【毕业学位论文】（Word原稿）北京鸭蛋氨酸需要量、生物学效价及毒性的研究动物营养与饲料科学博士论文

密级： 论文编号： 中国农业科学院 学位论文 北京鸭蛋氨酸需要量、生物学效价 及毒性的研究 I 摘 要 本论文通过三个试验在研究确定生长后期北京鸭蛋氨酸需要量的基础上从非毒性添加水平和毒性添加水平两角度研究了北京鸭蛋氨酸羟基类似物相对于蛋氨酸的生物学效价。同时，从氧化损伤 、采食量调控及 基化的角度探讨了蛋氨酸及其羟基类似物毒性的中毒机理，最终为肉鸭养殖生产中安全高效利用蛋氨酸源提供试验依据。 试验一研究了蛋氨酸对生长后期北京鸭生产性能和胴体品质的影响。结果表明，饲料中添加适量蛋氨酸可显著提高生长后期北京鸭日增重和胸肉率，显著降低腹脂率（ 采用非线性模型斜率比法，以等摩尔添加水平为基础，以日增重为评价指标， 7 21 日龄和 7 42 日龄 对于 8%和 67%；以料肉比为评价指标， 7 21 日龄和 7 42 日龄 对于 6%和 44%。 试验三比较研究了过量 北京鸭毒性及其中毒机理。结果表明，过量 可显著降低北京鸭日增重、采食量和胸肉率，且 鸭生长抑制程度低于等摩尔水平 蛋氨酸源摄入量为评价指标， 3 6 周龄北京鸭对蛋氨酸的最大耐受量为： 天只 （ 千克体重 天） ，而北京鸭对 等摩尔水平 有更高的耐受量。同时，采用线性模型斜率比法，以采食量为评价指标，在毒性 添加水平 下，对于 生物学效价为 50%。在采食量激素调控方面，饲料中添加过量 6 周龄鸭血浆瘦素、胰岛素水平均未产生显著影响 (P而在饲料中添加2%显著提高 6 周龄鸭血浆神经肽 Y 水平（ to on LM 8% 7%, as 6% 4%, as to LM In LM % in 而对 3 7周龄北京鸭平均日增重产生显著影响（ 随日粮蛋氨酸水平升高，胸肉率表现出 先升高后降低的显著二次曲线相关（图 2。同时，与对照组 (相比， 氨酸显著降低了北京鸭腹脂率 (而对天冬氨酸氨基转移酶影响显著 (。这与 （ 1986）和罗清尧和高振川（ 2000）在北京鸭方面的研究结果相一致。 另一方面，在医学临床诊断中，血浆总蛋白、白蛋白是反映肝脏蛋白质合成的指标。长期肝损 伤 可导致血浆总蛋白、白蛋白降低（宋国培， 2003）。而血浆丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸转移酶和乳酸脱氢酶是反映肝功能的敏感指标，其 活性 与 肝脏受损程度成正相关（ 麻晓林等，2003）。这三种酶主要存在于肝、肾、心肌等组织器官的细胞中。当肝脏存在损害时，细胞膜受损，细 胞内丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸转移酶和乳酸脱氢酶将释放到血液中，进而导致血浆或血清中这三种酶活性的升高。为此，考虑到本试验中北京鸭日增重随蛋氨酸水平表现出先升高后降低的变化规律（图 2,本试验通过测定血浆总蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸转移酶和乳酸脱氢酶反映鸭的健康状况。本试验结果表明，随蛋氨酸水平升高， 7 周龄北京鸭血浆丙氨酸转移酶活性表现出升高的趋势，而天冬氨酸氨基转移酶活性在 平时显著提高（ 同时，饲料中添加 提高北京鸭采食量的趋势，但无明显规律。其中，相对于对照组， 显著提高 7 21 日龄北京鸭采食量， 显著提高 7 42 日龄北京鸭采食量（ 而在 效蛋氨酸添加水平下， 采食量的影响优于 而，二因子方差分析表明，以等摩尔浓度为基础， 间在7 21 日龄及 7 42 日龄北京鸭平均日增重、平均日采食量和料肉比上不存在显著差异（ P 氨酸及蛋氨酸羟基类似物对北京鸭胴体品质的影响 如表 3因子方差分析表明， 2日龄北京鸭胸肉率、腿肉率、皮脂率和腹脂率均未产生显著影响 （ P同时， 单因子 和双因子 方差分析 均 表明， 以等摩尔浓度为基础， 2日龄北京鸭胸肉率、腿肉率、皮脂率和腹脂率上不存在 显著 差异（ P 3. 氨酸及蛋氨酸羟基类似物对北京鸭血液生化指标的影响 如表 3示，单因子方差分析表明， 42 日龄北京鸭 血浆尿酸、总蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基酸转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶 均未产生显著影响（ P同时， 单因子 和双因子 方差分析 均 表明， 以等摩尔浓度为基础， 间在 42 日龄北京鸭 血浆尿酸、总蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基酸转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶上均不存在 显著 差异（ P 中国农业科学院博士学位论文 第三章 北京鸭蛋氨酸 及其 羟 基类似物相对生物学效价的研究 32 表 3氨酸及蛋氨酸羟基类似物对 7 21 日龄北京鸭生产性能的影响 on 1 of 氨酸源 加水平 %) 日增重 g/只天） 采食量 g/只天） 料肉比 照 0 值 同时， 单因子 和双因子 方差分析 均 表明， 以等摩尔浓度为基础， 间在 6 周龄北京鸭血浆丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶 上均不存在 显著 差异（ P 表 3明， 6 周龄北京鸭 肝脏 超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶 产生显著影响（ 其中，与对照组相比， 著提高了鸭肝脏中超氧 化物歧化酶活性（ 表 3氨酸 及蛋氨酸羟基类似物 对 6 周龄北京鸭肝脏丙二醛、超氧化物歧化酶 及 谷胱甘肽过氧化物酶的影响 on 氨酸源 加水平 %) 丙二醛 mg 超氧化物歧化酶 U/ mg 谷胱甘肽过氧化物酶 U/ mg 对照 0 值 氨酸源的比较 值 肩号上 不同小写字母表示差异显著（ 但 北京鸭胸肉率、腿肉率、腹脂率、批脂率等胴体品质均未产生显著影响，且在等摩尔添加水平上 存在显著差异（表 3这与上述关于蛋氨酸及蛋氨酸羟基类似物显著影响 肉禽胴体品质的研究报道不一致。同时，该结果与第二章试验结果不一致，其差异可能与两种试验设计中试验基础日粮蛋氨酸缺乏程度不同有关。 此外， 在以 玉米 实际日粮中存在的天然蛋氨酸水平往往在肉禽蛋氨酸需要量中占有相当高的比例，进而 可能 影响 添加效应 。 为减少或排除 试验基础 日粮蛋氨酸 水平 对试验结果的影响， 1982） 与 984)在蛋氨酸水平低于玉米豆粕型日粮的半纯合日粮 中 按 相同 摩尔浓度添加 察到 提高肉仔鸡体增重和降低料肉比方面显著优于 之同时，在以 为唯一日粮蛋氨酸源且按等摩尔添加的纯合日粮中， （ 1982）和 （ 1984）均发现 提高肉仔鸡或来航鸡日增重和降低料肉比方面显著优于 1980） 在中国农业科学院博士学位论文 第三章 北京鸭蛋氨酸 及其 羟基类似物相对生物学效价的研究 40 含 半纯合试验基础日粮中分别等摩尔浓度添加 L、 相应构型 提高肉 仔鸡 8 14 日龄肉仔鸡增重方面 间不存在显著差异，但其在含 无 纯合试验基础日粮中分别等摩尔浓度添加 L、 相应构型现，在提高肉仔鸡 8 16 日龄肉仔鸡增重方面 在显著差异。由此可见，基础日粮蛋氨酸水平过高可能是导致本试验和大多数采用实际日粮的试验报道得出 提高肉禽生产性能和胴体品质方面不存在显著差异这一结论的重要原因。 氨酸 及蛋氨酸羟基类似物 对北京鸭血液生化指标的影响 在医学上，血浆 中总蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、和乳酸脱氢酶目前被广泛应用于肝功能的临床诊断。当肝脏损伤时，血浆总蛋白、白蛋白降低，血浆丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶和乳酸脱氢酶活性升高（ 麻晓林等， 2003） 。因此，以上血液生化指标被用于评价本试验中鸭生理状况。本试验中，饲料中添加 北京鸭血浆总蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、和乳酸脱氢酶未产生显著影响（ P 这也可能是由于本试验基础日粮蛋氨酸水平略高于第二章而蛋氨酸最大添加量低于第二章。 同时，这也 表明本试验 最大添加量未超出鸭能承受的正常生理范围。 另一方面，高半胱氨酸是蛋氨酸代谢的中间产物。蛋氨酸的摄入往往会导致动物血浆高半胱氨酸水平的升高。无论是静脉注射 ,还是自由采食，断奶仔猪血浆高半胱氨酸水平均随蛋氨酸摄入量的升高而呈显著线性升高（ ， 2004）。 （ 2004）在含 础日粮中添加 显著提高 21 日龄北京鸭血浆高半胱氨酸水平。然而，本试验尚未观察到 7 周龄北京鸭血浆高半胱氨酸水平产 生显著影响，且无明显规律。 2006）发现，血浆高半胱氨酸是反映蛋氨酸对鼠毒性的的敏感指标，当日粮蛋氨酸水平达到中毒剂量时才引起鼠血浆高半胱氨酸水平显著升高。因此，血浆高半胱氨酸水平的不显著变化与本试验中两种蛋氨酸源的添加 水平较低 有关。 氨酸 及蛋氨酸羟基类似物 对北京鸭抗氧化机能的影响 丙二醛是体内脂质过氧化的稳定终产物，其含量高低反映体内自由基水平及脂质过氧化程度，而谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶作为清除体内氧自由基的酶，其活性高低间接反映了机体清除自由基的能力。目前 ,蛋氨酸对动 物氧化机能的影响仅有少量报道。 (1999)通过饮水方式给鼠补充蛋氨酸表明 ,在短时间内 (48 小时 )，蛋氨酸可显著提高鼠心脏中谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶、及过氧化氢酶活性显著升高。其中，谷胱甘肽过氧化物酶平随其活性升高而升高，表现出蛋氨酸对其转录水平上的调控。聂伟（ 2006）研究表明，与采食蛋氨酸充足饲料肉仔鸡及蛋鸡中血清脂质过氧化物水平显著低于采食蛋氨酸缺乏饲料的肉仔鸡或蛋鸡。但对血清总抗氧化力未产生显著影响。在本试验中，与对照组相比，著提高了北京鸭 肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性，而 与之 等摩尔对应的 显著提高了超氧化物歧化酶活性。因此，结合本试验结果与先前试验报道报道，在饲料中添加适量水平蛋氨酸 可能 对家禽抗氧化机能有一定的改善作用。 中国农业科学院博士学位论文 第三章 北京鸭蛋氨酸 及其 羟基类似物相对生物学效价的研究 41 氨酸羟基类似物相对于蛋氨酸 的 生物学效价 在本试验中，经单因子和二因子方差分析及平均数多重比较表明， 以等摩尔添加水平为基础， 体品质、血液生化指标、抗氧化机能方面均不存在显著差异（ P 然而， 方差分析仅能得出定 性的结论，而 两种 蛋氨酸源对肉禽生长效应的影响，还应体现在不同水平下 两种 蛋氨酸源 对 肉禽生长 效应的影响 幅度上。 目前，斜率比法是评定 物学效价主要定量方法，其通过斜率的变化反映出两种蛋氨酸源对家禽生长效应的影响幅度。论文第一章总结了大量关于斜率比法在估测肉禽蛋氨酸羟基类似物相对于蛋氨酸生物学效价方面应用的实验报道 (表 1 目前 ，利用葡萄糖作为稀释剂将 99 5%而将其与 99 品 质量浓度添加至肉禽日粮中用于 评价 斜率比法在评定蛋氨酸羟基类物生物学效价中的有效性 (2002； 2005a,b)。 第一章对相关文献进行描述性统计分析表明， 以日增重和料肉比为评价指标， ,65%9%3和56，且两者与 65之间不存在显著差异 （表 11，这证实了斜率比法在评定蛋氨酸源相对生物学效价的有效性。 然而，斜率 比法对蛋氨酸源生物学效价的估测 可能 会受到 2006）通过对相关文献资料进行统计分析认为，随添加水平的升高， 2006）为此提供了试验依据。在 2006）的试验中，肉仔鸡体增重随 体增重随 而，家禽对两种蛋氨酸源不同的生长反应效 应与试验中设定的蛋氨酸源添加范围密切相关。 2007）在火鸡方面的研究表明，以等摩尔浓度为基础，当有效蛋氨酸添加范围为 0 ，体增重随 体增重随 是，当有效蛋氨酸添加范围为 0，体增重随 体增重随 此， 在本试验中， 考虑到家禽生产性能随日粮蛋氨酸水平升高表现出先升高后降低的变化规律，结合 第二章研究结果，设定蛋氨酸添加量在 0 保证 本章采用线性和非线性模型斜率比法进行回归分析均达到显著水平，进一步证实了这一点。 本试验采用线性模型和非线性模型斜率比法以等摩尔添加水平为基础研究了 对于 生物学效价。尽管线性模型获得的生物学效价高于非线性模型所获得的值，但非线性模型所达到的显著性水平优于线性模型，这表明非线性模型更适合本试验中 对于 物学效价的估测（表 33依据非线 性模型斜率比法，以等摩尔添加水平为基础，以日增重和料肉比为评定指标， 7 21 日龄 对于 物学效价分别为78%和 66%， 7 42 日龄 对于 物学效价分别为 67%和 44%。且以日增重为评定指标获得的 对生物学效价高于以料肉比为评定指标获得的 对生物学效价。在第一章表 1肉仔鸡 对于 物学效价方面相关文献所得数据进行描述性统计分析表明，以日增重和料肉比为评定指标，肉仔鸡 对于中国农业科学院博士学位论文 第三章 北京鸭蛋氨酸 及其 羟基类似物相对生物学效价的研究 42 物 学效价分 别为 。由此可见，北京鸭 对于物学效价与肉仔鸡的相当。 另一方面，考虑到 北京鸭产生相对独立的生长效应，本试验采用折线法对获得最佳生产性能所需蛋氨酸源添加 水平 进行估测。其研究结果表明，以等摩尔添加水平为基础，获得最佳日增重和料肉比所需 加量低于 加量（表 3（ 2006）综合分析近 50 年内已发表的 100 余个蛋氨酸 与 蛋氨酸羟基类似物比较研究相关的肉仔鸡 试验并对其试验数据进行回归分析表明，达到肉仔鸡最大体增重所 需 添加量分别为 而达到最佳饲料转化效率所需 添加量分别为 本试验结果与其研究结果相一致。这也从另一角度表明，采食 粮家禽比采食 禽能更快达到最佳生产性能。 结 用方差分析和平均数多重比较表明，以等摩尔添加水平为基础，以生产性能、胴体品质、血液生化及抗氧化机能为评定指标， 间不存在显 著差异。 用非线性模型斜率比法，以等摩尔添加水平为基础，以日增重和料肉比为评 价 指标， 7 21 日龄 对于 物学效价分别为 78%和 66%， 7 42 日龄 对于 物学效价分别为 67%和 44%。且以日增重为评 价 指标获得的 对生物学效价高于以料肉比为评 价 指标获得的 对生物学效价。 日增重为评价指标 采用折线模型估测 量添加量表明， 达到最佳增重所需 加量低于 粮中添加适量 能 对北京鸭抗氧化机能有一定改善作用。 中国农业科学院博士学位论文 第 四 章 蛋氨酸及其羟基类似物对北京鸭毒性及中毒机理的研究 43 第四章 蛋氨酸 及其 羟基类似物对北京鸭毒性 及 中毒机理 的研究 过量蛋氨酸及其羟基类似物对家禽生长均可抑制家禽生长。 在饲料中添加高于 1%水平蛋氨酸及 其 羟基类似物均可显著降低肉仔鸡日增重和采食量（ 1975b; 1980; 1982; , 2004）。 然而 ，蛋氨酸与蛋 氨酸羟基类似物毒性方面的研究主要集中在肉仔鸡和火鸡方面，而肉鸭蛋氨酸及 其 羟基类似物毒性方面的研究至今未见报道 。同时，蛋氨酸及其羟基类似物毒性的中毒机理方面的研究仅有少量报道。 综合相关文献，氧化损伤可能是蛋氨酸毒性的中毒机理。医学研究表明， 摄入过量蛋氨酸往往会导致鼠血浆及肝脏中脂质过氧化物水平升高，而超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性降低（ ， 2006；唐漾波和欧阳佩珍， 1994；马春桃和黎明等， 2006；李亮等， 2006）。 而这在家禽中未见相关报道。此外， 度甲基化可能是蛋氨酸毒性的分子作用 机理。在植物方面， 徐宝华（ 2005）研究 基化对小麦初生根生长发育的影响表明，随培养液中 生根生长受到抑制。在动物方面，白坚石等（ 2001）通过细胞培养试验表明，高水平 胞（早幼粒白细胞病细胞）基因组 基化水平升高。 （ 1993）认为蛋氨酸毒性与组织中 其研究中，与采食正常对照日粮 (相比，采食 粮鼠采食量和体增重显著降低的同时，其肝脏、肾脏、小 肠、骨骼肌中 然而，高蛋氨酸是否通过提高机体内 平进而提高 基化水平至今尚未见报道。另外，采食量降低是过量蛋氨酸抑制动物生长的重要原因。而激素在家禽采食量调控中起非常重要作用 （ 003） 。过量蛋氨酸是否通过影响采食量调控相关激素而抑制动物采食还有待研究。因此，本章试验通过研究蛋氨酸及其羟基类似物对北京鸭生产性能、胴体品质、血液生化、抗氧化机能及基化的影响，一方面比较研究蛋氨酸及其羟基类似物毒性，另一方面从采食量调控、氧化损伤及 基化的角度探讨蛋氨酸及其羟基类似物毒性的中毒机理，最终 为肉鸭养殖生产中合理安全使用蛋氨酸 源 提供 试验 依据。 料与方法 验设计 单因子完全随机试验设计。 5 个日粮处理。 1 个基础日粮对照组， 2 个蛋氨酸添加组 （ 1%, 2%） ， 2 个蛋氨酸羟基类似物添加组 (。 400 只 1 日龄健康雄性北京鸭采用常规饲料饲养至 21 日龄，称所有鸭只个体重，剔除部分体重最大和最小鸭只。依据每处理每重复 试验 鸭初始体重基本一致的原则，将 320 只 21 日龄雄性北京鸭随机分为 5 个处理，每处理 8 个重复，每重复 8只 鸭，每处理组鸭随机饲喂不同的试验日粮。 中国农业科学院博士学位论文 第 四 章 蛋氨酸及其羟基类似物对北京鸭毒性及中毒机理的研究 44 验动物 400 只 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所选育的 体重基本一致、健康的 1 日龄同一品系雄性北京鸭 。 验日粮 生长前期（ 0 3 周龄）常规日粮和生长后期（ 3 6 周龄）试验基础日粮均参考 1994）肉鸭营养需要，其原料组成及营养水平见表 4验设 5个日粮处 理。其中， 1种日 表 4长前期常规日粮和生长后期试验基础日粮组成 (%) of 粮组成 3 周龄常规日粮 0 6 周龄试验基础日粮 3-6 米 粕 4 盐 酸氢钙 粉 混料 养水平 代谢能 MJ/蛋白 氨酸 氨酸 +胱氨酸 氨酸 植酸磷 预混料为每千克饲料提供 : 铜 , 10铁 , 60 锌 , 60 锰 , 80 硒 , 碘 , 0.2 铬 , 化胆碱 , 1000维生素 A, 10000维生素 3000维生素 E, 20维生素 2硫胺素 , 2核黄素 , 8维生素 4维生素 泛酸 , 20烟酸 , 50叶 酸 , 1生物素 , 2预混料为每千克饲料提供 : 铜 , 10铁 , 60 锌 , 60 锰 , 80 硒 , 碘 , 0.2 铬 , 化胆碱 , 750维生素 A, 8000维生素 3000维生素 E, 20维生素 2硫胺素 ,核黄素 , 8维生素 3维生素 泛酸 , 10烟酸 , 50叶酸 , 1生物素 , 3依据鸡饲料原料表观代谢能值进行计算 中国农业科学院博士学位论文 第 四 章 蛋氨酸及其羟基类似物对北京鸭毒性及中毒机理的研究 45 粮为基础日粮对照组， 2 种日粮为基础日粮分别添加 1、 2 氨酸（ 制而成。 2种日粮为基础日粮分别等摩尔添加 氨酸羟基类似物游离酸（ A）。 加量均以等摩尔浓度为基础。有效蛋氨酸添加水平设定为 0、 1%、2%。所有日粮均为颗粒饲料。 养管理 试验鸭 网上平养，自由采食与饮水， 24 小时光照， 0 3 周龄采用常规饲料饲养， 3 6 周龄采用试验日粮分组饲养。其 他按常规饲养管理进行。 品采集及试验指标测定 分别 于 21 和 42 日龄，分别称取各处理组各重复鸭只空腹体重和剩余饲料重，计算 21 42日龄鸭平均日增重，平均日采食量，料 肉比。 于 42 日龄， 分别 从 每处理 每 重复 中 取与该处理该重复平均体重相当的鸭 2 只，称个体重，心脏采血 10入 4 凝的玻璃试管 ， 3000 转分钟 离心制备血浆 ， 料离心管分装、 冷冻保存以备分析。将采血后鸭只放血处死 ，褪毛，开膛，取 一定量肝脏样品 ，5料离心管分装、液氮速冻， 冷冻保存以备分析。 同时， 剥离鸭只皮脂、腹脂、胸肌、腿肌并称其鲜重 。胸肉率、腿肉率、腹脂率、皮脂率 均按其鲜重占屠宰前活重的百分比进行计算 。 同时， 于 42 日龄 ,从每处理组另外随机抽取鸭 5 只 ,采用含 1凝剂的注射器心脏采血5分混匀 后， 血液注入 料离心管 中， 分装， 冷冻保存 以备 取。 凝剂配制参考分子克隆实验指南（第二版）（ 1992）。 血浆总蛋白、白蛋白、尿酸、乳酸脱氢酶、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶采用中生北控生物科技股份有限公司生产的相应试剂盒在 自动生化分析仪上进行测定。 血浆和肝脏中 丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶采用南京建成生物工程研究所生产的相应试剂盒进行在 u530 分光光度计上进行测定。 血浆高半胱氨酸参考谢明（ 2003）方法，采用柱前荧光衍生高效液相色谱法在 效液相色谱系统中进行测定。 血浆瘦素、胰岛素、黑色素细胞刺激素、神经 肽 Y 水平采用人源性放射免疫法试剂盒进行测定，相应的试剂盒购自北京华英生物技术研究所。用于测定放射性计数的 。 血液基因组 考 分子克隆实验指南（第二版）（ 1992）所介绍方法进行提取，血液基因组 取后， 1 琼脂糖 凝胶电泳检测其完整性，随后，将每处理组 品合并制备混和样品用于 将每处理组 血液基因组 和样品 在 260检测其浓度后，取相同浓度 用宝生生物工程（大连）有限公司生产的 种限制性内切酶按以下反应体系 （表 4在 上酶切 6 小时后， 1%琼脂糖凝胶电泳，于凝胶成像系中国农业科学院博士学位论文 第 四 章 蛋氨酸及其羟基类似物对北京鸭毒性及中毒机理的研究 46 统下观察酶切图 谱并摄像。 表 4应体系 -2 l 10 L l 1 g 灭菌水 补充至 20 l 表 4应体系 -2 l 10 L l l 1 g 灭菌水 补充至 20 l 计分析 各处理组 试验数据表示成平均数 标准差。试 验数据采用国际通用 计软件进行方差分析 。 一方面试验数据按完全随机设计进行单因子方差分析，一方面剔除对照组 数据 后 对试验数据进行 2 2（ 2 个蛋氨酸源： 2 个有效蛋氨酸添加水平： 1%, 2%） 二因子方差分析 以比较两种蛋氨酸源之间差异 。以 。同时，加组北京鸭 入量显著高于 加组中国农业科学院博士学位论文 第 四 章 蛋氨酸及其羟基类似物对北京鸭毒性及中毒机理的研究 47 （ 与对照组相比， 饲料中添加 2%高 了 6周龄北京鸭 血浆丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶 活性 和高半胱氨酸 水平 ；饲料中添加2%周龄北京鸭 血浆白蛋白水平。同时， 2%著高于 等摩尔添加水平 ， 2%著 低 于 等摩