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第二章 牙体牙髓病微生物学 肖丽英 一龋病微生物学 1.细菌与龋病发生的关系 2.主要致龋菌及生物学特性 龋病是发生在牙齿硬 组织上的慢性细菌性 渐进性疾病,造成牙 齿硬组织的颜色、形 态、质地的改变。 龋病的定义 龋病的病因学因素 1.细菌在龋病发生中作用的证据的两个经典实验 一、细菌与龋病的关系 无菌鼠+细菌 龋病 无菌鼠+高糖饮食 无龋 (1)Orland的无菌鼠实验(1955) 牙齿+面包(糖)+ 唾液 龋 牙齿+面包(糖)+ 煮沸唾液 无龋 牙齿+脂肪(肉)+ 唾液 无龋 (2) Miller的体外实验(1890) 细菌酵解碳水化合物是龋病产生的根本原因。 (1)牙齿在萌出前不发生龋。 (2)抗生素可降低龋病的发生并减轻其严重程度。 (3)龋损牙本质和釉质中可找到细菌。 (4)体外的人工龋实验。 无菌即无龋 2. 其它实验 3. Ecological plaque hypothesis(90年代) 与龋病发生有关的细菌都是口腔正常微生物 群,由于局部的、全身的、食物的因素改变, 造成口腔生态环境的变化,正常细菌与宿主之 间的生理性组合改变为病理性组合,口腔生态 平衡转化为生态失调,正常细菌成为条件致病 菌,引起龋病。 (一)产酸和耐酸性 (二)合成细胞内外多糖的能力 (三)对牙面的粘附能力 二、致龋菌的生物学特性 部分细菌对不同口腔部位的粘附力 粘附部位 细菌 牙面 舌面 颊粘膜 变异链球菌 + + + 血链球菌 + + + 唾液链球菌 + + + 缓症链球菌 + + + 放线菌 + + + 韦荣球菌 + + + 奈瑟菌 + + + 判断标准 1.符合致龋菌应具备的生物学特性。 2.在龋损的各个时期都可分离并可纯培养。 3.细菌量与龋病的发生密切相关。 4.能引起实验动物的传染性龋损。 5.选择性限制该菌可以减少龋病的发生。 三、致龋菌 (一)口腔链球菌群 链球菌属(Streptococcus),口腔常驻菌,在口腔天 然菌群中比例最大。 血链球菌(S.sanguis) 缓症链球菌(S.mitis) 唾液链球菌(S.salivarius) 变异链球菌(S.mutans) S.mutans S.SanguisS. salivarius (二)变异链球菌与龋病 1.表型特征 G+染色,菌体呈球形,直径0.5-0.75um。 肉汤培养基:菌细胞呈短杆状或球状, 成队或链状排列,链长中等,或短,不活动。 轻唾琼脂平板(MS):高凸,粗糙,不透明,毛玻璃状, 嵌于琼脂内的菌落。 血琼脂平板:圆形,表面光滑,直径 0.5- 1mm的菌落。周围有(绿色)或(无色)溶 血环,有时为(透明)溶血环。 A B 变形链球菌菌落 A:光滑型菌 B:粗糙型菌菌落 变形链球菌细胞 2.细胞壁组成 (1)多糖 菌株抗原性 血清型 (2)肽聚糖:N-乙酰葡萄糖胺、N-乙酰 胞壁酸、短肽 (3)甘油磷壁酸:壁磷壁酸、膜磷壁酸 (4)表面蛋白:GTF、FTF、P1 决定变链菌的抗原性和在牙面的粘附 3. 致龋性 (1)产酸性和耐酸性 (2)合成细胞内外多糖 (3)对牙面的粘附性 4. 变异链球菌与龋病的关系 (1)横向的流行病学调查表明: 变链球菌的检出率同龋病的发生呈正相关。 (2)纵向的追踪调查表明:唾液或菌斑中变链 球菌的检出率与随后龋病的发生呈正相关。 结论:变链是主要的致龋菌,但不是唯一 的致龋菌。 问题:其他细菌仍可诱发动物龋,变链 和龋活跃性的关系不是恒定的。 1.形态学 革兰阳性杆菌,属兼性厌氧或专性厌氧 菌,菌体细长,直径0.6-0.9m,不分 支,无芽胞,不活动。 菌落呈圆丘形,表面光滑或粗糙,不透 明,干酪样白色或淡褐色。 (三)口腔乳杆菌 2. 致龋性 1.早期研究认为乳杆菌是主要的致龋菌。 2.目前的研究表明乳杆菌不是龋病发生的初始致病菌, 但参与了龋病的发展,主要涉及牙本质龋。 3.乳杆菌是导致根面龋的致龋菌之一。 1. 形态及培养 口腔中最常见的革兰阳性丝状菌,兼性厌氧 ,主要定居在牙面。 无鞭毛和芽胞,菌细胞末端较膨大,形态不 规则,为丝状或杆状,长短不一。 BHI培养基上,形成蛛网状和光滑型菌落。 (四)放线菌 2.致龋性 透射电镜下观察,放线菌有菌毛(pilli或 fimbria),各放线菌的菌毛成分不一样,粘性 放线菌有I型和II型两种类型的菌毛,而内氏放 线菌只有II型菌毛。菌毛与放线菌的粘附性能密 切相关。 二 牙髓和根尖周病的微生物学 n牙髓和根尖周细菌感染的主要途径 n牙髓及根尖周感染的细菌学特点 n牙髓及根尖周感染的常见病原菌 n牙髓及根尖周感染病原菌种类与临床症状的关 系 基本概念 牙髓和根尖周病是发生在牙髓组织和根尖周膜及 牙槽骨的疾病的总称,牙髓和根尖周病与龋病一道 被称为牙体牙髓病。 牙髓是牙组织唯一的软组织,由牙髓细胞、细胞间 质和细胞间液组成,位于由牙本质围成的牙髓腔内 ,借狭窄的根尖孔与根尖周组织相连。 根尖周组织指根尖部的牙周组织,包括牙骨质、牙 周膜和牙槽骨 牙髓根尖周病的细菌病因学证据 n1890年 Milier等首次在人的坏死牙髓组织中发现细菌 n1965年 Kakehashi等 经典的无菌鼠动物实验 在无菌条件下 钻开实验鼠牙髓腔暴露于口腔中 普通鼠 无菌鼠 实验牙在8天内可见 实验牙在42天内未见 发生严重的牙髓炎 牙髓有进行性炎症反应 牙髓坏死、根尖周炎 手术伤口很快愈合 结论:细菌是牙髓根尖周组织感染的启动因子 牙髓根尖周病细菌感染的途径 主要途径为: q 经牙体感染 q 经牙周感染 q 经血源感染 1 经牙体感染 诱因:龋病、外伤性牙折、牙隐裂、 楔状缺损、磨损及发育畸形等 途径:细菌或毒性产物 侵入暴露的牙本质小管至管壁脱矿、管腔扩大 引起牙髓的损伤、炎症反应和坏死; 通过根尖孔或侧支根管侵入根尖周组织,导致根尖 周炎或根尖周脓肿。 2 经牙周感染(逆行性感染) n深牙周袋的细菌经根尖孔或根尖区侧支根管进 入牙髓,引发牙髓感染 n由牙周途径导致的牙髓感染称为逆行性感染, 所引起的牙髓炎称为逆行性牙髓炎( retrograde pulpitis) 3 经血源感染(引菌作用 ) n引菌作用:暂时性的菌血症引起的细菌在代谢 障碍或创伤的牙髓组织的定植。 n诱因:因拔牙、洁治、根管治疗等可引起暂时 性菌血症,细菌通过血流进入创伤的牙髓或根 尖周周围组织,继而引发牙髓感染。 牙髓及根尖周感染的病原菌 n牙髓炎的病原菌 n感染根管病原菌 n根尖周炎病原菌 1 炎症牙髓的病原菌: Streptococcus spp 链球菌菌种 Actinomyces spp 放线菌菌种 Lactobacillus spp 乳杆菌菌种 Gn兼性厌氧和厌氧杆菌 牙髓炎的病原菌 与龋原性牙髓炎的牙髓组织炎症、坏死有重要关 系的不可逆性牙髓炎的主要病原菌 Peptostreptococcus micros Porphyromonas gingivalis 牙髓炎多继发于龋病,Streptococcus、 Actinomyces、Lactobacillus和Gn的厌氧杆 菌 髓腔开放者细菌的种类和数量较末开放者多; 在炎症牙髓中检出真菌。 2 感染根管的病原菌 产黑色素的革兰阴性杆菌 porphyromonas gingivalis 牙龈卟啉单胞菌 Prevotella intermedius 中间普雷沃菌 不产黑色素普雷沃菌 Prevotella oralis 口腔普雷沃菌 Tannerella forsythensis 福赛斯坦纳菌 peptostreptococcus micros 微小消化链球菌 Fusobacterium nucleatum 具核梭杆菌 (Enterococcus faecalis 粪肠球菌) 感染根管的病原菌 Gomes等: 60例感染根管专性厌氧菌是主要病原菌 P. micros、P. gingivalis、P. endodpntalis、 P. intermedia 和 F. nucleatum。 Prevotella spp 和P. micros 常见于急性感染根管中。 Sundqvist等:65颗感染根管的细菌 以革兰阴性专性厌氧杆菌为主 每个根管内细菌种类平均为5.3种 3根尖周组织感染的主要病原菌 产黑色素类的厌氧杆菌: Porphyromonas gingivalis 牙龈卟啉单胞菌 Prevotella intermedius 中间普雷沃菌 Tannerella forsythus 福赛斯坦纳菌 Fusobacterium SPP 梭杆菌菌种 Peptostreptococcus micros 微小消化链球菌 Eubacterium SPP 优杆菌菌种 Actinomyces spp 放线菌菌种 病原菌种类与临床症状的相关性 n厌氧菌与广泛性根尖周病变有关 n产黑色素的革兰阴性厌氧杆菌如中间普雷沃菌,牙 龈卟啉单胞菌,以及福赛斯坦纳菌、具核梭杆菌、 微小消化链球菌、优杆菌在急性根尖周炎和非开放 性牙髓多见,与根

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