凝血试验原理及相关问题(朱）.doc

凝血试验原理及相关问题一 功能测定法-以出现凝固或纤维蛋白为终点1. 全血凝固时间-凝血时间（CT，最早的凝血试验）1) 试管法（Lee and White, 1900）2) 原理、方法、影响因素，评价2. 活化的凝血时间（ACT），加入活化剂-硅藻土，加强接触活化，很少用。3. 复钙试验（再钙化试验） 4. 凝血酶原时间（PT，一步法）1) 名称（定义）-并非加入或测定凝血酶原，而是检测包括II，V，VII，X和纤维蛋白原（外源和共同途径）在内的过筛试验。2) 测定原理-加入组织因子的复钙时间 3) 组织因子的特性及来源，对相关因子的敏感性及反映敏感性的指标ISI。4) 方法标准化-原理及操作。#手工法：是参考方法，一切功能法测定的基础，是倾斜试管法（tilt-tube），也可用平皿（或试管）挑丝法。（本院创新的终点指示物法）#仪器法： 钩丝法-原理、评价 浊度法-原理、影响因素及评价 磁珠法-原理、评价 仪器要与试剂匹配，仪器与仪器间有相当大差异。5）用于口服抗凝药时，要报INR的原因：不同ISI的试剂，尽管PT秒数相同，但反映敏感性的INR可相差很大。6）血中大量肝素存在对本试验有影响。5部分凝血活酶时间（PTT）和活化的部分凝血活酶时间（APTT）1) 名称来源，定义（为何不用KPTT的原因）：所谓部分凝血活酶其实就是脑磷脂-血小板的替代物，用于PPP中代替血小板。2) 测定原理-加了活化剂及磷脂的复钙试验。3) 用于测定内源凝血途径的过筛试验。4) 方法标准化问题：目前没有类似ISI的敏感指标（但试剂之间敏感性确有差异）。5) 一定要用PPP，标本要尽快（2小时之内）测定（因为V、VIII因子不稳定，PT也一样）。测定中要处处考虑到，例如37保温及活化时间也要控制，不要太久。6) 手工法和仪器法与PT同，方法标准化。 7) 用于肝素治疗中控制剂量的指标，十分有用（类似PT用于口服抗凝药的监测）8) 本法完全可以取代凝血时间（CT），且较CT更好。6凝血酶时间1) 名称及定义 2) 主要用于抗凝物（主要是肝素）的检测和纤维蛋白原测定。临床应用不多。但有鉴别作用。即当PT，APTT延长时，先用TT排除血中的抗凝物质的存在。3) 测定方法及注意点见下述纤维蛋白原的测定7纤维蛋白原的测定 1) 方法很多，简单评价，特别是由PT推算的方法2) 为何要选用Clauss法作为常规的方法？3) Clauss法的原理 4) 当前在我国推行Clauss法的难点 凝血酶问题 标准品问题 方法问题 本院的一些改进简介8各种凝血因子缺乏的确证试验-广义的纠正试验 原理，方法及评价二 免疫学测定法1 免疫学测定法的基本原理2 几种免疫学测定法简介 浊度法，免疫扩散和火箭电泳法，胶乳凝集法，ELISA，放免等。 3 评价：优点，局限性，影响因素，免疫学法与功能法可能不一致。4 有些仪器可用浊度法或ELISA测定，但大部分要用手工测定。 三 生化测定方法 原理简介：1 蛋白水解酶-蛋白酶2 天然的酶抑制物3 丝氨酸蛋白酶及其酶切位点-精氨酸（Arg）和赖氨酸（Lys）4 人工合成带色原的底物作用原理（见图一） 5 方法应用及评价 四. 关于出血时间问题 1. 主要用于测定血小板功能和数量，后者意义不大，因为血小板计数已列入血常规（仪器法），而且BT对血小板数目不敏感。2. 不宜用于外科手术前预测出血，但方法仍是有用的。3. Duk