临床医生如何开展科研工作医学

临床医生如何开展科研 工作 n 基本科研训练 n 如何选题和进行科研设计 n 如何建立实验程序和做实验记录 n 如何分析结果得出结论 n 合作、交流、实验室安全 n 如何撰写论文 n 如何申请基金 基本科研训练（ 1） “六能力 ”： 1. 文献处理能力 2. 实验设计能力 3. 实验操作能力 4. 写作能力 5. 合作交流能力 6. 申请基金能力 重塑知识结构： “ 三三之比 ” “ 敲门砖 ” 和 “ 金钥匙 ” 临床医师与科 研素养 择业 基本科研训练（ 2） “三定 ” 定方向 定领域 定课题 “四要点 ” 目的明确 依据充分 设计合理 方法恰当 如何选题和进行科研设计？ “五性 ” 先进性 (advance) 独创性 (originality) 实用性 (practicality) 可行性 (feasibility) 影响力 (citation) 五 “R”： Real(reliable) Respect(your patients and) 选题出发点 n 从临床来和回到临床去 n 短平快与长深久 n 抓住本人和本单位优势 n 强强组合 n 力所能及 研究对象的选取 n 以人为本 n 差异和多样性 n 动物模型和细胞模型的目的 n 动物模型和细胞模型的选择 n 群体研究和个体研究 设定指标与实验分组 n 根据目的设定指标：以少为佳 n 对照 (组 )的必要性 n 按照统计要求分组 n 从设计开始正确选择统计方法 人：多因素分析 动物和细胞模型：单因素分析 如何建立实验程序和实验记录 1、实验程序的建立 n 根据研究目标确定研究内容 n 根据研究内容确定研究方法 n 方法的选择 n 预实验的必要性 经验和教训 n 首先 观察！别人操作的细节，为什么 要这样操作。 n 其次，不要在没有弄清楚原因的情况下， 盲目再进行相同的实验操作。做一次试验 ，就要排除一个可能的因素。 n 最重要的：留出时间思考！不要怕导师说 你实验少，就开一大堆试验 陷于大量 的体力劳动。 经验和教训 n 不要查到一篇文献，就马上按照文献方法去试。 看一看，要得到目标，有哪些方法，每种方法的 优点和缺点是什么，选择最方便的开始。 n 对于每一个细节，要问问什么这么做？如果不这 样做，后果是什么？能不能用其他方法代替？参 考其他相同类文献，看看别人做了什么改动？为 什么要这样改动？ n 提高工作效率的捷径 这种方法一开始 “ 累 ” ，但绝对有效。 n 培养你的判断能力，也是在积累你的经验和知识 。毕业的时候，你会脱胎换骨。 2、方法的选择 方法选择原则 针对性强：一对 一解决问题 简为上 不求全 推荐 A 照搬现成方法 B 重新建立方法 C 改动已有方法 D 改动中容易出现 的问题 如何做实验记录 n 实验记录表格化：便于统计和随时 总结 1. 原始记录表 2. 单项归纳表 3. 汇总表 n 推荐使用 Excel表和 SPSS表 1、 原始记录表（流水账） No指 标 Name Sex Age Height Weight BMI BP 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 2、单项归纳表（阶段小结 /3m） No指 标 Name Sex Age Height Weight BMI BP X均 值 S标 准差 N个数 组别 3、汇总表（论文中的表） No指 标 组 数 个数 Age Height Weight BMI BP 组 1 X均 值 S标 准差 X2卡方 值 P值 df自由度 组 2 X均 值 S标 准差 X2卡方 值 P值 df自由度 X均 值 S X2 P df Age Height Weight BMI BP TGFmRNA TGF蛋白 如何分析结果得出结论 如何面对结果 与预计相符的结果 与预计不符的结果 - 禁止舍弃部分数据使 之与设想相符 直观结果与统计结果 补漏 扩充和深化课题 如何解释结果 数据核实与误差分析 (区分偶然误差和系 统误差 ) 方法评估 找到支持或反对自己 论点的主要证据 不怀疑并充分重视新 发现 结果无法重现怎么办？ 我们在实验过程中，确实也发现某些实验数据较难重复。 原因： 1. 试剂纯度不符合要求或使用了不同批次、厂商的试剂 ； 2. 实验对象有变：动物品系不纯、细胞来源不明 3. 反应的操作存在误差：这突出表现在称量 、加样等环 节； 4. 为了保证实验数据的可重复性，我们必须遵循或者建 立一套标准的反应流程 (Manuals of Operation Protocols Standard, MOPS)。 5. 按照一套标准的实验方法进行操作，对于新进实验室 的同学更为重要。因为失败是新手们的常事。 6. 研究生通病：改 MOP n 为什么技术员老师次次都能做出来的实验我不能？ n 发表论文时，详写操作，试剂，目的是为保证别人重 现结果。因此，自己的实验在同一条件下进行。 n 事实上，很多文献的处理方法是不完善的，也在不断 变化的。所以才会有专门的丛书来总结。进入实验室 时间较长的人，都会发现有些文献的结果是很难重复 的仔细研究他们的实验方法，你会发现有些操作是完 全没有必要的，有些是错误的，当然也有可能作者有 所保留。 n 提高我们的实验室素养，其中之一就在于判断文献的 正确与否，而不是盲从。 实验室三宝：笔、本 、签 1. 记号笔要随身带。试管 ， 试剂瓶等用一个编 号一个，不要怕麻烦，一目了然，总比绞尽 脑汁好。 2. 小本或纸，最好用原始记录本。作一步写一 步，有了灵感马上记下来。下班前往记录本 上写。不要明日复明日。 签（最好多种颜色）。有时记号笔写不了， 或是需要保存，最好贴上签，并在本上记录 好。 最后，细节决定成败！ n 比如实验中如果要用酸度计 ,务必遵守酸度计 的使用条件如温度湿度等。 n 实验结束了，分析结果不对，我从缓冲液 试 剂一路找来，最后竟发现只是天气变冷了而已 ； n 每一次错误后都要认真找原因，再没有找到原 因前不要急着进行下一次试验。 n “ 郁闷啊 ” 错误发生后不要气急败坏 ，这样不利于吸取教训。也可能传染他人 合 作 n Always think of others! n Its a small world! n Be popular! n 各有所长、分工合作 n 帮助别人等于帮助自己 n 有团队就有纪律 团队精神体现在 每天离开实验室应该注意： n 该放回冰箱的东西是否放回了？冰箱门是否 关严了？ n 公用的东西是否还原了？要清洗的仪器、瓶 子是否泡上了？试验台面是否清理了？ n 仪器的使用记录是否及时写了？电源是否关 掉了？ n 门窗是否关好了？ 交流和表达 n 习惯表现自己 n 学会口头表达 n 表达欲是思考的开始，迫使自己不断 整理、归纳、总结 n No silent English! n Try to ask questions in English n Improved your written ability by E-mail 表达三境界 n 第一境界 “千呼万唤始出来，犹抱琵琶半遮面 ”： 背对听众，按照精心准备的 ppt内容，朗读。 n 第二境界 “删繁就简三秋树，领异标新二月花 ”： 提纲式 ppt， 讲演内容完全背下来，面对听众侃侃 而谈，但无眼神交流。 n 第三境界 “攻书破万卷，张口 /下笔如有神 ” ：完 全脱离文稿，用简明而通俗的语言表达自己的理 解。 安全与个人防护 基本原则： 1. “ 以人为本 ” 2. 物归原处 3. 保护他人就是爱护自己 4. 环保：公共空间 +环境 5. 杜绝不良操作 6. 实验室十大安全隐患 爱护设备，切忌自作主张 n 有个同学上学作核磁的时候，一不小心把核磁管打断了 。按学校规定要赔一半，要 400多元。好伤心啊！没完 另一个同学看断掉的半根核磁管很好玩，就把它放 进核磁仪里，然后就再也拿不出来了。那可是日本进口 的 人来了，又是飞机，又是宾馆。更伤心 n 有个博士生特自信，不服指导，结果把超速离心机的中 轴 “离 ” 弯了 这次惨了，分析中心的主任不干了。最 后中心、导师和小两口各掏 2万多；郁闷啊 n 所以， 高级仪器 可不是好玩的！ 如何撰写论文 论文类型 综述 论著 论著摘要和快报 病例报告 技术和方法 专论 讲座 杂志种类 权威杂志 一级期刊 学报 专业杂志 地方性刊物 综述性刊物 国际期刊 论文评价 SCI n 引用情况： SCI (science citation index) n 被收录情况（ Medline; PubMed; BA; CA etc)： 影响面扩大 n 论文类型评价：论著第一；快报第二； 新病种或亚型第三、新方法或新改进第 四 n 有价值的病例报告：新病种、新变异病 例、罕见病大家系或新疗法首报 如何写综述 文献准备 书、综述、论著、快报、 摘要 5年以内占 2/3；当年 1-2 篇； 立论关键要求出自权威刊 物；最新内容可出自快报 、文摘和个人交流；网络 内容须辩真伪 归类、整理、与自己体会 和资料对比 文献阅读方法 复习综述 浏览摘要 精读经典的和新的论著 吸取部分：结论 明； 结果 新；方法 略 关键要准确理解，寻找 和立论的有机联系 写综述的步骤 n 前言 讲义式语言：主题和相关背景、存 在问题、本题在该领域的地位 n 正文 描述性语言：引用文献确切；排列 资料整齐：提示可能机制：推测将来方向 n 小结 明确简练： “ 已解决 有争议 .待 解决 .关键在于 ” 撰写论著步骤 n 前言： 概略背景、存在问题、引出课题 n 对象和方法： 叙述简明，他人所创方法仅标出 处，新方法详述（包括试剂来源），注明统计 学方法。 n 结果： 详述，但不必罗列所有的原始数据，总 结结果有条理。尽量使用图（示范图和示意图 ）、表（结果统计表） n 讨论： 与前人相符、不符、新发现，解释和推 测（最有 个人色彩，最体现作者功力） n 致谢： 良好的习惯 临床研究（选自 NEJM ） 例 1： 191例急性横纹肌溶解症回顾性 波士顿儿 童医院 Pediatrics, 2006, 118(5):2119 n 表现：肌病 45%；发热 40%；病毒感染 39% n 病因：病毒性肌炎 38%；外伤 26%；结缔组织 病 5% n 中位年龄： 11y； 急性肾衰 4.7%-而首次尿液亚 铁血红素 2+者，无一例肾衰！ n 其他有统计学意义的检查：肌酐激酶 n 提示：急性横纹肌溶解症病因，儿童与成人不同 ，急性肾衰比例远低 临床研究（选自 NEJM ） 例 2：联合用药治疗非伤寒沙门菌感染 1例，台湾 Pharmacotherapy, 2006, 26(1):1617 n 已有：单用三代头孢，氟喹诺酮类治疗非伤寒沙 门菌感染 失败！ n 已有：联合二种治疗其他感染成功 n 尚无：联合二种治疗非伤寒沙门菌感染 第一例成功：男， 60y， 表现 ，经验性治疗不奏 效 ；血培养 -霍乱沙门菌，单药治疗 无效； 药敏试验（纸片扩散） ，联合用药 OK! 如何申请基金 基金种类与来源 国家自然科学基金 国家教委基金 其他部委特设项目 国家 863和九五攻关 地方省市级科委 企业横向课题 /个人 名义人才基金 国际组织和民间基金 会 中标基金特