血培养PPT学习教案

1、会计学1第1页/共64页根据培养结果：n选择正确的抗感染治疗方案 或调整经验治疗方案 n判断感染性疾病的类型n评价疗效及预后n正确采取感染控制措施是否隔离减少院内感染n监测敏感事件 （如：生物恐怖） 血液及无菌体液是最有意义的病原学检测标本。血液及无菌体液是最有意义的病原学检测标本。第2页/共64页三级报告：为临床医生提供抗菌药物敏感性试验结果 护理人员收集送检样本实验室检测、分离并鉴定导致血流感染的微生物第3页/共64页1. March 2003 report 3. Medtap International1. March 2003 report 3. Medtap Internationa

2、l2. Crit Care Med 2001; 29: 1303-10 4. Society for Critical Care Medicine (press release 2004)2. Crit Care Med 2001; 29: 1303-10 4. Society for Critical Care Medicine (press release 2004)第4页/共64页 Infection感染 Sepsis 败血症 全身炎症反应综合症重症败血症SIRSSevere sepsis第5页/共64页Hours to Days*Rangel-Frausta, 1995 JAMA 27

3、3:117-23 血培养阳性率15%30%60% Mortality败血症各阶段的血培养阳性率败血症各阶段的血培养阳性率第6页/共64页第7页/共64页Clin Infec Dis 24:584-602, 1997第8页/共64页n 血培养的临床实血培养的临床实践欠规范！践欠规范！原因何在？原因何在？第9页/共64页台湾长庚儿童医院台湾长庚儿童医院1010台台第10页/共64页台湾长庚儿童医院台湾长庚儿童医院血培养血培养80008000瓶瓶/ /月月第11页/共64页第12页/共64页国内三甲医院平均国内三甲医院平均血培养血培养500-1000500-1000瓶瓶/ /月月第13页/共64页

4、正正 确确 错错 误误 某医院微生物实验室在2010的12月份收到的BD BACTEC瓶第14页/共64页第15页/共64页第16页/共64页关键要点：关键要点：第17页/共64页第18页/共64页怀疑血流感染时应常规行血培养怀疑血流感染时应常规行血培养发热要做血培养发热要做血培养！第19页/共64页第20页/共64页03060时间 (分钟)体温体温血培养采血时机血培养采血时机细菌浓度细菌浓度第21页/共64页第22页/共64页第23页/共64页第24页/共64页血培养套数与阳性检出率（）血培养套数与阳性检出率（）65809699第25页/共64页凝固酶阴性葡萄球菌CNSn医源性感染最常见病原

5、菌；n表皮葡萄球菌感染最常见。n人体正常菌群（皮肤、口腔、小肠）； 属于条件致病菌；n引起泌尿系统感染、细菌性心内膜炎、败血症第26页/共64页Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333 采集采集1 1套无法判套无法判断是病原菌断是病原菌还是污染菌还是污染菌。2 23 3套血培养，有助于污染的判断。套血培养，有助于污染的判断。第27页/共64页第28页/共64页第29页/共64页第30页/共64页问题：问题：厌氧培养的必要性厌氧培养的必要性? ?第31页/共64页第32页/共64页n资料显示：16%的链球菌和17%的肠杆菌科细菌血培养时仅厌氧瓶报告阳性1n

6、根据文献，厌氧瓶除了检出厌氧菌，另外对葡萄球菌，肠杆菌科细菌以及苛养菌的检测有优势1.Bartlett JG, Dick J. The controversy regarding routine anaerobic blood cultures. Am J Med , 2000, 108: 5052506.2. Khanna P, Collignon P. Anaerobic bottles are still important in blood culture sets. Eur J ClinMicrobiol InfectDis, 2001, 20: 2172219.nKhanna等2对

7、7072份同时做需氧瓶和厌氧瓶的血培养结果分析显示: 640份血培养阳性,阳性率为9% 需氧和厌氧瓶同时阳性为55% 仅需氧瓶阳性为26% 仅厌氧瓶阳性为19% 第33页/共64页J Microbiol Immunol Infect.2007;40:445-44935 需氧瓶需氧瓶 厌氧瓶厌氧瓶金葡 5 5链球菌 5 3肠球菌 3 1克雷 5 5大肠 2 5绿脓 18 1真菌 17 0厌氧 0 3第34页/共64页J Microbiol Immunol Infect.2007;40:445-44936 需氧瓶需氧瓶 厌氧瓶厌氧瓶金葡 21 19链球菌 11 15肠球菌 13 15克雷 17 2

8、0大肠 30 40绿脓 49 3真菌 19 1厌氧 0 16第35页/共64页比较成年病人分离菌株在需氧及厌氧血培养瓶生长情形J Microbiol Immunol Infect. 2007;40:445-449第36页/共64页n不同于成人血培养，由于厌氧菌感染极少发生在儿童患者，因此一般建议只需采用需氧瓶。n若采用厌氧瓶可以增加兼性厌氧菌的检出率n对特殊的高危群体需考虑厌氧培养，包括：分娩过程中延迟破膜的新生儿、母婴垂直传播的绒膜炎、慢性口腔或鼻窦感染、蜂窝组织炎（特别是肛周及骶骨）、腹部感染体征、咬伤、破伤风、脓毒性静脉炎、接受类固醇治疗的儿童。对于儿童厌氧血培养：第37页/共64页第3

9、8页/共64页血培养物每增加1毫升，成年人真性菌血症阳性检出率增加3第39页/共64页第40页/共64页BD BACTEC 每个瓶都清晰显示最佳采血量利用瓶身刻度准确采血第41页/共64页n儿童的采血量不能超过其总血容量的1%， 可按年龄或体重分别采足够的血量 1月： 1月36月： 36月： n阳性率：足量采血 5.2% (34/655) VS.不足量采血2.1% (14/648)Behrman:Nelson textbook of Pediatrics,17th ed.,2004关于儿童血培养采血量：n对于新生儿败血症，最低的采血量不确定，通常的 血量是推荐的第42页/共64页体重体重kg

10、总血量总血量ml 第一套取血量第一套取血量ml（占全身血量）（占全身血量）第二套第二套取血量取血量ml总取血量总取血量ml 200 4（1-2） 2612.8-36.3 800 10（1.25） 1020=36.32200 20-30（1-1.3） 20304060Paisley JW, Lauer BA. Pediatric blood cultures. Clin Lab Med 1994;14:17-30.CAPT Robert L. Volume of blood required to detect common neonatal pathogens. The Journal of

11、Pediatrics.August 1996; 275-278关于儿童血培养采血量：第43页/共64页第44页/共64页Huang, et al., European Journal of Clinical Microbiology 17: 637. 1998(Cockerill, et al. CID 2004)第45页/共64页问题：问题：如何进行消毒与标本采集？如何进行消毒与标本采集？第46页/共64页第47页/共64页第48页/共64页1-2% 碘酊碘酊30秒或秒或10%碘伏消毒碘伏消毒60秒，秒，从穿刺点向外画圈消毒从穿刺点向外画圈消毒,直径直径1.5-2cm.用用75%乙醇消毒乙醇

12、消毒 60秒（脱碘），待秒（脱碘），待酒精挥发干燥后采血酒精挥发干燥后采血.注意：对于碘过敏的患者，只能使注意：对于碘过敏的患者，只能使用用75乙醇消毒乙醇消毒60秒，待酒精挥发秒，待酒精挥发干燥后采血干燥后采血.细菌是细菌是死的死的，不是不是死的死的皮肤消毒程序（三步法）：皮肤消毒程序（三步法）：第49页/共64页培养瓶的消毒程序：培养瓶的消毒程序：去掉培养瓶口的塑料瓶盖。75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒。自然待干。将标本注入培养瓶内。5. 颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝集。（儿童采血量少，更应注意颠倒混匀）细菌是细菌是死的死的，不是不是第50页/共64页使用蝶翼针采血使用蝶翼针采血1

13、 皮肤消毒2 培养瓶消毒3 标注采血量4 准备采血针5 静脉穿刺6 负压采血采血录像采血录像第51页/共64页第52页/共64页采集标本前：于室温保存，切勿冷冻。如冷藏需恢复至室温使用。采集标本后：尽快送微生物室，如无法及时送检，应置于室温， 不能置于冰箱或温箱，以免影响检出。树脂需氧瓶含溶血素厌氧瓶树脂儿童瓶分枝杆菌瓶及真菌瓶第53页/共64页第54页/共64页第55页/共64页第56页/共64页答案：不需冷藏，更不能冷冻。保存在1525的室温即可，温度过低会导致对温度敏感的耐瑟氏菌等死亡。n 加入标本后的培养瓶未能及时送到检验科，是否需要冷藏或放入35的温箱 ？答案：保存在室温即可，不能冷

14、藏也不能放入35的温箱 。 过夜不会对检测造成影响，但仍需尽快送检。冷藏可能导致对温度敏感的耐瑟氏菌等死亡。温箱会导致细菌进入生长对数期，从而错过检测的最佳时期。第57页/共64页答案：不可以，第二套需从第二个穿刺点采集，这样能帮助判断污染。n患者静脉中插有导管，可否直接从导管采血 ？答案：不可以，常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置中采集，检出污染或定植菌的可能性较大。除非怀疑导管相关性血流感染，请参照导管相关性血流感染的采血方法。第58页/共64页n 如用注射器采血后，是否需要更换针头再向培养瓶内注入标本？答案：不需要，对检出率无提升，会增加针刺伤的几率。但采集第二套血培养需更换针头进行穿刺。答案：标签应竖贴于瓶身上，同时不得遮盖瓶身原有标签，以免影响扫描。 正正 确确 错错 误误 第59页/共64页答案：寒战后或发热初期时，采用抗生素治疗前或下一次用药前。n 怀疑血流感染，一般应采集几套血培养？答案：成人应一次采集23套血培养。儿童只需采集需氧培养，24小时内采集23次。第60页/共64页答案：同时或短时间内采集23份血培养，因为体内巨细胞吞噬系统会在1530min内清除掉进入人体内的细菌。n 每套血培养的采血量为多少？答案：成人一份标本使用2个培养瓶（需氧厌氧），每瓶810ml，共20ml；要求至少采两份标本，即40ml。儿童一般只需采集需氧瓶，在保证采集