虎杖苷在大鼠体内的药动学特点和组织分布研究ppt课件

虎杖 苷 在大鼠体 内 的 药动 学 特点和 组织 分布 研 究 虎杖 苷 (3, 4,5-三 羟 基二 苯 乙 烯 -3-O-D-葡萄糖 苷 )是 从 蓼 科植物虎杖提取物（ Rhizoma Et Radix Polygoni Cuspidati）中分离得到的多 羟 基 类 化合物，近年 研 究表 明，虎杖 苷 在防止 动 脉 内 皮 损伤 性血栓形成，改善休克 微循 环 ，提高休克大鼠存活率， 减 轻 缺血 -再灌注、自由 基、 内 毒素等造成的 组织 器官 损伤 等 诸 方面有良好作用 。 1. 概 述 1. 概 述 试验 目的 分离提取虎杖有效部位， 研 究灌胃 给药 后虎杖 苷 在大 鼠体 内 的 药动 学 特点和不同 组织 的分布情 况 。 2. 试验 方法 2.1 色 谱 条 件 色 谱 柱： Diamonsil C18柱（ 250mm4.6mm， 5m ） 流 动 相：乙 腈 -水（ 26:74） 流 量： 1.0mL/min 检测 波 长 ： 303nm 2. 试验 方法 2.2 对 照品溶液的配制 精密 称 取虎杖 苷 对 照品适量，加甲醇溶解，配成 质 量 浓 度 为 60.625g/mL的 标 准 储备 液。按倍比稀 释 法配成 一系列 质 量 浓 度 (12.125、 6.063、 1.213、 1.010、 0.758、 0.606、 0.303、 0.152、 0.076g/mL）的甲 醇溶液。 2.3 虎杖 苷 有效部位制 备 虎杖 苷 粉末 50%乙醇回流提取， 并 浓缩 1 2水溶液 乙酸乙 酯 萃取NaOH调节 pH7.8 提取物 硅 胶 柱， 氯 仿 -甲醇（ 50 10）洗 脱 有效部位（ 77.25% ） 2. 试验 方法 2.5 生物 样 本的制 备 2.5.1 血 样 的制 备 雄性 SD 大鼠（体重 170200g） 6 只， 给药 前禁 食 12 h ，自由 饮 水。大鼠 ig 虎杖有效部位（ 3mg/mL虎杖 苷 混 悬 液）， 给药剂 量 为 50mg/kg (以虎杖 苷 计 )， 给药 后， 分 别 于 5、 10、 15、 25、 30、 45、 60、 120、 150、 180、 240min 从 大鼠眼底 静 脉 丛 取血 0.3mL，置 1mL 肝 素化的离心管中，以 10000 r/min离心 10min，取血 浆 于 -20 冷 冻 保存，待 测 。 2. 试验 方法 2.5.2 组织样 品的制 备 雄性 SD 大鼠 18只， 随 机分 为 3 组 ，每 组 6只。 给药 前禁 食 12 h，自由 饮 水。大鼠 ig 给 予虎杖有效部位， 给药剂 量 为 50mg/kg (以虎杖 苷 计 ) ，分 别 于吸收相 (10min)、分 布相 (30min) 和消除相 (120min) 各 断 头处 死 6只大鼠（以 上 时间 点根据其血 药浓 度 -时间 曲 线 确定），立即取出心 、肝、脾、肺、 肾 、胃、小 肠 、睾丸、 脑 ，除小 肠 和胃剪 开 除去 内 容物后用生理 盐 水 清 洗外，其余器官用生理 盐 水 洗 净 表面浮血，置 -20 冷 冻 保存。 测 定前取出 组织样 本 ，解 冻 ， 称 质 量，剪碎，加 2倍量生理 盐 水在冰浴中制成 匀 浆 。 2. 试验 方法 2.6 生物 样 品的 测 定 取 经处 理的生物 样 本 0.1mL，置于 1.5mL离心管中，加 入甲醇 0.3mL沉淀蛋白， 涡 旋 30s， 10000r/min离心 10min，取上 清 液 20L进样 ， 测 定。 3. 试验结 果 3.1 方法 专 属 性考察 图 1. 空白血 浆 (A)、空白血 浆 加虎杖 苷 对 照品 (B)和血 浆样 品色 谱图 (C) 3. 试验结 果 3.2 标 准曲 线 的制 备 取空白生物 样 本各 0.1mL，置 1mL离心 管中，加入虎杖 苷 对 照品溶液，分 别 制成 系列 质 量 浓 度的 样 本 ， 进 行 样 品 处 理和 测 定。以虎杖 苷 在生物 样 本中的 质 量 浓 度 (g/mL) 为 横 坐 标 ， 峰面 积为纵 坐 标 求得 方程。 分 别为 ： 血 浆 ： Y=5.876 10-5X-0.0098， r=0.9994 心 脏 ： Y=5.282 10-5X-0.0368， r=0.9995 肝 脏 ： Y=5.608 10-5X-0.0028， r=0.9988 脾 脏 ： Y=4.974 10-5X-0.0848， r=0.9993 肺： Y=5.009 10-5X-0.0726， r=0.9975 肾脏 ： Y=5.421 10-5X-0.0222， r=0.9954 胃： Y=5.480 10-5X-0.0066， r=0.9967 小 肠 ： Y=5.552 10-5X-0.0044， r=0.9993 睾丸： Y=5.532 10-5X-0.0057， r=0.9976 脑 ： Y=5.216 10-5X-0.0418， r=0.9998 3.4 药动 学研 究 结 果 大鼠 ig给 予虎杖有效部位后，血 药浓 度 -时间 曲 线经拟 合 后， 发现 大鼠以 50mg/kg ig给 予虎杖有效部位后，虎杖 苷 在大鼠体 内 的 药动 学 行 为 符合二室 开 放模型。 参数 单 位 Means V Lkg-1 20.245.92 t1/2() min 89.8427.52 AUC gminmL-1 126.8034.16 CL Lkg-1min-1 0.420.12 Tmax min 20.804.37 Cmax gmL-1 1.440.41 3. 试验结 果 3.5 组织 分布 研 究 结 果 结 果表明，大鼠 ig 给 予虎杖 苷 后， 组织 分布迅速， 10 或 30min各 组织 中虎杖 苷 浓 度即 达 峰 值 ， 单 位 组织 中以脾、心、肺、胃中分布 较 高，肝、 脑 、 肾 次之，小 肠 、睾丸 组织 中分布再次之。 3. 试验结 果 4.讨 论 4.1 药动 学 从 药动 学参数 可以看出，虎杖 苷 口服吸收 较 快， Tmax 为 (20.804.37 )min， t1/2 为 (89.8427.52 )min， CL为 (0.420.12)L/(kgmin)， 说 明虎杖 苷 在血中 清 除 较 快，虎 杖 苷 在大鼠体 内 很快消除，不易蓄 积 中毒。 V为 (20.245.92) L/kg，表示 药 物分布于全身，虎杖 苷 可能 与 组织 大量 结 合，而 与 血 浆 蛋白 结 大鼠的体液 总 容 积 合 较 少 。 4.讨 论 4.2 组织 分布 组织 分布 实验 研 究 发现 ， 随 着 时间 的 变 化，各 组织 中的 药 量呈 动态 分布， 给药 后 10或 30min时 各 组织 中的 药 量即 达 到最高，然后逐 渐 下降。大鼠 ig虎杖 苷 后，以脾 脏 、 心 脏 、肺中虎杖 苷 的量最高， 这 可能 与 心 脏 、脾 脏 中血 管丰富，血流量大有 关 。在 给药 后 30min虎杖 苷 在 脑组 织 中分布也 较 丰富，可 见 虎杖 苷 经 一定 时间 可透 过 血 脑 屏 障。 在 研 究 药 物体 内 分