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临床基因扩增检验操作规范临床基因扩增检验操作规范 一、临床基因扩增检验实验室的一、临床基因扩增检验实验室的 规范化设置及其各室的功能规范化设置及其各室的功能(一)试剂贮存和准备区(一)试剂贮存和准备区(二)标本制备区(二)标本制备区(三)扩增区(三)扩增区(四)扩增产物分析区(四)扩增产物分析区二、各阶段操作要求二、各阶段操作要求(一)标本的采集(一)标本的采集(二)标本的稳定化处理(二)标本的稳定化处理(三)标本的运送(三)标本的运送(四)标本的贮存(四)标本的贮存(五)标本的处理(核酸提取)(五)标本的处理(核酸提取)(六)靶核酸的逆转录(六)靶核酸的逆转录(RT)和扩增和扩增(七)扩增产物的分析(七)扩增产物的分析实时荧光定量PCRTaqMan荧光定量荧光定量PCR原理原理三、三、PCR污染与对策污染与对策(一)污染的预防(一)污染的预防1、阳、阴性对照、阳、阴性对照2、常见的环境污染源有、常见的环境污染源有 追踪可疑的环境污染源追踪可疑的环境污染源1. 环境污染处理法环境污染处理法2. 反应液的污染处理法反应液的污染处理法 T A T A T A T A T A PCR A U A U A U UNG A A A 加热加热 A A A PCR(二)实验室布局不合理引起的污染问题(二)实验室布局不合理引起的污染问题(三)(三)PCR
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