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文档简介
钙离子对凝血的影响一、实验目的:观察钙离子对凝血的影响,特别是钙离子对凝血的影响。二、实验原理:什么是凝血? 什么东西?凝血过程分为三个阶段:凝血酶原活性物的形成、凝血酶原的形成、纤维蛋白的形成。 凝血的途径有两条:内源性凝血和外源性凝血。内源途径是指与血液凝固有关的因素全部来源于血液,血液与带负电荷的异物表面接触而启动。 表面活化生成的凝血因子在钙离子的作用下可以活化f 4,f4a在钙离子的作用下可以在f4a和活化的血小板提供的磷脂膜表面结合复合体,活化f 8。外源性凝血途径是指血液以外组织因子的暴露和血液引起的凝血过程,又称组织因子途径。 血管损伤后组织因子外露,组织因子与fviia、钙离子结合形成复合体。 该复合体在磷脂和钙离子存在的情况下,迅速激活fx,生成fxa。 内源性和外源性途径中生成的fa存在钙离子时,与fa在磷脂膜表面结合生成Fa-Fa-钙离子磷脂复合体,即凝血酶复合体,激活凝血酶原,诱发凝固过程。资料显示1 :因子I,即纤维蛋白原基本上从肝脏发生,在凝血酶的作用下转化为纤维蛋白原聚合物,在钙离子的作用下转化为坚固不溶的纤维蛋白原。 因子是凝血酶和钙离子作用下首次分解活性凝血酶。 因子iii也是在钙离子存在的情况下与因子vii结合使复合体活性化。 因子v在fa、磷脂、钙离子形成的凝血酶过程中起催化作用,加速凝血酶原向凝血酶的转化。 因子,即钙离子在凝血过程中需要钙离子的参与,有间接证据表明钙离子再次被吸收后,可以维持凝血因子的电荷表面,稳定各种凝血蛋白、磷脂等结构。血小板激活后,细胞质内高浓度的钙离子引起血小板收缩活动,促进血块凝固。 血液中钙离子不足时,血液不会凝固。 凝血的恢复钙时间延长,会出现一定程度的抗凝现象。 钙恢复时间:脱钙抗凝血液加入钙离子后再凝固所需的时间。三、受试者:家兔。四、实验药品和仪器:兔手术台、哺乳动物手术器械一套、水浴箱、动脉夹、动脉插管、试管、5ml注射器、大烧杯、小烧杯、棉花、冰、石蜡; 1%戊巴比妥、肝素、脑组织上清、5%氯化钙、5%磷酸钠。五、实验步骤:1、麻醉:1%戊巴比妥3ml/kg从兔耳缘静脉注射麻醉。 麻醉标志:呼吸平稳,瞳孔散大,角膜反射消失,四肢疼痛反射消失。2、固定:将麻醉兔仰卧位固定在兔台上。3、准备皮:修剪头发。4、准备实验:准备对照组、脱钙组、高钙组,设置实验药品a组:按照下表设置药品A(1-7)b组(即脱钙组) :在与a组药品相同量的条件下,在试管B(1-7)中加入5%磷酸钠1ml。c组(即高钙组) :在与a组的药品相同量的条件下,在试管C(1-7)中加入5%氯化钙1ml。5、手术:颈部正中切开(57cm ),皮下组织与肌肉分离,单侧颈总动脉分离,结扎前端,外周端夹动脉插管。6 .开始操作,记录数据。六、观察项目:操作如下表观察并记录结果实验仪器编号实验条件凝血时间(min )a组b组c组在试管10ml中加入鲜血1ml1对照管2棉花3石蜡;石蜡4加入脑组织上清0.5ml5三十七度水浴6冰浴7加入肝素4U七、实验结果预测:根据预测结果建立时间曲线,进行比较和结果分析。的双曲馀弦值。八、分析讨论:用单变量和多变量来验证这些因素对凝血的影响。 如果接触面粗糙度不同,则棉花接触面粗糙,相当于血管管壁破裂,凝血酶活化加快凝固时间,因此比对照管时间短的石蜡维持光滑的血管特性,延迟凝固时间,但与其说光滑的管壁活化,不如说凝血酶少,比对照管时间长。温度不同,对照管在室温20以下时凝血酶不能完全活化,37时凝血酶的最佳温度,因此凝血时间比对照管短,冰浴条件下凝血酶的活性受到抑制,凝血时间变长。脑组织的九、注意事项:1 .记录凝血时间要求准确。2 .判断凝血的标准是一致的。 一般以试管倾斜45度时试管内的血液不流动为基准。3、合理分工,比较实验采血时间继续进行。4
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