抗核抗体(免疫荧光法)PPT课件.ppt

ANA,南京中医药大学沭阳附属医院风湿免疫科孙助民,1,抗核抗体：是指抗细胞核成分抗体的总称，一般大部分风湿免疫病都呈现抗核抗体阳性，是初筛项目。检验方法：间接免疫荧光法和ELISA,ELISA：应用整个细胞核、核抽取物、混合物或纯化从组核蛋白。间接免疫荧光法：底物：初用鼠肝或肾切片；但人贴壁细胞系的Hep-2（人喉癌）细胞最适合。优势：可以看出核型与滴度。,2,IFANA,滴度：1:320时正常人阳性率3.3%1:40时正常人阳性率31.7%指南：1:80有临床意义。,核型：颗粒型均质型核仁型着丝点型核膜型核点型胞浆型其他型,3,颗粒型,与此型相关的抗体为ENA颗粒型则可能是各种自身免疫性结缔组织病。,抗Sm抗体：该抗体是ANA中的粗颗粒型，通常伴随抗U1RNP抗体而出现抗SSA（Ro）抗体和抗SSB（La）抗体：此两种抗体是ANA中的细颗粒型。,4,均质型,与抗组蛋白，AnuAanti-dsDNA相关均质型可能是SLE或药物性狼疮等；抗dsDNA抗体：该抗体可能是ANA中的均质型或是ANA阴性。最近研究发现，也可能是颗粒型或核仁型。,5,.,抗Scl-70、抗RNA聚合酶、抗PM-Scl该抗体是ANA中的核仁型，其靶抗原是拓扑异构酶。该抗体是硬皮病弥漫型较为特异的抗体，并常预示着预后不良。此外该抗体也可出现与多发性肌炎、IgA肾病等患者。抗原纤维蛋白抗体、抗PM-SCL抗体和抗RNA多聚酶抗体：此三者抗体均多为ANA中的核仁型。抗原纤维蛋白抗体的靶抗原是U3nRNP，抗PM-SCL抗体的靶抗原是核仁中的颗粒成分，抗RNA多聚酶抗体是RNA多聚酶和。此三种抗体在硬皮病中亦较为常见，亦可见于多发性肌炎等疾病。,6,核仁型,与核内的核糖体有关抗Scl-70、抗RNA聚合酶、抗PM-Scl,该抗体是ANA中的核仁型，其靶抗原是拓扑异构酶。该抗体是硬皮病弥漫型较为特异的抗体，并常预示着预后不良。此外该抗体也可出现与多发性肌炎、IgA肾病等患者。抗原纤维蛋白抗体、抗PM-SCL抗体和抗RNA多聚酶抗体：此三者抗体均多为ANA中的核仁型。抗原纤维蛋白抗体的靶抗原是U3nRNP，抗PM-SCL抗体的靶抗原是核仁中的颗粒成分，抗RNA多聚酶抗体是RNA多聚酶和。此三种抗体在硬皮病中亦较为常见，亦可见于多发性肌炎等疾病。,7,着丝点型,须组织培养细胞为底物，染色特点为分裂象的细胞核，核膜消失，染色体向两端整齐排列，着丝点部位染荧光。着丝点型可能是硬皮病的局限型，也可能是PBC抗着丝点抗体：其靶抗原是着丝点蛋白CENP-A、CENP-B和CENP-C。该抗体与硬皮病局限型密切相关，患者常表现为CREST综合征，即钙化症、雷诺现象、食管运动障碍、硬指（趾）症及毛细血管扩张。该抗体在PBC中亦较为常见，可以为PBC提供预后信息。此外，该抗体还见于SLE等疾病。,8,核膜型,抗ds-DNA,抗gp210、抗核孔复合物又称抗核周因子抗体，靶抗原是核孔复合物（包括gp210和核孔蛋白p62）和板层素B受体。该抗体在PBC中亦具有较高的阳性率，此外抗板层素B受体抗体也可见于自身免疫性肝炎、抗磷脂综合征及SLE等。抗gp210抗体和核孔蛋白p62抗体对于判断PBC预后具有重要意义，前者阳性常提示PBC有向肝衰竭发展的危险性。,9,胞浆型,抗线粒体抗体（AMA）：其靶抗原是线粒体内、外膜蛋白，目前共发现9种亚型（M1-M9）。该抗体是PBC敏感而特异的抗体，敏感性和特异性均可达到90%以上。M2、M4和M9与PBC关系密切，M2型更为特异，M4型常与M2并存，而M9型阳性常提示患者处于PBC的早期。,抗肌动蛋白抗体：其靶抗原为肌动蛋白、原肌球蛋白等多种细胞骨架成分。该抗体多见于型自身免疫性肝炎。也偶见于病毒性肝炎、PBC、炎症性肠病等。抗Jo-1抗体：其靶抗原为组氨酰-tRNA合成酶。该抗体多见于多发性肌炎（常伴有肺间质纤维化）。抗核糖体抗体及核糖体P蛋白抗体：是SLE的特异性抗体。,10,核点型,分少核点型（1-5）和多核点型（5-20），前者靶抗原是p80盘曲蛋白，后者靶抗原是Sp100和PML。