【毕业学位论文】（Word原稿）白术脂溶性成分研究

毕 业 论 文 （本科生） 中文标题 白术脂溶性 成分研究 英文标 题 on 学生姓名 周 丽 指导教师 张占欣 学 院 药学院 专 业 药学 年 级 2008 级 兰州大学教务处 周丽：白术脂溶性成分研究 诚信责任书 本人 郑重声明：本人所呈交的毕业 论文（设计） ，是在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。毕业 论文（设计） 中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、观点等，均已明确注明出处。除文中已经注明引用的内容外，不包含任何其他个人或集体已经发表或在网上发表的论文。 特此声明。 论文作者签名： 日 期： 周丽：白术脂溶性成分研究 I 目录 摘要 . 1 . 2 第一章 前言 . 3 第二章 白术的研究现状（综述） . 4 术相关古籍记载 . 4 术生药研究 . 5 术名称 . 5 术商品名 . 5 术处方名 . 6 术化学成分药理作用 . 6 发油 . 6 糖 . 7 同方法对白术脂溶性成分的研究 . 7 漉法 . 7 临界萃取法 (. 7 蒸气蒸馏法（ . 8 相微萃取法 (. 8 术脂溶性成分种类研究现况 . 8 第三章 实验部分 . 11 验部分 . 11 器 和试剂 . 11 物 来源和鉴定 . 11 验流程 . 11 果与讨论 . 11 合物 1 结构图 . 11 合物结构鉴定 . 12 合 物理 常数和波谱数据 . 12 周丽：白术脂溶性成分研究 考文献 . 13 附录 . 15 致谢 . 16 周丽：白术脂溶性成分研究 1 白术脂溶性 成分研究 作者：周丽 指导教师 ：张占欣 （ 兰州大学 药学院 甘肃省 兰州市 730000) 中文 摘要 目的： 白术 (菊科多年生草本植物。具有健脾益气等功效，用于治疗脾虚少食，胎动不安等症。相关药效 实验表明：白术具有降 血糖、抗凝血、强壮、 利尿、 抗菌等 广泛的药理 作用 。化学成分研究表明，白术中含有倍半萜类化合物。 本文 系统 研究了 白术（ 部 的 脂溶性 化学成分。 方法： 硅胶柱层析（ 制备薄层层析（ 重结晶、 各种现代波谱技术 （ 113。 结果：确定了其中 1 个化合物的结构 。 关键词 ：白术，菊科，化学成分，倍半萜 周丽：白术脂溶性成分研究 2 on 730000) is as a It is as a of in s . a in 00is to as A of . in 113 . of by of 丽：白术脂溶性成分研究 3 第一章 前 言 白术 ( 为菊科 多年生草本 植物。植株 高 最低 30高可达 60肥厚 的根状茎 略呈 现 拳 卷 状。茎 生长 直立，上部 有 分枝。叶互生 。 叶片 3，深裂或上部茎的叶片不分裂，裂片 呈 椭圆形 ， 边缘有刺。 花冠红色， 头状花序 ，有钟状 总苞 ， 略扁的 瘦果 呈现 椭圆形 状 。花期 79 月，果期 8 10。 白术植株在 凉爽 的 气候 下生长良好， 而 高温高湿 的环境里生长受到抑制 。 一般来说， 气温 30 以下时， 白术 植株 的生长 速度随气温升高而 逐步 加快 。 如 果气温升至 30 以上 ，其 生长 则会 受到抑制 。白术的 地下部的生长以 26为最适宜。白术 耐寒 能力比较高 ，在北京能安全越冬 而不会受到冻害 。 除了白术的 苗期 以外，该植物 对土壤 中 水分 的含量 要求 都 不严格 。如此时干旱，幼苗 将会 生长迟缓 。 高温季节 为了防止 病害 情况的发生，应该适当排水 。生长后期，根状茎迅速膨大，这时需保持土壤湿润，如土壤干燥对根状茎膨大有影响。白术对土壤 的 要求 也 不严格， 它在 酸性黏壤土、 偏 碱性的沙质壤土 上都能生存 ， 其中 以排水良好的沙质壤土为好 。 但 是，白术 不 适合 在 盐碱地 和 低洼地 上进行 种植。 白术主要生长 于湖北通城、浙江新 昌 、江西修水 、 湖南平江、天台、东阳、于潜 、 宁呈，利川，河北、山东等省也可以引种栽培 ， 陕西普遍有栽种 。 现今药用白术多 为人工栽培，野生白术数量已甚微。 白术不能连作，种过之地须隔 5 10 年才能再种，其前作以禾本科 作物 为佳，因禾本科作物无白绢病感染（ 如 小麦、玉米、谷子）。 此外， 白芍、花生、萝卜、元参、 等作物不适合与白术 进行轮作， 油菜、白菜、烟草、附子、地黄、番茄等作物 也不适宜与其轮作 。坡度 在 15 度 左右 的阴坡生荒地或撂荒地 是白术的优良 育苗地 ， 其中 以较 为贫瘠的 土地为最佳 ， 因为 过肥的 生长 环境会使 白术苗 的 枝叶过于柔嫩， 使其 抗病力 不强 。 周丽：白术脂溶性成分研究 4 第二章 白术的研究现状 （综述） 术相关古籍记载 药材白术 多 指 菊科植物白术 的干 燥根茎部分 ，在神农本草经译文中被列为中药药材之上品 。除神农本草经外，大量古籍对白术的药用价值都有记载： 本草 纲目 ：“ 在术条下，无苍、白之名。近多用白术治皮间风，止汗消痞，补胃和中，利腰脐间血，通水道，上而皮毛，中而心胃，下而腰脐，在气主气，在血主血。 ” 名医别录 ：“ 味甘，无毒。主治大风在身面，风眩头痛，目泪出，消痰水，逐皮间风水结肿，除心下急满，及霍乱，吐下不止，利腰脐间血，益津液，暖胃，消谷，嗜食。 ” 日华子本草： “ 治一切风疾，五劳七伤，冷气腹胀，补腰膝，消痰，治水气，利小便，止 反胃呕逆，及筋骨弱软，痰癖气块，妇人冷，症瘕，温疾，山岚瘴气，除烦，长肌。 ” 药性论 ：“ 君，味甘，辛，无毒。 能 主大风顽痹，多年气痢，心腹胀痛，破消宿食，开胃，去痰涎，除寒热，止下泄。主面光悦，驻颜，去黑。治水肿胀满，吐呕逆，腹内冷痛，吐泻不住，及胃气虚冷痢。 ” 开宝本草： “ 味苦、甘，温，无毒。主大风在身面，风眩头痛，目泪出，消痰水，逐皮间风水结肿，除心下急满，及霍乱、吐下水止，利腰脐间血，益津液，暖胃，消谷，嗜食。 ” 药类法象： “ 除温益燥，和中益气，利腰脐间血，除胃中热。去诸经之湿，理胃。 ” 汤液本草： “ 气温，味甘。苦而甘温，味厚气薄，阴中阳也，无毒。 ” 本草衍义补遗： “ 本草不分苍、白，议论甚多，四家本草言之误矣。如古方平胃散，苍术为最要之药。衍义为气味辛烈，发汗尤速。又白术味亦微辛，苦而不烈，除湿之功为胜。又有汗则止，无汗则发，与黄芪同功，味亦有辛，能消虚痰。 ” 本草发挥： “ 成聊摄云：脾恶湿，甘先入脾。茯苓、白术之甘，以益脾逐 水。 ” 周丽：白术脂溶性成分研究 5 主治秘诀： “ 气浊，味甘微苦，气味俱薄，浮而升阳也。其用有九：温中一，去脾胃湿二，除脾胃热三，强脾胃进饮食四，和脾胃以生津液五，主 肌热六，治 四肢 困倦，目不欲开，怠惰嗜卧不思饮食七，止渴八，安胎九也。又云：脾胃受热湿，沉困无力，怠惰嗜卧，并去痰，须用白术。饮水多因致伤脾，须用白术、茯苓、猪苓。水泻，须用白术、茯苓、芍药。又云：非白术不能去湿。 ” 药性赋： “ 味甘，气温，无毒。可升可降，阳也。其用有四：利水道，有除湿之功；强脾胃，有进食之效，佐黄芩有安胎之能，君枳实有消痞之妙。 ” 本草新编 ：“ 白术，味甘辛，气温，可升可降，阳中阴也，无毒。 入心、脾、胃、肾、三焦之经。除湿消食，益气强阴，尤利腰脐之气。 有汗能止，无汗能发，实君药而非偏裨 。往往可用一味以成功，世人未知也，吾今泄天地之奇。如人腰疼也，用白术二三两，水煎服，一剂而疼减半，再剂而痛如失矣。夫腰疼乃肾经之症，人未有不信 。” 术生药研究 生药白术 呈现 不规则的 肥厚 团块 状 ， 长 3 13等， 直径 7 白术 表面有瘤状突起及断续的纵皱和沟纹 ，整体呈现 灰黄色或灰棕色， 并且 带 有须根痕 ， 顶端有残留茎基和芽痕。 生药白术 质地 坚硬 而 不易折断，断面 凹凸不平 ， 呈现 黄白色 或 淡棕色 。此外断面 有棕黄色的点状油室散在 。 烘干 的白术 呈现 断角质样， 颜 色较深 ， 有 的具有 裂隙。 白术具有清香 的气味 ， 略尝 之有 甘、微辛 之味 ，嚼之略带黏性 。 有研究表明，白 术炮制前后及不同炮制品中白术内酯 、 的含量 各不相同。其中 炒白术中白术内酯 的含量明显提高 ， 白术内酯 的含量 则 随着炒制程度的不同而 呈现有 规律 的 差异 。 术名称 药用白术又名 于术，冬术，冬白术，浙术，种术，云术，台白术，山蓟，天蓟，山芥，山精，山连，乞力伽，杭白术，广术，杭术，贡术，仙居术，平术 。 术商品名 白术 商品名有 于术 、野于术、烘术、晒术、冬术、徽术、浙白术、种术、平 术等 。 周丽：白术脂溶性成分研究 6 其中，于术 又名于白术、于潜术、烟术 ，其 产于浙江省于潜地区 者品质最优，为地道药材 ；野于术， 又名天生术。为产于浙江省于潜、昌化、天目山一带的野生白术 ；烘术， 霜降 到 立冬期间采挖 的为之 ， 将其 去除残茎及须根，洗净烘干 而成 ；晒术， 又名生晒术 ， 为霜降至立冬之间采挖，去除残茎及须根，洗净晒干 而成的 药材 ；冬术， 又 叫 冬白术 ， 为冬季采挖 ， 拣 选 纤维少 而肥厚 者， 蒸至半熟 后晒干 而成的 药材 ； 徽术 ， 该种类数 产于安徽省歙县 (旧时徽州 )者 品质 为佳 ；浙白术，为产于浙江者；种术，为产于安徽者； 平术 ， 为产于湖南平江者 。 术处方名 白术 处方名 有 白术 、 于术 、 生白术 、 炒白术 、 土白术 、 土炒白术 、 焦 白术等 。 处方中写白术、于术 是 指生白术 。生白术 为原药材去除杂质 后泡 软切片 ， 生用入药者 。 炒白术又名炙白术 ， 其 为白术片 与 麸 同 炒至 呈现 浅黄色 再 入药者 。炒白术的 健脾和中功效 比生白术有所 增强 ； 土白术又名土炒白术 ， 为白木片用灶心土细粉炒至外面挂有土色，取出摊晾入药者 ，其 健脾和胃、止泻止呕作用增强 ；焦白术又名 白术炭 、焦术 ， 为白术片用武火炒至外 黑 里黄 再 取出 晾 干 入药者 ， 其收敛止泻作用 相对有所 增强 。 白术因其优良的药用价值为 历版 中国药典所收载 。现今由于其在临床上已有较广泛的应用，故而国内外对其展开了较多的研究。 术 化学成分 药理作用 发油 白术 活性成分主要为挥发油。白术所含挥发油不仅可通过提高巨噬细胞的活性从而增强机体非特异性免疫功能，达到抑制癌细胞的生长目的 1，还具有明显抗消化道肿瘤作用 2， 对小鼠肉瘤 移植性肿瘤肝癌 显著抑制作用，对艾氏腹水癌 (具有显著的生命延长作用 3；此外，它还有抑制肠管自发运动等作用 4。 白术挥发油中所含的白术内酯类成分 ， 如白术内酯 I、 其是白术内酯 I，具有调节胃肠道功能和促进营养物质吸引的功能 5。不但如此， 这三种白术内酯还具有抗炎、抗肿瘤功效 6， 7。 李伟等 8以 家兔为实验对象，测量其离 体肠管的运动、小肠的吸收状况以及唾液淀粉酶活性 ， 从而 对白术 的健脾 成分进 周丽：白术脂溶性成分研究 7 行 了筛选。实验 表明，白术内酯 进其小肠 吸 收和增强唾液淀粉酶活性，从而证明 白术内酯 昳 等 9将白术内酯 经过一段时间的药物治疗后，检测发现，患者的 上臂肌肉周径 ( 体力 和 食 欲 状况 都有显著改善。此外患者的肿瘤因子水平也有降低。 双白术内酯对豚鼠离体心房肌有负性频率和负性肌力作用 10。 此外，刘洋 等11对三氯化铝致痴呆模型小鼠进行双白术内酯药物治疗，一段时间疗程后，检测小鼠脑内乙酰胆碱的含量和乙酰胆碱酶的活性。结果显示，小鼠脑内乙酰胆碱含量有所降低，并且乙酰胆碱酶活性也有显著降低。从而证明双白术内酯对小鼠三氯化铝致痴呆有一定疗效。 糖 提取分离白术 水溶性 多糖可用苯酚 用此方法可得到白术的粗多糖（ 此外，经过优化的提取方案还可分离出白术的精多糖（ 对精多糖进行检测可知其内主要含有葡萄糖、甘露糖、半乳糖和阿拉伯糖等。 孙 文 平等 12以小鼠为实 验对象，利用白术中水溶性多糖刺激小鼠的免疫系统分。实验结果显示，小鼠血清中特异性抗体和非特异性抗体均有明显增加，从而推测白术多糖可能具有较广的免疫调节作用。此外，朱南山等 13对 血淋巴细胞体外培养的实验结果表明，白术多糖能够通过胞内信号传导对淋巴细胞的免疫调节功能具有显著提高作用。 此外，有 大鼠衰老模型的 实验证明，白术多糖还具有一定抗衰老作用 14。 同 方法 对白术脂溶性成分的研究 漉 法 周枝凤 15等将平江、浙江和怀化 3 个产地白术用 50乙醇浸泡之后用 乙醚 萃取，得 到 挥发油 。 利 用 谱柱分析得 18 种成分， 主要有 去氢化香橙烯、 叶 711丁基化羟基 1 甲苯、 1320-0苯酚。 临界萃取法 (张忠义等 16从市购白术中提取的挥发油中鉴定出 33 种成分，其中 2， 7周丽：白术脂溶性成分研究 8 甲氧基 6为含量最高者。 7榄香烯含量各占 吴佳等 17从湖南平江县产的白术的挥发油中分离出 49 种成分中鉴定出 38 个，其中苍术酮占 含量最高，但 吴素香等 18利用 析 取的浙江盘安白术的挥发油中，得到 36 种化学成分，但是不含苍术酮。呋喃二烯占总挥发油的 最高，其次 闰克里等 19用气质联用鉴定白术化学成分，结果含量最高的是苍术酮， 定结果为 果为 总体所得的白术挥发油化学成分基本相同，且烯类化合物种类最多。 蒸气蒸馏法（ 周枝风 20等用 别提取了怀化白术、 平江和浙江白术的挥发油。经气质谱连用分析得出，三种地方生长的白术有相当一部分的成分相同，鉴定结果为白术内酯 I 与白术内酯。总共分离鉴定出 23 种白术挥发油成分。彭万仁等 21对湖南产白术挥发油的成分进行分析，并最终鉴定出 38 种成分。并且得出含量较多的成分主要是烯类，其中含量较高的是 (反 )64， 5， 6， 73， 65。 相微萃取法 ( 固相微萃取 (一种集采样、萃取、浓缩、进样于一体，且无溶剂样品前处理的技术。郭方 遒等 22首次采用顶空固相微萃取法 (取白术挥发油，并鉴定出 41 种成分，占总挥发油含量的 其中主要成分苍术酮占挥发油总量的 在天然产物挥发性成分分析领域中发展较为迅速 且 比较成熟 的方法是能快速有效地分析样品中的有机物组分的 气相色谱 。 术 脂溶性 成分 种类 研究 现况 大量研究表明，白术脂溶性成分 比较复杂， 主要为挥发油，含量为 右 23。 挥发油中主要成分有苍术酮（挥发油含量最高 24）、白术内酯、白术内酯、白术内酯、白术内酯 、 双表白术内酯、白术内酰胺、杜松脑、蒲公英萜醇乙酸酯、 苷、 烷二烯酮 等。 周丽：白术脂溶性成分研究 9 部分化合物结构如下： 周丽：白术脂溶性成分研究 10 a) 苍术酮 b)白术内酯 c) 白术内酯 d) 白术内酯 e)白术内酯 f)双表白术内酯 g)白术内酰胺 h)杜松脑 i)蒲公英萜醇乙酸酯 j) k) l)尿苷 m） n)芹烷二烯酮 o)R:H 苍术内酯 R:基苍术内酯 p)茅术醇 周丽：白术脂溶性成分研究 11 第三章 实验部分 验部分 器 和试剂 熔点： 字显示显微熔点测定仪；核磁共振仪： M - 400 型 ；柱层析硅胶（ 200 ）及薄层层析硅胶（ 为青岛海洋化工厂出品；石油醚（沸程 60 90 ）和 无水乙醇为天津化学试剂有限公司出品；羧甲基纤维素钠（ 上海化学试剂供应站分装厂出品，硫酸（ 95%购自甘肃白银化学化学试剂厂；丙酮、甲醇、氯仿、乙酸乙酯均为工业重蒸；薄板检测用 254 外灯，硫酸 5%）浸没加热。 物 来源和鉴定 白术 (部购 自 河北安国药材市场 。 验流程 将干燥的 白术 根部（ 5 粹后，在室温下用重蒸工业乙醇浸泡三次，每次六天，减压浓缩合并。将 合并 所得提取物 用蒸馏水进行 溶解， 再依次 用石油醚、乙酸乙 酯和正丁醇分别 进行 萃取。经 验，将石油醚和乙酸乙酯萃取部分合并，该合并部分经硅胶柱层析，用石油醚丙酮溶液（ V： V 1： 0， 40： 1，20： 1， 10： 1， 5： 1， 3： 1， 2； 1， 1： 1， 1： 2）梯度洗脱，经 查，合并相同流分，减压浓缩得 9 个部分（ A I）。 反复硅胶柱层析，用石油醚丙酮洗脱，得化合物 1。 果与讨论 合物 1 结构 图 化合物 1 周丽：白术脂溶性成分研究 12 合物结构鉴定 化合物 1： 无色晶体。 1300 图中有 一 对 环外 烯氢信号 峰 H 1H, H (1H, 一个连氧 号峰 H 1H, 一个角甲基 号峰 H 3H, s, 一个烯甲基号峰 H 3H, 13400 图中 出现 15个碳信号峰，在低场区出现有一个内酯羰基碳信号 C 组双键碳信号 C C C C 个连氧碳信号 C 高场区出现烯甲基碳信号 C 结合氢谱数据，推测该化合物为一桉烷型倍半萜内酯类化合物，且含有一对环外双键。将 该化合物的 1 1325对照，确定化合物 1 为 白术内酯 I（ ） 。 合 物理 常数和波谱数据 化合物 1 白术内酯 I（ ） ， 无色晶体 , 201300 = 1H, (1H, 1H, 3H, s, 1H, 13100= 周丽：白术脂溶性成分研究 13 参考文献 1 关晓辉 , 等 . 白术挥发油对小鼠免疫功能的影响 J. 北华大学学报 (自然科学版 ), 2001, 2(2): 1222 张宏桂 , 等 . 白术倍半萜成分的化学研究 J. 白求恩医科大学学报 , 1993, 19(6): 5603 王翕 ,等 . 白术挥发油抗实体瘤的作用研究 J. 中国药物与临床 , 2002, 2(4): 2394 董岩 , 辛炳炜 . 白术化学成分研究新进展 J. 山东医药工业 , 2003, 22(3): 325 李伟 ,等 . 白术质量标准研究 I 测定 2 种白术内酯的含量 J. 药物分析杂志 , 2001, 21(3): 1706 , et 1979, 27: 29547 汤德芳 , 等 . 平江白术根茎挥发油的成分及其抑瘤作用研究 J 1984, 19(9): 438 李伟 ,等 . 白术健脾有效成分研究 J. 南京中医药大学学报 . 2006, 22(6): 3669 刘跌 , 等 . 白术内酯 J. 第 一军医大学学报 . 2005, 25(10): 130810 蒲含林 , 等 . 双白术内酯对豚鼠离体心房肌的作用 J 2000, 16(1): 6011 刘 洋 , 廖春梅 . 双白术内酯对三氯化铝致痴呆模型小鼠的作用研究 J. 湖南师范大学学报 . 2006, 3(3): 2512 孙 文平 , 等 . 当归、白术、制白附子多糖对小鼠免疫凋节作用的影响 J. 中国中医药信息杂志 , 2008, 15(7): 3713 朱 南山 ,等 . 白术多糖对仔猪血淋巴细胞转化及信号传导相关分子的影响 J. 华北农学报 , 2007, 22(2): 18周丽：白术脂溶性成分研究 14 14 马庆华 , 等 . 白术多糖对 研究 J. 中国老年 学杂志 , 2006, 26(12): 165815 李家实 . 中药鉴定学 M. 上海 :上海科学技术出版社 , 1998:201. 16 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