风湿病常用实验室检查临床意义课件

1、抗核抗体风湿性疾病一大特征是患者血液中自身抗体的出现，且以抗核抗体为主，其抗原位点是核酸、组蛋白、非组蛋白、磷脂及各种蛋白酶等多种物质。定义：从狭义来说，抗核抗体（ANA）是针对细胞核内的DNA、RNA、蛋白或这些物质的分子复合物的一组自身抗体的总称。但从广义来说，是抗细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称，其靶抗原包括细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期等成分。分类：按细胞内分子理化特性和分布部位，可将ANA分成五大类：抗DNA抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋白抗体、抗核仁抗体和抗其他细胞成分。抗核抗体风湿性疾病一大特征是患者血液中自身抗体的出现，且以抗特点病理性自身抗体生理性自身抗体临床相关性器

2、官特异性或系统性自身免疫所有正常人 病（如SLE中抗ds-DNA抗体）产生的机制抗原诱发性免疫反应机体自身固有型别lgG (lgG1和lgG3亚类)lgM、,lgG、,lgA(?)亲和力高低独特型个体独特型（个别为交叉独特交叉独特型 型）抗原特异性仅限于自身抗原的功能区有多多反应性 个抗原决定簇开始表达在疾病发生时或发生前可能在出生血清浓度高至非常高，根据病程有变化低，多克隆B细胞激 活时可增高功能体内：病理性机体防御的第一道防体外：抑制自身抗原的功能线（?）,消除细胞破碎残留物（？），是独特型网络的基础（？） 病理性抗体和生理性抗体比较特点病理性自身抗体生理性自身抗体 可抑制细胞功能的抗体

3、类型可抑制的功能疾病相关性抗DNA拓扑异构酶改变DNA的局部结构SSc（硬皮病）抗增殖细胞核抗原-多聚酶调节的DNA复SLE（系统性红斑狼疮 （PCNA） 制抗丙酮酸脱氢酶E2脂酸与线粒体的结合抗rRNP磷蛋白mRNA的翻译抗RNA多聚酶I28S和18SrRNA的合成SSc抗RNA多聚酶IImRNA前体的转录SSc抗RNA多聚酶III5SrRNA、tRNA和其SSc他小RNA的组成抗Sm/U1-nRNPmRNA前体的剪切SLE,MCTD抗tRNA合成酶（Jo-1tRNA与氨基酸残基的耦联PM/DM、PL-7和PL-12等）抗蛋白酶3抗体粒细胞丝氨酸蛋白酶-3的韦格纳肉芽肿病活性部分可抑制细胞功

4、能的抗体 类型可抑制的功能疾病相抗核抗体检测患者血清中存在抗细胞核成分的抗体，可以特异性和核抗原成分结合，形成免疫复合物，再与荧光标记抗人IgG抗体结合，在荧光显微镜下观察到特异的亮绿色荧光为阳性。抗核抗体检测患者血清中存在抗细胞核成分的抗体，可以特异性和核 抗核抗体不同检测方法比较方法优缺点间接免疫荧光法价格便宜，但阳性率低，敏感度和（鼠肝或肾切片作底物）特异性较差间接免疫荧光法 虽然价格较高，但优点甚多，包括： （Hep-2细胞作底物） 1.阳性率增加了1020，尤其是抗SSA抗体（抗原量增加）； 2.原来不能检出的 抗体可以检出，如抗PCNA(增殖细胞核抗原)和抗着丝点抗体（抗原种类增加

5、）；3易于观察和荧光染色核型分析（细胞核大和结构清晰酶联免疫吸附法其价格昂贵，缺点多，包括：1.检测结果不稳定（酶本身受影响因素多）；2特异性和敏感度较低（很难复制或重组出含细胞抗原的全部成分，且某些抗原不具备天然构象而无抗原性或抗原性很弱），故很少应用 ANA筛选试验怀疑风湿病或排除风湿性疾病ANA阳性，是否存在自身免疫性疾病受试者的特点：性别、年龄、家族史、易患遗传基因 基础疾病史、用药史存在的症状：发热，伴随皮损，口干、伴随多饮、多食，外阴溃疡、雷诺现象进一步检查特异性抗体和其他实验室检查ANA阳性与疾病的严重性和疾病活动性程度是无关的ANA筛选试验怀疑风湿病或排除风湿性疾病检测方法目前

6、多采用间接免疫荧光法进行ANA的筛选实验，然后再根据染色图谱的类型进一步做特异性ANA的检测正常值1:640干燥综合症75D,S低类风湿关节炎1535D151:640系统性硬化症6090S,N,D,C常较高药物性狼疮100D,S可能高混合性结缔组织病9599S,D可能高正常人1:80注：P-周边型，D-弥漫型，S-斑点型，N-核仁型，C-着丝点型常见风湿病的抗核抗体疾病阳性率（）染色图谱滴度CREST: 皮下钙质沉着、雷诺氏现象、食道运动失调指趾硬化、毛细血管扩张CREST: 抗核抗体阳性的疾病分类疾病结缔组织病SLE、MCTD（混合性结缔组织病）、SSc、PM/DM（皮肌炎/肌炎）、SS(干

7、燥综合症)等肺疾病原发性肺纤维化、原发性肺动脉高压、石棉所致的肺纤维化等肝病自身免疫性肝炎，活动性肝炎，原发性胆汁性肝硬化，酒精性肝病等血液病白血病、骨髓病、淋巴瘤、特发性血小板减少性紫癜、自身免疫性溶血性贫血等慢性感染寄生虫（锥虫、血吸虫等），结核杆菌，麻风杆菌，沙门菌，克雷伯杆菌感染健康人年龄越大，阳性率越高（60岁的阳性率为2025），但滴度低，为均质型或弥漫型。有SLE、SS或SSc家族史的一级亲属，阳性率可达50。其他I型糖尿病、Graves病、多发性硬化、终末期肾病、器官移植后等抗核抗体阳性的疾病分类疾病摘自：周淑芬， 天津医药，06，34（8）摘自：周淑芬， 天津医药，06，34

8、（8）非何杰金氏病 ANA测定非何杰金氏病 ANA测定病毒感染引起的抗核抗体阳性自身抗体病毒感染ANAEB病毒，柯萨奇病毒，甲型、乙型和丙型肝炎病毒，HIV-1病毒，流感病毒，麻疹病毒，细小病毒B19，Varicella抗心磷脂抗体腺病毒，Chickenpox,EB病毒，甲型肝炎，HIV-1、腮腺炎、细小病毒B19和风疹病毒RFEB病毒，幼儿急疹病毒，甲型、乙型和丙型肝炎，带状疱疹病毒，流感病毒，麻疹病毒，腮腺炎病毒，细小病毒B19 ，水痘病毒抗DNA抗体柯萨奇病毒，流感病毒，麻疹病毒，细小病毒B19 ，Varicella抗肝-肾微粒体抗体丙型肝炎病毒冷球蛋白甲型、乙型和丙型肝炎，艾滋病病毒抗

9、线粒体抗体EB病毒抗微粒体抗体EB病毒，丙型肝炎病毒抗平滑肌抗体Chickenpox， EB病毒，麻疹病毒，腮腺炎病毒，病毒性肝炎病毒抗淋巴细胞抗体 EB病毒， HIV-1病毒，细小病毒B19抗SSA、SSB抗体细小病毒B19ANCA HIV-1病毒抗甲状腺抗体 EB病毒，丙型肝炎病毒病毒感染引起的抗核抗体阳性自身抗体病毒感染ANCA HIV-1病毒狼疮细胞的检测及临床意义抗RNA多聚酶I28S和18SrRNA的合成SSc检测结果不稳定（酶本身受影响因素多）；（3）抗体水平随SLE病情活动而升降，缓解期水平下降甚至可转阴，故该抗体可作为狼疮活动性指标之一，用来监测SLE病情变化和观察药物治疗。

10、慢性感染寄生虫（锥虫、血吸虫等），结核杆菌，麻风杆菌，沙门菌，克雷伯杆菌感染周边（核膜）型鼠肝切片、细胞ds-DNA,核层蛋抗ds-DNA、抗核白（Lamin） 层蛋白（Lamin）抗体重复测定而PBC患者治疗有效药物为熊去氧胆酸，淤积性肝损害均有不同程度改变；aPL（antiphoslipid antibodies）是一组针对各种带负电荷磷脂的自身抗体，包括抗心磷脂抗体（ACL）、狼疮抗凝物（LAC）、抗磷脂酰丝氨酸、抗磷脂酰胺醇、抗磷脂酰甘油、抗磷脂酸和抗2-GP1等。抗Mi1抗体、抗Mi2抗体的检测及临床意义抗核周因子（APF）、抗角蛋白抗体（AKA）、抗SaANA阳性，是否存在自身免疫

11、性疾病在实验时，采用人胎盘中提取Sa抗原国外报告pSS中PBC的发生率为19%，且多无症状系统性硬化症6090S,N,D,C常较高抗Sa抗体阳性者晨僵、关节受累明显重于阴性组（4）该抗体还与新生儿红斑狼疮（因可通过胎盘）、C2缺乏症和先天性完全性房室传导阻滞密切相关抗ENA抗体的定义及种类（4）抗Sm抗体常伴随抗细胞核RNP抗体（ nRNP 抗体）狼疮细胞的检测及临床意义项目 说明定义 白细胞破坏后，释放出细胞核（脱氧核糖核蛋 白），再与ANA（抗脱氧核糖核蛋白抗体）结合 后，被中性粒细胞吞噬，在补体参与下，形成“均圆 体”即狼疮细胞。此时粒细胞的核被推向一边正常值 阴性临床意义（1）与活动性

12、狼疮相关：未治疗的活动性狼疮阳性 率约5070，而在缓解期核治疗后阳性率低， 往往呈阴性（2）诊断狼疮的敏感性和特异性均较差，不能定量。在RA、SSc、药物性狼疮、结核、SS、DM及慢性活动性肝炎也可阳性，不能说“查到狼疮细胞可能诊断狼疮，或未查到狼疮细胞可排除“狼疮”（3）目前普遍认为检测狼疮细胞应该废弃，因为操作复杂、费时及技术因素影响大等，现已被ANA核抗DNP抗体等其他抗体所替代ANCA HIV-1病毒狼疮细胞的检测及临床意义项目抗dsDNA抗体的检测和临床意义项目说明定义针对细胞核内脱氧核糖核酸的自身抗体检测方法放射免疫法、短膜虫间接免疫荧光法、酶联免疫吸附法和金标法等正常值 放射免

13、疫法20%，间接免疫荧光法（一）临床意义（1）在SLE中的阳性率为4090，活动期为80 90，非活动期为30以下（2）对诊断SLE有高度特异性（特异度达90），是目前公认的SLE特异性抗体，阳性患者中有90以上为SLE活动期患者，而非SLE患者和正常人多为阴性，少数结缔组织病如SS、MCTD和药物性狼疮可为阳性，但阳性率1:640阳性率增加了1020，尤其是抗SSA抗体（抗原量增加）；疾病阳性率（）染色图谱滴度pSS所致胆管炎引起胆汁淤积可能并不少见，宜称之为pSS胆管炎而不宜诊为自身免疫性肝炎；aPL（antiphoslipid antibodies）是一组针对各种带负电荷磷脂的自身抗体，

14、包括抗心磷脂抗体（ACL）、狼疮抗凝物（LAC）、抗磷脂酰丝氨酸、抗磷脂酰胺醇、抗磷脂酰甘油、抗磷脂酸和抗2-GP1等。颗粒型U3nRNP/Fibrillarin抗U3nRNP/Fibrillarin RNA多聚酶IAKA对于诊断RA的特异性较高项目 说明抗心磷脂抗体（aCL）:间接ELISA法，IgG、IgM、IgA阳性率分别为36、17和14，持续中高滴度的IgG、IgM与血栓相关，在SLE中aCL阳性率为1230。干燥综合症75D,S低（3）亚急性皮肤型狼疮：该抗体阳性者发生皮疹和光过敏较多，而关节炎、雷诺现象、胸膜炎、CNS损伤、肾脏受累、贫血、 低补体血症和抗dsDNA抗体阳性较少均

15、质型细胞PM-Scl(PM-1),RNP,抗PM-Scl(PM-1)抗体,抗7-RNA 2-RNP（To）抗体，抗4-6-RNA抗体血清浓度高至非常高，根据病程有变化低，多克隆B细胞激 活时可增高抗丙酮酸脱氢酶E2脂酸与线粒体的结合aPL（antiphoslipid antibodies）是一组针对各种带负电荷磷脂的自身抗体，包括抗心磷脂抗体（ACL）、狼疮抗凝物（LAC）、抗磷脂酰丝氨酸、抗磷脂酰胺醇、抗磷脂酰甘油、抗磷脂酸和抗2-GP1等。临床表现：关节痛、肌炎、胸膜炎APS实验室诊断采用标准化的测定2糖蛋白1依赖型aCL ELISA, 2次或更多次（每次间隔至少6周）检出中或高滴度的Ig

16、G和/或IgM aCL2次或更多次（每次至少相隔6周）在血浆中检出LA磷脂依赖性的凝血过筛试验延长如APTT、KCT(白陶土凝集时间)、dRVVT（蛇毒试验）、稀释的PT和Taxtarin time与乏血小板正常血浆混合无法纠正以上延长的时间补充外源性磷脂可以缩短和纠正以上延长的时间排除其他的凝血系统异常，如存在因子VIII抑制物或肝素着丝点型细胞DNA蛋白结合体抗着丝点抗体 抗磷脂抗体检测APS诊断：aCL ELISA采用牛血清作为封闭液和稀释液，因为牛血清中含有2糖蛋白1，aCL和心磷脂结合需要血清中一种磷脂结合蛋白2糖蛋白1（ 2GP-1） 2GP-1依赖性aCL自身免疫性疾病因2GP-

17、1存在，心磷脂和aCL结合会增强梅毒患者血清中aCL与磷脂结合会因2GP-1存在而抑制。正常人、感染性疾病（梅毒、AIDS、Q热）、药物（氯丙嗪）可检出aCL抗磷脂抗体检测APS诊断：aCL ELISA采用牛血清作为封抗磷脂类抗体（带负电、中性和两性磷脂）：分为识别磷脂或磷脂-蛋白复合物抗体，前者与感染有关，后者与血栓或APS有关。抗心磷脂抗体（aCL）:间接ELISA法，IgG、IgM、IgA阳性率分别为36、17和14，持续中高滴度的IgG、IgM与血栓相关，在SLE中aCL阳性率为1230。抗2-GP1抗体：阳性率20，其与血栓的相关性要比抗心磷脂抗体强狼疮抗凝因子（LA）：PT复合物（

18、Xa、Va、Ca及磷脂），Tensec(因子IXa、VIIIa、Ca及磷脂),与血栓密切相关。抗磷脂类抗体（带负电、中性和两性磷脂）：分为识别磷脂或磷脂-APS实验室诊断策略（Dr. Harris）APS临床表现aCL和LA均阴性 aCL弱阳性 aCL高/中度阳性或者 但临床症状典型 LA阳性 重复测定抗2GP-1和ELISA aPL均阴性 一个阳性和均阳性考虑IgA aPL阴性 阳性 APSAPS阴性 阳性APS抗2GP-1或ELISA aPLAPS实验室诊断策略（Dr. Harris）APS临床表现a扩大筛查的范围英国血液学会2000年在抗磷脂抗体综合症诊疗指南 鉴于血栓和流产复发的高风险

19、以及aPL对临床的指导意义：SLE、低龄（如小于50岁）卒中和外周动脉栓塞，连续3次或以上妊娠丢失无明显原因的静脉血栓虽存在其他危险因素但静脉血栓反复发作无吸烟史、高血压、糖尿病或高脂血症等危险因素的年龄较大的动脉栓塞孕中晚期内正常形态胎儿不明原因死亡的患者怀疑APS的早期严重先兆子痫或严重胎盘功能不全患者扩大筛查的范围英国血液学会2000年在抗磷脂抗体综合症诊疗指抗磷脂抗体的检测及临床意义抗磷脂抗体的检测及临床意义类风湿因子的检测及临床意义类风湿因子的检测及临床意义类风湿因子阳性的疾病类风湿因子阳性的疾病抗核周因子（antiperinuclear factor, APF）是1964年荷兰学者

20、用颊粘膜细胞作为底物检测抗核抗体（ANA）时，偶然发现APF对诊断RA特异性高达90，是早期诊断RA有效指标。 抗角蛋白抗体（antikeratin antibody, AKA）是1979年Young 发现RA血清中有一种与大鼠食道角质成分起反应的抗体。AKA对于诊断RA的特异性较高对RF阴性的患者提供诊断指标与RA关节压痛数、晨僵时间和CRP有关抗核周因子（antiperinuclear factor, 抗Sa抗体抗Sa抗体是以Savoic 名字命名的一种新型自身抗体，在未经选择的RA患者中抗Sa抗体的阳性率为42.7，特异性高达98.9。Sa抗原为一酸性蛋白，等电点5，因组织来源不同，Sa

21、抗原分子量有些差异。在实验时，采用人胎盘中提取Sa抗原抗Sa抗体阳性者晨僵、关节受累明显重于阴性组抗Sa抗体抗Sa抗体是以Savoic 名字命名的一种新型自身分布在细胞质中称小细胞浆核糖核蛋白（scRNPs），分布在细胞核内称小细胞核核糖核蛋白（snRNPs）定义以患者名字命名。pSS所致胆管炎引起胆汁淤积可能并不少见，宜称之为pSS胆管炎而不宜诊为自身免疫性肝炎；APS诊断：aCL ELISA采用牛血清作为封闭液和稀释液，因为牛血清中含有2糖蛋白1，aCL和心磷脂结合需要血清中一种磷脂结合蛋白2糖蛋白1（ 2GP-1） 2GP-1依赖性aCLaPL（antiphoslipid antibod

22、ies）是一组针对各种带负电荷磷脂的自身抗体，包括抗心磷脂抗体（ACL）、狼疮抗凝物（LAC）、抗磷脂酰丝氨酸、抗磷脂酰胺醇、抗磷脂酰甘油、抗磷脂酸和抗2-GP1等。（3）抗体水平随SLE病情活动而升降，缓解期水平下降甚至可转阴，故该抗体可作为狼疮活动性指标之一，用来监测SLE病情变化和观察药物治疗。临床意义（1）对诊断原发性SS有高度特异性，其阳性率为15.抗体抗RNA多聚酶I抗体可引起药物性狼疮的药物：芳香胺类（SASP、倍他乐克、普鲁卡因酰胺）、肼类（异烟肼）、巯基类（抗甲状腺药物、青霉胺）、苯类抗SSB抗体实验室检测及其临床意义抗肝-肾微粒体抗体丙型肝炎病毒系统性硬化症6090S,N,

23、D,C常较高6，并与原发性SS的腺体外表现相关出现，因Sm和nRNP 是同一分子复合物（即RNP颗粒）中正常值 阴性抗Sa抗体是以Savoic 名字命名的一种新型自身抗体，在未经选择的RA患者中抗Sa抗体的阳性率为42.（3）亚急性皮肤型狼疮：该抗体阳性者发生皮疹和光过敏较多，而关节炎、雷诺现象、胸膜炎、CNS损伤、肾脏受累、贫血、 低补体血症和抗dsDNA抗体阳性较少隆免疫球蛋白升高，且以IgG升高为主，而单纯PBC患者以其靶抗原为33KD的核酸结合蛋白，来源于Hela细胞或Ehrilich细胞健康人年龄越大，阳性率越高（60岁的阳性率为2025），但滴度低，为均质型或弥漫型。抗RA33抗体

24、1989年Hassfeld等首次报道其靶抗原为33KD的核酸结合蛋白，来源于Hela细胞或Ehrilich细胞在各项RA早期诊断指标中，抗RA33看体特异性最高，在RA中的阳性率为35.8，尤其在RA早期出现，抗RA33抗体的消长与用药无关。分布在细胞质中称小细胞浆核糖核蛋白（scRNPs），抗CCP抗体抗核周因子（APF）、抗角蛋白抗体（AKA）、抗Sa抗体、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（抗filaggrin抗体）等的靶抗原就是环瓜氨酸肽，因此抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP）成为早期诊断RA的有用指标，抗CCP提高诊断特异性有一定意义。抗CCP抗体抗核周因子（APF）、抗角蛋白抗体（AKA）、抗风湿病

25、常用实验室检查临床意义课件风湿病常用实验室检查临床意义课件风湿病常用实验室检查临床意义课件自身免疫性肝炎自身免疫性肝炎“狼疮性肝炎”“狼疮性肝炎”自身免疫性肝炎分型I型：临床最常见，女性多见，抗聚合肌动蛋白 抗体对诊断具有高度特异性，pANCA阳性率高（94），ANA5075、抗平滑肌抗体66，LE（）II型：214岁儿童多见，病情多较重，进展迅速，肝硬化比例高，易合并其他结缔组织病，特异性出现肝肾微粒体抗体III型：多为年青女性，临床与I型相似，出现可溶性肝抗原抗体，可有抗平滑肌抗体或ANA抗体自身免疫性肝炎分型I型：临床最常见，女性多见，抗聚合肌动蛋白风湿病常用实验室检查临床意义课件风湿病

26、常用实验室检查临床意义课件风湿病常用实验室检查临床意义课件C反应蛋白的检测及临床意义C反应蛋白的检测及临床意义风湿病常用实验室检查临床意义课件风湿病常用实验室检查临床意义课件风湿病常用实验室检查临床意义课件谢谢关注谢谢关注常见抗核抗体荧光染色图谱相关抗原和抗体染色图型底物取材抗原成分相关抗体周边（核膜）型鼠肝切片、细胞ds-DNA,核层蛋抗ds-DNA、抗核白（Lamin） 层蛋白（Lamin）抗体均质（弥散）型鼠肝切片、细胞组蛋白（DNP）抗组蛋白抗体，抗、ds-DNA ds-DNA ，抗DNP抗体斑点型鼠肝切片、细胞ENA抗Sm、RNP、Scl-70、PM-1、SSA、SSB和Jo-1抗体

27、等核仁型 颗粒型U3nRNP/Fibrillarin抗U3nRNP/Fibrillarin RNA多聚酶I 抗体抗RNA多聚酶I抗体 均质型细胞PM-Scl(PM-1),RNP,抗PM-Scl(PM-1)抗体,抗7-RNA 2-RNP（To）抗体，抗4-6-RNA抗体 斑点型核仁编组区抗核仁编组区（NOR）抗体着丝点型细胞DNA蛋白结合体抗着丝点抗体 （ACA）PCNA型细胞DNA聚合酶抗增殖细胞核抗体常见抗核抗体荧光染色图谱相关抗原和抗体染色图型底物取材临床意义（3）抗体水平随SLE病情活动而升降，缓解期水平下降甚至可转阴，故该抗体可作为狼疮活动性指标之一，用来监测SLE病情变化和观察药物治

28、疗。（4）与狼疮性肾炎、关节炎、精神神经症状及典型蝶形红斑等有相关性：该抗体可与存在于多种器官微血管结构中的DNA抗原相结合，形成免疫复合物，激活炎症系统如补体途径等，导致组织损伤。ds-DNA阳性者较阴性者LN(狼疮肾炎）的危险性高12倍低滴度的ds-DNA在多种疾病甚至正常人中出现临床意义ds-DNA阳性者较阴性者LN(狼疮肾炎）的危险性高抗SSA抗体检测和意义项目说明定义抗原为细胞内的小RNA和60kDa或52kDa成分的蛋白质成分组成检测方法对流免疫电泳、免疫双扩散和免疫印迹法正常值阴性临床意义（1）SLE：阳性率为2748，单独抗SSA抗体阳性比抗SSB 抗体同时阳性有更严重的肾脏受累，且抗dsDNA抗体升高的比例高（为77，而单独SSB（）者仅33）；另外，抗SSA抗原抗体 （）多伴有光敏感。（2）SS：该抗体与SS的血管炎相关，抗SSA和抗SSB抗体均阳性者多有内脏受累，且发病早、病程长、反复腮腺肿大和腺体病变重， 腺体外病变如紫癜样皮疹、脾大、淋巴结肿大和血管炎均较明显（3）亚急性皮肤型狼疮：该抗体阳性者发生皮疹和光过敏较多，而关节炎、雷诺现象、胸膜炎、CNS损伤、肾脏受累、贫血、 低补体血症和抗dsDNA抗体阳性较少 （4）该抗体还与新生儿红斑狼疮（因可通过胎盘）、C2缺乏症和先天性完全性房室传导阻滞密切相关抗SSA抗体检测和意义项目说明抗中性粒