LAENNEC基础文献集1.doc

LAENNEC的基础株式会社日本生物制剂目次前言2LAENNEC概要2LAENNEC的特点2LAENNEC的基础3LAENNEC临床4LAENNEC的毒性实验5久留米大学医学部 临床病理研究所山本敏嗣西 克朗青木晴惠LAENNEC的一般药理作用7久留米大学医学部 临床病理研究所青木晴惠 黄志 良 吉村纯平LAENNEC对CCl4肝障碍的影响10东京医科大学药理学教室(主任：渋谷教授)阪本浩二笠原多嘉子三上胜夫LAENNEC对大白鼠实验性慢性肝障碍的影响18东京医科大学药理学教室坂本 浩二笠原 多嘉子小林 正朗 西村 忠 典 文献集发行所株式会社日本生物制剂東京都渋谷区富谷丁目44番号译者：关历兵前言所谓肝硬化、慢性肝炎的积极治疗方法，至今尚未确立。因此，对此类疾病的治疗还限定在以护肝、抑制疾病发展为目标的状态下。即为抑制肝脏的炎症活动性，使其处于抑制状态。奥村先生说，从慢性肝炎到肝硬化的症状发展过程中，其主要所见是肝细胞的坏死。现在对此进行证明的最好临床检查法，既进行血清Abderhalden的测定。(内科29、1043、1972) 因此，认为降低増高了的GOT、GPT値而使其得到改善是有效的治疗方法。应用这种治疗方法有助于减少肝细胞的坏死，并能阻止病情的进一歩发展。LAENNEC是由肝脏研究会的上田先生等在严密计划的基础上，根据实施了的Cross-over法所得的Double-bilnd Test结果，确认了其对GOT、GPT値有明显的改善作用，故认为LAENNEC是对慢性肝疾患有治疗价値的药剂。LAENNEC概要成分LAENNEC是把胎盘经Acetone脱脂后用盐酸加水分解的液体。其中含有各种氨基酸，其安瓶(ml)中含有112mg水溶性物质。适 应 症改善慢性肝脏病的肝功能用法用量通常是日次安瓶，皮下或者肌肉注射。根据不同的症状可以日注射次。注意事项 本剂不可用于静脉注射。 使用中偶可出现恶寒、发热、发疹、目眩、胸闷等过敏症状。 长期连续注射时，偶可出现注射部位的局部硬结。贮存方法置于避光、阴凉处保管。有効期限一年LAENNEC的特点 肝功能检查値的改善根据Double-blind Test可以确认，LAENNEC对肝功能检查値特別是对血清Abderhalden活性値有明显的改善作用。 抗脂肝作用LAENNEC具有抗脂肝的作用，可以减少脂肪的沉着和改善肝细胞的脂肪变性。 肝糖原沉着作用肝糖原的増加能増强肝脏的抵抗力，促进肝细胞的再生，有助于肝细胞的机能増强。 组织呼吸賦活作用LAENNEC能促进组织呼吸，増进组织的新陈代谢。 肝实质的再生促进作用LAENNEC具有促进肝实质细胞修复的作用，而且在改善肝实质恢复的同时，还能吸收増殖的间质结缔组织使肝功能恢复正常。LAENNEC的基础化学a. 性状LAENNEC是微黄透明的液体，比重1.0431.027（15），pH値5.56.5。b. 氨基酸将LAENNEC中含有的氨基酸用氨基酸自动分析机进行TLC分析的结果，LAENNEC中的氨基酸含量约35.7mg/ml，并确认了其中含有18种氨基酸。c. 穏定性把LAENNEC置于室内的散乱光线、冷暗处、40、60、灭菌灯下30cm、沸水中、气压120等种条件下放置一定的时间后、测定其pH、Amino natrogen、总H2量、氨基酸组成、吸光度等五项値。其结果，pH、Amino nitrogen和总H2量几乎没有经时变化，在高温下可见有经时性的着色倾向。d. 抗原性以USP的Protein Hydrolysate Injection中的Antigenicity Test为基准，选用体重为300400g的雄性土抜鼠進行实验的结果，LAENNEC的致敏组和对照组注射時和注射后均未見異常。毒性No实验动物给药方法给药量(ml/kg)给药期間结果急性毒性小鼠大白鼠腹腔内注射腹腔内注射1020401510无一只死亡，亦未见任何中毒症状，因为小鼠40ml/kg和大白鼠10ml/kg的腹腔内注射量已是极量，所以未能再増量进行，故50未能确定。亚急性慢性毒性大白鼠腹腔内注射0. 51. 05.010三個月和六個月作为肝功能指针的GOT.GPT値，各组之间均无明显的差异。此外，未见任何中毒性变化。无一例死亡。胎仔试验妊娠小鼠筋肉注射皮下注射3.3(人体最大量的80倍)0.8(20倍)20(500倍)5(125倍)从胎齢第天开始持续六天着床数、生仔数、吸收胚数、性比、生仔平均体重、平均体长和尾长等，筋肉注射和皮下注射均未見異常药理作用a. 抗脂肝作用给体重约为150g的大白鼠以CCl40.2ml/kg的量进行连续天皮下注射，致大白鼠于急性肝障碍，然后用LAENNEC1.2ml/kg及3.6ml/kg进行连续天的皮下注射并观察其反应。观察认为，在给药CCl4之前给药LAENNEC的前处置组中、1.2ml/kg的量使肝重体重明显降低，3.6ml/kg的量使Total Lipid、肝Total Cholesterol明显降低。在给药CCl4之后给药LAENNEC的后处置组中，3.6ml/kg的量仍使肝小叶构造保持在良好的状态。b. 纤維増生抑制作用给雄性小鼠CCl41ml/kg的量进行连续12周的皮下注射，导致小鼠于实验性的慢性肝障碍，然后将LAENNEC 0.54ml在CCl4给药期的后周同时给药(同时给药组)或者在给药CCl4结束后给药周(后给药组)，分别进行了周次皮下注射。观察认为，同时给药组有轻度的细胞障碍，纤维増生不明显，小叶再生也不明确，生化学性的所见有改善倾向。后给药组纤维増生被抑制，小叶再生几乎无所见。c. 肝实质再生促進作用将体重约150g的雄性小鼠的肝脏部分切除，切除后开始给与LAENNEC 0.54ml(3.6ml/kg)周次皮下注射，分别于切除周后、周后、周后进行了有关肝实质再生能力的检查，第周的检查可见肝脏脂肪代谢亢进，第周的检查结果也相同。第周的体重比对照组加重，显而易见，肝实质再生増加了肝脏的重量。d. 其他的药理作用采用小鼠、大白鼠、家兔等动物，研究了LAENNEC对中枢神经繋统、呼吸、血压、心脏、末稍血管等的作用，其结果未产生任何影响。LAENNEC临床 双盲试验的比較以肝硬化、慢性肝炎为对象，在全国15所設施实行了124例用Cross-over法的Double-blindTest測定。其结果，LAENNEC的应用使血清Abderhalden(GOT,GPT)的活性値得到了明显的改善，而且其他的临床检查结果也有改善的傾向。因此，LAENNEC得到的评价是：其完全可以作为降低肝硬化、慢性肝炎等慢性肝疾患Abderhalden的药物，应用于临床治疗。 一般临床作用一般临床试验是在全国17所设施中进行的。其效果判定是根据自觉症状、他觉症状、肝功能检查结果及组织像等进行综合性的判定，以显效、有效、好转作为有效的症例统计出其有效率。总结上述结果，肝硬化有效率为68.89(175/254)，慢性肝炎有效率为81.37(201/247)。 副作用进行双盲试验的144例中，有例在LAENNEC给药期间出现了注射部位的局部皮疹，为此停止了投药。一般临床试验的总数中，报告有12例出现了副作用，频率为7.74。症状为注射部位的疼痛、硬结以及发红、发疹等，投药停止后症状逐渐消失。LAENNEC的毒性实验久留米大学医学部 临床病理研究所山本敏嗣 西 克朗 青木靖惠急性毒性实验小鼠将60只体重1820g的小鼠(雄30只、雌30只)分为组，实验准备结束后给药LAENNEC。分别以0.1ml/10g、0.2ml/10g、0.4ml/10g的量进行腹腔注射。其结果无只死亡，也未出现任何中毒症状。认为再加大剂量亦无意义，所以把0.4ml/10g作为最大剂量，未能作LD50的确定。 大白鼠将60只体重200g左右的大白鼠(雄30只、雌30只)分为组，分别以LAENNEC1ml/kg、5ml/kg、10ml/kg的量进行腹腔注射。其结果和小鼠相同未出现任何中毒症状，也无死亡例。对于大白鼠10ml/kg的量是极量，所以未进行再加大量的实验。因此也未能作LD50的确定。亚急性毒性实验将140只130150g的大白鼠(雄70只、雌70只)分为组，其中组为LAENNEC给药组(0.5ml/kg、1.0ml/kg、5,0ml/kg、10ml/kg)，组为0.9NaCl注射组(1.0ml/kg和10ml/kg)，组为对照组(无投药组)，进行了个月的连续给药(腹腔注射)观察其各种状态的变化。个月后采血、杀死后对各脏器进行了剖检。随生长而体重増加状态的进展正常，但雄鼠的5.0ml/kg和10ml/kgLAENNEC给药组的体重増加略受抑制，雌鼠的各组之间未见差异。红血球数显示稍有増加的倾向，最高値増加了6.3，但是10ml/kgLAENNEC给药组减少了16，即显示出减少的倾向。白血球数也显示増加的倾向，最高値増加了22，但10ml/kgLAENNEC给药组减少了8.1。红细胞压积(Ht)则显示出几乎和红血球数、白血球数完全相应的増加或减少，其变化也在上述结果的范围内。血红蛋白(Hb)値的变化亦在生理变化范围内。但10ml/kgLAENNEC给药组显示出明显的下降。肝功能指针的GOT、GPT値在各组中均未显示出明显的变化。亦未出现认为有可能出现的中毒症状。无例死亡。慢性毒性实验与亚急性毒性实验相同，给组共140只的大白鼠连续注射LAENNEC个月观察其中毒情况，并在个月后进行了血液检查和脏器组织的病理观察。体重増加的状态与亚急性中毒实验同样进展正常，其増加幅度最大的是无投药组，其次是0. 5ml/kg、1.0ml/kgLAENNEC给药组，再次则是10ml/kgLAENNEC给药组。血液检查中，红血球虽显示出増加的倾向，雄鼠的给药组和无投药组相比较10ml/kgLAENNEC给药组显示出明显的差异。雌鼠各组均未显示出明显的差异。白血球虽也显示若干増加倾向，但总体上没有明显的差异。红细胞压积的变化在生理变化范围内，各组之间没有明显的差异。血红蛋白量与无投药组相比，各组虽有若干变化，但除10ml/kgLAENNEC给药组显示明显减少(危险率5)以外，均未见明显的差异。投药个月后测定了GOT、GPT等肝功能检查値，其结果未出现任何认为有可能出现的肝障碍症状，而且无投药组和LAENNEC给药组的平均値也无明显的差异。总结根据上述结果总结出的关于给药LAENNEC所致的影响，通过对雄鼠进行的个月的实验虽可见随发育而増加的体重显示出抑制倾向，但其程度很难说0.5ml/kg和1.0ml/kg的给药组有明显的差异，但比此用量更大的给药组却产生了相当大的抑制作用。雌鼠的差异不太显着。对红血球数、白血球数、红细胞压积、血红蛋白量、GOT、GPT等的影响，均未显示出特别的明显变化。对于一般状态的观察，全部实验的过程中，未出现任何认为有可能出现的中毒症状。关于LD50的应用，虽然给小鼠和大白鼠分别以0.4ml/10g、10ml/kg的量进行了腹腔注射，但其结果也未能确定。急性中毒性和亚急性中毒性的死亡率都是0，慢性毒性实验是0.01(2/140)。LAENNEC的一般药理作用久留米大学医学部 临床病理研究所青木靖惠 黄志 良 吉村纯平对中枢神经繋统的作用1. 对自發运动的作用用奏子十字光路自发运动测定装置，将标准管理下的LAENNEC无投药对照组的只小鼠和只为一组的LAENNEC 0.5ml/kg给药组的三组共18只小鼠，分别再持续给药一周LAENNEC 1.0ml/kg，日次。每次把各组的只分为一组装入笼中，取10分钟的积累统计値进行比较。总结其结果，对照组与给药组之间，其运动特别是在自发运动上未出现任何差异。 对疼痛刺激的作用用56的热板法进行了实验，将小鼠分组和上述自发运动分组配置相同。其结果，与对照组相比较1.0ml/kg给药组未出现明显的差异，而0.5ml/kg给药组则明显地显示出回避反应延长的现象。 对麻醉持续时间的作用用麻醉剂Hexobarbital Sodium130mg/kg给每组中的各只小鼠(雄、雌鼠各只)进行腹腔注射，通过测定头部正向反射的出现时间和到下次反射重新出现的时间，求得麻醉持续时间。分别将LAENNEC0.5ml/kg、1.0ml/kg和5.0ml/kg的给药各组，给药小时后按上述方法进行了处置，将其麻醉持续时间与对照组进行比较。其结果，标本的误差很大，单纯的平均値比较接近，但无法定论两者之间是否有差异。 肌肉松弛作用试用了家兔Head-drop Test。根据对运动神经肌腱的影响来观察肌张力的变化。调制成1.0ml中含有0.15mg/kg的d-Tubodurarine液体，固定于家兔的腹部后，用连接于塑料管的皮下针刺入耳静脉内，准确地以每15秒0.1ml的速度注入。求得至头部也完全倒在地上时的注射次数(为防止呼吸运动停止需准备人工呼吸或Neostig-mine)。只为一组，设置组(包括LAENNEC无投药组、腹腔注射LAENNEC0.5ml/kg、1.0ml/kg、5.0ml/kg组)，给药24小时后将各组和对照组进行Head-drop Test比较。其结果，达到Head-drop的次数，各组之间未出现明显的差异。 抗痉挛作用采用了对家兔的交流电电击法。在动物的两耳根部夹上电极，用交流电50进行约小时(未能引起痉挛的情况下再延长)的电击，至少对只以上家兔的电击时间作出规定，根据由此引起的痉挛型(TF、TE、CT)观察期的出现速度、强度、持续时间及其它。对LAENNEC无投药对照组以及LAENNEC0.5ml/kg、1.0ml/kg、5.0ml/kg腹腔注射组的三组，分别试行电击法进行了比较。给药的三组和对照组都呈现了近似的时间、持续型和强度，故认为LAENNEC无抗痉挛作用。 对体温的影响用铜制的恒温电热直肠用电极插入家兔的直肠，用精密级电位差计、返照检流计所测得的零位测定値的温度换算法来求得体温。测定体位采取横位，顺应时间分以上。分别取LAENNEC无投药对照组、LAENNEC0.5ml/kg、1.0ml/kg、5.0ml/kg组各只的组(全部雄鼠)，其给药方法是每日在将要给药之前于腹腔内进行，测定时间为每周次持续周。所得的平均値，对照组38.200.24、1.0ml/kg组38.500.32、5.0ml/kg组38.400.44、10ml/kg组38.700.22。与对照组相比较，未显示出特别的明显差异。对呼吸及血压的作用将无麻醉的健康正常家兔(约kg)背位固定后在颈部进行正中切开，使气管、左总动脉剥离暴露，将气管插管插入Marey的气鼓，结扎颈动脉的头侧，再将插入动脉的充满肝素的动脉插管连接于描画水银测压计。此外再暴露出一侧股静脉，用连接塑料管的注射器，分别给药生理盐水(0.85)、LAENNEC 0.05ml、0.1ml、0.2ml、0.5ml。0.05ml静脉注射后血压稍有下降，但马上就得以恢复。呼吸振幅在注入分钟左右开始稍稍缩小，但在30分后几乎完全回复到了原来的状态，并且显示了若干増大的倾向。20分钟后再一次追加静脉注射0.05ml，仍然显示出同样的结果而未出现再度増大的反应，再进行反复注射后反而又出现缩小状态。0.1ml/kg静脉注射后血压迅速地下降至30mmHg左右，而且此后仍显示出节段性的持续下降状态。此时的呼吸振幅也显示缩小，但比血压变化出现的时间延遅了。0.20.6ml/kg的给药量出现的反应与上述过程几乎相同，但其变化显着，呼吸振幅的缩小也出现的较早。即0.05ml/kg以下的用量对颈动脉压、呼吸运动几乎无影响。在此以上的用量却显示出相对地抑制作用。此时心电图除显示出波变浅、波下降以外，无其它明显的变化。对摘出癞哈痲心脏的作用给体重约为200g的癞哈痲的摘出心脏用八木灌流法进行了实验观察。在冷却血液用的Ringer液中滴入LAENNEC 0.03ml，经过一过性的减弱期后，可以见到増大近倍的Hebel振幅。0.1ml的滴入比上述过程更加増强，而且此増强的状态持续了很长时间。此现象改用新鲜的Ringer液也未见衰减。1.0ml的滴入过程中，初期明显的减弱，此后也未出现上述的増强现象而显示明显的抑制状态。对植物神经的影响对摘出脏器的作用）肠管在家兔的肠道中用Magnus法，将LAENNEC滴入灌流Tyrode液中进行了实验。LAENNEC 0.1ml的滴入对肠管运动无影响，0.3ml的滴入使肠管稍有收缩，1.0ml的滴入使肠管强烈收缩而且自律运动稍被抑制，改用新鲜的Tyrode液后其运动也难以恢复。在上述的条件下，滴入0.06Atropine 0.2ml时，出现了强烈抑制现象，肠管明显松弛，自律运动受到促进，Resatamine也显示了同样的结果。故可以认为LAENNEC对肠管的作用是Vagotonic样作用。）膀胱按照用于肠管的方法，对健康正常家兔的膀胱体进行了实验观察。可见滴入LAENNEC0.2ml使膀胱收缩，自律运动也受到抑制。 Histamine作用将体重约kg的健康正常无麻醉家兔背位固定，用颈总动脉插管的Marey法进行血压描记。先注射了0.1mg/kg Histamine HCl后出现了血压的一过性上升和继而出现急剧下降约20mmHg的现象，约分钟左右恢复到原来的状态。确认此状态约持续20分钟后将LAENNEC 5ml/kg注入腹腔内，分后出现血压上升，但恢复原来的状态后又再次出现了下降现象。此后约经过90分左右又注入了同量的Histamine，此次血压的上升与初次相比停留在约1/2的程度，继而稍有下降，大约在分以内恢复原状。故LAENNEC此范围内的给药量类似于Histamine的降压抑制作用。局部麻醉作用给家兔施行角膜反射法，并在人的前臂内侧进行皮内注射，均观察60分钟。两者均未显示出LAENNEC的局部麻醉效果。总结关于LAENNEC的一般药理作用，将上述实验的结果总结如下。 LAENNEC不具有使中枢神经繋统的神经活动平衡失调的类似作用。 对呼吸和血压的影响，静脉注射LAENNEC用至0.1ml/kg以上时对血压有抑制作用。其影响程度，对血压的抑制作用大于对呼吸的抑制作用。 对摘出心脏的影响，少量的LAENNEC可使心肌兴奋，大量的应用可使心脏抑制。但认为此抑制作用与心肌和心脏自律中枢的作用性质不同。 对自律神经的影响，LAENNEC具有使肠管平滑肌收缩的作用。如滴入阿托品或Restamin可使其收缩现象立刻缓解。LAENNEC对肠管的收缩作用，认为与副交感神经刺激性物质有关。此外，Histamine的降压作用，在给药histamine之前90分钟给药LAENNEC的结果中可看出，有若干被抑制的现象。东京医科大学杂志31、829、1973LAENNEC对CCl4肝障碍的影响关于抗脂肝作用东京医科大学药理学教室(主任：渋谷健教授)阪本浩二笠原多嘉子三上胜夫序言LAENNEC是以组织疗法为基础的胎盘浆制剂。所谓组织疗法，即把摘出于生物体外的组织在一定的条件下冷藏，以维持在此条件下的生化学反应，据推测组织内可以产生一种被称之为生物原刺激素的物质，以此作为生物体机能増强物质应用于治疗的方法。除了冷藏角膜、皮肤的移植以外，还把胎盘、脏器、血液等作为原料制成组织制剂。有关此应用和作用机制主要是苏联和中国有很多的报道。然而，现在对其本质仍然解释不清，据推测可能是对生物个体抵抗力的増强物质，或是耐热性物质、不被Proteolytic enzymes分解的物质，或是有机酸样物质，或是能产生核酸样的补enzyme物质等。胎盘浆疗法是从稗田教授创制的冷藏胎盘混悬液发展来的。最初使用的是冷藏的满期正常分娩胎盘(包括脐帯)的生理盐水混悬液，为了进一歩提高功效接着又进行了胎盘的胃液素消化，调制成了盐酸加水分解液。可是，根据动物实验得知，由于其中含有组织的分解不完全加水分解物，也有一过性地加重肝障碍的情况3)。为此，又把胎盘用Acetone处理后，在进行胃液素消化以及充分地盐酸加水分解操作的基础上，制成了含胎盘量为W/V(注射用蒸留水)，pH値为6.16.4的胎盘注射液LAENNEC。关于LAENNEC的作用已有论文报告，在临床中可用于肝硬化4)9)、术后腹膜粘连10)等，动物实验中对大白鼠的肝硬化4)11)、脂肪肝3)12)、切除肝再生13)等有效。此次，作为LAENNEC的基础研究的重要环节，将实验了的LAENNEC对急性肝障碍和伴随其发生的脂肪变的作用，按前处理和后处理的检索报告如下。实验方法实验动物是採用固体飼料(日本制)養育的岁齢(体重約90g)的Sprague-Dawley属的雄性大白鼠。将体重养至约150g的大白鼠，以只为组(加上预备的只共只)设置了组。急性肝障碍模型是用CCl40.2ml/kg(10Olive Oil的混合液2.0ml/kg)连续皮下注射作成。实验使用的LAENNEC是人的常用量的10倍(1.2ml/kg)和30倍(3.6ml/kg)的量，进行了连续天的皮下注射。接着把注射了天的CCl4组作为前处置组，相反地把持续给药LAENNEC组作为后处置组。其对照组是用与LAENNEC同量的生理盐水进行的前处置和后处置。各组均在注射完成24小时后(实验第10天)致死，并进行了各项値的检索。检索的项目如下： 体重曲线 肝重体重 对肝脏脂肪代谢的影响1)肝脂质Total Lipids(TL)、Triglyceride(TG)、Phospholipid(PL)、Total Cholesterol(TC)2)血清脂质Total Cholesterol(TC)对Abdrehalden的影响1) 血清Transaminase(GOT、GPT)2) 血清Alkaline Phosphatase(Al-P)肝组织所见实验的第10天将禁食12小时的大白鼠断头致死，取其血液和肝脏。秤量了肝的湿重量后进行了脂质测定并作成组织标本。肝实质的测定采用肝左叶的1/2，用细胞抽溃器除去支持组织后，秤取g(湿重量)，按Bragdon重量法14)抽出脂质。肝TL用Bragdon-Oxidation法14)、肝TG用Fletcher法15)、肝PL用蛋白分离后Fiske-Subbauow法16)、肝TC用Zak的变法17)、分别进行测定。把肝左叶的剰余部分用Fromalin(用磷酸缓冲液将pH値调至7.4)固定后，用Haematoxylin和Sudan进行染色，在光学显微镜下进行了观察。断头时将采取的全血的血清进行分离，用Zak的变法测定血清TC。Abderhalden的测定，GOT、GPT采用Reitman-Frankel法18)(Karmen单位)，Al-P采用Kind-king法19)(King-Armstrong单位)。实验结果 体重曲線前处置法中，体重的増加包括对照组在内未见受到抑制，全组生长正常，而且LAENNEC3.6ml/kg的交付组还显示出体重増加的良好倾向。后处置法中，虽可见CCl4交付组全组的体重増加稍有被抑制倾向，但是此后的LAENNEC交付组和对照组的比较无明显差异，均显示体重増加。 肝重体重前处置法中，对照组的肝重体重的比値较高，LAENNEC交付组可见肝肿大的抑制倾向，而且1.2ml/kg组与对照组比较显示出明显的低下(0.05)(Fig.1)。后处置法中，可见对照组的肝重体重比前处値法稍低，与LAENNEC交付组之间亦未见明显的差异(Fig.2)。 对肝脏脂肪代谢的影响1)肝脂质前处置法中，可见对照组的TL急剧増加，平均约占肝重量的14。其组成几乎全是TG的増加，TC的増加程度居中，PL显示稍稍増加，LAENNEC对此TL的増加显示出抑制作用。1.2ml/kg交付组平均减少了肝重量的约11.5。3.6ml/kg组也同样减少了约9.5，与对照组相比较显示出明显的差异(0.01)。关于TL的组成，3.6ml/kg交付组的TG和TC均可见増加抑制倾向，特别是TC与对照组相比有明显的差异(0.05)。PL的増加也显示被抑制的倾向。1.2ml/kg交付组中肝脂质各组成的増加抑制程度，3.6ml/kg交付组比较轻，未显示出明显的变化(Fig.1)。后处置法中对照组的肝TL显示出轻度的増加，平均约占肝重量的6.8。其组成TC的増加约占一半，PL的増加与前处置的对照组程度相同。LAENNEC交付组中，1.2ml/kg和3.6ml/kg交付组对肝TL的増加均显示稍稍抑制的倾向。其组成TG的増加抑制见于1.2ml/kg组，TC的増加抑制见于3.6ml/kg交付组，PL与对照组几乎相同(Fig.2)。此頁将12頁表插入，再附一頁圖示(附頁不加入頁数之内)。表：原文的12页图：原文的15页直后的页2)血清脂质前处置对照组的血清TC稍有増加。对此LAENNEC1.2ml/kg交付组显示中等程度的増加抑制，3.6ml/kg交付组几乎未显示出任何影响(Fig.1)。后处置对照组血清TC的増加平均约占前处置对照组的1/2。对此LAENNEC交付组几乎未显示出任何影响(Fig.2)。 对Abderhalden的影响1) 血清Transaminase前处置法中，对照组显示GOT値上升、GPT値在正常范围内。与此相比LAENNEC1.2ml/kg交付组的GPT値稍稍超过对照组显示上升，未见抑制现象。GPT値几乎无变化。3.6ml/kg组的GOT上升稍受抑制，GPT値与对照组几乎相同。后处置法中，对照组的GOT値超过前处置对照组显示上升，GPT値也显示轻度上升。对此LAENNEC1.2ml/kg交付组的GOT値显示出稍受抑制，GPT値相比较稍有上升。3.6ml/kg交付组与1.2ml/kg交付组相比显示GOT値的上升受轻度抑制，GPT値也显示稍抑制现象(Fig.3)。2) 血清Alkaline phosphatase前处置法中，对照组可见轻度上升，LAENNEC交付组也几乎显示出相同的値。后处置的对照组与前处置对照组相比，显示轻度上升。此项LAENNEC交付组未出现特别的影响(Fig.3)。 肝组织学的改变从各组选择出生化学变化的中间値及最大値个阶段的肝组织标本，在光学显微镜下进行观察，将其变化的程度按+进行了分类。前处置组中，可见对照组的肝小叶中心部的肝细胞核消失，中心部至中间部的肝细胞空胞变(+)。同样中心部至中间部的脂肪变程度也显示(+)。LAENNEC1.2ml/kg交付组可见肝小叶中心部至中间部的若干个肝细胞核消失，中心部至中间部有空胞为(+)，脂肪变的程度为(+)。3.6ml/kg交付组可见小叶中心部空胞()，中心性的脂肪变呈现(+)(Fig.1)。后处置组中，对照组可见小叶中心至中间部()的空胞以及细胞萎缩(+)。脂肪变呈中心性为()。LAENNEC1.2ml/kg交付组可见小叶中心部空胞()、全体的萎缩像()和中心性的稍不规则的脂肪变()。3.6ml/kg交付组虽可见中心性空胞()和全体的萎缩像，但小叶的构造保持良好，中心部的脂肪变也较少(Fig.2)。设 计 与 总 结对于给大白鼠连续天皮下注射CCl40.2ml/kg所致的急性肝障碍，按照进行了的药物前处置法和后处置法，给以LAENNEC1.2ml/kg、3.6ml/kg连续天皮下注射，并以脂肪变为中心将其对于肝脏的影响进行了检索。本实验所设定的CCl4交付量，选用不能导致肝实质强度坏死而致其成中度脂肪肝的相应量。体重増加的抑制设定在使体重轻度减轻的程度。前处置法中，给对照组连续天皮下注射注射用蒸留水，接着连续注射天CCl4。交付后24小时出现肝脏稍稍肿大，肝的TC平均増加到了肝重量的约14。其组成TG占大部分，TC中度的増加，PL则显示轻度的増加。血清TC显示稍増加的倾向，血清GOT値中度上升，GPT値几乎完全正常，血清Al-P値则显示轻度的上升。此时期的肝脏组织学所见，可见肝小叶中心部的核消失、中心部至中间部(+)程度的空胞变以及中心部至中间部(+)程度的脂肪变。LAENNEC对此的作用在3.6ml/kg交付组中明显的显示出来了。可见到肝肿大稍受抑制，肝TL、肝TC显示出明显的低下，血清TC无明显改变，血清GOT値稍受抑制，血清Al-P値亦无特别的变化。肝组织学所见，虽可见小叶中心性的空胞变()及中心性的脂肪变(+)，但比对照组程度较轻。1.2ml/kg交付组显示出肝肿大明显的抑制，血清GOT値稍高于对照组，其値约在3.6ml/kg交付组和对照组的中间。后处置法中，对照组的连续天CCl4交付后，保持此状态天以观察交付结束后的自然经过状态。此时肝脏虽仍见肿大，但肝TL显示降低，占肝重量的约6.8。其组成TC多于TG，PL减少而且未能恢复至正常域。血清TC呈现若干低下现象。血清仍然呈现GOT値中度上升，GPT値几乎完全正常，血清Al-P値稍稍低下的现象。肝组织学的所见，显示出肝小叶中心部至中间部()程度的空胞变和()程度的中心性脂肪变，细胞萎缩程度(+)。此项的LAENNEC交付组中，1.2ml/kg交付组除肝TG显示正常以外，未能显示出明确的作用。肝组织学的所见中，3.6ml/kg交付组的肝小叶构造保持了良好的状态。上述的前处置法中，LAENNEC显示出一定程度的抗脂肝作用。然而，后处置法中由于CCl4的交付量用至不致于引起肝坏死的程度，CCl4交付后天可见到自然恢复倾向，所以LAENNEC对脂肪肝的治疗作用没有得以明确。CCl4所致脂肪肝的机理，可以说是由于CCl4抑制了肝细胞的蛋白合成，引起作为肝脏脂质运输型的脂蛋白形成障碍，从而导致脂肪肝的发生。细胞体的障碍机理虽尚见明确，但认为可能是由于其可以使CCl4在生体内进行代谢，成为有free radical的CCl3，其作用于高度不饱和的脂肪酸，生成Peroxide脂质，而导致细胞体的机能障碍。胎盘21)在妊娠的某个时期开始转换为胎儿肝脏，参与胎儿物质代谢的调节，并且是可以在10个月间使胚胎发育成500g重的具有复杂形体构造的脏器。其自体代谢旺盛，含有糖(以Glucose为主的Hexosamine、Xylose、Galactose、Rhamnose等)、脂质(据推测含特殊磷脂质)、蛋白质(据推测含有特异蛋白，多为脂蛋白、糖蛋白)、核酸、Enzyme、激素(可产生Chorionic Gonadotropin、Progesterone、Estrogen等，还含有Androgen、Estrogen、ACTH、Melanocyte-stimulating Ho-rmone、Growth Hormone-prolactin复合体、Relaxin、Oxytocin、Vasopressin、Serotonin等)等。关与胎盘浆制剂LAENNEC的作用12)22)，至今的动物实验中3)4)11)13)根据CCl4交付可知具有抑制肝脏的脂肪沉着、吸收CCl4肝硬化増殖产生的结缔组织、改善肝机能、促进肝脏切除后的肝实质再生等作用。此外，对人的肝硬化4)9)也能促进由于病变而増殖的结缔组织的吸收，减少细胞的脂肪沉着，从而得到改善肝机能的结果。有关本次实验见到的具有一定程度的抗脂肪肝作用，若推论其本质必定言及到以胎盘浆疗法为基础的生物原刺激素。然而，对LAENNEC成分的分析过程中，在还不能确定能产生何种物质的现今，仅能根据已知成分和未知物质的综合作用结果进行推测。有关脂肪肝是否可发展成为肝硬化的说法很多，我们虽认为LAENNEC具有一定的抗脂肝作用，但LAENNEC对CCl4连续注射的实验肝硬化将及与怎样的影响，仍要継续进行研究。结论LAENNEC对CCl4的急性肝障碍的作用总结如下。前处置法中，可见1.2ml/kg交付组的肝重体重明显的低下，3.6ml/kg交付组的肝TL、肝TC値明显的低下。与此同时还确认了肝脏组织学的实验结果。后处置法中，生化学的所见与对照组虽未见有明显的差异，但可见到3.6ml/kg交付组的小叶构造保持了良好的状态。文献1) 组织疗法：组织疗法研究所编、青木书店、1954。2) 稗田宪太郎：胎盘浆疗法神经病理学思想、白寿会出版、1955。3) 大本英治、森田辰夫、田中幸夫、井元靖惠、中川漸：胎盘调制液抗脂肝作用、久留米医誌、21,1706、1958。4) 田中正：肝硬变症治疗关实验的研究、久留米医誌、19、459、1956。5) 河瀬修：胎盘浆末期肝硬变症一治验例、久留米医誌、17、97、1954。6) 吉住好夫：人肝硬变症胎盘浆影响、组织再生、1P、1955。7) 内藤晴生：肝硬变胎盘浆影响、久留米医誌、21、477、1958。8) 渡边造見、内藤晴生、森田辰夫、平松一郎、花城清剛：胎盘调制液PP-B肝硬变症対临床的効果、久留米医誌、21、1967、1958。9) 稗田宪太郎：肝硬变症治疗成绩、临床研究、47、258、1970。10） 河瀬修：術后腹膜癒着対胎盘浆影响、久留米医誌、19、2027、1956。11） 一番瀬久：四盐化炭素肝硬变対胎盘浆影响、久留米医誌、20、1612、1957。12） 柿添满喜男：胎盘浆抗脂肝作用关研究、久留米医誌、20、1064、1957。13） 平松一郎：肝脏再生胎盘浆影响、久留米医誌、22、2664、1959。14） 丹羽正治等：临床化学分析、57、1966。15） Flether,M.J.:A colorimetric method for estimating serum triglycerides,Clin. 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Abderhalden1) transaminase(以GOT,GPT,Reiman-Frankel法为基础的比色kit)2) alkaline phosphatase(以Al-P,Kind King法为基础的比色kit)3) leucine aminopeptidase(以LAP,Goldbarg法为基础的比色kit)4) lactic acid dehydrogenase(以LDH,Cabaud Wroblewski法为基础的比色tik)5) 肝脏组织学所見 Haematoxylin-Eosin,Sudan IV,Azan Mallory,Van Gieson,PAS stain.实验结果 体重及肝重体重体重的变化中，CCl4组与正常组比较，w显示明显减少(P0.05),12、17w也显示减少，22w显示明显减少(P0.05)。同时给药组与CCl4组比较，12w显示明显増加(P0.01)，17w也几乎相同。对照组与CCl4组比较，12w显示明显的増加(P0.00