【毕业学位论文】（Word原稿）水貂胰蛋白酶消化模型的建立及外源酶对水貂消化和生产性能的影响特种经济动物饲养博士论文

密级 论文编号： 中国农业科学院 学位论文 水貂 胰蛋白酶 消化模型的建立及外源酶对水貂消化和生产性能的影响 i 摘 要 本文 通过 四个 试验 对 水貂消化道参数与生产性能的研究， 来 建立 水貂胰蛋白酶消化模型及 确定 外源酶对 水貂消化和生产性能的影响 ，分为以下几个主要部分： 试验一：水貂胰蛋白酶作用模型的建立。 试验采用 66只水貂，采食后每隔 30 分钟测定 300分钟内消化道内蛋白酶活性与 ，反映水貂采食后消化道内消化规律 的变化 。由试验结果可知， 水貂采食后消化道前段 为酸性，随采食时间的延长， 呈现先 升 高后 降 低的变化，但一直保持酸性 ；消化道后段 为碱性，采食后其 随时间变化规律与消化道前段则 正相反，呈现先变低，后升高的趋势 ， 但一直保持碱性 0120 分钟；水貂采食后消化道各部 位蛋白 酶活性 逐渐升高，大约在采食后 60 120 分钟时间段内达到最高，以后逐渐降低 ，在降低的过程中存在 活 性 升高的波峰出现； 水貂消化道各部位蛋白酶活性以回肠 部位 最高。 试验二： 外源酶对水貂生产性能及肠道主要消化参数的影响。 试验采用 3 3 复因子试验设计， 在水貂传统日粮中添加外源酶，通过生产性能指标、消化道各部位的胰蛋白酶 活性 与 来验证添加外源酶对水貂生产性能与对水貂消化的影响。试验结果表明， 添加外源酶对水貂的 总体 生产性能未产生明显影响 ，但对 公貂活体长 产生了极显著的影响，中水平蛋白酶添加组比 对照组公貂活体长提高 了 对 水貂母貂胃蛋白酶 活性 并无显著影响 ； 对公貂间胃蛋白 活 性 的影响达到极显著水平 ，添加脂肪酶组公貂胃蛋白 活 性 最高 ； 对水貂十二指肠胰蛋白 活 性 、回肠胰蛋白 活 性 、 公貂空肠胰蛋白 活 性 并无显著影响 ； 对母貂间空肠胰蛋白 活 性 影响达显著水平 ，添加低水平淀粉酶与蛋白酶组 显著高于其他组 ； 对水貂结肠胰蛋白 活 性 影响达极显著水平 ， 添加蛋白酶与脂肪酶的最高水平组显著高于添加淀粉酶的中低水平组 ； 对水貂公貂直肠胰蛋白 活 性 并无显著影响 ； 对水貂母貂直肠胰蛋白 活 性 影响达极显著水平 ； 对水貂胃内 母貂肠内各部位 对水 貂公貂肠内各部位 的影响均达极显著水平 ， 添加脂肪酶组与对照组在肠 道 内以回肠为分界 线， 回肠以前较 高 ，以后较 低 ； 添加淀粉酶组正相反。添加蛋白酶组则在小肠各部位 试验三：外源酶对水貂糖代谢的影响。 本试验 采 用 56 只 16 周龄健康短毛黑水貂，采用 2 3复因子试验设计，研究添加外源淀粉酶与蛋白酶对水貂糖代谢水平 的影响 。结果表明， 在 育成期与冬毛生长期 水貂传统日粮类型条件下，添加试验用淀粉酶与蛋白酶，对各试验组水貂肝糖元含量 、 公貂血糖水平影响不显著 ； 对各试验组水貂母貂血糖水平影响显著（ P 。添加高水平淀粉酶组效果最明显 , 其血糖水平高于对照组 试验四：外源酶的添加与水貂日粮类型之间 的 关系。 试验采用 3 3 复因子试验设计， 在水貂特定日粮中添加外源酶，通过生产性能指标、营养物质消化率来验证 适宜的试验日粮类型 及在该日粮类型条件下适宜添加的外源酶类 型。 结果表明，在水貂冬毛生长期，在本试验日粮类型条件下，添加试验用 酶 对水貂活体长 无 显著影响；对各组水貂体重影响 达 极显著 水平 。植物性蛋白 代水平越高，水貂越冬体重损失越大； 对饲料蛋白质消化率的影响达极显著水平 ，表现为 植物性蛋白质替代水平越高， 水貂对饲料中蛋白质的消化率越低， 中 性 蛋白酶可极显著的提高水貂对饲料中蛋白质的消化率 。其中 30%植物性蛋白替代并添加酸性蛋白酶试验组的 饲料蛋白质消化率比不添加酶 60%植物性蛋白替代试验组提高 对水貂饲料脂肪消化率的影响达极显著水平 ，其中 30%植物性蛋白替代试验组 添加酸性蛋白酶的饲料脂肪消化率比不添加酶 60%植物性蛋白替代试验组提高 关键词 :水貂， 胰蛋白 酶，模型，生产性能 to of of to in by in of of of in 66 1 of pH in 0 00 in of pH in of is pH of of is pH of of H is PH of of is pH of of is pH of of pH is pH of 0 120 of in It at 0 120 it of in in of of in is of of to in of 3 to of of pH in in of to of of to of is P . of to of is P . of in is of to of is P . of in is of to of of of is P. of to of of of is P . of to of of of is P . of to of of of is P . of of in is of to of of of is P . of to of of of is P . of to pH in is P . of to pH of is P . of to pH of is P is as pH in of in is pH in in is pH of in is pH of in pH of in of to in 56 16 3 of to in of to of is P is in of to of of is P . of to of of is P . of to of of is of of in is of of 3 to of of in It is in of to of is P is in of to of is P . of is is of to of is P . of is of in is of in is of in 0% of is no 0% of of to of is P . of in 0% of is no 0% of v 目 录 中文摘要 英文摘要 第一章 引 言 1 些 生物学特性 1 4 源酶制剂在 畜牧业中 的应用 14 义和总体设计方案 22 第二章 试验研究 25 验 一 水貂 胰蛋白 酶作用模型的建立 25 料 与方法 25 果 27 论 33 结 39 验二 外源酶对水貂 生产性能及 肠道主要消化 参数的影响 40 料与方法 40 果 41 论 54 结 58 验三 外源酶对水貂糖代谢的影响 59 料与方法 59 果 61 论 64 结 66 验四 外源酶的添加与水貂日粮类型之间关系的研究 67 料与方法 67 果 70 论 74 结 78 第三章 总结与结论 79 文的总结 79 文的主要结论 81 文的创新点 82 待于进一步研究的问题 82 参考文献 83 致谢 95 作者简历 96 1 1 4 14 of 22 25 25 25 27 33 39 40 40 41 54 58 59 59 61 64 66 67 67 70 74 78 79 79 81 82 to 82 83 95 96 中国农业科学院博士学位论文 引 言 1 第一章 引言 水貂是我国主要的小型珍贵毛皮动物。它起源于美洲和欧洲的野生水貂， 50年代 末从前苏联引入中国，在我国的东南沿海发展迅速，经过多年的选育， 开始形成自己的品种，水貂其经济价值主要在于其毛皮可以作为高档裘皮服装原料，貂油可以作为高档的化妆品的原料 ， 貂 心可以入药。 近几年随着人们生活水平的提高，裘皮服饰已经走入我们普通百姓家庭，对其的需求量也不断增加 （朴厚坤， 1989） 。 同时，随着 我国饲料工业的发展和壮大，特种养殖已经成为畜牧业不可或缺的一部分 ，发展特种动物饲料已经引起广泛的关注。 水貂的某些生 物学特性 貂的 分类学地位 水貂（ 动物的分类学上隶属于哺乳纲（ 食肉目（ 鼬科（ 鼬属（ 自然界中 ， 有在形态上相似的美洲水貂（ 欧洲水貂（ .）两种，因美洲水貂较欧洲水貂被毛美观，故目前世界上各国广为饲养的水貂均为美洲水貂的后裔 （邹兴淮， 1986） 。 美洲水貂主要的分布区域在北美洲的阿拉斯加到墨西哥湾以及俄罗斯的西伯利亚等地 区。美洲水貂共有 11 个亚种，其中经济价值最高、与家养水貂关系组密切的有 3个亚种（ 貂的 形态与 习性 水貂是一种小型珍贵毛皮动物，体细长，外形与黄鼬相似。头较小，耳壳小，四肢短，前后肢均具有五指和五趾，指、趾端有利爪，指、趾间有微蹼，后趾间的蹼比前指明显，尾细长，尾毛长而蓬松。 野生状态下 的 水貂毛色多为浅褐色，人工饲养下，由于长期选择的结果，毛色加深，多为黑褐色或者深褐色，叫标准色，通过变异及人工分离，已经培育出白色、 银蓝、钢蓝、咖啡、米黄、蓝宝石、红色、黑十字、紫罗兰等几十种色型。 野生状态下，水貂多在冲毁的河床，浅水湖岸或林中小溪、近水处栖息，以自然形成的岩洞营巢，冬季，喜在冰洞或在不结冰的急流暖水一带活动栖息。 水貂为肉食性动物，野生时主要捕捉鼠类、鸟类、蛙类、蛇等为食， 有 在巢穴中贮食习性。水貂视觉较弱，听觉灵敏，行动敏捷，性凶残，攻击力较强。多在夜间活动觅食，善于游泳与潜水。水貂的寿命约为 12 15 年，具有 8 10 年的繁殖能力。人工饲养条件下，种貂利用率高，利用年限为 2 3年，少数优良个体 4 5年，幼貂 9 10月 龄达到性成熟。 水貂是季节性发情，季节性换毛动物，每年春季发情， 2 月底到 3 月上中旬。一年换 2 次被毛，春季脱冬毛长夏毛，秋季脱夏毛长冬毛。 中国农业科学院博士学位论文 引 言 2 貂的经济价值 水貂皮是高档裘皮原料 ， 自古有裘皮之王的美称，是世界裘皮市场的领头品种 ， 价格昂贵。其毛细密、平齐，有好的光泽度，富有弹性，板质坚韧轻柔。貂皮可制高档的裘皮大衣、皮领、帽子等，具有保暖，轻柔，华丽，穿着舒适等特点。 水貂副产品有多种用途 ： 貂心具有很高的药用价值。对治疗风湿性心脏病、充血性心力衰竭有独特疗效。貂的睾丸和阴茎制成 的 药酒，具有滋补壮阳的 功效。貂油含有丰富的不饱和脂肪酸，除了食用外，现已成为高级化装品和香皂的原料。貂肉 的 营养丰富，含有较高的蛋白质。是一种独特的野味佳肴。貂粪 是 农作物的优质肥料。处理后 的 貂粪还可以喂猪。 总之，水貂全身都是宝，经过充分利用可以增加收益，提高其经济价值。 貂的消化生理特性 水貂属中型鼬科动物， 单胃动物 。同时也是严格的肉食动物， 在很多特性上不同于杂食性和草食性动物，表现在对饲料 消化 利用的特殊性上。首先水貂的消化道适合于动物性饲料的 消化 ，门齿短小，犬齿非常尖锐发达，臼齿咀嚼面不发达，这表明水貂的牙齿不适 合咀嚼食物，特别是不适于磨碎植物性的根茎或纤维素，而适合于捕食食物 并撕成小块。其次，水貂的消化道的相对长度比草食性动物的消化道短 的 多，草食性动物的消化道长度是动物本身体长的 17 倍左右， 猪的消化道长度为其体长的 25倍。 而水貂的消化道是体长的 4倍，空、回肠无明显的界限，空、回肠总长度约为 110 147厘米 ，大肠包括结肠与直肠，全长 20厘米 左右，无盲肠，直肠末端为肛门 。 水貂的胃肠道与其他动物相比具有较小的容积，仅为 60 100毫升 ，消化道中蛋白酶与脂肪酶较多，而淀粉酶较少，因此，对含有大量蛋白质和一定数量 脂肪的动物性饲料的消化能力强，对植物性饲料的消化能力弱，只能消化淀粉和糖，而不能消化纤维素。水貂的消化进行得非常强烈， 采食咀嚼少，食物通过肠道的速度快，对饲料的消化率需求及酶的产量要求都很高。饲料在水貂的消化道中停留的时间较短。在胃中的时间仅为 1小时 30分至 2小时 30 分钟。而草食性动物饲料在消化道中可停留 7 8 天。所以水貂宜于消化吸收营养价值 大、 蛋白质含量高的动物性饲料。 国外学者在水貂肠道发育、消化酶的分泌及对蛋白质消化代谢方面的研究较多，认为水貂主要依靠酶的消化（ ， 1988），其消化系统相 对成熟较晚， 4 6 周龄期间水貂肠水解酶经历迅速的变化，依赖肠的生长，整个酶活力在 6 10 周龄进一步增强（ 1996） 。根据 的研究，仔貂蛋白酶、胰蛋白酶原、胰凝乳蛋白酶原活性或数量在 1 12 周间逐渐增加，水貂消化酶活性如胰蛋白酶，直到 10 周龄才达到最大水解能力（ ， 1988） 。 工饲养 水貂的 一些习性 水貂的驯化，长久以来程度不高。因为一些行业因素以及水貂物种本身的特点，水貂驯化程度的提高进展缓慢。近年来，随着水貂养殖量的提高，水貂的驯化程度也 有了明显的提高。人工饲养的水貂与野生水貂在生活习性方面有着一定的差异，但还有很大的相似性。在食欲与食性上，中国农业科学院博士学位论文 引 言 3 人工饲养的水貂还保留着野生动物的一些特点。比如在经过长期人工喂养后，大部分水貂仍然保留着在巢穴中储存食物的习性。因其在野生状态下的昼伏夜出的习性，驯化后的水貂即使饲料供给充足，仍然是大部分的采食活动都发生在夜间。在采食习性上，水貂有如下特点： 其一 ， 在采食时间的分配上，水貂一般采食过程很长，边玩边吃。随着驯化程度的提高，水貂的采食时间有缩短的趋势。 其二，对食物要求很高。饲料中动物性蛋白质要达到一定水平 ，且愈新鲜愈好。不能粉碎的过细，要在水貂采食过程中，能形成撕咬动作为佳。 其三，喜食动物性饲料，且消化率较高，对谷物饲料的消化率低。谷物饲喂前要熟化。否则容易引起腹涨。 其四， 水貂的食欲根据时间变化，有一定规律的变化。在上午，因气温相对较高，故采食较少，到中午之前，基本停止采食。 应少量饲喂。 下午因气温渐渐开始降低，采食活动开始密集。但主要还是集中在夜间，夏季尤其明显。 下午应加大饲喂量。 中国农业科学院博士学位论文 引 言 4 貂蛋白质营养研究进展 中国水貂皮生产量占世界总产量的 10%以上。我国水貂饲养业 ， 大致 经历了国家扶持发展阶段 (1956 1978年 )、规模发展阶段 (80年代 )和发展调整阶段 (90年代以来 )。自 1956年以来 ， 国家陆续支持在东北、华北、西北和华东等地建立水貂饲养场 ， 到 1978年底 ， 种貂存栏数达 30 多万只 ， 水貂养殖场 2000余个 ， 年产水貂皮 75万多张。 1980年开始 ， 出现了许多个体养貂户 ， 使水貂的养殖规模迅速扩大。 1988 年，全国水貂饲养场发展近 3000 个 ， 种貂 300 多万只 ， 取皮近600 万张 ， 出口水貂皮 330 万张 ， 换回外汇约 2 亿美元。几十年来，国内外学者在水貂营养研究方面做了很多工作，但目前国内 外关于水貂的营养研究方面还存在许多空白，有待科研人员的进一步努力。 水貂的主要经济性状是毛皮的生长，因此，蛋白质及氨基酸营养，特别是含硫氨基酸营养对水貂来说，至关重要。尽管水貂高的蛋白质摄入与低的蛋白质存留相比，存留仅约占摄入的 8%，但日粮氨基酸组成对水貂的健康和毛皮质量还是非常重要的。 貂体氨基酸组成 蛋白质是水貂机体生命活动的基础，也是构成水貂体组织、体细胞的基本原料和更新修补体组织的必需物质。水貂体内除了水分