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河北医科大学第四医院东院检验科 杨红芳 血细胞分析仪检测原理 库尔特和血细胞分析仪库尔特和血细胞分析仪 血球之父血球之父-库尔特库尔特 一电阻抗法检测原理(库尔特原理) 1.白细胞检测 LymphocyteMonocyteGranulocyte 淋巴细胞 大单个核细 胞群 粒细胞 淋巴 嗜碱 单核 嗜酸 中性粒细胞 二联合检测型原理 主要体现在白细胞分类,实质是选用较特异的方法将血含 量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出,发现异常细胞。 共有特点是:均使用了鞘流技术。 前 鞘 流 后 鞘 流 检 测 窗 1.VCS检测技术 光散射 传导性 电阻抗 每个细胞接受三维分析 定义到三维散点图的相应位置 (1).Conductivity传导性 针对细胞内部结构的测量方法 利用高频电磁波对细胞传 导性的特点,检测: 细胞核大小 细胞核密度 细胞核结构 核浆比异淋和淋巴 全角度:10-70的 全角度激光散射量 它是准确区分嗜酸性细胞 和中性粒细胞的一个重要 参数。 (2)Laser Scatter激光散射 针对细胞颗粒特性的测量方法 VCS白细胞分类 V C S 电阻抗技术 细胞内部结构 细胞内的颗粒性、核分叶性和细胞表面 结构 MAPSS 0:前向散射光:细胞大小、数量 10:侧向散射光:细胞内部结构及核染色质 的复杂性 90:垂直角度散射光:细胞内部颗粒及分 叶状况 90D:垂直角度去偏振散射光,鉴别E与N 2.多角度偏振光散射法(MAPSS) 3.光散射与细胞化学技术联合应用 (1)过氧化物酶(Peroxidase, Perox)染色通 道 过氧化物酶活性强度:ENM, L和B则 无。 (2)嗜碱性粒细胞/分叶核(baso/ lobul- arity)通道: 除B外其他细胞仅剩裸核,不同细 胞的裸核结构不同,分叶越多散点越靠近横 轴右侧,根据多分叶核和单个核的比例,可 计算出左移指数。 4.电阻抗、射频与细胞化学联合 这类仪器是利用电阻抗、射频这一成熟细胞 计数技术结合细胞化学技术,通过4个不同的检 测系统对白细胞、幼稚细胞进行分类和计数。 (1)嗜酸性粒细胞检测系统 (2) 嗜碱性粒细胞检测系统 (3)淋巴、单核和粒细胞检测系统 (4) 幼稚细胞检测系统 5. 双鞘流动力连续系统 (DHSS) 用钨光源流式细胞光吸收、化学染色和电 阻抗法 WBC计数通道:电阻抗法 嗜碱性粒细胞通道:专用染液 WBC分类通道:双鞘流系统中,用流式 细胞光吸收、电阻抗和细胞化学染色液联 合检测除B以外的WBC。 白细胞分类散射图 联合使用多项技术(流式、激光、射频、电导、电阻抗、 细胞化学染色)同时分析一个细胞,综合分析实验数据,从而 得出较为准确的白细胞“五分群”结果。 三血红蛋白测定原理 血红蛋白测定采用光电比色原理 血细胞悬液中加入溶血剂后,红细胞溶 解释放血红蛋白,后者与溶血剂中有关成 分结合形成血红蛋白衍生物,进入血红蛋 白测试系统 特定波长(530550nm)下进行光电比色 血
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