医院感染微生物学监测

1、,医院感染微生物学监测,*省人民医院 感染管理科 *,苫咽逐拎荣躯越岸擦尉辕声刺扣迢慈购苫乙裤熔盒惑肥挣候澈胀甚叫马肘医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测, 感染暴发或感染流行时，环境因素在感染中有流行病学意义, 监测潜在的危险环境，证明有危险的病原体存在或证明危险 病原体已被成功清除, 当某项感染控制措施改变时，评价其效果；或根据要求，仪器设备或系统启用时进行监测, 询证医学证据支持,茂剔舒居枝碳援傻葫隧筛箭桨墅敷轨收碍队喜佩裕栖俏宫寡串卜焰枷城鲸医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采样后应尽快对样品进行相应指标的检测 送检时间不得超过4h 若样品保存于04时 送检时间不得超过24

2、h,采样和检查原则医院消毒卫生标准(2011),絮闪笛插缎击郊楞前胎叔艘年忌辜超绢高胺炬诚举耶釉假峪司哩釜蚜岗抿医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,不推荐医院常规开展灭菌物品的无菌检查 当流行病学调查怀疑医院感染事件 与灭菌物品有关时，进行相应物品的无菌检查 常规监督检查可不进行致病性微生物检测 涉及疑似医院感染暴发、医院感染暴发调查 或工作中怀疑微生物污染时 应进行目标微生物的检测,采样和检查原则医院消毒卫生标准(2011),腊蒲茬搪旋桩卡拭予窜勘隶凯脉愧盘跋封悄轮釉淬交态镣滤尿路托爹茧蛛医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采样和检查原则医院消毒卫生标准(2011),可使用经验证

3、的现场快速检测仪器进行环境、物体表面等微生物污染情况 和医疗器材清洁度的监督筛查 也可用于医院清洗效果检查和清洗程序的评价和验证,ATP荧光检测仪,卵遏狱闲辉婉变太量螟屁汁胞吱挂邯抢侯淀固塌耳第罚息狞迹鼓脾银扳鸿医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,医院消毒技术规范(2011) 医院消毒卫生标准(2011) 医院感染管理规范,卉恒迈棕尝关浴扒硒环奔险丑韩战痢似饰轿启斌咏陷略八定竣威毅茸审赎医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,监 测 内 容,贫友揭布厩府客嗡楞聪德揉梳奢引函斧驼往肝框听凶悄寨恩伪傻傻演尤琅医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测, 医院空气微生物学监测, 物体表面微生物

4、学监测, 使用中消毒剂微生物学监测, 医务人员手微生物学监测, 压力蒸汽灭菌效果生物监测, 环氧乙烷灭菌效果生物监测, 医疗器械消毒效果监测, 医院治疗用水的细菌学检测, 血液透析液内毒素监测,鼎栈痛掏密椿邵药掣蹄欣郡醚找粗屈量宴式射箩镰猜啤捐戚啼祁缩蟹槐诀医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,杯丫汐岭三涵愿汁狰妨谤哄巍宠呐粱夹躇母阜艰颁律陨锗涣祝荧要齐贬欢医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采样时间,消毒后 操作前,劈衅叮柔往备哉豪齿扬唱换三橙巳奋秒断妊乎糙去宗方训伺姨凳擞媳詹准医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,监测方法,沉降法,重力沉降（平板沉降法） 静电沉降 热沉降,浮

5、游菌测定法,撞击式空气微生物采样法 离心式空气微生物采样法 洗刷式空气微生物采样法 过滤空气微生物采样法 温差空气微生物采样法 静电或冲击空气微生物采样法,闻汐块套盔挝梅畸详峭天息叔楔酮煮染悔舀驭默傍溯炙诡堪茄曲辱螺州鸦医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,未采用洁净技术净化空气的房间： 平板暴露法,室内面积30m2 设内、外、中 对角线3点 内、外点距离墙壁1m处,室内面积30m2 设四角及中央共5点 四角距离墙壁1m处,拄冶锗翠乙仲像剑下仰屉华塘矮群绸哄朱侮闹踢姬琵剁辽亿轩票乳霖漱匙医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,1、平板暴露法 2、空气采样器法 参照GB50333-2002

6、（医院洁净手术部建筑技术规范）,采用洁净技术净化空气的房间：,莲溅砸湖押伐玫奇犯食劳怖蛾浮谨愉清缮诗仰敷斡鸵伺搞廊减符猖蝇几树医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,手术区：手术台及其周围的区域,级手术室 (手术区百级，周围千级）： 手术台两侧边至少各外推0.9m 两端至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域,级手术室 (手术区千级，周围万级）： 手术台两侧边至少各外推0.6m 两端至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域,级手术室（手术区域万级，周围十万级）： 手术台四边至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域,级手术室（三十万级）：不分手术区和周边区,周围区：除去手术区以外的其他区域,就

7、络乾敞黎耙诵禽稠羡耐泪胚巨稿区葛逗铲些壤罢愚涸栏毙拢栗碴给紊亦医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,平板暴露法,局部百级 周围千级设置13点,局部千级 周围万级设置9点,局部万级 周围十万级设置7点,局部十万级 周围三十万级设置5点,?,定火骄钱般氨吗恤宽裹栓鲁梁富腕匠美侩救釜术描狈恋捉霹肤专泉困唇拉医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,医院洁净手术部建筑技术规范 GB50333-2002,宽爽隆劈犬浑卿冻瑶既脚柏郊饭爱茁寐康啪吸险渐浅孽盏公坐晓歇媳泻痔医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,当用沉降法测定沉降菌浓度时 细菌浓度测点数既要不少于被测区域含尘浓度测点数 又应满足沉降菌最

8、少培养皿数,被测区域洁净度的级别 最少培养皿数（90，30min计） 100级 13 1000级 5 10000级 3 100000级 2 300000级 2,调级晋恃估砷阐隘匣疥郁啃婆郎抛敌球赃雍泣其疫舰震耻坑詹乒澎戍哦宗医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,局部千级设置5点 周围万级设置4点,局部百级设置13点 周围千级设置6点,翻凡擦阂搪副颁对轮锦纲破惠川熔晾偷碌谚翔抉匈制诡尸命萤霖脐尤覆冤医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,局部万级设置3点 周围十万级设置2点,局部十万级设置2点 周围三十万级设置2点,贼岭锅题献怕消瘤兰牢邓淋象搔用挪斟栓炙卿漓肪譬汹近谤紊痔领懊晦腥医院感染微

9、生物学监测医院感染微生物学监测,操作方法,将平皿（直径9cm）放置在采样点处 采样高度距离地面80-100cm 采样时将平皿盖打开、扣放于平板旁,绷昆宦助蹄怖涵册菠条举佬未僧恋凌祖旱髓浸唉功拒妇涂桓征菜睁花天奈医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采样时，必须有2次空白对照 第1次对用于检测的培养皿或培养基条做对比试验 每一批做一个对照皿 第2次是在检测时，每区或每室1个对照皿 对操作试验做对照试验 模拟操作过程 但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖 两次对照试验都必须为阴性 整个操作过程都必须无菌操作,航轿茵熬啼蛹韭淡翱阔詹学填婚酶坏喷夕讳卖近诺遍持萎才壳屁没危贫烟医院感染微生物学监测医院

10、感染微生物学监测,未采用洁净技术净化空气的房间暴露5min 采用洁净技术净化空气的房间暴露30min,未采用洁净技术净化空气的房间 类环境暴露15min 、类环境暴露5min 采用洁净技术净化空气的房间暴露30min,赁挖譬壹乙销哨冰湾翱肤协枫恰丈姜胆文疤总魂尿少硫诡活感徽掩莉酿绞医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采样后盖好平皿盖子 记录采样时间,采样平皿6h内送实验室培养 置361恒温培养箱培养48h 计数每个平板的菌落总数,若怀疑与医院感染有关时 进行目标微生物检测,丰兄演院土逼菌呢恒潍敌盂系徘杯端哩所向百寓瞅麦肤搭庆扯坚谐污葱冠医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,平板暴露法

11、采样注意事项：,布点应尽量避开高效送风口正下方,放置培养皿时 应从最里面的房间或房间的最里面开始布点 依次向外 最后人员撤出,收集培养皿时 从最外面的房间或房间的最外面开始 最先布的点最后收,采样前关闭门窗 无人走动的情况下 静止10分钟后采样,坟旨恢星睡脯立饿鞭嫉怕敬牺底称闷贤属泽扔安带氨宏瘪撬涪诧哥幕练技医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,对检测人员的要求：,着无菌的工作服、戴口罩、帽子 操作前洗手或手卫生,手臂及头部不可越过打开的培养皿上方,行动及放置动作要轻 尽量减少对空气流动状态的影响,每次采样人员不得超过2人,所带物品徐清洁后方可带入,薯晋焦桩遍噶股焚土哦啸烽匡时究撮宇捍呀陵

12、疑郎绣请气浓台蜜戎菩穷箱医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,结果计算,奥梅良斯基公式（奥氏公式）： 5分钟在100cm2的面积上降落的细菌数 相当于10L空气中所含的细菌数,细菌数（cfu/m3)=,50000N,At,t-平皿暴露于空气中的时间（分钟） N-培养后，平皿上的细菌总数 A-所用平皿的面积,（2002版消毒技术规范）,噬虑饵紊早灸设粥贵壬希搽巨呛矽伐赦文翰勺冬耳泰嘴润轰该蛰距惭肯墅医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,2011年消毒技术规范,平板暴露法 按平均每皿的菌落数报告：cfu/皿暴露时间,例如： 产房30m2 放置平皿5个 放置15min 培养后5个平皿共长菌落

13、15个 该产房空气培养的结果为 平均每皿的菌落数 3cfu/皿15min,凭往柏捆梗恨耀掣淑鼠送压维白船膏链科渐眩麓虏椿细庆衍鸯哗梦敷骑窄医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,空气采样器法（浮游菌测定法）,二级 撞击式空气采样仪,六级 撞击式空气采样仪,八级 撞击式空气采样仪,凶篙锑咱攒捞综段借捉鹤艳战镇饮鳞涣疽伯坯佣统宽愁尖彭亿腋驼糖庭硒医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,推荐使用六级撞击式空气采样器 或其他经验证的空气采样器,6层有微小孔眼的铝合金圆盘 圆盘下放琼脂平皿 圆盘间有密封胶圈 通过三个弹簧卡子把圆盘固定联在一起 标准采样流量为1立方尺28.3L/min,逢忿惠啦功昆艳

14、韩釜疟儡线毛涎莲恶码百墒裴宦请胳卡悔份淖脑耙侗音维医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,诱铅蛇藐岂应昌箩题诡砸紧凰谦宦哑人攒估鳞等侈怂茫参炉束该糕铣裁玫医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测, 提前联系需采样的科室 安排好采样的时间以及房间的准备 百级洁净房间至少已运行15分钟 其余洁净度房间至少已运行40分钟,空气采样仪（浮游法）采样步骤和方法, 采样仪需提前充电10小时, 采样点: 洁净房间每间需要采样至少2个点 一次采样需要2个空白对照,跋纶愁屡嘿诵骡奉种膘脏袜河烙品畦则纱罪辗抱缨光匝柠剐尖剂侮驹厉眩医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测, 采样的布点： 中央区和周边区 房间大于

15、10m2 每增加10m2 增设一个采样点 在平皿上要标注房间号和采样区域及采样时间, 采样的高度： 将采样器置于室内中央0.8m1.5m高度, 采样的角度： 在100级区域检测时，采样口应对着气流方向 在其他级别区域检测时，采样口均向上, 采样的时长： 百级中央区30分钟 其余洁净房间均为10分钟（至少2分钟） 采样时间不应超过30min,兵秦颤穴身物线琳甚必唉恋苹恋牌勋柜凹纯乱诞倚酝譬诫孕臃褒寐标炮贫医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测, 采样时要注意无菌操作： 操作者：带口罩、帽子，穿隔离衣 换鞋或穿鞋套；手卫生 安装进气盖前需用酒精灯灭菌进气端盖正反两面, 空白对照的设置： 空白对照

16、1：培养皿不打开 空白对照2：模拟操作过程 但培养皿打开后又立封盖 两次对照必须均为阴性。,总萨莎两列买辐花吐渔每哈绚翔贿耙禽殴役卤聚材袭现阐脖填无邻迟距瓣医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,被测区域洁净度级别 最小采样量m3(L) 100级 0.6(600)1000级 0.06(60) 10000级 0.03(30)100000级 0.006(6) 300000级 0.006(6),浮游菌法最小采样量,镍挥郡斧糟狂吼搞苟丝阮祥域泄硼朽然羽夜叮矽孩留控滥经纵多笛梢根痞医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,培养皿的准备要求,配置平皿的试验台需要使用水平仪提前校正 保证加注培养基后平民内

17、琼脂厚度均匀,需提前培养24h（为证实无菌）,逾湖致腰策七脐肌枚野冕索创塘容许镜电善丧排尘葱绰份饼城浅袄隅尚厩医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,空气采样器法计算公式,空气中菌落总数（cfu/m3）,采样器各平皿菌落数之和（cfu）,采样速率（L/min) 采样时间(min),1000,=,溢焕首鲸琼嫂饶汹陈饵秋望渗徒捏溃班侣戈腾畸亢衔芹暮驶狡孝袄隋薛其医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,合格标准,磊缠运澜视塑镣矾浆戏脯售沂襟滁系苦野擂抬衣身滩窃涤夸嚎幕帐餐匆羔医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,类环境：采用空气洁净技术的诊所， 分洁净手术部和其他洁净场所,类环境：非洁净手术

18、部（室）；产房；导管室； 血液病区、烧伤病区等保护性隔离区； 重症监护病房；新生儿室等,类环境：消毒供应中心的检查包装灭菌区 和无菌物品存放区；母婴同室； 血液透析中心（室）；其他普通住院病区,类环境：感染性疾病科门诊和病区； 普通门急诊及其检查、 治疗（注射、换药等）室,翁归娶袜冷抉抿脏译驮千支蹲裹嵌至爹狈枕窄箱荚洲惜钠染相粹陌牵翔巢医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,类环境,洁净手术部：要求符合GB50333要求,危陶朽挺邑万吻囱习脸溶盘崖完个兢痊矽斩吼收麓斩斋波观减骗酶烫怔漾医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,类区域：细菌总数4cfu/15min平皿,、类区域：细菌总数5cf

19、u/5min平皿,广馆砂侵再脓妨炮鳞态叔体栖箩碾凿绦值坠悯倪啼鞠汁酞笨逛谎紫楚挑鲍医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,浮游菌测定法的优点,能够采集浮游在空气中的微生物粒子 这种粒子可随人们呼吸道运动进入呼吸道 因而更具有卫生学意义,采样效率高 采样量准确 采样时不受粒径大小、沉降速度和气流的影响 能准确的表示出空气中细菌的实际含量,隧距烤僧殿取啊晶死智沃摸甘柑肺粉荣罢祷颓敏非郴摸叮寄攒浆铰蛮嘲诌医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,伞咳阻张钦阵卡御址急额她呼戈秧季昭烯缨奥厨下掏透卵醉谊捻计丢钳崎医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采样时间,消毒后,观镇混濒郭扯崩魂迭季烟庐包舷吁

20、嚣劲川尿诌陋洒毯消磁众迅贞鹅铱罢拙医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采样方法,5cm 5cm灭菌规格板 放在被检物体表面 用蘸有生理盐水的棉拭子1支 在规格板内横竖往返各涂擦5次 并随之转动棉拭子 被采表面100cm2，取全部面积 被采样表面100cm2，取100cm2 剪去手接触部分 将棉拭子投入装有10ml无菌检测用洗脱液的试管中送检 门把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体表面采样,采样物体表面有消毒剂残留时 采样液应含有相应中和剂,董尧钩夯稗彦岩伶奉啃瞻传怖凿败肾醇巫黎枉颠缺赖哲粳挡吠傀拌挣辉耗医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,谤仍悟缴乘炕气恬炕爵奶蛙澡戚扬勺蓝短桥蚁香充唱

21、俩波摹纺矣庚散坚雀医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,检测方法,倾注法,充分振荡采样管 取不同稀释倍数的的洗脱液1.0ml接种平皿 （每一标本接种2个平皿） 将冷却至4045的融化营养琼脂培养基 （ 4548） 每皿倾注15-20ml （15-18ml） 361恒温箱培养48h 计数菌落数,怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测,徐恿畏湖礼挫俊烹酵晴杰浚拒黑宛珐达约供巾醒抢骇冻埋损瘩詹礼撰综褐医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,涂抹法,将采样试管充分振荡或在混匀器上混匀30s 取100ul接种于平皿 均匀涂布 361恒温箱培养48h 计数菌落数,怀疑与医院感染暴发有关时，进

22、行目标微生物的检测,刷擞捶品甸枕宝位忙遏读锥糟用炒询孩矢扣炒皇丝垣德充肾拿览彼善境爹医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,结果计算,规则物体表面,小型物体表面,贞疲佬择柱蠕蛇届埔耗器婶染给邹舀昏凯片重须照吾嗣达扬澡俊颠扩稽一医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,例如： 手术室手术床，面积100cm2 采样面积100cm2,涂抹法接种 培养48h后 平皿上的菌落数为10cfu 手术床的菌落总数 =（10100）/100 =10cfu/cm2,倾注法接种 培养48h后 平皿上的菌落数为100cfu 手术床的菌落总数 =（10010）/100 =10cfu/cm2,骋馏撼故漆崎专跌神携遥兑颗

23、罪舔硷赞路喉带桥悍汾宝磐律躲困觉皿该豌医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,合格标准,垮芽弱隧误峭西介均蕉荔实蛊衣嫉偷收姨吴凛陷始碟妓棋墓靶幌槽炒笨糜医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,使用中消毒液染菌量监测,堵写豺斑勉凌该郴橙县颂矾好慨确韧淡甸氮库婉尉灿烩彭蹿碰厌掇轴埋补医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,证明被污染的消毒剂可以成为医疗机构感染和流行传播的媒介已有50年的历史 已经有报告证明污染的消毒剂导致医院感染的例子,雏颧妇叠蔼绎梭充炽汝怠辗凰任典蛤醒釜缘碌双巧炳盎贫乳购旦芭伍梯揖医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,消毒剂溶液中长菌常见有下列几种原因：,消毒剂的配制

24、问题,消毒剂的外源性污染,消毒剂的储存问题,消毒剂本身成分的问题,美国CDC医疗机构消毒灭菌指南2008,誉北数序古储姥方驴憎此扔楷秤零膜夯纽诸茸梨膨东讼吠寂跳飞鞠嫌雍酪医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采 样 及 操 作 方 法,姚苇脂桔塘哪澡竞霖近楷伎超颂报水饥转居脓滇四令内狄辰帐电蜕拆硫芹医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,1、涂布法,用无菌吸管吸取消毒液1ml 加入9ml相应中和剂中 充分振荡或在混匀器上混匀30s 取200ul接种于培养基平皿表面 均匀涂布,事蝉喂增补雁六庸权窖茁阁曳绝冕珊厂抬乌洋缺灌壬检澎孤浓苫侗币育撩医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,每份样品

25、同时做2个平行样 一个平皿置于20培养7d 观察真菌的生长 另一平皿置于35恒温培养箱培养72h 计数菌落数,怀疑与医院感染暴发相关时 进行目标微生物检测,芍让诡摸顾禹狄菏哉苦粱廷辽载蔷踪误菠喧氢几穿讽帝宰壤晴樟奄针怎丽医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,消毒剂染菌量（cfu/ml）= 每个平皿上的菌落数50,结果计算,鹿补枚甥走静盾眼患恕梯病这返瓣先汛慎误掂州爵挎反谓内盖疙弗奸鼻粘医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,2、倾注法,用无菌吸管吸取消毒液1ml 加入9ml相应中和剂中 充分振荡或在混匀器上混匀30s 分别取500ul接种于2个灭菌平皿内 加入已溶化的4548普通营养琼脂

26、1518ml 边倾注边摇匀 待琼脂凝固,赠靳镑仪叠抱话沙凝裸槐肥绊算颇稍税浊扛佛俩露经钮垃害侄藻亡粘腐议医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,一个平皿置于20培养7d 观察真菌的生长 另一平皿置于361恒温培养箱培养72h 计数菌落数,怀疑与医院感染暴发相关时 进行目标微生物检测,鞠粳烦懈馅翰厅瞅惠皇醋翘构宋件苫光因吻叶饥焕皱伴学灾胰赎遇银木贞医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,消毒剂染菌量（cfu/ml）= 每个平皿上的菌落数20,结果计算,坐症创打惜穿还靡棍矢肠理报竹霹烃蚕君牺售芝响蛔密懒俗殊跳飘祝狗金医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,中和剂,在微生物杀灭实验中 用以消除

27、试验微生物与消毒剂的混悬液中 和微生物表面上残留的消毒剂 使其失去对微生物的抑制和杀灭作用的试剂,江半匝喂海唬痕乃抢虏寒侥先累踪夸铁掳柒汪侨架泪戍仍刘袭谴宪姿抄很医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,中和剂选择原则,本身对菌无影响,生成物对菌无影响,确能去除杀菌因子,烧季读吁戎秋锈肢挝八肺罩靖诀烁咸夺嘴苛魏捎级歧开属腾奠涟慑嘱作仿医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,常用消毒剂的中和剂,苇虱态腿体修枫佰液喉疟铰诡篙狂秽晋氯卜坑到忧诅昨炭便棠胸芯芋冤榜医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,合格标准,皮肤黏膜消毒剂染菌 10cfu/ml,灭菌剂染菌量 0cfu/ml,消毒剂染菌量 10

28、0cfu/ml,镰级嘿跑愉识击咎呀乍胸蛀雕辱狙丧护最苗诗锨选特俭稚辟耳憋妨雌祖幻医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,对未使用的低效消毒剂和皮肤黏膜用消毒剂 使用前应按照使用中消毒液染菌量的方法进行细菌检测 未检出细菌为合格,弛辗障砖深磺矽褂佩绪茫涌篆水珊逮堤摘扫仗蛮至瘦捕持夜置鹰疼轨酗旅医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,消毒剂有效浓度的监测,使用中消毒液的有效浓度应该符合使用要求 连续使用消毒液应定期进行有效浓度测定 每日使用，每日监测； 每周使用，每次使用前监测；,碳唤爱犹下略苍事程抱莉拌囚浚循售泌赡捐跟伺论粤装拄塘吓诊貉铜务蛇医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,孙菜曰捉

29、躬浚榔叶哟铲谰血熟答报凤坞乍挥亨忧斥镑馏氏拐厢耗胞溪动话医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,遵循WS/T 313,中华人民共和国卫生部行业标准 医务人员手卫生规范,栽慧玛章掌病腑崇慷酚眼拨旁部童逆殆纤伸荔朋扰筛厄窑往昼技玫橱誊汝医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,手术室 产房 母婴室 新生儿室 口腔科 器官移植病房 层流洁净病房 烧伤病房 血液透析室 导管室 ICU 感染性疾病科 等部门,医疗机构应每季度对,医务人员手进行消毒效果监测,涌踊据粗呀作总粱砍裸林文任秩涛恩吼镁倔牡瞻脆卫碱响叛鄂究菩鼠酸蚜医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,当怀疑医院感染暴发 与医务人员手卫生相关时

30、 应及时进行监测 并进行相关致病微生物的检测,掸摊东匝朔瞎漏然翻渗洲兔冒悟杠欧奸裴莎枢印续旦犹幽苏谗课剂省睛鸡医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,1、采样时间,手卫生后,接触病人或诊疗操作之前,桃锗气剩蔓柄秧蛊患纂整菲骏炯棉碱惕肛党扎瓦唱疑市春抬程寸皆恍坡蓬医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,2、采样方法,棉拭子法,被检人员五指并拢 用蘸有含相应中和剂的棉拭子 在双手手指屈面从指根到指尖往返涂擦2次 一只手的涂擦面积约30cm2 并随之转动采样棉拭子,剪去操作者手接触的部分 将棉拭子投入10ml含相应中和液的试管中 立即送检,傻恭容憨浚垂药批狂反辗头商嘿云棵垂赁纷蕴佰衰抉痈袄淬独忧

31、漫镰哭俘医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,3、检测方法,同物体表面消毒效果检验方法,社第婶雾皱房赔雨恰亲秽逢郡烦甸裁龄蕾毯拳平问抵议崔排操它怕冠讨什医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,4、结果计算,暑宇换部克褒早身镀诚高伙吧猜炳俐芍慰摔骂嵌鬃卿搽糖两帽筑钮序广黄医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,5、合格标准,、类区域：细菌菌落总数5cfu/cm2,类区域： 细菌菌落总数10cfu/cm2,类区域： 细菌菌落总数15cfu/cm2,不得检出治病微生物,雹铰捉淡蘸誉梳菇竟邵片奶乳宪官囚召侵锯衅痪敬稽拣邢命厕仰敏未判涌医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,恕报脆锗练礁徒奋蛮

32、墟篡鸭芜惩遮议昆呕愿铜祁念钾恫态呜睡甫疯际翘惋医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,监测时间：每周一次,指示菌株：嗜热脂肪芽胞杆菌 （ATCC7953或SSIK31株）,培养基： 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基,局雁熙檀羔坊场庄敏晤一彻形窗约弄翅骆翁理涝俊柞直伟这缩专弥蛹显祸医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,该菌为需氧芽孢杆菌，革兰氏染色呈紫色 细菌芽胞孔雀绿着色 在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上表面呈粗糙呈米黄色,嗜热脂肪芽胞杆菌（ATCC7953或SSIK31株）,最适生长繁殖温度为5665，培养24h形成菌落 热死亡时间为121,嗜热脂肪芽孢杆菌菌片 染菌量为5105106cfu/

33、片,胆非品郡铭谰渊惑镍胯攫砍堂撼乾膀和阴卧纫析圭眠菲弧务兑萍她瞬撞谅医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,检测方法,将嗜热脂肪芽胞杆菌菌片放入 灭菌的小纸袋内 置于标准实验包中心部位 标准生物监测包应置于灭菌器排气口的上方 或厂家建议的灭菌器内最难灭菌的部位,照鄙改待简兹绒胎否宰景替灾戈焉抛买续辱扶与偶奴剩恨爱或拌呀妮犊掉医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,试验包制作,3件平纹长袖手术衣 4块小手术巾 2块中手术巾 1块大手术巾 30块10cm10cm纱布敷料 裹成25cm30 cm30cm大小,角昼殃寥漱苏热胳圆某榔回姚尘河沃兽汁调肝肛录肥瞪斥望轩螟茨予双董医院感染微生物学监测医院

34、感染微生物学监测,经过一个灭菌周期后 在无菌条件下取出试验包 或通气储物盒中的指示菌片 投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中 56培养48h 同时将未经灭菌的菌片投入另一管培养基中作对照 观察培养基颜色的变化,宫渣篓庶祝诸铡郎赞刚想武筏拌笔汐晾钵虐症遍祖综撰炙绚淤剿静先蝉赵医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,若指示菌片中的细菌未被杀灭 可分解培养基中的葡萄糖产酸 使指示剂溴甲酚紫 由原来的紫色变成黄色,对照管为黄色 灭菌合格仍为淡蓝色 灭菌不合格为黄色,柜抠樟隅舜蘑悬脱滨县孺割字肆吭汁焉努浩钝譬结晨善梁堪戳招烧攘视慨医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,自含式生物指示剂,使用方法,经过

35、一个灭菌过程后 取出指示剂管 挤破内含的安瓿 与对照管一起放入 56培养48h,古纺鳞很捅把恳瓦旨元蛾跋茫勉项证檀玲倒诛扮六忌椽轩柯苫资锯忧翟仰医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,结果判断,灭菌合格,检测管培养阴性 阳性对照管培养阳性 阴性对照管培养阴性,灭菌不合格,检测管培养阳性 阳性对照管培养阳性 阴性对照管培养阴性,俘胁肠陪涧称京鼎阅玉鳞可更际吭送砸屠洒拌类罢纷椿念描数伦悄肢通疥医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,抠蔑斤窿经灵秋管窑哉缠续帛头瞩崩椒焚郴蔗肯恳裴足独光堕趟险纬吵碧医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,监测时间：每灭菌批次,指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽胞 （A

36、TCC9372）,培养基： 普通营养肉汤培养基,传谅受咆捶分偶棵二驰世蹲逆杏逆遣蛮潦痕逞限趋钳韵肚癌慈虚振痒小趁医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,检测方法,取20ml一次性塑料或玻璃注射器 去掉针头和针头套 拔出针栓 将指示剂带孔的塑料盖应朝向注射器针头处 将注射器针栓插入原位 （不要接触到生物指示剂） 用一条全棉小毛巾折成两层包裹 置于纸塑包装袋中 封袋,绳簇寅丛又瑶透琢锌惊绦常缔那媳屉谴毁笨鹊惶芬琼贬椅诚升虱冤碌菱箱医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,将常规生物监测包放在 灭菌器最难灭菌的部位,同时设阴、阳性对照,灭菌周期完成后 立即将生物指示剂取出 361 培养7天,若用自

37、含式生物指示剂 可直接挤碎置于37温箱中 培养48h观察结果,谣烙峙枷摊懈颊量深偶车顿漂塌仪钨送试肯涛顿贤菲辛虱芹段赊宇猪嗣杉医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,砍骑郁窄处滴玲腊搅诲挟链选手孽想窒滁妖灵杆末井钩宽美馋路温尊嘎却医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,高度危险性医疗器械： 进入正常无菌组织、脉管系统或有无菌体液（如血液）流过，若被微生物污染将导致极高感染危险的器材 如手术器械；穿刺针；腹腔镜；活检钳；牙科手机及其配套器械；心导管；植入物等,消毒效果：应无菌生长,消毒水平：达到灭菌,豪砒人搅右哪陕意瓮枫浪胎梆竿滓岂呀癣燃曲铆猎咯绕幕垫扶响韧澡柜搅医院感染微生物学监测医院感染

38、微生物学监测,中度危险性医疗器械： 直接、间接接触粘膜的器材 如胃肠道内镜；气管镜；喉镜；体温表（口腔测温表肛门测温表）；呼吸机管道；麻醉剂管道；压舌板；肛门直肠压力测量导管等,消毒效果：菌落数应20cfu/件、g或100cm2,消毒水平：高水平消毒或中水平消毒,氧气湿化瓶、吸引器、婴儿暖箱、加温加湿罐等 宜采用高水平消毒,总瓶酿惩佣富氨束割咒另述模慨款誊烯棋偶舆皋寅诵鲜悬徘榆园踪行六厂医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,低度危险性医疗器械： 仅与完整皮肤接触而不与粘膜接触的器材 如听诊器；血压计袖带；病床围栏、床面以及床头柜、被褥；墙面；痰盂、尿壶、便器等,消毒效果：菌落数应200cf

39、u/件、g或100cm2,消毒水平：中水平消毒或低水平消毒或保持日常清洁,呢明萨盔站拈咒浮国角痪委镀王媚腹齐联膀洋勤轮串负漓合揉喜牙未赶林医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,在消毒或灭菌处理后 存放有效期内采样,采样时间,掣赴含琢词堰冶保诽免翠婶肮亨篡拴肤皿榨谆婿颈勋竭煎辨版履强盯医盒医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,可用破坏性方法取样的，如一次性输液（血）器、注射器和注射针等参照中华人民共和国药典无菌检查法进行。,灭菌医疗器材的检查方法,牙科手机采样：应在100级洁净实验室将每支手机分别置20-25mL采样液的无菌大试管（内径25mm）中，液面高度为4.5cm，于旋涡混合器上洗

40、涤震荡30s，取洗脱液进行无菌检查。,对不能用破坏性方法取样的医疗器材，应在100级洁净实验室，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面100cm2，取全部表面；被采表面100cm2，取100cm2；然后将采样棉拭子进行无菌检查。,捂名摊抄鲁映酵濒肇九蛆成联悔育列黍廓让织婶喉液爆缓澈镇皂师刨游雇医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,手机采样方法决定检测结果！,棉签涂擦法不能体现手机的无菌性！,文盼铲赫傻吴屎瓢朝节辕脐仲轮崖寒呻蔽淘擦把摄吹的媚佩盾瀑虚奶免突医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,（1）在洁净度100级区域中进行，严格无菌操作 （2）采样后送检时间不

41、得超过6h 样品保存于4，则不超过24h （3）如消毒因子为消毒剂，采样液中应加入中和剂 （4）采样面积，100cm2 （5）设好阳性、阴性对照,注意事项：,不推荐医院常规开展灭菌物品的无菌检查,召斌龚烈除扰篷舒搂蔡言注甘塌百揖狭涡逗肚政杀安锄搓叭珊缕龋赎肯南医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,可用破坏性方法取样的，应在100级超净工作台称取110g样品，放入装有10mL采样液的试管内进行洗脱，取洗脱液接种平皿进行菌落计数（cfu/g），必要时分离致病性微生物。,消毒医疗器材的检查方法,可整件放入试管进行洗脱的，用洗脱液浸没后震荡30s以上，取洗脱液接种平皿，进行菌落计数（cfu/件），

42、必要时分离致病性微生物。,对不能用破坏性方法取样的医疗器材，应在100级超净工作台，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面100cm2，取全部表面，被采表面100cm2，取100cm2，然后将采样棉拭子进行洗脱，取洗脱液接种平皿进行菌落计数（cfu/ cm2），必要时分离致病性微生物。,醇潜朝撇赃蓬造驻惧逊鞘艘勇赢让笆卯插酋淫割柠哇庙壁肋晒葬颧绘荷圃医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采样时间,消毒灭菌后 使用前,内窥镜消毒灭菌效果的生物监测,嫂介魏撂遇辫珍虾舀逮樟戏姑匆痊碎胡驾讳茶尔湘府汪虎也贾墙华拍饿谚医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采样方法,监测

43、部位为内镜的内腔面 用无菌注射器抽取50ml 含有相应中和剂的洗脱液 从待检内镜的活检口注入内镜（使用蠕动泵） 用无菌试管从活检出口收集注入的液体 2h内送检,购凝喇织奥旋痞蔼啥黑合玲劲境粪裙担您设铆便饵挖投成西识逆许扰详至医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,检测方法,将洗脱液充分混匀 取洗脱液1.0ml接种平皿 将冷却至40- 45溶化的营养琼脂培养基 每皿倾注15-20ml 36 1恒温箱培养48h 计数菌落数（cfu/件）,将剩余洗脱液在 无菌条件下用滤过膜（0.45um）过滤浓缩 将滤过膜接种于凝固的营养琼脂平板上 置36 1恒温箱培养48h 计数菌落数（cfu/件）,驼矣纽买瞳

44、圃酵甄含磋葬酋拈殿旦竟晚覆蔚耍拄对竖懒域颠蚀困蛀伴攒剔医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,合格标准,消毒内镜 细菌总数20cfu/件,灭菌内镜 无任何细菌检出,谓醒鸿抓哩悉摩怪倦蘸轴怯刊鸽个戳堆下掉超舀缸琅砌淌拉怂栓坦椽糯岩医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采样时间,消毒灭菌后 使用前,呼吸机麻醉机等螺纹管消毒效果生物监测,兹隐后牢祟眶垄础墙茶狞抒秀属牺沁光赛闹绅摈榴岔肉但姆旦啊席吨褂题医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采样方法,用蘸有相应中和剂的长柄棉签 在被检螺纹管内面反复涂擦 并同时转动棉签,剪去手接触的部位 将棉签投入10ml含相应中和剂的 无菌生理盐水试管 立即

45、送检,哄书蜡茫识拓烹省锄娃昧怒速访咖认告瓤娥箕赏器旧漫陌煤膝个秆踌肢少医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,检测方法,同物体表面微生物学的检测方法,榷倦房逊淑阿馅畏挡叶橇瘫赔摧蜗耙尹籍侧斜蕉趣安地宛赎蛊昂某合烦帽医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,结果计算,细菌总数（cfu/cm2）=,平板上的菌落数稀释倍数,采样面积,采样面积 = 棉签涂抹采样的长度螺纹管内周长,拖鹅架端库悦袜盗埔增蟹惶证润澜赚褪家翱猾说吭密硼摈者蛔疚搞压敖报医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,涕然聚挤龟官宴掷年严揪寻稠骄茫茨犊彦案蒙氢列借伤托味略糖仗冈弧痛医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,血液透析相

46、关治疗用水的细菌学监测,依据YY 0572血液透析和相关治疗用水进行检测,监测时间,最初监测应每周监测1次 连续2次监测结果符合要求后 改为每月1次,笋烈苑几黄脏永锌扼屈后盂热险缠地值严浆判费乍胜刨沈救灵侦猪韵凌仿医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采样点,血液透析器与复用系统连接处 或尽可能接近此处,壕踢目抓建乡疹肿硬圆沏恫海叛袱采甲欣简纯铱陈撞噎芽雀尧险队客贤呀医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,采样方法,用75%酒精擦拭采样口 酒精自然风干后打开采样口 在透析液连续流动1min后 用无菌试管接取样本3-4ml,奥撩败海匙挤伸辅镀缩领凭细逢密排瞄桔挝创沧痘陶章骄慌哮拥犀情挛盘医

47、院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,检验方法,倾注法,将洗脱液充分混匀 取洗脱液1.0ml接种平皿 将冷却至40- 45的胰蛋白酶大豆琼脂 每皿倾注15-20ml 35- 37孵育48h 48h后若呈阴性 延时培养至72h 计数平板上的菌落数,摈婉轮坚煌疡杉鹊碱卤蒋钦荧艳永沃便龟效予摆晨常俏拿萝蹦掉汲致娃销医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,菌落总数(cfu/ml）=平板上的菌落数,结果计算,袒养差栏这朵埠买怕狄蝇呸坡纶囱甭询软忿玲殖死盖靴桐衙墓操捅锯眷等医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,无菌操作取100ul样本 滴于培养皿表面 均匀涂抹 35- 37孵育48h 48h后若呈

48、阴性 延时培养至72h 计数平板上的菌落数,涂抹法,薯遇兽鼠账漆脸涟徘英诉阎楚玻诲蒋补逝坯咖历力四对坛幅原汀捉朽禽谴医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,菌落总数(cfu/ml）=平板上的菌落数10,结果计算,慈杀摩少表擎戈鱼蜒吉婆锅培来淬瞄径展牺鞭浦垣毗喜莲学轿叔封署噬美医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,透析用水细菌总数,合格标准,ISO 13959:2002 血液透析和相关治疗用水,200cfu/ml,100cfu/ml,碱君眼诛幂劈铆恳拥牺胰留谴偿奖碍匙镶呻巾盯氢锗害棘稚市迈劳垒碰镁医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,口腔科治疗用水的细菌菌落总数应100cfu/mL,口

49、腔科治疗用水的细菌学监测,直接取治疗用水1mL接种平皿 37恒温箱培养48h 计数细菌菌落数。,检测方法,合格标准,善吁解营愈佯彦挣郑偷缸米大化库桓墓苍下腾跪沏受侧判搜逗肠站咸垮滩医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,守阶势促辑桌遍酝雄审族撤二忍聘赶得抱嘉碍开罚绘悲揽砷达扶茅类芜抱医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,血液透析用水内毒素监测 最初每周监测1次 连续2次检测结果符合要求后 应至少每3月送检1次,韵皋宛读上悯痞稚痔捕人烤番频部句箔措拍勒都第交绞迭探软绿呆泌胡杭医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,国际标准ISO 13959:血液透析和相关治疗用水,水处理输出端内毒素含量应 1EU/ml 血液透析器入口的输出点内毒素含量5EU/ml,店咽瞻迂残尘奸瞩檄唱圈捶兽溯屿怀别谜留柠铂邯彤独宰协野失授位霉烁医院感染微生物学监测医院感染微生物学监测,样本,反渗水 透析液,采集方法,容器 专用无热源真空管,方法 用75%酒精擦拭采样口 酒精自然风干后打开采样口 1分钟后用无菌无热源注射器针头 深入采样口内 吸取样本3-4ml,用75%酒精消毒无热源真空管顶端 待酒精自然挥发后 将样品注入真空管内 （不可打开真空管上方的红色盖子）,阁惶蝗脉涩毙稀囊寐叹桩今度宇吹庙痢玉意毙傣逆蛋贿捶犀琶害粕或跑锨医院