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第一讲 基因工程、克隆技术,专题九 现代生物科技,题组1 基因工程,1(2010全国,5)下列叙述符合基因工程概念的是 ( ) AB淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗 体基因 B将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干 扰素的菌株 C用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,通过筛选获得青霉素 高产菌株 D自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌 DNA上,B,解析:基因工程是在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼 接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无 性繁殖,使目的基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产 物。所以B为基因工程,而A为动物细胞工程,C为诱变育种,D无人为因素不属于基因工程。,2(2010浙江理综,2)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过 程中,下列操作错误的是 ( ) A用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C将重组DNA分子导入烟草原生质体 D用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞,A,解析:限制性核酸内切酶用于提取目的基因和切割载体,烟草花叶病毒 的遗传物质是RNA,不能用限制性核酸内切酶切割,A项错误;DNA连 接酶可以连接具有相同黏性末端的目的基因和载体,B项正确;受体细胞 可以是受精卵和体细胞,也可以是去除细胞壁的原生质体,C项正确; 目的基因为抗除草剂基因,所以未成功导入目的基因的细胞不具有抗除 草剂的能力,筛选时应该用含除草剂的培养基筛选转基因细胞,D项正 确。,题组2 克隆技术,6(2010广东理综,24)新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。 下列技术(或仪器)与应用匹配正确的是(双选) ( ) APCR技术扩增蛋白质 B杂交瘤技术制备单克隆抗体 C光学显微镜观察叶绿体的基粒 D花粉离体培养培育单倍体植物,BD,7(2010浙江理综,4)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是 ( ) A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 B克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变 C二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的 D恶性细胞系的细胞可进行传代培养 解析:由于接触抑制,动物细胞培养时只能形成单层细胞,A项错 误;克隆培养法在培养时,由于所有子代细胞来自于一个亲代细 胞,所以基因型一般都相同,B项错误;二倍体细胞的传代培养次数 通常是有限的,只有少数细胞遗传物质发生改变,才能无限增殖,C 项错误;恶性细胞系的细胞具有癌变的特点,可进行传代培养,D项 正确。 答案:D,考点1 基因工程相关知识考查,1基因工程的基本工具的比较,2.将目的基因导入受体细胞中的方法的比较,3.PCR技术与DNA复制的比较,4.目的基因的检测内容和方法的比较,5.两种基因治疗途径及其特点,6.基因工程的应用,1对DNA连接酶、DNA聚合酶等的理解,2.基因工程与蛋白质工程的比较,【例1】 (沈阳质检)转基因植物油是由转基因植物通过压榨或浸出法加 工制得的,因其出油率高而被广泛采用。我国是植物油消费大国, 每年都从国外进口大量的转基因植物油。 (1)在培育转基因油料植物的过程中,基因操作需要的工具酶是 _。在基因表达载体中,目的基因 的首端必须含有_,它是_识别和结合位点。 (2)请写出一种将目的基因导入油料植物细胞可以采用的方法: _。若受体细胞为植物体细 胞,可采用_技术获得转基因植物体,该技术所依据 的原理是_。,限制性核酸内切酶和DNA连接酶,启动子,RNA聚合酶,农杆菌转化(或基因枪、花粉管通道)法,植物组织培养,植物细胞的全能性,(3)若要检测(2)中获得的植物细胞染色体上是否含有目的基因,可采用_技术。而想要得知上述植物是否真的出油率高,应如何做?_。 (4)若利用蛋白质工程继续提高油料植物的出油率,其设计流程应从预期的_出发,设计预期的_结构,推测出应有的_序列,然后找到相对应的_序列,再用转基因技术改变其现有性状。,DNA分子杂交,将该植物制出的植物油与同等质量的非转基因植物制出的植物油称重比较,蛋白质功能,蛋白质,氨基酸,脱氧核苷酸,考点2 克隆技术相关知识整合,1细胞工程的几个过程流程图比较,2.植物组织培养与动物细胞培养的比较,3.植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较,受精作用、原生质体融合、动物细胞融合,【例2】 野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗 寒能力,但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究, 用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交,培育出了生活能力强 的杂交系马铃薯。据图分析回答问题:,(1)过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解,其中“酶解”所用的酶应 该包括_。 (2)过程可用聚乙二醇(PEG),其目的是_。 (3)请用文字和箭头表示出技术过程的实验流程:_。 由此过程可以看出植物细胞有形成完整个体的可能性,这是 _的表现。 (4)在培养基上培养一段时间后,原生质体会再生出细胞壁。可以取样, 通过_实验来鉴别细胞壁是否已经再生。 (5)请说明运用植物体细胞杂交法的最大好处:_。,纤维素酶、果胶酶,诱导原生质体融合,融合细胞 愈伤组织 幼苗,植物细胞具有全能性,植物细胞的质壁分离与复原,可以克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍,【例3】 (潍坊质检)人CD20单克隆抗体是治疗一些恶性肿瘤的特效药 物,目前主要是通过培养哺乳动物细胞的方式生产。我国科学家已经 培育出世界上第一头转入了CD20抗体基因的转基因牛,可以从它产 的牛奶中直接提取CD20抗体。这项技术成熟后,有望使这一特效药 的生产成本降至现在的1/10。请回答: (1)单克隆抗体的制备过程需先将_和 _融合,这一过程的诱导方法与植物体细胞杂交不同的 是_。 (2)动物细胞培养需要在含_混合气体的培养箱中进

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