糖尿病合并冠心病患者血小板表面受体FcγRⅡA和CD40配体

1、糖尿病合并冠心病患者血小板外表受体FcRA和CD40配体【摘要】目的：讨论2型糖尿病(2-d)合并冠心病(hd)病人血小板外表受体fra(d32)和d40配体d40l的表达程度及二者的相关性。方法：选择单纯hd患者36例(组)、单纯2-d患者35例(组)、2-d合并hd患者33例(组)及正常对照者30名(正常对照组)，采用流式细胞术分别检测其血小板外表fra和d40l的表达程度,并将二者作相关分析。结果：组血小板fra和d40l程度较对照组、组及组均显著升高p0.050.01,血小板外表fra和d40l的表达程度呈正相关(r=0.374,p0.05)。结论：2-d合并hd患者的血小板外表fra

2、和d40l表达程度明显升高,二者呈明显正相关。血小板外表fra和d40l的表达程度可能是反映糖尿病患者合并冠状动脉粥样硬化的有用指标。【关键词】受体，f；d40配体；冠状动脉疾病；糖尿病，2型abstrat：bjetive:tdeterinetheplateletsurfaeexpressinffgaara(fra,d32andd40linpatientsithtype2diabetesellitus2-dandrnaryheartdiseasehdandtexplretherelatinshipbeteenthe.ethds:theplateletsurfaeexpressinffraand

3、d40lereeasuredbyflytetryatfastingstatein104nseutivepatients，inluding36patientsithhd(grup),35patientsith2-dithuthd(grup)，and33patientsith2-dandhd(grup).the30subjetsereservedasantrlgruptherrelatinbeteenplateletfraandd40lereinvestigated.results:plateletsurfaeexpressinffraandd40leresignifiantlyhighering

4、rupthanthseinntrlgrup,grupandgrup(p0.050.01)thelevelfplateletfraaspsitivelyrrelatediththelevelfplateletd40l(r=0.374，p0.05).nlusin:plateletsurfaeexpressinffraandd40l，aybeusefularkersfrpreditingthepresenefrnaryatherslersisinpatientsithtype2diabetesauthrsaddress：departentfardilgy,thesendaffiliatedhspit

5、alfdalianedialuniversity,dalian，lianing，116027，hinakeyrds：reeptrs,f;d40ligand;rnaryarterydisease;diabetesellitus,type2糖尿病(d)是冠心病(hd)的等危症,其10年内发生心血管事件的危险较非d患者高510倍,这两种疾病具有多个共同的危险因素,如胰岛素抵抗等。近年研究提醒血小板活性的改变、炎症反响在糖尿病患者的病情开展及血栓性并发症的发生中起着一定作用1。众所周知，胶原是血管内皮细胞外基质的重要组份，不仅支持血小板粘附，而且是血小板活化的强诱导剂。血小板外表f受体链(freept

6、r-hain)参与血小板与胶原之间的反响过程2。冠心病根底是冠状动脉粥样硬化as及冠脉内的血栓形成，在这一过程中，血小板外表f受体frafgaara起到非常重要的作用3。d40配体(d40ligand，d40l)是肿瘤坏死因子-tnf-家族的一种跨膜蛋白质，d40l作为重要的炎症信号通路的配体，在as发生、开展中起重要作用。有的研究说明免疫与炎症反响参与了冠心病的as斑块形成及破裂,d40l可以诱导细胞黏附,趋化因子形成,诱导细胞外基质降解,引发血小板的活化4,抗d40l抗体可以减少急性冠脉事件的发生。本研究主要对单纯hd患者及2型糖尿病(2-d)有或无合并hd患者的血小板外表fra和d40l

7、的表达程度进展检测，并作相关分析。1资料与方法1.1一般资料住院患者104例,均承受冠状动脉造影检查，根据是否患有2-d(空腹血糖程度7.0l/l或餐后2h血糖程度11.1l/l，或服用降糖药物，或承受胰岛素治疗,排除继发性糖尿病及型糖尿病患者被分为3组：组，hd患者36例，其空腹血糖程度5.61/l;组,2-d患者35例，冠状动脉造影结果正常；组,2-d合并hd患者33例。另选择30名作为正常对照组，其既往史及体检，心电图，胸片，心脏超声检查及肝、肾功能，血糖等生化指标均经检测分析，确诊无d及hd。采集所有入选对象的有关临床资料，剔除有急、慢性病毒或细菌感染史、免疫系统异常或肿瘤病史的患者。

8、1.2方法血小板外表fra和d40l表达程度的检测：所有患者空腹12h后于清晨采取肘静脉血2l，抗凝，取0.1l新颖血用150磷酸盐缓冲液pbs稀释后，分别与荧光标记的单克隆抗体d32-异硫氰酸荧光素fitbizl,德国、d40l-fitalbihe,德国室温避光孵育60in后，采用美国bd公司fasalibur型流式细胞仪分析，测定血小板外表fra和d40l的平均荧光强度fi，用ellquest软件获取结果。1.3统计学方法采用spss11.0统计学软件包进展统计分析，计数资料以例数与百分比表示，采用x2检验；计量资料以均数标准差(s)表示，组间比较采用t检验,以pearsn相关方程计算变量

9、间关系。p0.05为差异有显著性。2结果2.1基线特征各组间年龄、男女比例没有显著差异,在三组患者中，血小板数大致一样,主要危险因素在三组间没有明显差异。见表1。表1对照组和疾病组根底临床资料2.2各组血小板外表fra和d40l表达程度组的血小板外表fra和d40l的表达程度显著高于组、组和正常对照组p0.050.01；组、组的以上指标亦显著高于正常对照组(p0.01)。见表2。表2各组血小板外表fra和d40l表达程度注：与对照组比较p0.01；与组比较p0.05；与组比较#p0.01。2.3血小板外表f受体fra和d40l表达程度的相关性分析血小板外表f受体fra和d40l的表达程度呈明显

10、正相关(r=0.374,p0.05)。3讨论d是一种慢性代谢性疾病,除葡萄糖、蛋白质及脂质代谢紊乱外尚有血小板功能变化及凝血纤溶系统功能的紊乱,可导致各种并发症尤其是血管并发症的出现。有报道认为d患者的血小板活性与其血管并发症的发生开展相关,与患者病情的控制好坏相关。故研究d患者的血小板功能变化有一定的临床意义。血小板的活化及炎症反响在as的发生、开展中起重要作用。血小板的活性增强不但参与粥样斑块的形成,还参与斑块的破裂,促进血管内血栓的形成。动物实验说明,抑制血小板与动脉管壁的粘附,可以减少as的发生和开展。胶原是细胞外基质的主要成分，在血小板与动脉管壁的粘附中起重要作用，这一过程是通过血小

11、板f受体链与糖蛋白gp组成的复合物发挥作用的。在血小板膜上，gp与f受体链以复合物形式存在，两者在构造和功能上亲密相关。gp跨膜区的精氨酸与f受体链跨膜区的天冬氨酸以盐键的形式非共价连接5。将gp和f受体链基因共转染k562细胞，后者表达这两种蛋白并重建对胶原的粘附和细胞内磷酸化反响；如仅转染gp基因，那么细胞对胶原的上述反响消失6。f受体链缺陷小鼠,因血小板不能表达f受体链,gp也不能表达,不能对胶原刺激产生反响2。提示这两种蛋白分子在血小板膜外表定位和功能发挥上亲密相关。f受体链以二聚体形式存在,其胞内区肽链含有免疫受体酪氨酸活化基序(ita)，该基序中的酪氨酸发生磷酸化后募集并活化其他信

12、号转导分子,从而发生有序的胞内信号转导,产生生物效应,引起血小板的活化和分泌6,7。胶原介导的血小板活性增强可引起动脉硬化及动脉血栓形成,在这一过程中,fra起到关键性的作用3,8，作者在国外的研究及其他学者均发现d病人血小板fra的表达增强9，10)。但血小板fra在d合并hd病人的表达情况尚未见报道。本研究结果显示,d合并hd病人血小板fra的表达程度明显高于单纯d及单纯hd组和正常对照组(p0.050.01)，单纯d及单纯hd病人血小板f受体fra的表达程度也明显高于正常对照组,可见,随着d病人冠脉病变的出现，血小板f受体fra表达增加，其监测有可能成为预测d病人合并冠状动脉粥样硬化的重

13、要指标。d40l存在于血小板及t淋巴细胞外表,可与b淋巴细胞、巨噬细胞、内皮细胞、血管平滑肌细胞的d40相结合产生一系列炎症反响。目前认为d40l是各种免疫炎症反响调节的信号通路,参与as斑块内主要细胞成分的炎症反响调节11。d40l能诱导巨噬细胞表达组织因子,是炎症反响、粥样斑块不稳定的基矗假设阻断d40l,可以减缓斑块的开展,使其构造特征趋于稳定。d40l还可通过调节粥样斑块内金属蛋白酶的表达,降解细胞外基质,减弱粥样斑块稳定性12。另外,d40l调节的机体免疫反响信号通路,可能刺激血管内皮细胞,巨噬细胞,血管平滑肌细胞产生与as有关的生物活性因子,如选择素、细胞因子等,使之在组织中表达增

14、强。d40l越高,as危险性越大。因此,d40l是心脏事件的危险因子,也是识别as斑块和血栓形成的外周血标志物。有文献报道在急性冠状动脉综合征患者中d40l程度升高13，与本研究中d患者的情况相似,故d患者血小板活化与其冠状动脉的并发症相关。2型d患者由于在疾病过程中存在血管内皮细胞受损、脂质过氧化等原因,可导致血小板激活。患者的高血糖状态本身也可导致血小板活化,血小板被激活后其凝血活性增高,表如今其聚集功能增强、细胞外表-颗粒膜蛋白表达量增多等。在本研究中2-d合并hd患者血小板fra及d40l增高p均0.01，并且通过直线相关分析发现血小板fra与d40l的表达程度呈明显正相关，说明二者都

15、参与了冠脉斑块的形成,对于as发病互相促进。以上结果反映2型d患者体内存在着血小板的活化及炎症反响,血小板激活在d患者的病情开展、并发症的发生方面起一定的作用。对d患者进展抗血小板功能药物的治疗以降低血小板活化程度,有助于d病情的控制并可预防其冠状动脉粥样硬化的发生。总之，血小板fra和d40l程度可能是反映d病人并发冠状动脉粥样硬化的有用指标,对于d将来风险预测具一定价值。但目前针对血小板fra的研究不多，详细的机制尚有待于进一步研究和验证。【参考文献】1yazbekn,bapata,kleiann.plateletabnralitiesindiabetiellitusj.rnarteryd

16、is,2022,14:365-371.3alverleyd,brasse,hakerr,etal.ptentialrlefplateletfgaariiainllagen-ediatedplateletativatinassiatedithatherthrbsisj.atherslersis,2002,164:261-267.5leetsnkj,leetsnj.plateletllagenreeptrsj.thrbhaest,2001,86:189-197.7niesandtb,bergeier,shultev,etal.expressinandfuntinftheusellagenreept

17、rglyprteinviisstritlydependentnitsassiatiniththefrgaahainj.jbilhe,2000,275:23998-24002.9abezan,liz,shulz,etal.surfaeexpressinfllagenreeptrfreeptr-/glyprteinviisenhanednplateletsintype2diabetesandediatesreleasefd40ligandandativatinfendthelialellsj.diabetes,2022,53(8):2117-2121.10alverleyd,hakerr,ldaka,etal.inreasedp