实验六细菌荚膜染色法课件

实验六、细菌的荚膜染色法实验六、细菌的荚膜染色法1实验的目的要求学习并掌握荚膜染色法实验的目的要求学习并掌握荚膜染色法2实验六细菌荚膜染色法课件3实验六细菌荚膜染色法课件4方法湿墨水法干墨水法(P78)Anthony氏法(P79)方法湿墨水法5湿墨水法制备细菌墨水混合液加盖玻片镜检湿墨水法制备细菌墨水混合液6制备细菌墨水混合液1、滴绘图墨水

2、制备混合液绘图墨水滴1滴绘图墨水在载玻片中央挑取少量菌苔与墨水混合均匀涂布制备细菌墨水混合液1、滴绘图墨水2、制备混合液绘图墨水滴17加盖玻片在盖玻片上放一张滤纸，轻轻按压吸干多余混合液1、加盖玻片将盖玻片一端浸泡在细菌墨水混合液中缓缓盖上盖玻片2、吸去多余液体勿留气泡加盖玻片在盖玻片上放一张滤纸，轻轻按压吸干多余混合液1、加盖8镜检1、镜检用低倍镜高倍镜观察制片置显微镜载物台上2、结果：

背景灰色，菌体较暗，菌体周围荚膜呈现明亮透明圈。镜检1、镜检用低倍镜高倍镜观察制片置显微镜载物台上2、结果：9干墨水法制备细菌墨水混合液涂片固定染色镜检干墨水法制备细菌墨水混合液10制备细菌墨水混合液1、滴生理盐水

2、涂片6%葡萄糖在载玻片一端

滴一滴6%葡萄糖水挑取少量菌苔再加一环墨水,混合均匀制备细菌墨水混合液1、滴生理盐水2、涂片6%葡萄糖在载玻片11涂片1、先将推片一端放在混合液上

2、将推片向另一端平行滑动

3、使混合液均匀铺成薄层

4、干燥室温自然晾干涂片1、先将推片一2、将推片向另3、使混合液4、干燥室温自然12固定、干燥甲醇固定，自然干燥

甲醇滴甲醇浸没涂片1分钟倾去甲醇，室温自然干燥注意：固定及干燥均不能加热和用热风吹干，因为荚膜含水量高，加热会使其失水变形。同时，菌体失水收缩，会与周围染料脱离产生透明区，导致不产荚膜的细菌被误认为有荚膜。固定、干燥甲醇固定，自然干燥甲醇滴甲醇浸没涂片1分钟倾去甲13染色1、滴甲基紫染液2、水洗不要直接冲菌膜甲基紫染液甲基紫染液染色1-2分钟3、自然干燥染色1、滴甲基紫染液2、水洗不要直接冲菌膜甲基紫染液甲基紫染14镜检1、镜检用低倍镜高倍镜观察制片置显微镜载物台上2、结果：

背景灰色，菌体紫色，菌体周围荚膜呈现明亮透明圈。镜检1、镜检用低倍镜高倍镜观察制片置显微镜载物台上2、结果：15Anthony氏法制片固定染色镜检Anthony氏法制片16制片、固定生理盐水

1、滴生理盐水

挑取少量菌苔与生理盐水混匀均匀涂布2、涂片滴半滴生理盐水在载玻片中央

3、干燥固定室温自然晾干制片、固定生理盐水1、滴生理盐水挑取少量菌苔与生理盐水混17染色1%结晶紫染液1、滴孔结晶紫染液滴结晶紫染色2分钟3、脱色20%CuSO4水溶液染色1%结晶紫染液1、滴孔结晶紫染液滴结晶紫染3、脱色20%18镜检1、镜检用低倍镜高倍镜观察制片置显微镜载物台上2、结果：

背景灰色，菌体深紫色，菌体周围荚膜淡紫色。镜检1、镜检用低倍镜高倍镜观察制片置显微镜载物台上2、结果：19实验六、细菌的荚膜染色法实验六、细菌的荚膜染色法20实验的目的要求学习并掌握荚膜染色法实验的目的要求学习并掌握荚膜染色法21实验六细菌荚膜染色法课件22实验六细菌荚膜染色法课件23方法湿墨水法干墨水法(P78)Anthony氏法(P79)方法湿墨水法24湿墨水法制备细菌墨水混合液加盖玻片镜检湿墨水法制备细菌墨水混合液25制备细菌墨水混合液1、滴绘图墨水

2、制备混合液绘图墨水滴1滴绘图墨水在载玻片中央挑取少量菌苔与墨水混合均匀涂布制备细菌墨水混合液1、滴绘图墨水2、制备混合液绘图墨水滴126加盖玻片在盖玻片上放一张滤纸，轻轻按压吸干多余混合液1、加盖玻片将盖玻片一端浸泡在细菌墨水混合液中缓缓盖上盖玻片2、吸去多余液体勿留气泡加盖玻片在盖玻片上放一张滤纸，轻轻按压吸干多余混合液1、加盖27镜检1、镜检用低倍镜高倍镜观察制片置显微镜载物台上2、结果：

背景灰色，菌体较暗，菌体周围荚膜呈现明亮透明圈。镜检1、镜检用低倍镜高倍镜观察制片置显微镜载物台上2、结果：28干墨水法制备细菌墨水混合液涂片固定染色镜检干墨水法制备细菌墨水混合液29制备细菌墨水混合液1、滴生理盐水

2、涂片6%葡萄糖在载玻片一端

滴一滴6%葡萄糖水挑取少量菌苔再加一环墨水,混合均匀制备细菌墨水混合液1、滴生理盐水2、涂片6%葡萄糖在载玻片30涂片1、先将推片一端放在混合液上

2、将推片向另一端平行滑动

3、使混合液均匀铺成薄层

4、干燥室温自然晾干涂片1、先将推片一2、将推片向另3、使混合液4、干燥室温自然31固定、干燥甲醇固定，自然干燥

甲醇滴甲醇浸没涂片1分钟倾去甲醇，室温自然干燥注意：固定及干燥均不能加热和用热风吹干，因为荚膜含水量高，加热会使其失水变形。同时，菌体失水收缩，会与周围染料脱离产生透明区，导致不产荚膜的细菌被误认为有荚膜。固定、干燥甲醇固定，自然干燥甲醇滴甲醇浸没涂片1分钟倾去甲32染色1、滴甲基紫染液2、水洗不要直接冲菌膜甲基紫染液甲基紫染液染色1-2分钟3、自然干燥染色1、滴甲基紫染液2、水洗不要直接冲菌膜甲基紫染液甲基紫染33镜检1、镜检用低倍镜高倍镜观察制片置显微镜载物台上2、结果：

背景灰色，菌体紫色，菌体周围荚膜呈现明亮透明圈。镜检1、镜检用低倍镜高倍镜观察制片置显微镜载物台上2、结果：34Anthony氏法制片固定染色镜检Anthony氏法制片35制片、固定生理盐水

1、滴生理盐水

挑取少量菌苔与生理盐水混匀均匀涂布2、涂片滴半滴生理盐水在载玻片中央

3、干燥固定室温自然晾干制片、固定生理盐水1、滴生理盐水挑取少量菌苔与生理盐水混36染色1%结晶紫染液1、滴孔结晶紫染液滴结晶紫染色2分钟3、脱色20%C