甲型肝炎灭活疫苗质量标准HS20000013

PAGEPAGE13北京众邦医疗科技开发公司关于爱巴苏的校改、补充申报材料品名：甲型肝炎灭活疫苗（爱巴苏）收审号：HS20000013申报单位：北京众邦医疗科技开发公司联系电话：84210021、84210078单位传真：84212494、84210217单位地址：北京东城和平里六区三号楼一层邮政编码：100013电子信箱：Liuzhijing@收到材料时间：2002年05月30日再交材料时间：2002年06月19日关于印校爱巴苏质量标准、使用说明书及包装标签的上报材料目录上报材料目录—————————————————————————P2核对保证书（软盘、纸版）———————————————————P3甲型肝炎灭活疫苗质量标准（软盘、纸版）————————————P4-5甲型肝炎灭活疫苗质量标准起草说明（软盘、纸版）————————P6起草说明附录1甲型肝炎病毒抗原的定量测定（软盘、纸版）————P7-8起草说明附录2流感病毒血凝素的测定（软盘、纸版）———————P9起草说明附录3甲型肝炎灭活疫苗的小鼠效力试验（软盘、纸版）——P10-11甲型肝炎灭活疫苗使用说明书（软盘、纸版）———————————P12-13包装标签样稿（纸版）———————————————————(拷贝件)核对保证书品名：甲型肝炎灭活疫苗（爱巴苏）收审号：HS20000013本品的质量标准、使用说明书及标签已经过我校核、确与药审中心认定的拟稿一致，我代表我们单位对此负责。生产（研制）单位：瑞士伯尔尼血清和疫苗研究所生产（研制）单位核稿人（签名）：H.Weber负责校对者（签名）：Dr.C.Hammer联系人：刘芷菁联系电话：84210021、84210078日期：2002年06月18日甲型肝炎灭活疫苗质量标准HepatitisAVaccine，InactivatedJS200000371外观应为白色透明,无异物。2装量按《中国药典》(2000年版)附录1B中的“注射液的装量”进行,应不低于标示量。3pH测定按《中国生物制品规程》(2000年版)pH值测定方法进行,测定疫苗混合物(不少于5支疫苗合并在一起),pH值在20℃时的范围为6.5-7.0。4无菌试验按《中国生物制品规程》(2000年版)通则中《生物制品无菌试验规程》进行,结果应为阴性。5异常毒性试验按《生物制品规程》(2000年版)通则中《生物制品异常毒性试验规程》进行。到期动物应健存,体重增加。6柳硫汞含量的测定按《中国生物制品规程》(2000年版)附录V中《柳硫汞含量的测定方法》进行,结果应为15-30μg/ml。7游离甲醛含量的测定按《中国生物制品规程》(2000年版)附录V中《游离甲醛含量的测定方法》进行,结果应为≤200μg/ml。8内毒素含量的测定按《中国药典》(2000版附录)进行,结果应≤4.OEU/ml。9流感病毒A血凝素含量的测定用琼脂扩散方法（见附录1）进行,结果应<5μg/ml。10甲型肝炎病毒抗原将疫苗及其参考品倍比稀释后用甲肝抗原试剂进行测定,计算疫苗中的抗原含量,应为≥1000I9IU/ml。(见附录2)11鉴别试验按《中国生物制品规程》（2000年版）进行,疫苗与特异的甲肝抗体中和,证明含有甲肝抗原。12小鼠效力试验按附录3进行,体内试验(小白鼠)(ED50/m1)≤20ORU【规格】500IU/0.5ml/人份/瓶【生产国别及生产厂】瑞士伯尔尼血清和疫苗研究所【质量复核单位】中国药品生物制品检定所甲型肝炎灭活疫苗质量标准起草说明该质量标准是以我国《生物制品规程》(2000年版)为依据，结合厂家规程拟订的。其中，流感病毒A血凝素含量、甲肝病毒抗原含量的测定我国《规程》中没有，而厂家质量标准中有此项检测，因此，此质量标准中保留了这几项标准。另外，由于该疫苗是灭活疫苗，故此质量标准中没有病毒滴定及热稳定性试验检测项目。特此说明。附录1甲型肝炎病毒抗原的定量测定方法:将己知含量的甲肝抗原与待测样品用ELISA双抗体夹心法测定后计算含量。材料：纯化HAV-IgG：由本室纯化,效价1:300酶标记HAV-IgG：来源本室,效价1:1000己知含量的疫苗参考品实验步骤：1用包被缓冲液稀释纯化HAV-IgG(1:300)包被微孔板，100ul/孔，4℃过夜。2洗液洗三次，设一孔空白对照，三孔阴性对照，二孔阳性对照及四孔细胞对照，在相应孔中加待测样品20ul/孔,过夜。3用洗液洗三次，加入50ul/孔酶标记HAV-IgG，置40℃2小时。4洗液洗四次，加入显色剂lOOul/孔，置室温15分钟，加终止剂50ul/孔。5比色用酶标仪(波长492nm)测定OD值。结果计算：1閾值计算閾值=细胞对照均值*2.12结果判定≥閾值为阳性,<閾值为阴性。3计算含量按下列方法进行：将测出的参考标准及样品的OD均值乘以1000后记入下表：稀释度参考标准OD*1000（T）样品OD*1000（S）1：2¹1：2²1：2³1：2⁴1：2⁵T₅T₄T₃T₂T₁S₅S₄S₃S₂S₁计算公式：含量*Log־¹[V/W*Log1.5]V=0.2(T₁+T₂+T₃+T₄+T₅)-0.2(S₁+S₂+S₃+S₄+S₅)W=0.1（T₅-T₁+S₅-S₁）+0.05（T₄-T₂+S₄-S₂）含量*Log־¹[V/W*Log1.5]结果批号含量附录2流感病毒血凝素的测定方法用已知含量的流感病毒血凝素经琼脂扩散计算其相对含量。材料流感病毒血凝素抗流感病毒血凝素抗体步骤1将知含量的流感病毒血凝素和经系列稀释的待测样品加入琼脂板的周边孔,抗流感病毒血凝素抗体中心孔。237℃作用24小时,观察沉淀线。3根据己知含量的流感病毒血凝素最大稀释倍数能出现沉淀线与待测样品进行比较计算其含量。附录3甲型肝炎灭活疫苗的小鼠效力试验效力试验为评价疫苗免疫效果的指标。其方法是将疫苗进行一系列稀释后注射小鼠，测定小鼠血清中的抗HAV抗体，计算能使50%小鼠产生抗体的疫苗含量。1.疫苗批号：。标示含量：2.方法：2.1动物：品系来源：2.2疫苗稀释液：为含mg/ml的氢氧化铝，溶液来源：。2.3疫苗稀释：每批疫苗按下述方法进行。管号12345对照疫苗ml稀释液ml稀释度2.4注射动物：2.4.1注射剂量：ml/只，每个稀释度注射只小鼠。2.4.2注射途径：。2.4.3注射时间：。2.5采血：采血日期：。眼球采血后分离血清。2.6测抗HAV抗体（记录附后）2.7结果计算：疫苗稀释度（对数）阴性数/接种数阴性动物分布累计比数阴性%阴性阳性阴性阳性50%—<50%距离比例=>50%—<50%=<50%阴性血清稀释度的对数+距离比例*稀释度的对数=即该疫苗稀释倍后可使50%的小鼠产生抗体ED₅₀=/=EL.U./ml甲型肝炎灭活疫苗说明书[药品名称]通用名:甲型肝炎灭活疫苗英文:HepatitisAVaccine，Inactivated商品名:爱巴苏英文：EpaxalBerna汉语拼音:jiaxingganyanmiehuoyimiao主要成份:甲肝病毒抗原。每支(0.5ml)至少含有500放免单位的甲肝病毒抗原(RG-SB毒株)。该产品采用由瑞士Berne血清和疫苗研究所研制的一项技术,将用福尔马林灭活的人体二倍体细胞培养的甲肝病毒颗粒与IRIVs(免疫增强作用的重组流感病毒小体)结合。IRIVs中流感病毒表面血凝素分子附着在卵磷脂双层膜上。在生物体内,IRIVs和与其结合的甲肝病毒一道,积极与巨噬细胞的相应受体结合,从而被吞噬,在巨噬细胞的吞噬小体内,流感病毒血凝素的融合肽在PH为5时被活化,被吞噬的脂质体可直接与吞噬小体的膜融合,这样,相对较小的甲肝病毒得以表达于巨噬细胞膜表面。巨噬细胞的抗原提呈能力及T淋巴细胞的活化作用因此得以增强,进而活化B淋巴细胞产生甲肝抗体。IRIVs特异性地增强甲肝抗原免疫原性的作用大大超过非特异性的铝类佐剂。因IRIVs不引起异体反应,故可达到最理想的耐受性。[性状]无色透明液体。[适应症]适用于成人和年满1周岁以上年龄段的儿群。适用范围为:1．生活在甲肝低危和中危地区的人群。如旅经甲肝流行区的人员:援助发展的工作人员；驻外各种使团及辅助人员的亲属；现役军人；医护工作人员；与甲肝病人和污染甲肝的物品密切接触的临床、护理工作人员；经常更换性伙伴者；患甲肝病情严重者,如免疫功能缺陷者、吸毒人员及其福利工作人员；密切接触难民以及收容所人员的工作者；从事食品生产和销售者；从事地下工程和污水处理的工作人员等。2．生活于甲肝高危地区的人群。[用法用量]1．基础免疫:三角肌一次性注射0.5ml,接种后第14天产生保护。如果需要立即保护,可在接种本品的同时,选择另一部位接种2mlGlobumanBerna(甲肝免疫球蛋白),在主动免疫产生之前提供及时的被动免疫保护。2．加强免疫:由于疫苗的保护作用至少持续一年,因此基础免疫一年后才须进行加强免疫。加强免疫仍是肌注0.5ml。[不良反应]局部反应为注射部位疼痛、红肿、变硬；全身反应有发热、头痛、不适、食欲不振或恶心等。[禁忌]对疫苗中任何一种组成成分过敏者。[注意事项]1、急性发烧时不应进行接种。2、有较强出血倾向(血友病、抗凝血病等)者,应作上臂皮下注射。3、免疫系统有损的患者,对接种的免疫反应性可能下降。[孕妇及哺乳期妇女用药]1、孕妇用药对胎儿无明显的危险性,但一般仅对有高度感染危险性的孕妇进行接种。2、哺乳期免疫对小儿无不良影响。[儿童用药]1周岁以上儿童用药同成人一样。[药物相互作用]不需要与其他免疫接种间隔一段时间。同时接种2mlG