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钠离子与牛血清蛋白的作用 The sodium ion interact with bovine serum albumin. 指导教师:谭明雄教授 答辩人姓名:李玉婷 时间:2014.052014.05月月2323日日 论文概要 选题意义 研究内容和研究方法 实验结果及讨论 结论与展望 1 2 3 4 通过国内外研究白花丹素的结果来看,白花丹素具有 较高的药用价值,但是白花丹素是存在一定的毒性,所 以应用配位化学理论,把活性成分与金属离子作用,合成一 系列具有抗肿瘤活性的天然产物金属配合物,经研究发 现,这样的金属配合物具有较高的清除超氧阴离子自由 基能力,较白花丹素的抗肿瘤活性高,并且毒性也大大 降低了。 选题意义 1 二、研究内容和研究方法 本论文主要通过紫外光谱和荧光光谱来研究 观察钠离子、白花丹素、白花丹素钠对牛血清 蛋白的作用。 三、实验结果及讨论 1、通过紫外光谱的测定,观察钠离子、 白花丹素、白花丹素钠对牛血清蛋白的作用 2、通过荧光光谱的测定,观察钠离子、 白花丹素、白花丹素钠对牛血清蛋白的作用 图(A)在25时钠离子与BSA相互作用的紫外光谱 (CB SA= 110-5mol/L CNa=110-6mol/L) (1)钠离子与牛血清蛋白的作用 图(B)在37时钠离子与BSA相互作用的紫外光谱 (CB SA= 110-5mol/L CNa=110-6mol/L) 由图 可见,图(A)和图(B)可知,随着加入Na() 离子后牛血清白蛋白在紫外光谱区显示了两个特征的蛋白质 吸收带,其峰位置分别为215nm 和278nm。其中215nm处吸收 峰强度远远大于278nm处吸收峰强度。随着Na()离子的 不断加入, 虽然没有发生红移也没有发生紫移,但是这两个 特征峰均逐渐减弱,表现为减色效应。 说明BSA的分子结构发生了改变。同时也引起了蛋白质 中2个色氨酸和19个酪氨酸周围微环境的极性变化。 钠离子对牛血清蛋白的作用的结论 (2)白花丹素与牛血清蛋白的作用 图(C)在25时白花丹素与BSA相互作用的紫外光谱 (CB SA= 110-5mol/L C白花丹素=110-7mol/L) 图(D)在37时白花丹素与BSA相互作用的紫外光谱 (CB SA= 110-5mol/L C白花丹素=110-7mol/L) 由图(C)和图(D)可知,随着白花丹素的不断加 入,在235nm处吸收光谱发生红移。而在278nm处的吸收光 谱的增色效应更为明显, 因而使吸收峰的峰位向短波长(紫 移)发生微小位移。,也就是发生了紫移。 说明BSA的分子结构发生了改变,并且白花丹素与 BSA发生了相互作用,同时也引起了蛋白质中2个色氨酸 和19个酪氨酸周围微环境的极性变化 。 白花丹素与牛血清蛋白的作用 (3)白花丹素钠与牛血清蛋白的作用 图(E)在25时白花丹素钠与BSA相互作用的紫外光谱 (CB SA= 110-5mol/L C白花丹素钠=110-7mol/L) 图(F)在37时白花丹素钠与BSA相互作用的紫外光谱 (CB SA= 110-5mol/L C白花丹素钠=110-7mol/L) 由图(E)和图(F)可看出,随着白花丹素钠配合 物浓度的增加,其较强的吸收峰峰值明显下降,并且 发生了红移现象;而在278nm处的吸收峰也发生了下 降的趋势,但是相对于较强吸收峰的下降要弱得多, 并且无红移现象。 故白花丹素钠配合物与BSA发生了相互作用,因此 也引起了蛋白质中2个色氨酸和19个酪氨酸周围微环 境的极性变化 。 白花丹素钠与牛血清蛋白的作用 (1)钠离子与牛血清蛋白的作用 图G分别在25和37时钠离子与BSA相互作用的荧光光谱 (CB SA= 110-5mol/L CNa=110-5mol/L) (1)白花丹素与牛血清蛋白的作用 图H分别在25和37时白花丹素与BSA相互作用的荧光光谱 (CB SA= 110-5mol/L C白花丹素=110-5mol/L) (1)白花丹素钠对牛血清蛋白的作用 图I分别在25和37时白花丹素钠与BSA相互作用的荧光光谱 (CB SA= 110-5mol/L C白花丹素钠=110-5mol/L) 由图(G)可以观察到:随着钠离子的加入的荧光光 谱的变化情况, BSA的发射荧光强度随着金属钠离子浓 度的增加在339nm附近呈有规律的降低, 出现荧光猝灭现 象,但是没有红移或紫移显现。所以推测出钠离子和BSA 存在着相互作用。 同样,由图(H)和图(I)也可看出随着白花丹素 或白花丹素钠的加入,出现最大发射波长随白花丹素或 白花丹素钠浓度的增加有紫移现象,说明BSA分子中发 色团周围的微环境及蛋白质分子构象发生了改变。 四、结论和展望 本文是采用紫外可见光谱在BSA中分别加入钠离子、白花丹素 和白花丹素钠这三种物质,发现白花丹素钠的配合物、白花丹素 都与BSA明显发生了红移或者紫移的作用,所以发现白花丹素钠 的配合物、白花丹素都与BSA明显发生相互作用,而钠离子与 BSA几乎没有发生红移或紫移,所以没有钠离子和BSA没有发生 相互作用,只是改变了蛋白质周围微环境的极性。 还通过荧光光谱法测定钠离子、白花丹素和白花丹素钠分别 对BSA的相互作用。通过测定25和37温度下的荧光光谱,按 照Stern-Vol
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