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文档简介

南通市教育科学研究中心刘义友,基因工程的基本操作程序,有同学知道这三种标志吗?,1简述基因工程基本操作的四个步骤;2简述目的基因的获得、运载体的构建、目的基因的导入与检测等常用的方法及其基本原理.,考点列举,基因工程的基本操作程序,1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定,活动1结合基因操作的四个基本过程,你能说出下列历史事件，为什么对基因工程的诞生起到了决定性的作用？,理论基础,技术支持,基因工程的基本操作程序,第一步：目的基因的获取,如何建立?,活动2体验基因文库的构建过程,分析基因文库构建过程的图解，思考问题：,什么意思？怎么做？,温和噬菌体：感染宿主细菌后不引起细菌裂解而与宿主细胞建立共生关系并随细菌繁殖传给细菌后代。,T2噬菌体?,解读cDNA文库的构建过程,(1)提取某种生物发育某一时期的mRNA;(2)mRNA反转录形成DNA片段;(3)DNA片段与载体连接后,储存在一个受体菌的群体中。,活动2体验基因文库的构建过程,分析基因文库构建过程的图解，思考问题：,就是基因表达载体？,（08年江苏高考）将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。,注意基因克隆载体与基因表达载体的区别,载体(vector）：用于承载、克隆、转移目的基因(DNA片段)，能自我复制的DNA分子。,（1）在基因克隆时：将目的片段转移到宿主细胞中进行复制克隆克隆载体；（2）在基因导入受体时：将目的片段转移到受体细胞中使目的片段稳定存在并表达表达载体。,目的基因启动子和终止子复制原点标记基因多种单一限制酶切点合适大小,DNA片段复制原点标记基因多种单一限制酶切点合适大小,目的基因转移转化或感染,基因工程的基本操作程序,第二步：基因表达载体构建,活动3体验基因表达载体的构建过程,下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），思考回答：,你知道双酶切法吗？,（10年江苏高考）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。,与只使用EcoR相比较，使用BamH和Hind两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_。,目的基因转移转化或感染,基因工程的基本操作程序,第三步：将目的基因导入受体细胞,第四步
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