T∕BPSPA 0004-2018 蝉花菌种

ICS 67.080.01分 类 号 ： A0 1 4 2 团 体 标 准 T/BPSPA 0004 2018蝉 花 菌 种 Isaria cicadae2018-08-30 发 布 2018-09-10 实 施中 国 科 技 产 业 化 促 进 会 中 国 菌 物 学 会 联 合 发 布北 京 民 营 科 技 促 进 会 前 言本 标 准 按 照 GB/T 1.1 2009给 出 的 规 则 起 草 。请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利 。 本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 这 些 专 利 的 责 任 。本 标 准 由 中 国 科 技 化 产 业 促 进 会 、 中 国 菌 物 学 会 、 北 京 民 营 科 技 促 进 会 提 出 ， 由 北 京 民营 科 技 促 进 会 归 口 。本 标 准 负 责 起 草 单 位 ： 浙 江 泛 亚 生 命 科 学 研 究 院 。本 标 准 起 草 单 位 ： 中 国 科 技 产 业 化 促 进 会 、 中 国 菌 物 学 会 、 北 京 民 营 科 技 促 进 会 、 中 国科 学 院 北 京 微 生 物 研 究 所 、 广 东 省 微 生 物 研 究 所 、 上 海 中 医 药 大 学 、 安 徽 农 业 大 学 、 浙 江 泛亚 生 命 科 学 研 究 院 、 浙 江 泛 亚 生 物 医 药 股 份 有 限 公 司 。本 标 准 主 要 起 草 人 ： 谭 华 、 李 增 智 、 刘 杏 忠 、 李 泰 辉 、 刘 杏 忠 、 郭 英 兰 、 董 彩 虹 、 陈 祝安 、 樊 美 珍 、 NigelHywel-Jones、 孙 长 胜 、 李 国 强 、 张 忠 亮 、 谭 悠 久 、 张 磊 、 杨 乙 楠 、 方 国 辉 、 郭 石 泉 。本 标 准 为 首 次 发 布 。 本 标 准 为 首 次 发 布 。 蝉 花 菌 种1 范 围本 标 准 规 定 了 蝉 花 菌 种 生 产 技 术 规 程 及 检 验 指 标 。本 标 准 适 用 于 蝉 花 菌 种 的 生 产 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 条 款 通 过 本 标 准 的 引 用 而 成 为 本 标 准 的 条 款 、 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 随 后 所 有 的 修改 单 （ 不 包 括 勘 误 的 内 容 ） 或 修 订 版 均 不 适 用 于 本 标 准 ， 然 而 ， 鼓 励 根 据 本 标 准 打 成 协 议 的 各 方 研 究 是 否可 使 用 这 些 文 件 的 最 新 版 本 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 适 用 于 本 标 准 。 GB/T 191 包 装 储 运 图 示 标 志GB/T 6388 运 输 包 装 收 发 货 标 志GB/T 12728 食 用 菌 术 语GB 15569 农 业 植 物 调 运 检 疫 规 程GB 2760 食 品 安 全 国 家 标 准 食 品 添 加 剂 使 用 标 准GB/T 317 白 砂 糖GB 1886.239 食 品 安 全 国 家 标 准 食 品 添 加 剂 琼 脂GB/T 23530 酵 母 抽 提 物GB/T 20371 食 品 安 全 国 家 标 准 食 品 加 工 用 植 物 蛋 白 NY/T 528 食 用 菌 菌 种 生 产 技 术 规 程NY/T 1742 食 用 菌 菌 种 通 用 技 术 要 求NY 5099 无 公 害 食 品 食 用 菌 栽 培 基 质 安 全 技 术 要 求农 业 部 令 2015 年 第 1 号 修 订 食 用 菌 菌 种 管 理 办 法 ZBB 23008-85 马 铃 薯 （ 土 豆 、 洋 芋 ）3 术 语 与 定 义本 部 分 术 语 和 定 义 按 GB/T 12728 的 规 定 ， 其 他 未 规 定 的 采 用 下 列 术 语 和 定 义 。3.1 蝉 花 蝉 花 也 称 蝉 棒 束 孢 Isaria cicadae Miquel,旧 称 蝉 拟 青 霉 Paecilomyces cicadae Samson。3.2 空 泡当 发 酵 和 培 养 的 菌 丝 进 入 衰 退 期 时 ， 菌 丝 生 长 中 出 现 的 液 泡 变 大 现 象 ,预 示 菌 种 出 现 老 化 。 3.3 菌 丝 自 溶菌 丝 在 自 身 水 解 酶 作 用 下 发 生 自 我 降 解 的 过 程 ， 通 常 是 因 菌 龄 过 长 或 高 温 导 致 的 生 理 老 化 。4 菌 种 生 产4.1 菌 株 的 选 用选 用 优 质 高 产 、 遗 传 稳 定 性 好 、 生 物 活 性 成 分 含 量 比 较 高 ， 对 温 度 、 湿 度 具 有 一 定 环 境 适 应 性 的 菌 株 。目 前 宜 选 用 蝉 花 BAIC0101等 菌 株 。4.2 场 地 与 环 境 应 符 合 NY/T 528 食 用 菌 菌 种 生 产 技 术 规 程 的 规 定 。4.3 设 备 设 施应 符 合 NY/T 528 食 用 菌 菌 种 生 产 技 术 规 程 的 规 定 。4.4 容 器4.4.1母 种 容 器 应 符 合 NY/T 528 食 用 菌 菌 种 生 产 技 术 规 程 的 规 定 。4.4.2 原 种 宜 采 用 500ml-2000ml 玻 璃 三 角 瓶 。4.4.3 栽 培 种 宜 根 据 产 量 使 用 适 宜 容 量 的 发 酵 罐 。4.4.4 母 种 和 原 种 容 器 封 口 材 料 采 用 中 性 硅 胶 塞 、 透 气 膜 或 其 他 能 满 足 正 常 培 养 要 求 的 材 料 。 4.5 母 种 的 制 作 与 保 藏4.5.1 培 养 基 配 方采 用 PSA培 养 基 。培 养 基 配 方 :马 铃 薯 200g、 白 砂 糖 20g、 琼 脂 粉 20g、 水 补 至 1000mL。马 铃 薯 应 符 合 ZBB 23008-85 马 铃 薯 （ 土 豆 、 洋 芋 ） 标 准 要 求 ；白 砂 糖 应 符 合 GB 317 白 砂 糖 标 准 要 求 ；琼 脂 应 符 合 GB 1886.239 食 品 安 全 国 家 标 准 食 品 添 加 剂 琼 脂 标 准 要 求 ；4.5.2 培 养 基 制 备将 去 皮 马 铃 薯 切 片 置 容 器 内 加 水 1000mL， 煮 沸 30min后 过 滤 ， 加 入 白 砂 糖 和 琼 脂 粉 ， 补 足 水 至 1000mL， 加 热 溶 解 后 ， 用 分 装 器 装 入 试 管 中 ， 装 量 为 试 管 长 度 的 1/4-1/5， 塞 上 硅 胶 塞 。 置 于 0.11 Mpa压 力 高 压 灭菌 锅 中 灭 菌 30min， 将 试 管 趁 热 排 放 在 斜 面 板 上 自 然 冷 却 。4.5.3 转 管 扩 繁经 出 草 鉴 定 合 格 的 母 种 ,以 1:30-1:70进 行 转 管 ,在 22 -25 温 度 中 培 养 ,菌 丝 长 满 试 管 斜 面 (10d-15d) 并 产 生 孢 子 后 即 可 使 用 。 转 管 扩 繁 应 不 超 过 5 代 。4.5.4 贮 存母 种 须 在 3 -5 冷 藏 箱 中 保 藏 。4.6 原 种 、 栽 培 种 的 生 产4.6.1 培 养 基 配 方配 方 一 :白 砂 糖 35g,大 豆 水 解 蛋 白 10g,酵 母 抽 提 物 5g,补 水 至 1000mL,pH6.0-7.0。配 方 二 :马 铃 薯 200g、 白 砂 糖 20g、 补 水 至 1000ml。酵 母 抽 提 物 应 符 合 GB/T 23530 酵 母 抽 提 物 标 准 要 求 。 大 豆 水 解 蛋 白 应 符 合 GB/T 20371 食 品 安 全 国 家 标 准 食 品 加 工 用 植 物 蛋 白 标 准 要 求 。4.6.2 装 瓶 (罐 )原 种 制 作 时 将 培 养 液 装 入 三 角 瓶 中 ,装 量 为 容 器 容 量 的 1/5-1/4,用 硅 胶 塞 封 口 。栽 培 种 制 作 时 在 液 体 发 酵 罐 中 配 制 培 养 液 ,装 液 量 为 发 酵 罐 容 量 的 2/3。4.6.3 灭 菌原 种 培 养 基 灭 菌 压 力 ： 在 0.1Mpa-0.15Mpa 压 力 下 高 压 蒸 汽 灭 菌 30min。栽 培 种 培 养 基 灭 菌 压 力 ： 在 0.lMpa-0.15Mpa压 力 下 高 压 蒸 汽 灭 菌 40min。4.6.4 接 种培 养 基 冷 却 至 常 温 后 ,在 无 菌 环 境 下 接 种 ,每 支 斜 面 母 种 （ 规 格 ： 18 180mm） 接 1 瓶 原 种 （ 规 格 ： 500ml-2000ml） ； 栽 培 种 接 种 量 控 制 在 2%-5%。4.6.5 培 养原 种 宜 在 25 条 件 下 置 于 140r min-150r min的 摇 床 上 振 荡 培 养 2d-3d。栽 培 种 宜 在 25 条 件 下 置 于 通 气 量 为 1:0.5、 罐 压 为 0.02-0.1MPa 的 发 酵 罐 中 培 养 24-48h。4.7 要 求4.7.1 感 官 要 求4.7.1.1 母 种 感 官 要 求母 种 感 官 要 求 应 符 合 表 1 的 规 定 。 表 1 母 种 感 官 要 求项 目 指 标分 生 孢 子 枯 草 色 、 粉 状 、 分 布 均 匀菌 丝 均 匀 、 致 密 ,无 气 生 菌 丝发 菌 程 度 菌 丝 长 满 料 面 ,表 面 粉 质 状 ,枯 草 色培 养 物 气 味 无 异 味培 养 物 镜 检 菌 丝 菌 丝 均 匀 ,健 壮 ,无 杂 菌 菌 丝 4.7.1.2 原 种 、 栽 培 种 感 官 要 求原 种 、 栽 培 种 感 官 要 求 应 符 合 表 2 的 规 定 。表 2 原 种 、 栽 培 种 感 官 要 求项 目 指 标菌 丝 状 态 絮 状 或 小 球 状 菌 丝 体杂 质 无培 养 液 清 澈色 泽 紫 红 色 气 味 蝉 花 独 特 清 香 味培 养 物 镜 检 菌 丝 密 集 健 壮 ,无 空 泡4.7.2 质 量 要 求母 种 无 角 变 、 分 生 孢 子 层 均 匀 、 无 菌 丝 自 溶 现 象 、 无 杂 菌 。原 种 和 栽 培 种 无 杂 质 ,培 养 液 清 澈 、 紫 红 色 ,气 味 清 香 、 无 异 味 。5 检 验 方 法5.1 感 官 要 求 菌 丝 (球 )状 态 、 色 泽 、 培 养 液 、 发 菌 程 度 采 用 目 测 、 鼻 嗅 、 镜 检 的 方 法 检 测5.2 质 量 要 求按 照 微 生 物 菌 种 资 源 纯 度 检 测 技 术 规 程 进 行 ,角 变 、 杂 菌 、 自 溶 采 用 目 测 或 显 微 镜 镜 检 的 方 法 检 测 。 6 检 验 规 则6.1 组 培6.1.1 母 种 组 批以 接 种 时 间 、 方 法 、 培 养 条 件 一 致 的 母 种 为 一 个 组 批 。6.1.2 原 种 、 栽 培 种 组 批以 同 一 制 作 方 法 、 时 间 、 培 养 条 件 的 原 种 、 栽 培 种 为 一 个 组 批 。6.2 检 验每 批 按 4.5、 4.6 要 求 制 作 的 菌 种 逐 支 (瓶 、 罐 )检 验 ,按 4.7 要 求 进 行 全 项 检 验 ,检 验 合 格 的 菌 种 方 可 进 行 生 产 。6.3 判 定 规 则按 质 量 要 求 进 行 检 测 ,检 验 项 目 全 部 符 合 质 量 要 求 者 ,为 合 格 菌 种 ； 其 中 任 何 一 项 不 符 合 要 求 者 , 均 为不 合 格 菌 种 。6.4 生 产 过 程 档 案应 符 合 食 用 菌 菌 种 管 理 办 法 。7 标 识 、 标 签 、 保 质 期 7.1 标 识 、