依达拉奉在鼠氧自由基心肌损害和人病毒性心肌炎中的抗氧化作用研

1、依达拉奉在鼠氧自由基心肌损害和人病毒性心肌炎中的抗氧化作用研究 11-04-12 13:36:00 作者：戴闽，刘静，吴屹编辑：studa20【摘要】 目的 研究依达拉奉在鼠氧自由基(OFR)心肌损害和人病毒性心肌炎(VMS)中的抗氧化作用。方法 通过检测大鼠心肌细胞培育液的心肌细胞存活力(CMV)，超氧化物歧化酶(SOD)，丙二醛(MDA)，肌钙蛋白T(cTnT)指标以对比依达拉奉、维生素C和辅酶Q10 对经氧自由基预处理的心肌细胞的保护作用。检测治疗前后血清SOD，MDA, cTnT指标以对比依达拉奉、维生素C和辅酶Q10 对VMS患者的治疗作用。结果 (1)大鼠实验示：依达拉奉组CMV高

2、于维生素C组(P0.05)和辅酶Q10 组(P0.05),SOD活性高于维生素C(P0.05);MDA低于维生素C组(P0.05)及辅酶Q10 组(P0.05); cTnT低于维生素C组(P0.05)及辅酶Q10 组(P0.05)。(2)VMS研究示：经治疗，依达拉奉组患者SOD活性上升高于维生素C组及辅酶Q10 组(均为P0.05); MDA和cTnT下降高于维生素C组及辅酶Q10 组( MDA均为P0.01，cTnT均为P0.05)。结论 依达拉奉在鼠OFR心肌损害和VMS的抗氧化治疗中有明显效果。 【关键词】 依达拉奉;氧自由基;病毒性心肌炎ABSTRACT Objective To s

3、tudy the anti-oxygen effect of edaravone on the injured myocardial cells of rats by oxygen free radicals (OFR) and on those of patients with viral myocarditis. Methods The detected index of cardiomyocytes viability (CMV), superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA) and troponin T (cTnT) of the

4、 injuried myocardial cells of rats by OFR were applied in the comparative observation of the protective effect of edaravone, Vitamin C and coenzyme Q10 on the myocardial cells pre-prepared by OFR; the index of SOD, MDA and cTnT in serum detected before and after treatment were applied in the compara

5、tive observation of the therapeutic effect of edaravone, Vitamin C and coenzyme Q10 on patients with viral myocarditis (VMS). Results (1) The experiment on rats showed out: the CMV in edaravone group was higher than that in Vitamin C group (P0.05) and that in coenzyme Q10 group (P0.05); the SOD acti

6、vity in edaravone was higher than that in Vitamin group (P0.05); the MDA and cTnT in edaravone group were lower than those in Vitamin C group (P0.05) and those in coenzyme Q10 group (P0.05). (2) The observation of the patients with VMS showed out: the SOD activity of the patients in edaravone group

7、rose higher than that in Vitamin C group (P0.05) and that in coenzyme Q10 group (P0.05); the decrease of MDA and cTnT in edaravone group was more significant that that in Vitamin C group (P0.01) and that in coenzyme Q10 group (P0.05). Conclusions Edaravone is of obvious effect on the injuried myocar

8、dial cells of rats and in anti-oxygen treatment of the patients with VMS.KEYWORDS edaravone oxygen free radicals viral myocarditis国内外多项研究已证实氧自由基(oxygen free radicals OFR)对心血管系统的损害1-2,OFR参与了心肌炎、心力衰竭、克山病和冠心病等多种心血管疾病的发生发展过程3，尤其在病毒性心肌炎(VMS)的过氧化损害中起重要作用。目前VMS的抗氧化治疗主要是大剂量维生素C4,但剂量过大可使血液酸度升高，对心肌亦有损害。其他抗氧化剂

9、如辅酶Q10存在难溶解，易沉淀，质量不稳定等工艺问题。依达拉奉(Edaravon 3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮)是一种新型氧自由基清除剂5，该药能高效清除病变部位氧自由基，在脑缺血再灌注损伤的治疗中有一定疗效，因此用于VMS的抗氧化治疗应具有很大潜力。本研究旨在观察依达拉奉对氧自由基所致大鼠心肌损害的保护作用和对人VMS的治疗作用，探讨其机制，为临床寻找VMS抗氧化治疗的可行方法提供参考。1 材料与方法1.1 研究对象和材料 (1)实验动物：wistar大鼠乳鼠10只，购于四川大学华西医学中心，平均体重(25020)g(合格证号：川实动管第70号)。(2)临床患者：2007年5月20

10、09年6月间就诊于我院满足：发病1周内，肌钙蛋白T(cTnT)阳性，特异型柯萨奇B组病毒(CVB)IgM阳性，符合1999年全国心肌炎心肌病专题研讨会提出的成人急性心肌炎诊断参考标准的患者30名，平均(18.715.62)岁。(3)材料：小牛血清由成都华西生物研究所提供;DMEM培养基、胰蛋白酶由GIBCO公司(美国)提供;依达拉奉注射液(10mg/5ml)由先声药业提供(国药准字H20031342);辅酶Q10注射液(5mg/250ml)由西南药业提供(国药准字H10061135);丙二醛(malondialdehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，S

11、OD)实剂盒均购于南京建成生物工程研究所。1.2 方法1.2.1 动物实验1.2.1.1 模型制作及指标测定 参考文献6方法在四川大学华西基础医学与法医学院实验室进行大鼠模型制作：wistar大鼠无菌条件下开胸取心，剪碎，胰蛋白酶消化成单细胞，用含胎牛血清、青霉素、链霉素的DMEM培养基制成心肌细胞悬液。接种于六孔板，密闭静置37培养，第3天供实验用。用Mossman法测定心肌细胞存活力(CMV);肌钙蛋白T(cTnT)测试仪测算cTnT浓度;硫代巴比妥酸(TBA)法测算MDA活性;黄嘌呤氧化酶法测算SOD活力。1.2.1.2 实验分组及指标测算 大鼠心肌细胞随机分为5组：第组：对照组;第组：

12、(H2O2组)心肌细胞培养液中加入200mol/L H2O2;第组：(H2O2 加维生素C组)培养液中加入200mol/L H2O2 和50mg/L维生素C;第组：(H2O2 加辅酶Q10组)培养液中加入200mol/L H2O2 和5mg/L辅酶Q10注射液;第组：(H2O2 加依达拉奉组)培养液中加入200mol/L H2O2 和30mg/L依达拉奉注射液。于20min后测算各组CMV，SOD活力，MDA，cTnT指标。1.2.2 临床研究1.2.2.1 药物干预及实验分组 本研究程序符合人体实验伦理标准，所有患者均需签署知情同意书。入院后诊断为VMS的患者按计算机产生的随机序号分为维生素C组、辅酶Q10组及依达拉奉组，均常规给予卧床休息，利巴韦林抗病毒感染及对症治疗。维生素C组(第组)给予静脉维生素C 500mg/d;辅酶Q10组(第组)给予静脉辅酶Q10 5mg/d;依达拉奉组(第组)给予静脉依达拉奉50mg/d治疗;疗程7天。1.2.2.