多发性硬化许贤豪_卫生部北京医院神经科100730 北京东单大课件

多发性硬化 许贤豪 卫生部北京医院神经科 100730 北京东单大华路1号 TEL & FAX: 010-6514-2439 e-mail address: Date1ms-g-s 定 义 多发性硬化是中枢神经系统炎性 、多灶性、脱髓鞘性疾病。虽有20病 人自起病后进行性加重，但多数是以 复发、缓解为特征。 其典型的症状和体征，是由于 脊髓的白质传导束、视神经、脑室周 围白质、脑干和小脑的病变所致。 Date2ms-g-s 诊 断 临床诊断的主要依据是：有中枢神 经系统白质病变的证据，且有其部位及时 间上的多发。应除外其他疾病(Ebers GC 1986:1268)。 多发性硬化是一种以血管周围炎性细 胞浸润和多灶性脱髓鞘为主要特征 的中枢神经系统疾病。 Date3ms-g-s 多发性硬化的诊断标准(Poser 1983,1984) _ 临床 发作 临床 实验室 脑脊液寡 类别 次数 证据 证据 克隆区带 临床确定 1 2 2 实验室确定 1. 2 1 或1 或+ 2. 1 2 + 3 1 1 1 + 临床可能 1. 2 1 2. 1 2 3. 1 1 1 实验室可能 1. 2 + 2. 1 1 + Date4ms-g-s 发病率 发病率因区域不同而有明显差别： 北欧的北纬45-65度之间，于北美洲(美国北部、加拿 大南部)、澳大利亚南部和新西兰为多发性硬化高发病 区，为30-80/10万或100/10万；美国南部和南欧为6- 14/10万； 亚洲为低发病区，为3.5病人临床上不再恶化 ，非增强扫描时，其临床和MRI盖上 只有发生在高剂量组 Date59ms-g-s CHAMPS试验： 目的：能否缓解急性单症状 病人 用Avonex 30g 肌肉注射 ,3周 早期病例小剂量有效。 Date60ms-g-s ETOMS研究： 目的：能否缓解急性多症状发 作。 Rebif 22g皮下注射，各观察 3月 早期病人用低剂量有效 Date61ms-g-s 基因治疗(Gene Therapy) 转基因技术的创立大大提高了我们理解在动物模型 和相关人类疾病中各种不同基因的功能。对诱导基因 表达的四环素-调节转活化(transactivation)系统使我 们能以暂时和定量方式控制外源性基因的表达。这种 细胞特异性启动子操作使我们能在单一型细胞上表达 一种特殊的蛋白。四环素系统和组织特异性启动子的 结合使我们能创立一种发明性的基因表达系统，这样 有可能以某型细胞特异性、时间-和水平-可控制的形 式表达基因。一种少树突细胞-特异性髓鞘碱性蛋白 (MBP)基因启动子控制其逆转了的四环素-诱导性转活 化剂(transactivator)。 Date62ms-g-s 基因治疗(Gene Therapy) 可通过基因治疗提供细胞因子抑制剂，如TNF 拮抗剂，达到进行中自身免疫性疾病的免疫调节 。研究表达小鼠干扰素基因和含与小鼠免疫球 蛋白连接人类p55 RNF受体细胞外活性部位(Domain) 的嵌合性蛋白(chimeric protein)的逆转录病毒载体 (vectors)和试验质粒(test plasmid)。这些载体(vectors,向量 带菌者)暂时表达于COS-7细胞和持续地表达于 amphotropic包装的细胞系或ABH小鼠不灭的 (immortalized)成纤维细胞。 Date63ms-g-s 基因治疗(Gene Therapy) 用ELISA测定其表达水平。以Western转 印和生物学活性测定中枢神经系统中 组织特异性表达，在大鼠NSE启动子控 制下把干扰素基因克隆并表达。于实 验性变态反应性脑脊髓炎(一种多发性 硬化的小鼠模型)诱导期把DNA-脂质体 (liposome)复合物直接颅内注射以评价此 种结构和疗效。 Date64ms-g-s 基因治疗(Gene Therapy) 于实验性变态反应性脑脊髓炎动物的视神经 试验由病毒介导人类分解酶(catalase)基因转 染(transfer)的氧化损伤的抑制。实验性变态 反应性脑脊髓炎是原发性中枢神经系统脱髓鞘 的炎性自身免疫性疾病,常被用作人类多发性硬 化的动物模型.视神经是实验性变态反应性脑脊 髓炎和多发性硬化的常见受累部位。把含人类 分解酶(catalase)基因的重组腺苷相伴性病毒 同时注入实验性变态反应性脑脊髓炎的SJL/J 小鼠右侧视神经乳头。 Date65ms-g-s 基因治疗(Gene Therapy) 一个月后，细胞特异性分解酶活性，用分解酶免疫金 (immunogold)的定量方法评价细胞特异性分解酶活性 ，比内皮细胞、少树突胶质细胞、星形细胞者高一倍 ，和视神经轴索的二倍。对脱髓鞘来说用髓鞘区，对 视神经乳头水肿来说用视盘面积，和于活体用过氧化 氢反应产物的计算机分析其实验性变态反应性脑脊髓 炎组织损害的分解酶作用。注射不伴治疗性基因的重 组病毒的对侧视神经相比，接种分解酶基因使脱髓鞘 减低38%，视神经乳头水肿减少29%，细胞浸润减少 34%，血脑屏障破坏减少64%，而活体的H2O2减少61%。 Date66ms-g-s 基因治疗(Gene Therapy) 因为潜在治疗多发性硬化的效 果通常用实验性变态反应性脑 脊髓炎来实验，所以，此研究 提示：用病毒载体(vectors)分 解酶基因传递可能是抑制多发 性硬化的治疗策略之一。 Date67ms-g-s 基因治疗(Gene Therapy) 已报道，EAE的诱导期对通过MHCII类分子 刺激和通过CD28:CD80/CD86的协同刺激(co- stimulation)途径的系统阻滞高度敏感。相反，实 验性变态反应性脑脊髓炎的效应期，某些研究 示用MHCII类抗原特异性单克隆抗体和细胞毒性 T细胞抗原(CTLA)4-免疫球蛋白融合蛋白(fusion protein)的类似治疗相对无效。一般认为这可能 与效应细胞功能的敏感性不同或抑制性蛋白穿 入中枢神经系统差有关。 Date68ms-g-s 基因治疗(Gene Therapy) 为进一步澄清此问题，继实验性变态反应性脑脊髓 炎诱导后把MHCII类抗原特异性单克隆抗体和CTLA4-Ig 直接导入中枢神经系统，结果两者均抑制此病。发现 ：在临床发病前不久或期间全身给小鼠CTL4-Ig也可抑 制效应性免疫应答的进展，若直接给到中枢神经系统 则其效果更好，这可能与在CD28配体、CD80和CD86上 的作用有关。小鼠CTLA4-人Ig的治疗作用比小鼠CTLA4 -小鼠Ig蛋白为差，这可能与免疫原性增强和功能活性 降低有关，用非增殖性(non-replicating)腺病毒载体把 CTLA4-人Ig基因递入中枢神经系统的效果较单次注