磁珠法血片DNA提取试剂盒-工艺体系及质控标准

1、L品名、组份及规格品名中文名称：血片基因组DNA提取试剂盒（磁珠法）英文名称：Magbead Blood Spots DNA Kit产品组份及规格试剂成分颜色50 preps (ml)100 preps (ml)Buffer FTB16 ml32 mlBuffer LB16 ml32 mlBuffer MW134 ml68 mlBuffer MW235 ml65 mlProteinase K22mg44mgProteinase Buffer1.3ml2.6 mlMagbeads PN800 ul1.6 mlBuffer TB6 ml12 ml.简要原理及预期用途本试剂盒利用经过特殊外表处理的纳

2、米级超顺磁性,在一定条件下对核酸具有很强的亲 和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的核酸，能够到达快速别离纯化核酸的目的，并有效 除去蛋白、有机物等杂质。使用本试剂盒纯化的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、 PCR、文库构建、Sanger法测序、芯片检测、高通量测序等实验。.生产工艺流程图.原材料5M NaCl的配制及质量标准5M NaCl 配制5M NaCl 配方配制准备：准备天平、称量纸、移液器、量筒、1L烧杯等试剂名称存储温度规格（配制1L）氯化钠常温292.5g无酶水常温加水定容至1L配制：按照配方中各成分的体积进行试剂配制，称量292.5g固体氯化钠，溶于水中， 由于浓度较高，可加

3、热溶解，温度不宜超过50,最后剩余少量小颗粒加水接近1L后搅拌 溶解完全，定容1L后可分装至小体积，标签上需有试剂名称，生产批号等信息，室温保存。5M NaCl质量标准外观：配制成的5M NaCl肉眼观察为无色透明液体，无刺激性气味. Buffer FTB的生产工艺及质量标准Buffer FTB的生产工艺Buffer FTB 的配方:试剂浓度试剂名称存储温度规格（配制10ml）96*40 次100%Triton X-100常温100ul12ml10%SDS常温1ml120ml1MTris-Hcl(PH 5.2)41 ml120ml0.5MEDTA (PH8.0)常温lOOul12ml无酶水常温

4、补水至10ml补水至1.2L试剂名称：Buffer FTB300ul/反响1.2L配制准备：准备天平、称量纸、移液器、量筒、1L烧杯等;5.1.3 Buffer FTB 配制：按照配方中各成分的体积进行试剂配制，所有试剂必须震荡离心后方可使用，最后保证 试剂充分混匀。性能验证：按照磁珠法血片DNA提取标准操作规程流程进行，保证每个测试环节只有一个变 量，与市面上与已有的相同产品比对，对结果进行分析，选出合适的实验条件，整理入档。 分装：验证结果性能合格后，按以下规格对试剂进行分装，用50ml的无菌瓶进行分装，标签 上需有试剂名称，生产批号等信息。试剂名称50次（ml/反响）100次（ml/反响

5、）颜色Buffer FTB16ml32ml储存条件及效期：常温干燥条件下储存，有效期为12个月。Buffer FTB的质量标准外观：配制成的Buffer FTB肉眼观察为无色透明液体，无刺激性气味，震荡会有大量 泡沫出现，待静止一段时间后，泡沫会逐渐消失。522PH值：配制成的Buffer FTB的pH约6.7血片DNA提取检测：严格按照配方中各成分的体积进行试剂配制后，选用正常血片样本，按照磁珠法血片 DNA提取标准化操作规程流程进行。与市面上已有的产品比对，从提取的DNA纯度、 浓度、片段大小等方面分析，确保优于或者与市面上已有产品效果相同。. Buffer LB的生产工艺及质量标准6.1

6、 Buffer LB的生产工艺6.1.1 Buffer LB 的配方配制准备：准备天平、称量纸、移液器、量筒、L5L烧杯等;试剂浓度试剂名称存储温度规格（配制10mD96*40 次100%Triton X-100常温200ul24ml异硫氟酸服常温5.91g709.2g1MTris-Hcl(PH 5.2)42 ml240ml5MNaCl4600ul72ml0.5MEDTA (PH8.0)常温200ul24ml无酶水常温补水至10ml补水至1.2L试剂名称：Buffer LB30(hiI/反响1.2L6.1.3 Buffer LB 配制：按照配方中各成分的体积进行试剂配制，所有试剂必须震荡离心后

7、方可使用，最后保证 异硫氟酸胭充分溶解、加水定容至所需体积。由于异硫氧酸胭浓度较大，为了方便溶解，可 对其进行加热，温度不宜超过50。性能验证：按照磁珠法血片DNA提取标准操作规程流程进行，保证每个测试环节只有一个变 量，与市面上与已有的相同产品比对，对结果进行分析，选出合适的实验条件，整理入档。 分装：验证结果性能合格后，按以下规格对试剂进行分装，用30ml的无菌瓶进行分装，标签 上需有试剂名称，生产批号等信息。试剂名称50次(ml/反响)100次(ml/反响)颜色Buffer LB13ml26ml储存条件及效期：常温干燥条件下储存，有效期为12个月。6.2 Buffer LB的质量标准外观

8、：配制成的Buffer LB肉眼观察为无色透明液体，无刺激性气味，震荡会有大量 泡沫出现，待静止一段时间后，泡沫会逐渐消失。622 PH值：配制成的Buffer LB的pH约6.3血片DNA提取检测：严格按照配方中各成分的体积进行试剂配制后，选用正常血片样本，按照磁珠法血片 DNA提取标准化操作规程流程进行。与市面上已有的产品比对，从提取的DNA纯度、 浓度、片段大小等方面分析，确保优于或者与市面上已有产品效果相同。7. Buffer MW1的生产工艺及质量标准7.1 Buffer MW1的生产工艺7.1.1 BufferMW1的配方（每个反响需洗涤两次）:试剂浓度试剂名称存储温度规格（配制1

9、0ml）96*40 次100%Triton X-100常温200ul52ml盐酸胭常温4.74g1232.4g1MTris-Hcl（PH 5.2）42ml520ml5MNaCl4280ul72.8ml0.5MEDTA PH8.0常温lOOul26ml无酶水常温补水至10ml补水至2.4L试剂名称：Buffer MW1650111/反响（加无水乙醇前）2.6L （加无水乙醇前）配制准备：准备天平、称量纸、移液器、量筒、L5L烧杯等;7.1.3 Buffer MW1 配制：按照配方中各成分的体积进行试剂配制，所有试剂必须震荡离心后方可使用，最后保证 盐酸胭充分溶解、加水定容。性能验证：按照磁珠法血

10、片DNA提取标准操作规程流程进行，保证每个测试环节只有一个变 量，与市面上与已有的相同产品比对，对结果进行分析，选出合适的实验条件，整理入档。 分装：验证结果性能合格后，按以下规格对试剂进行分装，用100ml的无菌瓶进行分装，标 签上需有试剂名称，生产批号、使用前需要加入无水乙醇量等信息。试剂名称50次（ml/反响）100次（ml/反响）颜色Buffer MW134ml68ml7.L6储存条件及效期：常温干燥条件下储存，有效期为12个月。7.2 Buffer MW1的质量标准外观：配制成的Buffer MW1溶液肉眼观察为无色透明液体，无刺激性气味，震荡会 有大量泡沫出现，待静止一段时间后，泡

11、沫会逐渐消失。pH：配制成的 Buffer MW1 的 pH 约 5.8血片DNA提取检测：严格按照配方中各成分的体积进行试剂配制后，选用正常血片样本，按照磁珠法血片 DNA提取标准化操作规程流程进行。与市面上已有的产品比对，从提取的DNA纯度、浓度、片段大小等方面分析，确保优于或者与市面上已有产品效果相同。Buffer MW2的生产工艺及质量标准8.1 Buffer MW2的生产工艺8.1.1 Buffer MW2的配方（每个反响需洗涤两次）:试剂浓度试剂名称存储温度规格（ill/反响）96*40 次1MTris-Hcl(PH 8.0)415ul60ml无水乙醇常温150ul600ml无酶水

12、常温435ul1740ml试剂名称：Buffer MW26003 （加无 水乙醇前）2.4L （加无水 乙醇前）配制准备：准备移液器、量筒、1.5 L烧杯等;8.1.3 Buffer MW2 配制：按照配方中各成分的体积进行试剂配制，所有试剂必须震荡离心后方可使用，保证试剂 充分混匀。性能验证：按照磁珠法血片DNA提取标准操作规程流程进行，保证每个测试环节只有一个变 量，与市面上与已有的相同产品比对，对结果进行分析，选出合适的实验条件，整理入档。 分装：验证结果性能合格后，按以下规格对试剂进行分装，用100 ml的无菌瓶进行分装，标 签上需有试剂名称，生产批号、使用前需要加入无水乙醇量等信息。

13、试剂名称50次（ml/反响）100次(ml/反响)颜色Buffer MW230ml60ml储存条件及效期：常温干燥条件下储存，有效期为12个月。8.2 Buffer MW2的质量标准外观：配制成的Buffer MW2溶液肉眼观察为无色透明液体，有淡淡乙醇气味。pH 1：配制成的 Buffer MW2 的 pH 约 7.5血片DNA提取检测：严格按照配方中各成分的体积进行试剂配制后，选用正常血片样本，按照磁珠法血片 DNA提取标准化操作规程流程进行。与市面上已有的产品比对，从提取的DNA纯度、 浓度、片段大小等方面分析，确保优于或者与市面上已有产品效果相同。Buffer TB生产工艺及质量标准9

14、.1 Buffer TB生产工艺9.1.1 Buffer TB 配方配制准备：准备移液器、量筒、500 ml烧杯等;试剂浓度试剂名称存储温度规格（ul/反响）96*40 次1MTris-Hcl(PH 8.0)4lul4ml无酶水常温99ul396ml试剂名称：Buffer TB100ul400mL9.1.3 Buffer TB 配制：按照配方中各成分的体积进行试剂配制，所有试剂必须震荡离心后方可使用，保证试剂 充分混匀。性能验证:按照磁珠法血片DNA提取标准操作规程流程进行，保证每个测试环节只有一个变 量，与市面上与已有的相同产品比对，对结果进行分析，选出合适的实验条件，整理入档。 分装：验证

15、结果性能合格后，按以下规格对试剂进行分装，用25ml的无菌瓶进行分装，标签 上需有试剂名称，生产批号等信息。试剂名称50次（ml/反响）100次（ml/反响）颜色Buffer TB6ml12ml9.L6储存条件及效期：常温干燥条件下储存，有效期为12个月。9.2 Buffer TB质量标准外观：配制成的Buffer TB溶液肉眼观察为无色无味透明液体。922 PH值:配制成的Buffer TB的pH 8.0Proteinase Buffer生产工艺及质量标准10.1 Proteinase Buffer 生产工艺10.1.1 Proteinase Buffer 配方试剂浓度试剂名称存储温度规格（

16、ul/反响）96*40 次1MTris-Hcl(PH 8.0)4lul4ml甘油常温9ul36ml无酶水常温10ul40ml试剂名称：Proteinase Buffer20 ul80ml配制准备：准备移液器、量筒、100 ml烧杯等;10.1.3 Proteinase Buffer 配制：按照配方中各成分的体积进行试剂配制，所有试剂必须震荡离心后方可使用，保证试剂 充分混匀、定容。性能验证：按照磁珠法血片DNA提取标准操作规程流程进行，保证每个测试环节只有一个变 量，与市面上与已有的相同产品比对，对结果进行分析，选出合适的实验条件，整理入档。 10.1.5 分装：验证结果性能合格后，按以下规格

17、对试剂进行分装，用2ml的无菌离心管进行分装， 标签上需有试剂名称，生产批号等信息。试剂名称50次（ml/反响）100次（ml/反响）颜色Proteinase Buffer1.3ml2.6ml储存条件及效期：常温干燥条件下储存，有效期为12个月。2 Proteinase Buffer 质量标准外观：配制成的Proteinase Buffer溶液肉眼观察为无色无味透明液体。Proteinase Buffer 检测：此Buffer溶解蛋白酶K粉末后的溶液，保存稳定，存放于-20不冻结。Proteinase K粉末生产工艺及质量标准11.1 Proteinase K粉末生产工艺11.1.1 Prot

18、einase K 粉末配方：试剂浓度试剂名称存储温度规格（50次反响）96*40 次Proteinase K 粉末室温20mg1600mg1配制：按照20mg蛋白酶粉末中加入1ml的Proteinase Buffer进行配制，分装后于-20 保存。1LL3分装：按要求的量，用2ml的EP管分装。试剂名称50次反响100次 反响颜色Proteinase K 粉末22mg44mg1LL4储存条件及效期：室温储存，有效期为12个月。2 Proteinase K粉末质量标准外观：没加Buffer之前为白色粉末状，加入相应的Buffer溶解之后，为无色无味的 透明液体。血片DNA提取检测：需厂家提供相应的生产合格证明。选用正常血片样本，按照磁珠法血片DNA提取 标准化操作规程流程进行。与市面上已有的产品比对，从提取的DNA纯度、浓度、片段 大小等方面分析，得出此蛋白酶K是否符合实验要求。Magbeads PN生产工艺及质量标准12.1 Magbeads PN 生产工艺12.1.1 Magbeads PN 配方：试剂浓度试剂名称存储温度规格（111/反响）96*40 次Magbeads PN常温15ul