织透明。乙醇是脱水剂，甲醛是固定剂。15.【答案】A【解析】脱水应遵循梯度原则，防止组织剧烈收缩。通常从70%或75%开始，逐步过渡到80%、95%、100%。70%→80%→95%→100%是经典的合理梯度。16.【答案】D【解析】苏木精是碱性染料，细胞核核酸（酸性）与之结合呈蓝色；伊红是酸性染料，细胞质蛋白质（碱性）与之结合呈红色。这称为“嗜色性”。17.【答案】A【解析】刚果红染色是鉴别淀粉样物质的标准方法，在偏振光显微镜下可见特征性的苹果绿双折射。普鲁士蓝显示铁，VonKossa显示钙，抗酸染色显示结核杆菌等。18.【答案】A【解析】配置Harris苏木精或Gill苏木精时，需加入氧化剂使苏木精（无色）氧化为苏木红（有颜色）。常用的氧化剂是氧化汞（剧毒，Harris法）或碘酸钠/过氧化氢（Gill法，较温和）。19.【答案】D【解析】组织中出现空洞或气泡，通常是因为在包埋（融蜡）时，组织块内的水分或空气未完全排出，或者包埋时石蜡温度过高导致产生气泡被封固。20.【答案】B【解析】电镜超薄切片需用重金属盐染色以增加反差。醋酸铀主要染核酸和蛋白质，柠檬酸铅主要染蛋白质和糖类。HE是光镜染色。21.【答案】C【解析】PAS反应的原理是过碘酸氧化多糖分子中的乙二醇基（1,2-乙二醇）为醛基，醛基再与无色雪夫液反应生成紫红色化合物。22.【答案】C【解析】FITC（异硫氰酸荧光素）呈黄绿色荧光，最常用。HRP和AP是酶标免疫组化的酶标记物，DAB和AEC是HRP的显色底物。23.【答案】C【解析】固定液的体积必须是组织体积的15~20倍以上，以保证固定液充足，防止组织释放的成分稀释固定液或导致固定不均。24.【答案】B【解析】冷冻切片最大的优势是速度快（15-30分钟），主要用于手术中的快速病理诊断，以指导手术范围。虽然也能显示脂质和抗原，但术中诊断是其核心价值。25.【答案】C【解析】香柏油的折光率（n≈1.515）与玻璃（n≈1.52）相近，能够减少光线在镜头与玻片间的折射，增加数值孔径（NA）和分辨率。26.【答案】C【解析】SP法即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法，其中的酶通常是辣根过氧化物酶（HRP），用于催化DAB显色。27.【答案】E【解析】低浓度乙醇（如70%-80%）主要用于置换组织中的大量水分，且对组织收缩影响较小。为了防止组织从高含水状态直接进入高浓度酒精导致剧烈收缩，低浓度酒精的时间通常应设置得较长，确保水分逐步置换。28.【答案】D【解析】细胞凋亡是程序性死亡，特点是细胞膜完整、内容物不外溢、无炎症反应（D是坏死的特征）。凋亡可见体积缩小、染色质凝聚、凋亡小体。29.【答案】B【解析】苏木精陈旧氧化不足会导致着色浅；分化时间过短会导致胞质也染成蓝色（分化不彻底），背景脏；细胞核着色灰蓝且分化不佳，最常见的是分化时间不够，或者苏木精过度成熟导致染色过深且难以分化。结合选项，分化时间短是导致核着色深且胞质带蓝色的常见操作原因。30.【答案】B【解析】革兰染色阳性菌呈蓝紫色（结晶紫），阴性菌呈红色（复红）。31.【答案】A【解析】市售甲醛原液浓度约为40%（即100%福尔马林）。要配10%福尔马林（即4%甲醛），需取1份40%甲醛原液加9份溶剂（水）。公式：=。32.【答案】A【解析】石蜡块对温度要求不高，室温阴凉干燥处保存即可。长期保存需防尘防潮。切片和白片通常室温保存，若需长期保存核酸可低温。33.【答案】A【解析】Zenker液（含氯化汞）对红细胞固定极好，呈鲜艳的嗜酸性（红）且轮廓清晰，常用于造血系统淋巴瘤标本。34.【答案】C【解析】媒染剂通常是金属盐（如铝、铁、铬盐），它们作为“桥梁”连接染料和组织。在Harris苏木精中，钾明矾（硫酸铝钾）是媒染剂。35.【答案】B【解析】原位杂交（ISH）是用标记的核酸探针检测组织细胞内的DNA或RNA序列。检测蛋白质是免疫组化（IHC）的任务。现在多用非放射性探针（地高辛、生物素、荧光）。36.【答案】B【解析】树脂（中性树胶、DPX等）折光率与玻璃接近，硬度好，适合长期保存的永久装片。甘油和甘油明胶是水溶性的，主要用于荧光或短期保存。37.【答案】A【解析】脱水浓度跨度越大，组织渗透压变化越剧烈，导致组织收缩加剧。必须严格遵循梯度原则。38.【答案】B【解析】单纯酸脱钙（如盐酸、硝酸）对组织损伤大，容易膨胀。加入三氯乙酸或氯化铝等，可以起到缓冲作用，减缓酸对组织的破坏，保护细胞形态。39.【答案】B【解析】数值孔径（NA）决定了物镜的分辨率（分辨两点间最小距离的能力）。NA越大，分辨率越高。放大倍数由目镜和物镜共同决定。40.【答案】A【解析】在经典的Masson三色染色中，肌纤维被染成红色，胶原纤维被染成蓝色或绿色（视配方而定），细胞核呈黑色。41.【答案】C【解析】边缘效应通常是因为加抗体或试剂时，液体覆盖不均，边缘挥发快导致局部浓度升高或切片干燥，从而边缘着色深。42.【答案】B【解析】恶性肿瘤细胞通常核增大、深染，核浆比（N/C）显著增大，这是异型性的重要表现。43.【答案】C【解析】透明不完全时，组织内残留的乙醇与石蜡不互溶，形成白色云雾状混浊，石蜡无法完全渗透，导致切片困难。44.【【答案】A【解析】普鲁士蓝反应是显示三价铁（含铁血黄素）的特异性染色，呈蓝色。45.【答案】C【解析】TaqDNA聚合酶的最适延伸温度是72℃左右，用于引物延伸合成DNA链。46.【答案】C【解析】常规切片机粗调节用于快速进刀，每转一圈通常推进50μm。切片厚度是通过微调节旋钮控制的。47.【答案】C【解析】Carnoy液（甲醇-冰醋酸-氯仿）能很好地固定糖原和核酸，且穿透极快，常用于糖原染色或快速固定。48.【答案】C【解析】细胞核黑色、胞质灰蓝，说明苏木精染色过深且分化不够，或者苏木精浓度过高、时间过长。这是典型的“染色过深”现象。49.【答案】E【解析】脱水机程序最后是浸蜡，通常经过2-3缸石蜡以彻底置换透明剂。最后一步通常是石蜡Ⅲ。50.【答案】C【解析】生物安全柜操作时，操作者的脸部应处于操作口前方视窗玻璃之后，不能伸入柜内，以保护操作人员免受气溶胶伤害。二、多项选择题51.【答案】ABCE【解析】固定的主要目的是防止自溶（A）、腐败（B），沉淀物质（硬化，C），保存结构（包括某些染色基团E）。虽然现代固定液尽量保存抗原，但“保存抗原性”不是所有固定液（如含重金属的）的主要目的，且固定本身会对抗原造成一定程度的交联遮蔽，D不是固定液最本质的定义性目的。52.【答案】ACD【解析】刀有缺口（A）、蜡块边缘与刀不平行（C）、展片水温过低（D）是导致皱褶的常见原因。组织过硬易碎裂，不易皱褶；切片速度过慢通常影响平整度但不直接导致皱褶。53.【答案】ABCDE【解析】所有选项都是降低背景染色的有效措施：封闭（A）、降低抗体浓度（B）、充分洗涤（C）、阻断内源性酶/生物素（D）、控制显色（E）。54.【答案】ABCE【解析】Carnoy液穿透快（B），固定糖原核酸（C），由乙醇-冰醋酸-氯仿组成（A）。但它的主要缺点是收缩明显（E）。它对细胞核固定一般，主要用于细胞涂片或糖原。55.【答案】ABC【解析】脱水剂必须能与水互溶且逐步置换水。乙醇、丙酮、正丁醇是常用脱水剂。二甲苯是透明剂（虽也能脱水但因其剧烈收缩不直接用于脱水），环己酮是透明剂。56.【答案】BCE【解析】特殊染色指除常规HE以外的染色技术，用于显示特定结构或物质。抗酸（B）、网状纤维（C）、PAS（E）都是。HE是常规（A），免疫荧光（D）属于免疫组化范畴。57.【【答案】ABD【解析】含骨组织必须脱钙（A），脱钙后需洗去酸（B），使用弱酸（如EDTA或甲酸）保护结构（D）。脱钙不是越长越好（C），过度脱钙会破坏结构；脱钙后必须水洗（E）。58.【答案】ACDE【解析】油镜用后需擦（A），防潮防霉（C），移动握臂（D），下降观察（E）。光学镜头严禁用手触摸（B）。59.【答案】ABCD【解析】苏木精需氧化成熟（A、B），可自然或人工氧化（C），成熟后颜色变深（D）。成熟后的染液通常呈碱性或微碱性（含媒染剂），不是酸性（E）。60.【答案】ABCDE【解析】PCR、FISH、测序、流式、SouthernBlot均为分子病理常用技术。三、判断题61.【答案】×【解析】大多数固定液（特别是醇类）会溶解脂质。只有锇酸能固定脂质。62.【答案】×【解析】冷冻切片快，但厚度通常大于石蜡切片，且细胞内冰晶可能影响结构，精细度一般不如石蜡切片。63.【答案】√【解析】伊红是酸性染料，胞质碱性蛋白与之结合。64.【答案】√【解析】逆序会导致水进入组织，引起膨胀，破坏结构。65.【答案】×【解析】孵育可以在37℃进行，通常能加快反应速度，缩短时间。66.【答案】√【解析】经典Masson染色中胶原纤维呈蓝色。67.【答案】×【解析】病理报告具有法律效力，一旦发出不能涂改。如有错误，需发布补充报告或更正报告。68.【答案】√【解析】环氧树脂硬度高、切薄片，是电镜标准包埋剂。69.【答案】√【解析】甲醛久置氧化产生甲酸（蚁酸），甲酸与某些金属盐反应生成黑色沉淀（如甲醛黑色素）。70.【答案】×【解析】形态学上有显著区别，如凋亡有凋亡小体、无炎症；坏死有细胞肿胀、炎症反应。71.【答案】√【解析】分化即利用酸碱作用去除过染的染料。72.【答案】×【解析】组织块大小至关重要，一般不超过3cm×1.5cm×0.2cm。过大导致固定脱水不透。73.【答案】√【解析】数字病理切片（WSI）即全切片成像，是数字病理的基础。74.【答案】×【解析】普鲁士蓝显示铁，VonKossa显示钙。75.【答案】√【解析】95℃是PCR变性的标准温度，使DNA双链解开。四、名词解释76.核浆比：指细胞核与细胞质的体积（或面积）之比。正常细胞核浆比相对恒定，恶性肿瘤细胞常表现为核增大、浆减少，导致核浆比显著增大，是病理诊断中判断细胞异型性的重要指标之一。77.脱钙：指通过化学试剂（如酸、EDTA）或物理方法去除骨组织或钙化病灶中钙盐的过程。目的是使组织变软，便于后续的切片处理。78.抗原修复：在免疫组化染色中，由于甲醛固定会导致蛋白质交联而遮蔽抗原位点，通过加热（热修复）或酶消化（酶修复）等方法，重新暴露被遮蔽的抗原表位，从而提高抗体检测灵敏度的技术。79.人工假象：在标本取材、固定、脱水、包埋、切片及染色等处理过程中，由于技术操作不当或机械因素引入的、非标本本身固有的形态学改变。如切片刀痕、折叠、空洞、染色沉淀等，可能干扰诊断。80.术中冷冻切片诊断：指在手术过程中，为了确定病变的性质（如良性或恶性）、切缘是否干净等，将新鲜组织送至病理科，通过冷冻切片机快速制片（通常15-30分钟内）并进行显微镜下诊断的一种紧急病理检查方式。五、简答题81.简述常规石蜡切片技术（HE染色）的基本流程。答：(1)取材与固定：切除病变组织，立即投入固定液（如4%中性甲醛）固定。(2)脱水：利用梯度乙醇（70%→80%→95%→100%）逐步置换组织中的水分。(3)透明：利用二甲苯等置换组织中的乙醇，使组织透明。(4)浸蜡与包埋：用熔化的石蜡置换透明剂，并将组织包埋于蜡块中。(5)切片：使用切片机将蜡块切成3~5μm厚的薄片，贴附在载玻片上并烘干。(6)脱蜡：二甲苯脱去蜡，梯度乙醇复水至水。(7)染色：苏木精染核→水洗→分化（盐酸酒精）→蓝化（自来水/氨水）→伊红染浆。(8)脱水透明封固：梯度乙醇脱水→二甲苯透明→中性树胶封片。82.在免疫组化染色中，出现非特异性背景染色的常见原因有哪些？答：(1)内源性酶或生物素干扰：如组织中过氧化物酶、生物素未阻断。(2)抗体问题：一抗或二抗浓度过高、孵育时间过长、抗体不纯或交叉反应。(3)组织处理不当：固定时间过长导致抗原交联，或切片干燥。(4)洗涤不充分：PBS洗涤次数不够或时间过短。(5)显色反应失控：DAB显色时间过长或浓度过高。(6)封闭不足：未使用正常血清封闭非特异性位点。83.简述苏木精-伊红（H&E）染色的染色原理。答：H&E染色是双重染色，利用了组织成分对染料的亲和力（嗜色性）。(1)苏木精（Hematoxylin）：是一种碱性染料。在媒染剂（如铝明矾）作用下，形成带正电荷的染料-媒染剂复合物。细胞核中的核酸（DNA、RNA）含有磷酸基，带负电荷。正负电荷结合，苏木精使细胞核染成蓝色。(2)伊红：是一种酸性染料，在溶液中解离出带负电荷的阴离子。细胞质中的蛋白质多为碱性蛋白质，带正电荷。正负电荷结合，伊红使细胞质、肌纤维、胶原纤维、红细胞等染成不同程度的红色。84.为什么组织在脱水前必须用流水冲洗？如果冲洗不彻底