T-SPOT介绍课件

1、列入欧美等列入欧美等20多个国家结核诊疗指南多个国家结核诊疗指南内容内容 结核病基础概念结核病基础概念 T-SPOT.TB 产品知识产品知识 T-SPOT.TB 临床应用临床应用 病例分享病例分享内容内容 结核病基础概念结核病基础概念 T-SPOT.TB 产品知识产品知识 T-SPOT.TB 临床应用临床应用 病例分享病例分享2000-2008年我国肺结核报告发病情况结核分枝杆菌（MTB）是结核病的致病菌，通过呼吸道传播，可以侵入人体全身各种器官，主要感染肺部全世界约三分之一的人群感染了结核分枝杆菌，2012年全球结核病报告显示，在2011年有870万新发病例， 140万人死于结核病活动性结核

2、与潜伏性结核 新发TB病例来自潜伏性结核感染人群 潜伏性结核感染（hidden epidemic）人群数量巨大“定时炸弹” 若想控制活动性TB，必须先控制潜伏性结核感染 鉴别高危人群 预防性治疗 免疫接种 活动性TB 全球每年900万新发病例 仅为冰山一角Latent TB - “hidden epidemic”- 2 billion people infected活动性结核与潜伏性结核接触活动性结接触活动性结核病患者核病患者暴露程度不足，结核杆菌被机暴露程度不足，结核杆菌被机体免疫力清除体免疫力清除-没有症状没有症状,结核杆菌结核杆菌仍旧存在而不能被仍旧存在而不能被侦测侦测 - X-光光/

3、CT 扫描显扫描显示正常示正常-没有抗体应答没有抗体应答-诊断困难诊断困难-传统的结核感染检传统的结核感染检测只有测只有PPD机体被感染机体被感染受免疫抑制受免疫抑制没有临床症状没有临床症状终身处于感染终身处于感染状态状态潜伏性结核潜伏性结核有临床症状有临床症状具有传染性具有传染性-结核杆菌可以通结核杆菌可以通过涂片、培养检过涂片、培养检测出测出-胸部的胸部的 X-光或光或 CT 扫描显示异扫描显示异常常 -肺外结核难以诊肺外结核难以诊断断(特别是儿童特别是儿童)活动性结核活动性结核-结核病结核病5%5%再次激再次激活活LTBI活动的危险因素活动的危险因素Erkens J ERJ 2010结核

4、病常规诊断技术耗时长涂阴PTB检出低肺外结核难结核诊断X射线射线分子诊断分子诊断接触史接触史涂片涂片镜检镜检细菌培养细菌培养特异性差主观肺外结核难 操作复杂技术要求高涂阴PTB检出低肺外结核难 不能区分NTMPTB近半阴性肺外结核难试剂灵敏度低；不能区分既往感染和发病病人抗体检测抗体检测WHO关于血清学检测声明2011年年7月月20日，世界卫生组织（日，世界卫生组织（WHO）发出正式声明，要求）发出正式声明，要求禁止禁止将将血清学检血清学检测方法测方法（抗原，抗体，蛋白芯片等）用（抗原，抗体，蛋白芯片等）用于肺结核和肺外结核的诊断。于肺结核和肺外结核的诊断。WHO warns against

5、the use of inaccurate commercial serological tests for pulmonary and extra-pulmonary TB小结活动性结核病与潜伏性结核感染的区别LTBI危险因素结核中有20%左右的肺外结核，诊断困难传统结核诊断方法不能满足临床需要内容内容 结核病基础概念结核病基础概念 T-SPOT.TB 产品知识产品知识 T-SPOT.TB 临床应用临床应用 病例分享病例分享T-SPOT.TB原理T-SPOT.TB原理：结核感染者体内存在特异的效应T淋巴细胞，效应T淋巴细胞再次受到结核抗原（ESAT-6，CFP 10）刺激时会分泌多种细胞因子

6、（ IFN- ）。因此，检测效应T淋巴细胞可用于结核病或结核潜伏感染者的诊断 列入美国、英国等欧美列入美国、英国等欧美20多个国家结核诊疗指南多个国家结核诊疗指南 美国美国CDC推荐：推荐：BCG接种人群结核感染检测首选接种人群结核感染检测首选 国内风湿科国内风湿科/消化科指南消化科指南T-SPOT.TB原理由于效应T细胞存活时间很短（6周左右），而且具有特异性，因此可以作为机体是否正处于被感染的指标，无论是否有临床症状结核杆菌特异抗原T-SPOT.TB 准确、可信、快速 特异性好特异性好只针对结核分枝杆菌复合群敏感，与绝大多数环境分枝杆菌和卡介苗（BCG）无交叉反应 美国FDA数据：特异性9

7、7.1%(297/306) 国内临床数据：特异性94.1%(478/508) 灵敏度高灵敏度高基本不受免疫力低下/受抑制影响，在肺外结核患者中有很高的检出率 美国FDA数据：灵敏度95.6%(175/183) 国内临床数据：灵敏度95.3%(624/655) 快速简便快速简便简单的血液检测，隔天报告结果阴性预测值：阴性预测值：93.9%（478/509）阳性预测值：阳性预测值：95.4%（624/654）16ReferenceSensitivityKobashi et al. J Infect. 2009; 58(3):197-204 90.0% (36/40) Domnguez et al.

8、 Diagn Microbiol Infect Dis. 2009; 63(1):43-51 84.2% (32/38) Bosshard et al. Respir Med. 2009; 103(1):30-4. 98.4% (62/63) Higuchi Med Microbiol Immunol. 2009; 198(1):33-795.9% (47/49) Kim et al. Am J Med 2009 ;122(2):189-9594.6% (53/56) Nicol et al. Pediatrics. 2009; 123:38-43 50.0% (5/10) Markova e

9、t al. Biotechnol. & Biotechnol. 2009;23(1): 1103-110861.5% (8/13) Soysal et al IJTLD 2008 12(1):50-56*80.8% (80/99) Dominguez et al Clin Vacc Immunol 2008 15(1);168-71*85.7% (36/42) Chee et al J Clin Microbiol. 2008; 46(6):1935-4094.1% (254/270) Connell et al PLoS ONE 2008. 3; 7:e2624*100.0% (9/

10、9) Kobashi et al. Scand J Infect Dis 2008. 40; 8: 629-34*87.5% (42/48) Goletti et al. PLoS ONE. 2008. 3; 10: e3417.*89.9% (62/69) Kang et al Chest. 2007 Sep;132(3):959-65*92.2% (59/64) Janssens et al ERJ 2007 30(4):722-898.3% (57/58) Clarke et al Clin Exp Immunol 2007 150(2):238-44.90.0% (27/30) Det

11、jen et al CID 2007 1;45(3):322-8*92.9% (26/28) Ozekinci et al J Int Med Res 2007;35:696-70392.9% (26/28) Vincenti et al Clin Exp Immunol. 2007 Oct;150(1):91-8*84.6% (11/13) Wang et al Emerging Infect Dis 2007 13;4:553-887.2% (34/39) Losi et al Eur Respir J. 2007 Dec;30(6):1173-9100.0% (10/10) Kim et

12、 al Arch Intern Med 167;20:2255-2259100.0% (22/22) Jafari et al 2006 AJRCCM 174;9:1048-53100.0% (12/12) Ferrara et al Lancet 2006 376;1328-34*83.3% (20/24) Lee et al Eur Respir J 2006 28;24-30*96.6% (84/87) Goletti et al Clin Microbiol Infect 2006 12;6:544-50*91.3% (21/23) Meier et al EJCMID 2005 24

13、;529-53695.9% (70/73) TOTAL91.5% (1205/1317) 国外文献汇总灵敏度国外文献汇总特异性实验效果图阴性阴性结结果果阳性阳性结结果果空白空白对对照照抗原抗原AESAT-6抗原抗原BCFP10阳性阳性对对照照（PHA）报告单根据抗原A或/和抗原B孔的反应判断结果:检测结果为“有反应性”，参照以下标准： 空白对照孔斑点数为0-5个时且（抗原A或抗原B孔的斑点数）-（空白对照孔斑点数）6 空白对照孔斑点数大于6个时且（抗原A或抗原B孔的斑点数）2（空白对照孔斑点数）如果上述标准不符合且阳性质控对照孔正常时检测结果为“无反应性”实验结果判断斑点数的意义活动性or潜伏

14、性 多少个斑点是活动性结核？多少个斑点是活动性结核？结果阳性说明患者结核感染，是潜伏性还是活动性需要结合临床症状。因个体差异，没有具体的斑点数字可以依据。但斑点数越多越倾向于活动性结核Chee et al Eur J Clin Microbiol Infect Dis (2008)（IF=3.02）活动性与潜伏性结核感染患者中，T-SPOT.TB斑点数比较Janssens et al ERJ (2007)（IF=6.35）活动性与潜伏性患者中T-SPOT.TB斑点数的比较(TST+和 TST-)斑点数的意义现症感染 之前得过结核治愈了，之前得过结核治愈了，T-SPOT结果如何？结果如何？T-S

15、POT检测的是现症感染。如果彻底治愈，体内无结核分枝杆菌，则结果阴性；如果结果是阳性，则说明患者体内还存在结核分枝杆菌，还在结核感染中 陈旧性结核体内会存在记忆T细胞，但记忆T细胞在全血中的数量非常少，而且抗原再次激活孵育时间远远超过24h，不会因为记忆细胞的存在而产生斑点 文献显示，大概只有38%左右的活动性结核患者经过治疗，T-SPOT结果会转阴Chee et al. , AJRCCM (2006)（IF=11.04）Ribeiro S, Dooley K, et al. BMC Infect Dis, 2009 （IF=3.02）方法：在肺结核治疗中，用T-SPOT.TB方法评估治疗效果

16、。在治疗开始前，治疗16周和24周后，分别计数ESAT-6和CFP-10刺激产生的斑点数图1. 所有研究对象ESAT-6, CFP-10和总RD1在治疗前，16周后和24周后的平均斑点数（n=58）在24周完整疗程后，ESAT-6, CFP-10和总RD1产生的平均SFCs分别从42.7, 41.2和83.8降到23.3, 23.2和46.5 ，有显著性差异结论：T-SPOT.TB试验中检测的由RD1特异T细胞产生的-干扰素与肺结核患者在治疗中的结核杆菌量直接相关斑点数的意义治疗前后变化注意事项注意事项采血量：采血量：6-10ml采血管：采血管：肝素抗凝样本保存：样本保存：当天送样，常温运输注

17、意：注意：PET-CT与输血方法学优点 特异性95%左右，不受卡介苗（BCG）接种与环境分枝杆菌影响 灵敏度95%左右，几乎不受个体免疫功能低下影响 快速，24小时报告结果 国内外指南推荐，多篇文献数据支持 斑点数意义：斑点越多越倾向活动性结核、现症感染、能反应疗效 送样的注意事项方法学缺点 不能够提示临床患者的病变部位，需要结合临床的判断 目前还不能够根据斑点数量的多少来判断患者是活动性结核病或是潜伏感染者内容内容 结核病基础概念结核病基础概念 T-SPOT.TB 产品知识产品知识 T-SPOT.TB 临床应用临床应用 病例分享病例分享肺外结核结核分枝杆菌能侵染全身大部分器官，其中有20%发

18、生在肺外临床应用科室科室应用应用呼吸科呼吸科/结核科结核科呼吸系统疾病和结核的鉴别诊断；胸水/心包积液鉴别诊断；2周以上的不明原因发热病人的结核感染排筛；菌阴肺结核的辅助诊断；特殊人群（矽肺等）的结核排筛传染传染/感染科感染科2周以上的不明原因发热病人的肺结核排筛血液科血液科血液病治疗前后的结核筛查内分泌科内分泌科糖尿病患者结核的排筛神经内科神经内科结核性脑膜炎的辅助诊断临床应用科室科室应用应用风湿免疫科风湿免疫科生物制剂/免疫抑制剂治疗前后的筛查；剂量激素治疗前后的结核筛查；自身免疫性疾病与结核病的鉴别诊断；发热待查患者的结核排筛儿科儿科儿童肺结核的辅助诊断；儿童肺外结核的辅助诊断消化科消化

19、科腹水（结核性腹膜炎）待查；CD（克罗恩病）与肠结核的鉴别诊断；生物制剂治疗患者的结核筛查；发热待查国内外文献举例 T-SPOT.TB的灵敏度为94.7%(71/75)，肺疾病组和肺外疾病组中分别为95.6%和93.3%，特异性为84.1%(90/107)，肺疾病组和肺外疾病组中分别为69.2%和88.9%。冯云, 张文宏等. PLOS ONE, 2012（IF=3.73） 北京协和医院感染内科2004年至2010年收治的997例不明原因发热患者的病因分析显示，感染性疾病一直是最主要的病因，占479例(48.0%)，其中结核病占45.3%(217/479)侍效春, 刘晓清等. Chin Med

20、 J, 2013（IF=0.901）国内外文献举例 在84例CD或ITB患者中，T-SPOT是诊断ITB一个很好的指标，其灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别是84.2%、75.4%、50.0%和94.2%。李玥, 钱家鸣等. J Crohns Colitis, 2012（IF=2.566） 在60 例CD 以及34 例ITB 患者中，T-SPOT.TB 和PCR 方法的鉴别诊断效能：雷媛, 夏冰. Journal of Digestive Diseases, 2013（IF=1.853）敏感性敏感性%特异性特异性%PPV%NPV%T-SPOT88.293.388.293.3PCR52.

21、990.075.077.1国内外文献举例 293例怀疑结核病的非洲儿童，T-SPOT在年龄小于3岁、HIV感染和营养不良的儿童中灵敏度分别是85%、73%和78%。如果结合TST的结果，T-SPOT的灵敏度达到91%Liebeschuetz S, et al. Lancet, 2004（IF=39.06） 在77名结核病和51名健康儿童中，T-SPOT灵敏度为89.2%，特异性为94.1%，明显高于TST（灵敏度77.0%，特异性70.6%），卡介苗是否接种对结果没有显著影响。孙琳, 申阿东等. Chin Med J, 2010（IF=0.901）消化科-国内外指南 IBD诊断：在结核高流行区域要排除肠结核，方法包括PPD和-干扰素测定（T-SPOT.TB试验） CD排除肠结核的相关检查：胸部X线片，PPD试验，有条件时可行IFN-释放试验（T-SPOT.TB试验）Worl