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文档简介
1、第九章葡萄糖代谢相关测试:1。学习交换PPT,学习内容,第1节血糖试验,第2节血清糖基化蛋白试验,第3节胰岛素释放和C肽释放试验,第4节糖代谢试验,第5、2节其他糖试验。学习交流PPT、学习目标,掌握血糖和口服葡萄糖耐量试验的概念、实验原理、操作方法和临床应用;掌握糖化血清蛋白测定的原理、方法学评价和临床应用,熟悉胰岛素的临床应用和胰岛素释放试验;熟悉C肽的临床应用和C肽释放试验。了解血乳酸、丙酮酸、羟丁酸等糖类的测定。能以标准化和熟练的方式测量血糖、口服葡萄糖耐量试验、糖化血红蛋白和糖化血清蛋白,并正确解释实验结果;3、学会交流PPT,糖是一种有机化合物,其化学本质是多羟基醛或多羟基酮及其衍
2、生物,而碳水化合物代谢是指体内的一系列葡萄糖(Glc)和糖原(Gn)。人体内糖的主要形式是葡萄糖(Glc)和糖原(Gn)。葡萄糖是糖在血液中的运输形式,在体内糖的代谢中起主要作用。糖原是葡萄糖的聚合物,包括肝糖原、肌糖原和肾糖原,是糖在体内的储存形式。葡萄糖和糖原可以在体内氧化提供能量。前言,4,学会交换PPT,以及常用的临床检测试验:血糖浓度、口服葡萄糖耐量试验、糖化血红蛋白、糖化血清蛋白、胰岛素和胰岛素释放试验、C肽和C肽释放试验、糖代谢物(血乳酸、丙酮、-羟丁酸)、其他糖(果糖、半乳糖)等。5、学会交流PPT,第一节血糖测量,6、学会交流PPT,血糖一般指血液中的葡萄糖。在激素和其他因素
3、的调节下,血糖浓度保持相对恒定。健康人空腹血糖的参考范围通常是3。896.11毫摩尔/升(70,110毫克/分升),但在2003年,美国糖尿病协会(ADA)建议参考范围的上限应降低至5.6毫摩尔/升(100毫克/分升)。血糖,7、学习交流PPT,血糖浓度取决于血糖的来源和动态平衡的方式。血糖的来源主要受身体的饮食影响,而出路则取决于身体对血糖的利用。1.糖代谢概述。8.学习如何与PPT沟通。根据身体的不同状态,血糖有三个主要来源:1 .食物中糖分的消化和吸收,2 .糖原的分解,3 .非糖类物质的转化,(1)血糖的来源,9。学习如何与PPT沟通。葡萄糖的代谢过程取决于身体的需要。主要的代谢途径是
4、:1有氧氧化,2糖原合成,3转化为非糖物质,4转化为其他糖衍生物,5产生尿糖关键酶调节关键酶如何调节激素胰高血糖素、糖皮质激素和肾上腺素,它们是升高血糖的常见激素,胰岛素是降低血糖的常见激素。第二,调节血糖浓度。12.学会交流PPT,定义:胰岛素是一种由胰岛细胞合成和分泌的多肽激素。它主要作用于肝脏、骨骼肌和脂肪组织。功能:一方面,它促进这些组织细胞吸收葡萄糖,并将其转化为糖原或脂肪进行储存;另一方面,它可以抑制肝糖原分解和糖异生,从而降低血糖。(1)胰岛素,一种降低血糖的激素,定义了它的功能;3)学习和交流PPT,人胰岛素的化学组成中含有51个氨基酸残基,分子量为5808,由两条链组成,一条
5、是链间二硫键,另一条是链间二硫键。人胰岛素不同于其他生物的胰岛素,但其B链C端(B23B26)高度保守,是胰岛素生物活性的决定性区域。因此,不同来源的胰岛素在免疫学和生物学活性上具有相似性。(1)胰岛素,一种降低血糖的激素;14)学会交换PPT。在合成过程中,含有100个氨基酸残基的前胰岛素在胰岛细胞的核糖体上合成。前胰岛素原被快速挖掘最后,用蛋白酶将胰岛素原水解成含51个氨基酸的胰岛素和含31个氨基酸的C肽。(1)降血糖激素胰岛素,15)学习传递PPT,(1)降血糖激素胰岛素,前胰岛素原,胰岛素原,胰岛素,c肽,16)学习传递PPT,释放激动剂:葡萄糖,胰岛素,胰岛素等。阻断剂:高血糖症,生
6、长抑素和肾上腺素能。(1)胰岛素,一种降低血糖的激素,17。学会交流。胰岛素主要被肝脏吸收和降解,少量被肾小球过滤,在近曲小管被重吸收和降解。胰岛素在体循环中的生物半衰期为45分钟。主要通过胰岛素和胰岛素受体的结合,触发细胞内特定的信号转导,从而产生相应的生物学效应。(1)胰岛素,一种降低血糖的激素,及其降解机制;18)学习和交流胰岛素样生长因子(IGF)是一种多肽,其结构类似于胰岛素,具有类似于胰岛素的代谢和生长促进作用,主要包括IGFI和IGF-ii。IGFI,也称为C(somatomedinC),是细胞生长和分化的主要调节因子之一,但IGF-II的生理作用仍不清楚。IGFI主要由肝脏产生
7、,其他许多组织可以合成IGFI,但它不进入血液,只在局部发挥作用。在血液中,IGF的浓度大约是胰岛素的1000倍,但大部分都与特定的蛋白质结合在一起,只有少数以游离形式存在。然而,胰岛素在血液中是游离的,因此与胰岛素相比,血液中IGF的活性非常低。IGF通过特定的IGF受体或胰岛素受体发挥作用。(1)胰岛素样生长因子,一种降低血糖的激素,19。PPT和IGFI在正常葡萄糖代谢中的作用尚不清楚。外源性注射可导致低血糖,而缺乏IGFI可导致生长迟缓。胰腺外肿瘤会导致IGF过多,患者可能会出现饥饿低血糖。测定IGFI浓度可以评估生长激素的缺乏和过量,并监测身体的营养状况。(1)胰岛素样生长因子,一种
8、降低血糖的激素,20。学会交流PPT、胰高血糖素和肾上腺素;(2)升高血糖、刺激葡萄糖释放、降低葡萄糖利用率的激素、生长激素和皮质醇、21。学会交流PPT和血糖激素调节,22。学会交流。如果监管失衡,结果会是什么?高血糖或低血糖:低于2.8毫摩尔/升.高血糖:高于7.1毫摩尔/升(高于8.89毫摩尔/升,伴有糖尿病)。最常见的疾病是高血糖症:糖尿病。23、学习和交流PPT、高血糖症和糖尿病,高血糖症是由于葡萄糖代谢紊乱导致葡萄糖浓度高于参考上限的异常现象,主要表现为空腹血糖受损、糖耐量受损或糖尿病。其中,空腹血糖受损和糖耐量受损是正常糖代谢和糖尿病之间的中间状态,是糖尿病和心血管疾病的危险因素
9、和标志,糖尿病是一组严重的代谢性疾病。24、研究和交换PPT,糖尿病的发病机制和分类,糖尿病是一组由胰岛素分泌不足和/或低胰岛素作用引起的葡萄糖代谢紊乱。分型:2型糖尿病,2型糖尿病临床症状:“三多一少”,即多尿、多饮、多饮和体重减轻。25岁,研究和交流PPT,2型糖尿病又称青年发病型糖尿病或胰岛素抵抗型糖尿病。原因:胰腺中产生胰岛素的细胞被完全破坏,从而完全丧失产生胰岛素的功能。治疗:依赖胰岛素治疗。2型糖尿病也被称为非胰岛素抵抗型糖尿病。原因:它可以自己产生胰岛素,但是细胞不能对它做出反应,所以胰岛素不能发挥它的作用。治疗:需要单独使用胰岛素或结合口服药物。26.学会交流PPT、27。学会
10、交流。测定方法:无机化学法、有机化学法和酶法的参考范围为3.9-6.1毫摩尔/升(70110毫克/分升)。临床意义:高血糖和低血糖。3.血清(血浆)葡萄糖的测定和评价。28.学会交流。用比色法测定蓝色化合物,计算出血糖含量特异性差,易受其他还原性物质干扰。现在,空腹正常血糖的参考值消除了4.4-6.7毫克/升或80-120毫克/升。无机化学方法:吴氏方法,29岁,学习交换PPT,有机化学方法:邻甲苯胺法,原理:葡萄糖是一种含有醛基的己糖,在酸性条件下,希夫碱的颜色与样品中葡萄糖的含量成正比。评价:该方法操作简单,特异性强,易于操作,可直接用血浆或血清进行测定,但所用试剂具有腐蚀性和致癌性,目前
11、很少使用。30,研究和交换PPT,酶法,葡萄糖氧化酶(God)法,己糖激酶(HK)法,葡萄糖脱氢酶法,国际公认,国家推荐,31,研究和交换PPT,实验9-1,葡萄糖氧化酶(GOD)法测定血糖,原理:葡萄糖氧化酶通过氧气和水将葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并将其释放。在过氧化物酶的作用下,过氧化氢分解成水和氧,无色的4-氨基安替比林和苯酚氧化缩合形成红色醌。红色在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。在510纳米波长处测量吸光度,并通过与标准试管比较来计算血糖浓度。32、学会交换PPT,制备磷酸盐缓冲液(0.1摩尔/升,pH7.0),酶试剂葡萄糖氧化酶1200U,过氧化物酶1200U,4-氨基安替比林10毫克,
12、溶于上述磷酸盐缓冲液80毫升,调节pH7.0,定容至100毫升,保持2-8个月,再溶解酚溶液。避光2-8个月。保持苯甲酸溶液(12毫升/升)和葡萄糖标准溶液(5.0毫摩尔/升)1个月。学会交换PPT,进行实验操作,混合均匀,在37水浴中保持15分钟,向每支试管中加入0.5毫升蒸馏水,在510纳米波长下比较颜色,用空白试管将其调至零,并读取每支试管的吸光度。根据每个试管的吸光度计算血糖浓度。结果取三个试管,按下表操作,葡萄糖含量(mmol/L),34,学习交流PPT,自动分析仪检测,试剂的主要成分与手动检测相似,见试剂盒说明书。工作液配置:根据样品体积,按1:4的比例混合酶试剂和缓冲液。操作校准
13、、质量控制和计算机上样品的结果计算为1毫克/毫升0.0555=0.0555毫升/升,35。学习交换PPT时,葡萄糖氧化酶法可以直接测量脑脊液中的葡萄糖含量,但不能直接测量尿液中的葡萄糖含量。这是因为尿液中尿酸和其他干扰物质的浓度过高,这会干扰过氧化物酶反应,导致假的低结果。应及时分离红细胞以获取血样。因为红细胞的糖酵解会导致低测量结果。建议用草酸钾-氟化钠作为抗凝剂抑制糖酵解。注意事项,36、学会沟通PPT,为重度黄疸、溶血和乳糜性血清准备无蛋白血液滤液,然后进行测定。现在通常制备酶-酚混合物。葡萄糖氧化酶对右旋葡萄糖高度特异,溶液中约36%的葡萄糖为型,64%为型。葡萄糖的完全氧化需要型对型
14、的旋转反应。葡萄糖回转酶能加速这一反应,并延长孵育时间以完成自发回转过程。新制备的葡萄糖标准溶液主要是I型,因此必须放置超过2小时(最好是过夜),并且只有在旋转至平衡后才能使用。注意事项,37,学习交流PPT,计算:葡萄糖标准溶液:5毫摩尔/升血清葡萄糖(mmol/L)=AT/ASCS,参考值:3 . 96 . 1毫摩尔/升,38,学习交流PPT,该方法对于测量葡萄糖非常具体。从主反应公式可以看出,第一步是特定反应,第二步不太具体一些还原性物质,如尿酸、维生素C、胆红素、谷胱甘肽等。可与生色物质竞争过氧化氢,从而消耗反应过程中产生的过氧化氢,导致竞争抑制和低测定结果。然而,它对测定结果没有显著
15、影响。实验误差分析:39,学习交换PPT,实验9-2,用己糖激酶(HK)法测定血糖,原理:NADPH在340纳米处有吸收峰,其吸光度增加与样品中葡萄糖浓度成正比。评价:该方法特异性强,灵敏度高,干扰因素少,适合自动化分析。这是葡萄糖测定的参考方法,但试剂昂贵。40,学习交流PPT,试剂盒配方,41,学习交流PPT,实验操作,(2)混合均匀,放入37水浴中10分钟,在340纳米波长下比较颜色,比色皿的光学直径为1厘米,用蒸馏水将其调至零,并读取每个试管的吸光度。根据每个试管的吸光度计算血糖浓度。(3)结果计算:1)终点法(1)按照下表操作,42)学习交流PPT,实验操作,2)速率法:以半自动生化
16、分析仪为例(1)主要参数如下:8.2孵育时间30s监测时间60s波长340nm色度计光路1.0cm温度37液体吸收0.5mL加样(3)结果计算血清葡萄糖(0.5 ml)准确度和精密度高,适用于自动分析仪,但试剂昂贵。己糖激酶法不受轻度溶血、脂血症、黄疸、尿酸、维生素C等的干扰。但溶血严重的样品会影响测定结果。在极少数情况下,尤其是IgM型,血糖测定结果不可靠。44、学习交换PPT时,不同检测方法提供的空腹正常血糖参考值是不同的。葡萄糖氧化酶法:3 . 96 . 1mol/Lfolin-Wu法:4 . 46 . 7mol/L邻甲苯胺法:3 . 96 . 1mol/L,45,学习交换PPT法,葡萄糖氧化酶法:该方法特异性高,反应条件温和,能反映血液中葡萄糖的真实含量,已随着己糖激酶法得到推广和广泛应用:特异性高,灵敏度高,干扰因素少,适用于自动分析,是葡萄糖测定的参考方法,但试剂昂贵。吴氏方法:这种方法对葡萄糖没有特异性,所有的还原性物质都能产生相同的反应。邻甲苯胺法:该方法涉及强酸、加热等反应条件,不便于大规模检测。此外,邻甲苯胺必须蒸馏和使用,这是有毒的,很少用于临床和科学研究。血糖测定方法的特点,46,学
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