尿蛋白定性测定干法学法作业指导书

1、尿蛋白定性测定干法学法作业指导书1. 实验原理利用指示剂的蛋白质误差原理，蛋白质与指示剂的离子（溴甲酚蓝，四溴酚蓝二酯）相结合生成复合物，引起指示剂的进一步电离，超过了尿液的缓冲能力，指示剂则发生颜色变化。颜色的深浅与蛋白质含量成正比。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时留取。2.2 标本种类：新鲜尿液2.3 标本要求：采集患者尿液标本时，盛尿液的容器必须清洁干燥，要求留取中段尿。3. 标本储存：从排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析，应置4下冷藏保存，但冷藏时间不得超过6小时。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：细菌，经血，白带，

2、精液，粪便污染标本不能作测定。6. 试剂6.1 试剂名称 Combur10 TestR M6.2 试剂厂家 德国 Roche 诊断试剂公司6.3 包装规格：100Test/kit6.4 试剂盒组成：试纸条：100条6.5 试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存于2-30条件下，可使用至试剂盒所标示有效期。7. 仪器设备7.1 仪器名称：罗氏尿液分析仪7.2 仪器厂家：Roche7.3 仪器型号：MiditronR Junior II7.4 仪器校准程序：在使用过程中，一般是两周校准一次，如超过此期限，仪器会提示“Please Calibrate”（请校准）。通过测定内部参比块，环境温度和光学系统的改

3、变都可被补偿。当条件改变很大时，比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗，仪器将打印出一个错误信息；校准条是有稳定特征的灰白色试条，这些校准条只能使用一次。校准前，应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为：在“READY”显示时，按键，放上校准条。再按键，校准条被送入机器内，屏幕显示“Calibrating”（正在校准），约一分钟后，标准结果将被打印出。“Calibrating O.K”，表示校准成功。8. 操作步骤：8.1 按键，显示“Prepare Strip”,此时试条筒中拿出试条。8.2 约4秒钟后，显示“Dip Strip 1”，同时绿灯闪烁，将试条浸入尿样中。8.3 当显示“Insert St

4、rip 1”,把试条放在试条托盘上，此时绿灯亮，若要人工输入颜色，按键，再按键，选择相近的颜色，最后按键确认，同样也可人工输入浊度。8.4 约20秒后，显示“Dip Strip 2”，然后重复以上过程。每一个测量完成后将自动打印出结果。9. 结果判断：淡黄色（-），淡黄绿色（+/-），黄绿色（+），绿色（+），灰绿色（+），灰兰色（+）10. 质量控制：质控液的使用，低浓度质控液（蛋白质1.5g/L）蛋白定性应为（+）；高浓度质控液（10g/L）蛋白定性为（+）。11. 参考范围：阴性12. 临床意义：分为功能性，体位性，病理性蛋白尿，后者见于肾炎，肾病综合症。13. 操作性能：快速简便，特异

5、性强，灵敏度高，重复性好。14. 方法局限性14.1 试带应干燥，避光保存，远离酸性和碱性物质。避免用（湿）手触摸试带的试剂垫部分，以防试带污染失效。14.2 浑浊尿不影响比色，但尿液颜色异常（如血尿，血红蛋白尿，胆红素尿）将影响结果的观察。15. 注意事项15.1 干扰因素的控制与分析15.1.1 PH：尿液偏碱时（PH9），干化学试带法可呈假阳性；尿液偏酸（PH3）则会引起蛋白假阴性。因此，实验前需先将尿液PH调至56。15.1.2 药物：当患者应用大剂量青霉素钾盐，庆大霉素，磺胺，PAS，含碘照影剂时，可使化学试带法呈假阴性。15.1.3 反应时间和标本量：试带法需要足够的反应时间和标本量，因此检测时要求试带充分浸湿，但不宜长时间浸泡。时间过短，标本不足，反应不完全使结果偏低；时间太长使试带上包埋的药物洗脱至尿中，也会导致结果偏低。15.2 试带的差异 不同厂家不同批号的试带显色有差异，故强调使用严格标准化的试带。16. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系仪器厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。17. 参考文献17.1