DNA的粗提取和鉴定ppt课件.ppt

1、专题5 DNA和蛋白质技术、陇县第二高级中学郑斗妍、印鉴生物选择1、课题1 DNA的粗提取和鉴定、1、基础知识、DNA提取的基本思路：利用DNA和蛋白质等物理化学性质的差异提取DNA，去除其他成分。2，DNA溶解度取决于NaCl的浓度。2)DNA与其他细胞成分和酒精溶解不同，DNA不溶于酒精，细胞中的某些蛋白质溶于酒精。3)DNA和蛋白质对酶的耐受性不同。酶的特异性蛋白酶水解蛋白质。但对DNA没有影响。4)DNA和蛋白质对高温的耐受性不同：蛋白质、DNA热稳定性不同。大部分蛋白质经不起6080高温，DNA会变性80以上。5)DNA和蛋白质对洗涤剂的耐受性不同。洗涤剂可以瓦解细胞膜，但不影响DN

2、A。DNA的粗提取实验原理，第3，案例1:以鸡血为实验材料的DNA的粗提取，第1，实验原理，实验案例，1)在浓度不同的NaCl中DNA溶解度不同。2)DNA与其他细胞成分和酒精溶解不同，DNA不溶于酒精，细胞中的某些蛋白质溶于酒精。4，2。提醒我们，实验材料动物、人类和哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核，没有DNA，不适合用DNA提取的材料，但它是提取血红蛋白的理想材料。鸡血细胞液的优点：鸡血细胞，白细胞都有细胞核，含有大量DNA，既经济又容易获取。植物：洋葱、新鲜花椰菜、大蒜、菠菜等。5，6，3，方法和过程，1)，离心或定植后上清液，血浆，血细胞，细胞核物质提取：核DNA溶解：析出DNA:DNA

3、粘合剂再溶解：更纯粹的DNA提取：DNA，用多层纱布滤出，含DNA的稠物留在纱布里。过滤到纱布二楼。滤液中含有DNA。结果滤液体积分数为95%，冷却酒精50毫升，在一个方向轻轻搅拌，溶液中出现乳白色丝，用波峰卷丝。利用细胞吸水破裂，细胞核内物质释放，纱布滤出滤液。在过滤器中加入2mol/L的NaCl溶液搅拌，将DNA从染色质中分离出来，充分溶解DNA，过滤(去除杂质)，在烧杯中用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA。DNA和二苯胺试剂反应使溶液呈蓝色。7，感情，全部添加：4 mL二苯胺试剂2mol/LNaCl溶液5 mL，收购，其他方法可以确认DNA吗？取一些丝绸放在幻灯片中央，再加一滴甲基绿

4、溶液，丝绸就会变成绿色。注：用于鉴定的试剂为二苯胺或甲基绿。必须用二苯胺加热。用甲基绿加热，不要水浴。8，注意事项是在准备鸡血口服液的时候，提取鸡血的同时，要加入柠檬酸钠。鼎立后，上层是血清，下层是必需的血细胞。在整个实验中添加“两次蒸馏水、三次NaCl溶液、一次酒精”的目的不同，添加两次蒸馏水的目的也不同。一种是细胞破裂，另一种是稀释溶液。酒精最好使用95%的冷酒精。加入蒸馏水或添加酒精时，动作要轻，朝一个方向。保证DNA分子的完整性。使用时注意不要让玻璃棒接触烧杯的底部。鉴定DNA的时候要用沸水浴加热。二苯胺试剂目前必须工作。否则，可能会影响识别效果。二苯胺是一种毒性试剂，使用时注意不要让

5、液体接触皮肤或身体的其他部分。盛鸡血细胞的容器是塑料容器(鸡血细胞破裂后释放的DNA，容易吸附到玻璃容器中，导致提取过程中DNA丢失)，9，摘要1下图中反映了DNA溶解度和NaCI溶液浓度之间的关系()，2 DNA的粗提取和鉴定实验中，在提取鸡血球的核物质和分析含有DNA的占卜物的过程中使用蒸馏水。其作用是()A电子用于溶解血细胞，DNA B电子用于溶解血细胞。后者为了分离核和细胞质，稀释NaCl溶液C电子，提取DNA D电子，将DNA与核分离，析出DNA，C，B，11，3，下图是与“DNA粗提取和鉴定”实验相关的操作。这些工作的目的是清洗()，a .血细胞，去除血细胞表面的杂质。就是溶解DNA，去除不能溶