免疫学试题及答案.doc

一、ABO血型中，新生儿在什么情况下会发生溶血？答：什么是ABO溶血 ABO溶血是因母子ABO血型不合引起的新生儿溶血病，称为“新生儿ABO溶血病”，这是一种同族免疫性溶血。我国所发生的新生儿溶血症病例多数属于ABO溶血。产生ABO溶血的原因在怀孕期或分娩时可有为数不等的胎儿红细胞进入母体，若彼此血型不合，母亲体内缺乏胎儿红细胞所具有的抗原，母亲会产生相应的抗体。这种免疫抗体可通过胎盘进入胎儿体内引起溶血。ABO血型系统共有A、B、AB和O型四种，ABO血型不合溶血病主要发生在母亲是O型，胎儿是A型或B”型者。在ABO系统中，因O型人具有抗A或抗BigG的人数比A型及B型的人数多，A抗原较B抗原的抗原性强，故母O型，胎儿A型者得病机会多。ABO溶血症可发生在第一胎，与母体曾受自然界中类似A，B物质的抗原刺激，已具有抗A或抗B抗体有关。ABO溶血的特征该病主要症状及体征有水肿、黄疸、贫血和肝脾肿大。症状的轻重取决于抗体的多少、新生儿成熟度及代偿性造血能力等。1、黄疸是ABO溶血病的主要症状，大多数出现在生后23天。生后第1天内出现黄疸者占1/4左右，同样，产生重度黄疸者亦为1/4左右。4-5天黄疸达到高峰，以中度为主，少数为重度。黄疸严重者可有拒食、反应差、尖叫、角弓反张、惊厥等核黄疸症状。2、贫血ABO溶血病患者都有不同程度的贫血，但一般程度较轻，重度贫血(指血红蛋白在100g/L以下)仅占5%左右。ABO溶血病的某些轻型病例，可能早期症状不重，但到生后26周发生晚期贫血，或到生后812周生理性贫血”时期贫血表现得特别严重，这是因为血型抗体持续存在，使红细胞寿命缩短，发生慢性溶血所致。据报道，这类小儿红细胞的寿命仅35天左右，每天血红蛋白下降值约为同期正常小儿的4倍，红细胞破坏增加，而这时骨髓造血功能生理性低下，不能有效地代偿，终致发生新生儿晚期贫血。3、呼吸急促，心跳加快。4、肝脾肿大骨髓及髓外造血组织呈代偿性增生，故引起不同程度肝脾肿大，镜检在肝、脾、肺、胰、肾等组织内可见散在髓外造血灶。如何诊断ABO溶血孕妇应该在产前检查血型，及早了解胎儿情况，尽早准备好新生儿溶血症的各项监测措施。此外，还应对0型血的孕妇进行抗体效价的测定。检查时间为：第一次在妊娠16星期，第二次在妊娠28-30星期，此后每24星期复查1次。半数以上该血型孕妇在28周后产生抗体，当抗体效价1：128时，警惕溶血发生的可能。另外B超检查也可帮助发现胎儿溶血，当发现胎儿有皮肤水肿、胸腹腔积液、肝脾肿大、胎盘增大，应考虑是否存在母胎血型不合的可能。当然0型血的妈妈也不要太紧张，因为并不是每个0型血妈妈的宝宝都会溶血的，而且AB0型溶血一般病情较轻，产后仔细观察黄疸出现的时间，及早诊断和处理，预后都是相当好的。ABO溶血的危害ABO溶血可致胎儿贫血、心脏扩大、肝脾肿大、胎儿及胎盘水肿，血液中红细胞增多，严重时胎儿缺氧，造成胎死宫内。新生儿还会出现黄疸，间接胆红素可以通过血脑屏障使脑神经核黄染，影响智力发育和神经功能。ABO溶血的治疗方法分娩时，就要做好新生儿的抢救准备：胎儿娩出立即断脐，减少抗体进入宝宝体内；保留脐带，以备严重溶血病患儿换血用。新生儿出生后要严密观察黄疸出现时间，一般第23天，严重者24小时内就出现黄疸，并要注意黄疸加深速度，如胆红素浓度过高，不及时处理可引起胆红素脑病，以后影响智力，所以ABO溶血病要及早治疗。具体措施如下：光照疗法光照疗法是治疗新生儿黄疸最简便有效的方法，它的优点是退黄疸快，副作用少，皮肤黄疸接受光照后胆红素可分解成水溶性，从肠道、尿中排出体外，从而降低血中胆红素浓度，可避免胆红素脑病的发生。光照疗法时有的宝宝可出现一过敏性皮疹、大便次数增多等轻微的副作用，这些症状不需要处理，停光照后可自愈。药物治疗黄疸较严重者可反复多次光照疗法，同时加用药物治疗。可用抑制抗原反应的药物以减少继续溶血，活跃肝细胞酶系统，可加速胆红素代谢和排泄或阻止胆红素在肠道的再吸收及中药利胆退黄。补充铁剂或输血绝大多数ABO溶血病的宝宝不需要换血，经积极治疗后预后良好。新生儿ABO溶血病常同时伴有贫血，其程度与溶血程度一致。轻度溶血者常贫血较轻，严重溶血病患儿可能有较重的贫血，可根据贫血程度给予补充铁剂或输血等相应的治疗。ABO溶血该如何预防如果准爸爸是A型血、B型血或AB型血，准妈妈是O型血，且有过流产史或者输血史的话，就要当心新生宝宝有无贫血以及黄疸出现的时间、程度，不要和其他原因所致的黄疸、贫血混淆，以免耽误治疗。如果有ABO血型不合的可能，准妈妈在怀孕前就要做一个“产前血型血清学检查”，来查一查血液里抗体的情况。要是抗体的“活性”不高，准爸妈可以安心生孩子，要是抗体的“活性”很高，则可以通过一些药物治疗来降低，可在先进行中药治疗来降低抗体。这样做的目的主要是降低母亲抗体的“杀伤力”。如果已经怀上宝宝，准妈妈们要记得从16周左右开始，定期检测血液中抗体的情况，一般在四周左右一次，密切注意宝宝有否发生溶血可能。如有异常可以在孕期治疗，效果也不错。Rh血型不同的准爸妈，第一次怀孕时基本上没事，但如果有过流产或生过孩子等现象，一定要查准妈妈体内Rh抗体。若抗体阳性的“活性”很强，就不应该怀孕，否则发生死胎、新生儿严重溶血的危险性就比较大了。ABO溶血的后遗症ABO溶血症只要及时发现，及时治疗，是完全可以治痊愈的，不会有后遗症。如果已经有核黄疸，治愈后仍然有后遗症。严重的ABO溶血病最重的并发症是胆红素脑病，就是普通人说的黄疸上脑了。胆红素脑病的后遗症是手徐动、牙齿发育不良、眼运动障碍、听觉障碍、智力落后、脑瘫。当然这说的是最严重的后遗症。普通的ABO溶血，经过积极治疗后大多数是不留有后遗症的。什么是新生儿ABO溶血症新生儿ABO溶血病又称母婴血型不合溶血病，新生儿溶血病，是指母婴血型不合引起的同族免疫性溶血，仅见于胎儿、新生儿期。在该病防治方面的进展已使该病的严重性和预后有了明显改善，但它仍是新生儿期黄疸和贫血的重要原因。约占新生儿溶血性疾病的2/3，为Rh溶的2倍。ABO与Rh溶血的主要区别是溶血的程度较轻，有时与新生儿生理性黄疸难以区别，少见严重的高胆红素血症。其病理生理过程与Rh疾病相同。引起红细胞破坏的抗体是IgG，因IgM和IgA不可能通过胎盘。ABO溶血最多见于母亲为O型，患儿为A型或B型。极少见于患儿与A型或B型的母亲血型不合。其原因是O型母亲可自发地产生抗A和抗B的IgG抗体，而A或B型的母亲产生的抗B或抗A凝集素主要为IgM，此种IgM抗体可与进入母体的胎儿红细胞上的A或B抗原结合使红细胞迅速破坏，使具有A型或B型血型的母亲很少有同种致敏的机会。新生儿溶血症如何预防1、如果母亲过去有不明原因的流产、早产、死胎，或上一胎有新生儿重症黄疸，或确诊为新生儿溶血病者，应警惕本次妊娠有母子血型不合可能，尤其是血型为O型的准妈妈，要做好产前检查。2、如果母亲为“O”型或Rh阴性血，应在怀孕28、32、36周分别到医院检查抗体和抗体浓度，如果抗体为阳性，抗体浓度高则小儿发生溶血病的可能性极大，可给母亲服用退黄中药，生产前12周加服苯巴比妥可减轻新生儿黄疸。3、Rh阴性妇女在娩出Rh阳性婴儿72小时内，肌注抗RhDIgG300g，下次妊娠29周时再肌注300g，效果更好。Rh阴性妇女有流产史者、产前出血、羊膜穿刺后或宫外孕输过Rh阳性血时，应肌注同样剂量。4、发生新生儿溶血病，特别是Rh溶血可能性极大的产妇，如果腹围过度增大，体重增加超过正常，在怀孕35周以后应到医院检查羊水，如果羊水中胆红素浓度含量较高，其他检查说明胎儿肺脏发育成熟时，可在3538时引产，存活率较高。二、 用山羊血清中的IgG来免疫兔子，会获得多少种类型的抗体？答：用山羊的IgG来免疫兔子，产生的是第二抗体即抗体的抗体，二抗是利用免疫球蛋白具有同为抗体和抗原的两重特征中的作为抗原的特性，可刺激不同个体甚至同一个体的B细胞分泌抗Ig的抗体，去免疫异种动物，由异种动物免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。 可以产生同种型：第二抗体是兔抗羊IgG抗体，针对不同抗原的羊IgG抗体，他们的V区不同，所以只能与相应的抗原发生特异性结合，但C区是相同的，均含r链，因此第二抗体与之结合。由于同种型的存在，人们可以用羊的IgG免疫家兔，产生兔抗羊IgG，家兔的这种特异抗体也可称为抗抗体（即二抗）。反之，也可产生羊抗兔IgG。目前生产的这些抗抗体，在临床检测和生物学研究中，都是重要的检测试剂。 可以产生同种异性：同一种属不同个体间Ig分子所具有的不同抗原。 不可以产生独特型：因为独特型是每个Ig分子所特有的抗原特异性标志，其表位又成为独特位，存在于IgV区。三、 禽流感病毒入侵人体后，机体免疫系统的各个组成部分会陆续产生哪些免疫反应来杀灭病毒？ 答：当禽流感入侵机体时，机体会从三方面对其作出反应。一、免疫系统是生物体内一个能辨识出“非自体物质”（通常是外来的病菌）、从而将之消灭或排除的整体工程之统称。它能从自身的细胞或组织辨识出非自体物质（小从病毒，大至寄生虫）。所有植物与动物都具有先天免疫系统。人体内的免疫系统是人体抵御病原菌侵犯最重要的保卫系统。这个系统由免疫器官（骨髓、胸腺、脾脏、淋巴结、扁桃体、小肠集合淋巴结、阑尾等）、免疫细胞（淋巴细胞、单核吞噬细胞、中性粒细胞、嗜碱粒细胞、嗜酸粒细胞、肥大细胞、血小板等），以及免疫分子（补体、免疫球蛋白、干扰素、白细胞介素、肿瘤坏死因子等细胞因子等）组成。免疫系统是机体防卫病原体入侵最有效的武器。 一个细菌进入机体的遭遇:细菌进入机体会受到机体的非特异性免疫和特异性免疫构成的三道防线;第一道防线：首先受到生理外部屏障的阻挡，包括皮肤、粘膜、分泌物以及正常菌群的拮抗作用。 皮肤和粘膜能分泌多种杀菌灭毒物质。例如皮肤的汗腺能分泌乳酸使汗液呈酸性（pH5.2-5.8），不利于细菌生长。皮脂腺分泌的脂肪酸，有杀细菌和真菌作用。不同部位的粘膜腺体能分泌溶菌酶、胃酸、蛋白酶等各种杀菌物质。 人体为避免感染所提供的保护包括：物理屏障、化学屏障及生物性屏障。物理屏障 以肺为例，咳嗽与打喷嚏就能将致病源与刺激物排出呼吸道。眼泪与尿液可以将致病源冲洗出去，而由呼吸道与泌尿生殖道所分泌的黏液则能将微生物给黏附起来。化学屏障 皮肤与呼吸道能分必抗生素胜肽，如-defensins。唾液、眼泪与乳汁中的酵素，如溶解酶与A型磷脂质酶具有抗菌的效果。致病源随食物下肚后，胃中的胃酸与蛋白酶能提供强力的保护作用。生物性屏障 在泌尿生殖道与肠胃道内，共生菌会和入侵的致病菌争抢食物与生存空间，有时它们也会改变所处环境的pH值或铁含量以增加自己的优势那就是生物性屏障。借此，致病菌无法达到足够数量来造成疾病。然而，大部分抗生素只能（非特异地）消灭细菌，而对霉菌完全无效。二、免疫系统的工作过程 当病菌、病毒等致病微生物进入到人体后，免疫系统中的巨噬细胞首先发起进攻，将它们吞噬到“肚子“里（第二道防线：包括受到吞噬细胞的吞噬，补体激活的溶细胞作用，炎症反应及其淋巴结的过滤作用。），然后通过酶的作用，把他们分解成一个个片断，并将这些微生物的片断显现在巨噬细胞的表面，成为抗原，表示自己已经吞噬过入侵的病菌，并让免疫系统中的T细胞知道。固有免疫是生物在长期进化中逐渐形成的，参与的细胞如单核巨噬细胞、树突状细胞、粒细胞、NK细胞和NK T细胞，其识别免疫原虽然不像T细胞和B细胞那样具有高度的特异性，但可通过一类模式识别受体去识别病原微生物表达的称为病原体相关模式分子的结构。三、第三道防线：包括特异性免疫中的细胞免疫和体液免疫;细胞免疫是指机体在细菌（抗原）的刺激下，T细胞发生增殖、分化，进而直接攻击细菌或间接释放一些淋巴因子起到免疫作用。体液免疫是指机体受到细菌（抗原）刺激后，B细胞进行增殖并分化成浆细胞，由它合成抗体并释放到体液中以发挥免疫作用。适应性免疫应答可分为三个阶段：1）识别阶段：T细胞和B细胞分别通过TCR和BCR精确识别抗原，其中T细胞识别的抗原必须由抗原提呈细胞来提呈；2）活化增殖阶段：识别抗原后的淋巴细胞在协同刺激分子的参与下，发生细胞的活化、增殖、分化，产生效应细胞（如杀伤性T细胞）、效应分子（如抗体、细胞因子）和记忆细胞； 3）效应阶段：由效应细胞和效应分子清除抗原。当第一次的感染被抑制住以后，免疫系统会把这种致病微生物的所有过程用具的记录下来。如果人体再次受到同样的致病微生物入侵，免疫系统已经清楚地知道该怎样对付他们，并能够很容易、很准确、很迅速的作出反应，将入侵之地消灭掉。四、 如果要筹备一间承担简单免疫学实验的实验室，需要购买哪些器材？他们的用途是什么？答：MJ -梯度 PCR 仪：用于目的基因的扩增，类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物,由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成。 Ika 磁力搅拌器：应用样品溶解、培养基或化学试剂配制以及滴定试验等。磁力搅拌器适用于粘稠度不是很大的液体或者固液混合物的混匀操作。一般的具有搅拌，和加热两个作用。（1）、使反应物混合均匀，使温度均匀，（2）、在一个密闭的容器中加热，需要防止暴沸，例如在蒸馏过程中，可以加入沸石，也可以用磁力搅拌器，（3）、加快反应速度，或者蒸发速度，缩短时间。磁力搅拌器利用磁性物质同性相斥的特性，通过不断变换基座的两端的极性来推动磁性搅拌仔转动，通过磁性搅拌子的转动带动样本旋转，使样本均匀混合；通过底部温度控制板对样本加热，配合磁性搅拌子的旋转使样本均匀受热，达到指定的温度；通过加热功率调节，使升温速度可控，以适用更广阔的样本处理过程。 TECAN荧光-酶标仪：可广泛应用于低紫外区的DNA、RNA定量及纯度分析（A260/A280）和蛋白定量（A280/BCA/Braflod/Lowery），酶活、酶动力学检测，酶联免疫测定（ELISAs），细胞增殖与毒性分析，细胞凋亡检测（MTT），报告基因检测及G蛋白偶联受体分析（GPCR）等；血液学检验 血小板相关抗体的检验 PAIgA、PAIgG、PAIgM；D-二聚体的测定 D-Dimer；血清纤维蛋白降解产物的测定 FDP；三碘甲腺原氨酸、四碘甲腺原氨酸测定 T3、T4；免疫学检验 C反应蛋白的测定 CRP；免疫球蛋白的测定 IgD、IgE；循环免疫复合物的测定 CIC；传染病免疫学检验；甲肝血清学的检测；抗HAV-IgM乙肝血清学的检测 两对半；丙肝血清学的检测 抗HAV-IgG、抗HCV-IgM；丁肝血清学的检测 抗HDV-IgG、抗HDV-IgM；戊肝血清学的检测 抗HEV-IgG。 蠕动泵：蠕动泵在小体积流体分配和计量方面具有良好的重复性精度，无需安装任何阙，消除了流体常见的阻塞及虹吸现象。实验室的应用场合有：细胞组织输送、标本脱色、灌注、液体色谱分析以及酸性或碱性溶液输送。作为容积式泵，具有计量功能，一个产品的计量效果如何是要看泵的设计原理，蠕动泵是用滚轮挤压泵管，所以精度取决于泵管内径大小及电机的精度。在小流量范围内具有很好的计量效果。 Thermo 自动洗板机：洗板机是专门清洗酶标板的，一般和酶标仪配套使用。（1）、洗板机具备微孔板底部冲洗和两点吸液的功能。（2）、具有可拆卸式标板托盘，便於托盘的清洁和消毒功能。（3）、自动冲洗管路，防止了在使用中因洗液结晶造成的堵塞。（4）、全中文作业系统，操作简单明瞭，10分钟的培训就可学会。（5）、洗板机具备清洗头五种位置可编程调节功能，适用各种板型。（6）、洗板机具有键盘直接选取条清洗功能,可单排或任意组合清洗。（7）、洗板机是采用国际上最先进的无正负压技术开发的新型洗板机。（8）、避免了正负压所带来的麻烦，使用的轻松、省时、省力。（9）、洗板机是采用独特的液路及其清洗流程设计并有效的防止溢流现象。（10）、内置有100组洗板程式,可修改并自动存储,满足多种洗板要求。研究室的酶标板清洗工作。 Forma 2级生物安全柜：为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物。 Eppendorf 台式离心机：台式离心机是利用离心力，分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械。台式离心机主要用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开；或将乳浊液中两种密度不同，又互不相溶的液体分开(例如从牛奶中分离出奶油)；它也可用于排除湿固体中的液体，例如用洗衣机甩干湿衣服；特殊的超速管式分离机还可分离不同密度的气体混合物；利用不同密度或粒度的固体颗粒在液体中沉降速度不同的特点，有的沉降台式离心机还可对固体颗粒按密度或粒度进行分级。 超净工作台：这是一种供单人操作的通用型局部净化设备，气流形式为垂直层流，它可造就局部高清洁度空气环境，是一种提供局部无尘无菌工作环境的单向流型空气净化设备。净化工作台用途：广泛适用于医药卫生、生物制药、食品、医学科学实验、光学、电子、无菌室实验、无菌微生物检验、植物组培接种等需要局部洁净无菌工作环境的科研和生产部门。也可连接成装配生产线具有低噪声、可移动性等优点。它是一种提供局部高洁净度工作环境通用性较强的空气净化设备,它的使用对改善工艺条件,提高产品质量和增大成品率均有良好效果。IEC 离心机当含有细小颗粒的悬浮液静置不动时，由于重力场的作用使得悬浮的颗粒逐渐下沉。粒子越重，下沉越快，反之密度比液体小的粒子就会上浮。微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态和密度有关，并且又与重力场的强度及液体的粘度有关。象红血球大小的颗粒，直径为数微米，就可以在通常重力作用下观察到它们的沉降过程。 Forma CO2 培养箱：其广泛应用于细胞、组织培养和某些特殊微生物的培养，常见于细胞动力学研究、哺乳动物细胞分泌物的收集、各种物理、化学因素的致癌或毒理效应、抗原的研究和生产、培养杂交瘤细胞生产抗体、体外授精（IVF）、干细胞、组织工程、药物筛选等研究领域。Millipore切向超滤系统：蛋白质、肽、或核酸（DNA、RNA、寡核苷酸）的浓缩和脱盐；从澄清后的细胞培养介质中回收抗体或重组蛋白质；处理对于金属敏感的酶和分子；分离不同尺寸的生物分子；浓缩病毒或基因治疗载体；柱层析前的样本制备；凝胶过滤后的样本浓缩；去除水、缓冲液、介质溶液中的致热原。 NBS 7 升发酵罐：可加热、冷却、保温。设计有温度控制系统，对维持发酵温度及发酵产量有好提高。对于糖蜜、水解糖、蔗糖等固形物含量少的培养基，采用气升式发酵罐更有利。该设备可广泛用于抗生素、氨基酸、酶制剂、维生素、有机酸等好氧性发酵过程。发酵所必需的空气在静态混合元件内外上下流动，带动发酵液循环，促进气-液充分混合。数字凝胶成像系统：蛋白质、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分离纯化结果作定性分析。 Forma -80 冰箱:可用于保存药物、疫苗、酶、激素、干细胞、血小板、移植的皮肤以及从人体抽取的标本、植物种子的种质库、基因克隆库和一些重要的生物和化学试剂等。 Millipore纯水仪取代蒸馏水器和离子交换装置的所有用途，为实验室生产高纯稳定的用水。微生物培养基制备、缓冲液制备、水栽培、化学或生化试剂生产、作为设备的供水、清洗机、全自动生化仪、免疫分析仪、恒温恒湿箱、增湿机、老化仪、氢气发生器、作为Milli-Q超纯水系统的进水。 倒置荧光显微镜：包括一般荧光染色和免疫荧光染色方法,荧光染色方法可以显示细胞内的各种 成份,特别是对细胞内的两种核酸(DNA或RNA)及酸性粘多糖有较强的特异性,所以荧光染色法可以作为一种良好的细胞化学方法.免疫荧光方法是把免疫学技术和荧光染色结合起来一种方法,它具有免疫学的特异性和荧光方法的敏感性,作为一种研究方法或实验手段,荧光显微镜广泛地应用于医学领域内各种基础理论研究和临床诊断,如组织细胞学,微生物学,寄生虫学,病理学的研究以及自身免疫病诊断中得到了广泛应用. 组织匀浆器：动、植物组织及细菌、真菌等的破碎、裂解，以利于DNA/RNA、蛋白质的分离提取，小型研磨管/杵适合实验室微量生物样品，UNCon紫外分光光度计：测共轭双键这种不饱和度是一种应用，还可根据待测物对特定波长的吸收强度，与浓度成正比的关系，进行定性分析。一般待测物中含有苯环或共轭体系的化合物时做紫外可见分光光度计可以定性，而且很方便。能大体判断化合物的共轭结构（1）、定性分析：判断共轭关系及某些官能团。如在（200400）nm之间无吸收峰，说明该未知物无共轭关系，且不会是醛、酮，很可能是一个饱和化合物。（2）、异构体的判断：如乙酰乙酸乙酯存在酮-烯醇互变异构体。酮式没有共轭双键，在204nm处有弱吸收；烯醇式有共轭双键，在245nm处有强吸收。故可根据它们的紫外吸收光谱可判断其存在与否。（3）、纯度检查：例如，如果一化合物在紫外区没有吸收峰，而其中的杂质有较强的吸收，就可方便检出该化全物中的痕量杂质。（4）、定量分析：测定步骤与可见光分光光度计相同。