自体外周血干细胞移植治疗急性心肌梗死临床研究

1、自体外周血干细胞移植治疗急性心肌梗死临床研究 急性心肌梗死(AMI)目前治疗手段包括药物、 冠状动脉 介入治疗(PCI)、冠状动脉旁路手术 (CABG)等; 但上述手段均难以从根本上恢复心肌细胞数量， 改善 心脏舒缩功能； 干细胞移植为心肌梗死的治疗开辟了一条崭新的途径 。概 述辽宁省心血管病医院 观察经皮经腔冠状动脉内移植自体外周血干细胞(PBSC)治疗急性心肌梗死(AMI)的疗效与安全性。 辽宁省心血管病医院研 究 目 的资料与方法辽宁省心血管病医院研究路线 入选AMI病例70例 AMI常规治疗(药物+PCI) 分为移植组和对照组 术前超声心动图检查和术后6个月随访 辽宁省心血管病医院病例

2、选择入选标准 （1）年龄75岁 （2）急性心肌梗死 （3）知情同意 （4）不具备任一项排除标准 辽宁省心血管病医院病例选择排除标准（一） 不能进行经皮经冠状动脉血管成形术； 既往或当前的肿瘤病史或其他可能影响短期 存活的致死性疾病； 年龄75岁； 贫血（HB100克/升）及凝血功能障碍。辽宁省心血管病医院病例选择排除标准（二） 活动性感染； 骨组织接受过异常射线照射； 原发的溶血性疾病； 当时存在血液动力学不稳定，休克等； 任何情况，只要医生判断患者处于危险状态。辽宁省心血管病医院（一）急性心梗的常规药物治疗药物治疗阿司匹林、氯吡格雷抗凝硝酸酯类他汀类药物-blockerACEI / ARB其

3、他辽宁省心血管病医院方 法（二）干细胞移植前行靶血管 经皮冠状动脉腔内成形术 （PTCA/STENT）辽宁省心血管病医院方 法（三）外周血干细胞动员动员前检查 血常规（细胞形态室） 检查血细胞分数有无异常 有无幼稚细胞 肿瘤系列 凝血功能 决定患者是否入选的其它必要检查（肝、 肾功能等）辽宁省心血管病医院方 法动员：剂型:包涵体型粒细胞集落刺激因子 （商品名：惠尔血 ，麒麟昆鹏生物制药有限公司生产。）剂量: 300g ,qd/bid, 连用5天外周血干细胞动员辽宁省心血管病医院 动员组患者（300 g/day与600g/day ）： 在动员后第3、4、5、6、7天查外周血中WBC计数和分 类计

4、数，及CD34+细胞数量。 对照组患者： 在AMI后第3、5、7、8 天查外周血中CD34+细胞数量。 外周血干细胞动员辽宁省心血管病医院（四）外周血干细胞分离与采集分离前准备 患者生命体征平稳，心功能级； 血离子（钾、钠、氯、钙、镁、磷）正常； 分离前预防性口服葡萄糖酸钙。辽宁省心血管病医院方 法分离设备：美国Baxter公司生产的3000 PLUS 血细胞分离机； 采集血量：患者体重的78（根据心 功能状况酌情调整机采血量）；采集的外周血骨髓单个核细胞悬浮液的容积： 57毫升。 分离与采集辽宁省心血管病医院（五） PBSC经冠状动脉内回输 手术当日，采用Seldering技术建立股动脉通路

5、，用指引导管行梗死相关动脉造影；将over the wire球囊置入支架内，加压球囊，封闭支架远端的血管，将分离的PBSC悬液经over the wire球囊导管中心腔内注入梗塞血管远端；根据冠状动脉直径选择适当的封堵球囊直径。辽宁省心血管病医院方 法（六）安全性监测 外周血干细胞动员时观察； 外周血干细胞分离及采集过程中观察； 外周血干细胞经冠状动脉内回输过程中观察。辽宁省心血管病医院方 法常见并发症：骨痛，乏力，皮疹，发热，胃 肠 道反应（恶心、呕吐、便秘），心 绞痛或心力衰竭加重；少见并发症：自发性脾破裂、严重化脓性感染、 高凝状态、自身免疫性疾病等发生。 外周血干细胞动员时观察 安全性

6、监测辽宁省心血管病医院安全性监测 有无ACD中毒（低钙性口周麻木、抽搐）； 迷走神经反应性面色苍白、晕厥； 低血容量性面色苍白、晕厥； 心绞痛发作，心衰加重等。 分离及采集过程中观察 安全性监测辽宁省心血管病医院有无心律失常发生 窦性心动过缓 窦性停搏 AVB 室早、室速、室颤 低血压等 经冠状动脉内回输过程中观察安全性监测辽宁省心血管病医院（七）超声心动图监测 干细胞移植术前及术后6个月时检查； 采用双平面Simpson法； 评价左室形态（EDV 及ESV）； 心功能（LVEF） ； 室壁节段性运动积分(WISM）的改变。辽宁省心血管病医院方 法（八）生存率分析及心脏事件观察随访6个月生存率

7、分析；随访6个月心脏事件： 再发心梗 心绞痛恶化住院 CABG 再次PTCA 急性左心衰 心肺复苏 辽宁省心血管病医院方 法（九）统 计 学 分 析 采用SPSS10.0统计软件； 所有计量资料以均数标准差表示； 组间分析采用成组t检验； 计数资料采用X2检验； P0.05有统计学意义。辽宁省心血管病医院结 果辽宁省心血管病医院 共入选AMI病人70例； 干细胞移植组35例，常规治疗组35例； 两组在年龄、性别、AMI发生时间、AMI部位、 梗死相关血管均无统计学差异，见表1。 （一）基线资料情况 2003年11月19日-2005年1月结 果辽宁省心血管病医院 表1：两组之间基线情况比较（XS

8、）结 果辽宁省心血管病医院 表1：两组之间基线情况比较（XS）结 果辽宁省心血管病医院 移植组 对照组 P例数 35 35年龄（岁） 60.111.5 60.311.2 0.95男 28 7女 28 7 AMI时间（天） 65 6.1 4.8 0.69前壁AMI 12 13下壁AMI 15 17 前下壁AMI 8 5 0.54经冠状动脉回输细胞数结 果辽宁省心血管病医院干细胞悬液中CD34细胞数为： （7.257.33）107外周血干细胞动员效率结 果辽宁省心血管病医院移植组: 不同剂量G-CSF行外周血干细胞动员时：外周血中WBC与动员时间变化曲线见图1；外周血中CD34+数量与动员时间变化

9、曲线见图2；对照组: 外周血中CD34+数量与AMI发生时间变化曲线见图3 ； 300 g/day与600g/day两组外周血中WBC与动员时间变化曲线动员前 第3天 第4天第5天第6天第7天 动 员300g/day600g/day图1辽宁省心血管病医院300 g/day与600g/day两组外周血中 CD34+细胞数量与动员时间变化曲线第3天 第4天 第5天 第6天 第7天 300g/day600g/day 动 员图2辽宁省心血管病医院对照组外周血中CD34+数量与AMI发生时间变化曲线AMI第3天 第5天 第7天 第8天 动 员对照组图3辽宁省心血管病医院随访6个月：移植组 均无死亡病例发

10、生 对照组 （二）生存率分析结 果辽宁省心血管病医院 （三）心脏事件移植组（例） 对照组（例） 再发心梗 0 2心绞痛恶化住院 1 2 CABG 0 0再次PTCA 0 0急性左心衰 0 0心肺复苏 0 0 表2：各组6个月时发生心脏事件比较 结 果辽宁省心血管病医院 （四）超声心动图监测治疗组与对照组移植前多项超声指标之间均 无显著性差异，见表3；结 果辽宁省心血管病医院 表3：两组移植前超声检测指标的比较 （XS） 项目 治疗组 对照组 P值 EDV (mm) 134.236.7 122.135.3 0.182 ESV (mm) 63.824.9 59.425.3 0.507 EF (%)

11、 50.08.2 51.08.1 0.568 WMSI 1.220.19 1.240.18 0.593 辽宁省心血管病医院治疗组与对照组入选后6个月多项超声指标之间比较：EDV及ESV均无显著差异(P0.50、P 0.10)；EF升高(P0.04 )；WMSI(P=0.03 )；见表4。 （四）超声心动图监测结 果辽宁省心血管病医院表4：两组入选后6个月超声指标的比较（XS） 项目 移植组 对照组 P值 EDV (mm) 119.230.3 113.524.1 0.50ESV (mm) 52.620.3 52.69.6 0.10EF (%) 57.17.8 52.65.7 0.04WMSI 1

12、.100.12 1.180.14 0.03结 果辽宁省心血管病医院 （五）安全性评价 在外周血干细胞动员、分离采集及回输中总的 不良反应为35例； 动员时不良反应占37.1%(13/35)，见表5； 分离和采集中的不良反应占15.3%(5/35)，见表6； 经冠状动脉内回输过程中不良反应占20%(7/35)， 见表7。辽宁省心血管病医院结 果 表5：外周血干细胞动员时不良反应 不良反应 发生例数 发生率(%) 骨痛 6 17.1 低热 3 8.6 皮疹 1 2.9 乏力 2 5.7 脾栓塞 1 2.9 胃肠道反应 0 0 其它 0 0 合计 13 37.1 安全性评价辽宁省心血管病医院 表6：外周血干细胞分离和采集中的不良反应不良反应 发生例数 发生率(%) 低钙性口周麻木 3 8.6 心绞痛发作 2 5.7 低血容量性面色苍白、晕厥 0 0 低血容量性面色苍白、晕厥 0 0 其它 0 0 合计 5 14.3 辽宁省心血管病医院安全性评价表7：外周血干细胞回输中的不良反应 不良反应 发生例数 发生率(%) 窦性心动过缓 1 2.9 窦性停搏III度房室传导阻滞低血压 1 2.9 室颤 1 2.9