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文档简介

1、 生物选修3易考知识点背诵 7专题1 基因工程基因工程的概念:基因工程是在DNA分子水平上操作的,又叫DNA重组技术。(一)基因工程的基本工具1.“分子手术刀”限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。2.“分子缝合针”DNA连接酶 (缝合磷酸二酯键)(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DN

2、A连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”运载体(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。(3)其它载体:噬菌体、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取1.基因文库获取;2、人工合成(逆转录法);3、PCR技术扩增目的基因(1)原理:DNA双链复制(2)过程:(变性)第一步:加热至9095DNA解链;(复性)第二步:冷却到5560,引物结合到互补DNA链;(延伸)第三步:加热至7075,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步:基因表达载体的构建1.组成:目的基因

3、启动子终止子标记基因第三步:将目的基因导入受体细胞_1.转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2.常用的转化方法:将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是农杆菌转化法,其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,最常用的原核细胞是大肠杆菌,其转化方法是:先用 Ca2+ 处理细胞,使其成为感受态细胞,再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完

4、成转化过程。(感受态细胞法)3.重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步:目的基因的检测和表达1.首先检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是DNA分子杂交技术2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是分子杂交技术3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是抗原抗体杂交。4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。(四)蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。(

5、基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质,蛋白质工程可以生产自然界不存在的蛋白质)转录 翻译专题2 细胞工程(一)植物细胞工程 1.理论基础(原理):细胞全能性全能性表达的难易程度:受精卵生殖细胞干细胞体细胞;植物细胞动物细胞2.植物组织培养技术(1)过程:离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 试管苗 植物体(2)用途:微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种(3)地位:是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。3.植物体细胞杂交技术(1)过程:(2)诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等。(重要)化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。(3)意义:克服了远缘杂

6、交不亲和的障碍。(二)动物细胞工程 1. 动物细胞培养(1)动物细胞培养的流程:取动物组织(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)剪碎用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养瓶中进行原代培养贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。(2)动物细胞培养需要满足以下条件:无菌、无毒的环境: 营养:通常需加入血清、血浆等天然成分(常考)。适宜温度和PH:气体环境: O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。(5)动物细胞培养技术的应用:单克隆抗体的制备2.动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移

7、植。胚胎核移植较易成功。(2)选用去核卵(母)细胞的原因:卵(母)细胞比较大,容易操作;卵(母)细胞细胞质多,营养丰富,可为细胞核表达全能性提供条件。(3)体细胞核移植的大致过程是: 核移植 胚胎移植(4)动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法植物体细胞杂交细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、振动,聚乙二醇(PEG)克服了远缘杂交不亲和性,获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后诱导细胞融合离心、振动,聚乙二醇、灭活的病毒制备单克隆抗体的技术之一注入小鼠细胞融合分离抗原注入小鼠体内效应B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养选择

8、培养细胞培养基体内培养体外培养从腹水提取从培养液提取单克隆抗体4.单克隆抗体(2)制备过程:(3)杂交瘤细胞的特点:既能大量繁殖,又能产生专一的抗体。(4)单克隆抗体优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。(5)单克隆抗体作用:治疗疾病和运载药物:主要用于治疗癌症治疗,可制成“生物导弹”专题3 胚胎工程(一)动物胚胎发育的基本过程1. 胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术,如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎,还需移植到雌性动物体内生产后代,以满足人类的各种需求。2. 动物胚胎发育的基本过程(1)受精场所是母体的输卵管。(2)卵裂

9、期:特点:细胞有丝分裂,细胞数量不断增加,但胚胎的总体体积并不增加,或略有减小。 (3)桑椹胚:特点:是全能细胞。(4)囊 胚:特点:细胞开始出现分化(该时期细胞的全能性仍比较高)。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团,将来发育成胎儿的各种组织。(5)原肠胚:特点:具有囊胚腔和原肠腔。(二)胚胎干细胞1. 哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞,来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。2. 具有胚胎细胞的特性,在形态上表现为体积小,细胞核大,核仁明显;在功能上,具有发育的全能性,可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外,在体外培养的条件下,可以增殖而不发生分化,可进行冷冻保存,也可进行遗传

10、改造。(三)胚胎工程的应用1. 体外受精和胚胎的早期培养(1)卵母细胞的采集和培养:主要方法:用促性腺激素处理,使其排出更多的卵子(超数排卵) (2)精子的采集和获能:在体外受精前,要对精子进行获能处理。(3)受精:获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。(4)胚胎的早期培养:培养液成分较复杂,除一些无机盐和有机盐外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及血清、血浆等物质。(5)胚胎移植,胚胎一般要培育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行胚胎移植)3. 胚胎分割(1)概念:是指采用机械方法将早期胚胎(桑椹胚或囊胚)切割2等份、4等份等,经移植获得同卵双胎或多胎

11、的技术。(2)意义:来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质,属于无性繁殖。(3)材料:发育良好,形态正常的桑椹胚或囊胚。(4)操作过程:对囊胚阶段的胚胎分割时,要将内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。中国政府对克隆人的态度:四不原则:不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。但不反对治疗性克隆。(2)试管婴儿是有性生殖,用于解决不孕不育;设计试管婴儿是用于治疗遗传疾病;设计试管婴儿与试管婴儿根本的区别是:设计试管婴儿在胚胎移植前需要进行遗传学诊断(或基因检测)专题五、生态工程的五大原理 (生态学原理包括生态工程基本原理)1、物质循环再生原理2、物质多样性原理 3

12、、整体性原理4、协调与平衡原理 5、系统学和工程学原理选修一、课题1 果酒和果醋的制作酶一、实验原理1酵母菌的细胞呼吸(异养兼性厌氧型)酶有氧呼吸大量繁殖,表达式为:C6H12O6+6O26CO2+6H2O+能量无氧呼吸产生酒精和二氧化碳,表达式为:C6H12O6 2C2H5OH+2CO2+能量2酵母菌发酵最佳温度:1825,最适宜203醋酸菌好氧细菌,醋酸菌生长温度:3035课题2 腐乳的制作一、 实验原理1参与豆腐发酵的微生物有毛霉、青霉、酵母、曲霉(全是真菌)2.蛋白酶将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸。3、用来做腐乳的豆腐要求含水量是70%4、卤汤酒精含量

13、控制在12左右为宜。 课题3 制作泡菜并检验亚硝酸盐含量1制作泡菜所用微生物是乳酸菌,其代谢类型是异养厌氧型。2. 亚硝酸盐在食品生产中常用作食品添加剂。亚硝酸盐被吸收后随尿液排出体外,但在适宜pH 、温度和一定微生物作用下形成致癌物质亚硝胺。二、实验设计1. 泡菜的制作:泡菜盐水按清水和盐为41质量比配制煮沸冷却备用。2测定亚硝酸盐含量的原理(比色法)在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红,与已知浓度的标准显色液目测比较,估算泡菜中亚硝酸盐含量。专题二 微生物的培养与应用一、培养基:按功能或用途分:选择培养基和鉴别培养基。2五大营养

14、构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,生长因子 二、无菌技术:1消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。常用的方法有煮沸消毒法、酒精消毒法。2灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。常用的方法有:灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸气灭菌。课题3 探讨加酶洗衣粉的洗剂效果一、实验原理1目前常用的酶制剂有四类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶课题4 酵母细胞的固定化2固定化酶和固定化细胞:方法包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。固定化酶优点:使酶既能与反应物接触,又能与产物分离,还可以被反复利用。固定化细

15、胞优点:成本更低,操作更容易,可以催化一系列的化学反应,可反复利用课题5 DNA的粗提取与鉴定一、实验原理DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,DNA在2mol/LNaCl溶液的溶解度最大,在0.14mol/LNaCl溶液的溶解度最小。(在2mol/LNaCl最大量溶解DNA,在0.14mol/LNaCl下析出DNA)DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步的分离。2DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080oC的高温,而DNA在80oC以上才会变性。洗

16、涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。3DNA的鉴定 在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。二、实验设计1 实验材料的选取 动植物细胞都可以,但不能用哺乳动物成熟红细胞(因为没有细胞核和细胞器)2 破碎细胞,获取含DNA的滤液 动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞,例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。3 去除滤液中的杂质 常用方法:用不同浓度NaCl溶液溶解与析出;直接方法:加蛋白酶DN

17、A的析出与鉴定 将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液,静置23min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物。取两支20ml的试管,各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶液是否变蓝。课题6 血红蛋白的提取和分离1凝胶色谱法:(1)原理:根据蛋白质相对分子质量的大小分离蛋白质。相对分子量大的蛋白质先分离出来,相对分子量小的蛋白质后分离

18、出来。2缓冲溶液:作用:维持pH稳定。3电泳法:原理:不同蛋白质的带电性质、分子大小、形状和迁移速率不同。二、实验步骤1样品处理2粗分离 透析法:去除样品中分子质量较小的杂质。3纯化:凝胶色谱法4.纯度鉴定-SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳5G-75:“G”代表凝胶的交联程度,75表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水7.5g。PCR技术:用于扩增DNA片段,需要的条件有四个:两种引物、模板、四种脱氧核糖核苷酸、taq酶(常考),不需要能量。延伸方向:由子链的5向3延伸。纤维素分解菌的分离和鉴别:用纤维素作为唯一的碳源分离纤维素分解菌,这是选择培养基,向该培养基加入刚果红,根据是否出现透明圈就可以鉴别出

19、是否含有纤维素分解菌,这是鉴别培养基。尿素分解菌的分离和鉴别:用尿素作为唯一的氮源分离尿素分解菌,这是选择培养基,向该培养基加入酚红指示剂,可以鉴别出是否含有尿素分解菌,这是鉴别培养基。接种、分离、纯化细菌的方法常用的是:平板划线法或稀释涂布平板法统计细菌常用的方法:稀释涂布平板法,显微镜直接计数法纤维素酶和果胶酶都是复合酶,其中含有很多种酶,但不要求具体记住有是哪些酶。第部分经典实验一、主要的经典实验归纳1分泌蛋白的合成与分泌过程(必修1 P48)研究方法:同位素标记法实验结论:分泌蛋白合成与分泌的过程依次是核糖体_分泌小泡细胞膜外。2细胞膜的探索历程(必修1 P65-68)时间科学家实验过

20、程和结果实验结论19世纪末欧文顿20世纪初将膜从哺乳动物红细胞中分离出来进行化学分析主要成分是脂质和蛋白质1925荷兰E.GorterF.Grendel1959罗伯特森用电子显微镜看到“暗亮暗”的三层19701972桑格、尼克森3酶的发现:(必修1 P81-82)1773年意大利科学家斯帕兰札尼设计了一个巧妙的实验说明胃具有化学性消化的作用;1836年德国科学家施旺从胃液中提取出了消化蛋白质的物质(即胃蛋白酶);1926年美国科学家萨姆纳从刀豆种子中提取出脲酶的结晶并证实脲酶是一种蛋白质;20世纪80年代美国科学家切赫和奥特曼发现少数RNA也具有生物催化作用。4光合作用的发现(必修1 P97-

21、106)时间科学家实验过程和结果实验结论17711779普里斯特利英格豪斯植物可以更新空气1864萨克斯1880恩格尔曼1939鲁宾和卡门20世纪40年代卡尔文5DNA是遗传物质的探索历程(必修2 P42-46)时间科学家实验过程和结果实验结论1928格里菲斯1944艾弗里1952赫尔希、蔡斯RNA是烟草花叶病毒的遗传物质6DNA复制方式的探索(选学)必修2 P52-53(半保留复制)7遗传的基本规律的发现(必修2 P2-11)研究方法:杂交实验(杂交、自交、测交)孟德尔成功的原因:正确地选用_作为试验材料;用_方法对实验结果进行了验证;采用了由_因素到多因素的研究方法; 科学地设计了试验程序

22、。8基因位于染色体上(必修2 P27 萨顿假说)9生长素的发现(必修3 P46)1880年达尔文向光性实验推想:胚芽鞘的尖端接受单测光刺激后,向伸长区传递某种“影响”,造成伸长区背光侧生长更快,因而胚芽鞘出现向光性弯曲;1910年詹森证明:胚芽鞘尖端产生的影响可以透过_传递给下部。1914年拜尔证明:胚芽鞘的弯曲生长是因为尖端产生的影响在其下部_造成的。1928年荷兰科学家温特的实验得出:胚芽鞘的尖端确实产生了某种物质,这种物质从尖端运输到下部促进胚芽鞘下面某些部分的生长;1934年荷兰科学家郭葛等人从一些植物中分离出了这种物质,经鉴定为_。10. 促胰液素的发现(必修3 P23)沃泰默的实验

23、:过程:稀盐酸注入狗的上段小肠肠腔,结果_稀盐酸注入狗的血液中,结果_稀盐酸注入狗的上段小肠肠腔,但切除了_,只留下血管,结果_解释:这是由于小肠上微小的神经难以剔除干净的缘故,所以是一个十分顽固的神经反射斯他林和贝利斯的实验过程:小肠黏膜+稀盐酸+砂子磨碎,制成_,注射到_实验结果:_实验结论:_二、教材实验的方法汇总(1)实验结果的表示方法:光合/呼吸 细胞液浓度大小 细胞是否死亡 酶活性/酶催化速率 甲状腺激素作用 胰岛素作用 胰高血糖素作用 (2)实验条件的控制方法1)除去容器中CO2或维持容器中CO 2)除去叶中原有淀粉 3)除去叶中叶绿素 4)除去光合作用对呼吸作用的干扰 5)分离

24、细胞器 6)动物细胞破裂 7)植物细胞破裂 8)杀灭细菌 9)控制容器的温度水浴加热或恒温箱保温。10)避免种子上的微生物影响实验前用 等对萌发的种子进行消毒。(3)同位素标记法的应用用放射性同位素 分别标记噬菌体的DNA和蛋白质。用同位素标记 研究DNA的复制过程,可说明DNA复制方式是 。用3H标记 ,可以研究细胞内合成分泌蛋白所经途径。用放射性元素分别标记 研究光合作用释放的氧气来H2O。用放射性元素研究光合作用中碳的同化途径,结果为 。三、生物学一般研究方法 假说演绎法 类比推理法 模型建构法 同位素标记法 第部分教材基础实验一、物质提取鉴定类实验(4个)生物组织中还原糖、蛋白质和脂肪

25、的鉴定;叶绿体色素的提取与分离; DNA的粗提取与鉴定;蛋白质的提取和分离1、物质鉴定实验主要内容归纳物质还原性糖淀粉脂肪蛋白质DNA试剂特殊实验要求新制斐林试剂(两种成分先混合)、50-60水浴加热 若材料有颜色(如绿色叶片)需先脱色显微观察;用酒精洗去浮色先滴加试剂A(0.1g/mLNaOH)摇匀后,再加试剂B(0.01g/mLCuSO4)沸水中加热5min,冷却观察特征现象_色沉淀呈_色_ _色溶液呈_色溶液呈_色拓展:运用免疫学原理可以鉴定细胞中特定的蛋白质(原理:抗体能与抗原发生特异性结合);运用基因探针可鉴定某种特定基因(原理:DNA分子杂交)。2、物质提取或分离实验方法归纳提取叶

26、绿体色素用无水乙醇溶解色素;层析法:利用色素在层析液中溶解度不同分开;静置、过滤与离心:用此方法可将叶片残渣与叶绿体色素、细胞的DNA、蛋白质与细胞碎片分离。3、注意问题显色反应的材料最好不带色或颜色浅;可溶性还原性糖鉴定中不宜以甘蔗为材料,因为蔗糖不具还原性;进行DNA提取和鉴定实验时不能选用哺乳动物红细胞作为材料;叶绿素提取实验中选择新鲜绿叶(叶绿素含量丰富)等。实验结论常根据特定的颜色反应来确定。二、显微观察类(7个)观察DNA和RNA在细胞中的分布;用显微镜观察多种多样的细胞;观察线粒体和叶绿体;观察植物细胞的质壁分离与复原;观察细胞的有丝分裂;观察细胞的减数分裂;低温诱导染色体数目加

27、倍的观察。 1、主要内容归纳:观察方式实验名称观察对象生物材料染色剂观察到的现象原色观察观察叶绿体叶绿体质壁分离与复原细胞染色观察脂肪的鉴定脂肪观察DNA和RNA的分布DNA、RNA观察线粒体线粒体观察有丝分裂细胞特征观察减数分裂细胞特征低温诱导染色体加倍染色体2、注意问题实验取材:根据观察对象采用合适的材料,如观察有丝分裂应选洋葱根尖或马蛔虫受精卵(分裂旺盛);观察质壁分离与复原应选择紫色洋葱表皮(成熟的植物细胞,液泡大、呈紫色);观察叶绿体一般选藓类小叶(叶片薄、叶绿体大)或新鲜的稍带叶肉的菠菜叶下表皮(靠近下表皮的叶肉细胞中含少而较大的叶绿体)。显微镜的使用方法:显微镜的使用方法,重点是

28、高倍镜的使用方法。先在低倍镜下观察(使用较大光圈,用左眼观察)找到目标;将目标移至视野中央(如何移?);换高倍镜(如何换?);调节视野亮度(如何调?)和细准焦螺旋,直到物像清晰。视野范围细胞数目视野明暗度细胞结构物镜与玻片距离高倍镜比低倍镜龙胆紫、碘液、醋酸洋红等染料染色时细胞已死亡,_是专一性活体染色剂(死细胞不能着色)。三、实验探究类(5个)探究影响酶活性的因素;探究酵母菌的呼吸方式;探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用探究培养液中酵母菌数量的动态变化;探究水族箱(或鱼缸)中群落的演替。四、模拟制作与实习调查类 模拟实验通过模拟实验探究膜的透性;模拟探究细胞表面积与体积的关系。实习调查调查常见的人类遗传病;用样方法调查草地中某种双子叶植物的种群密度;土壤中动物类群丰富度的研究。模拟实验往往因为结构过于细微无法或较难用生物材料直接进行观察研究;实习调查类实验往往需要选用恰当的调查方法和测量技术,并对调

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