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文档简介
双向免疫扩散试验 临床免疫学检验教研室实验目的1. 掌握双向免疫扩散实验的原理,操作方 法;2. 正确理解抗体效价的含义;(1:2/1:4)实验原理本质上属于固相免疫沉淀反应;抗原和抗体分别在含有电解质的固相介质孔中, 各自向四周扩散, 若抗体抗原相对应, 则在比例适宜处形成沉淀线;若将待检抗体做系列倍比稀释,可以根据白色沉淀线逐渐消失的情况确定抗体的效价。试剂与材料1. 已知浓度的抗原: 人IgG2. 1.5%琼脂糖: 生理盐水配制3. 生理盐水4. 载玻片, 移液管,打孔器, 针头,移液器, 湿盒,5. 待测抗血清实验步骤1. 标记 2. 制板(45ml琼脂糖溶液/玻璃板; 静置待凝) 3. 打孔(梅花形,间距保持45mm) 4. 固定(过火56次) 5. 准备抗血清(1/2;1/4;1/8;1/16) 6. 加样(10l/孔)7.温育结果判断:出现沉淀线的最高抗体稀释度即为该抗体在对应抗原浓度下的效价。注意事项:自己总结思考题:1. 如何根据双扩实验中沉淀线的状态对抗原和抗体的性质进行分析?梅花形加样
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