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文档简介
动物微生物学实验第1页/共11页一目的要求1.掌握一般培养基制备的原则和要求。2.熟悉一般培养基制备的过程。第2页/共11页二.原理牛肉膏蛋白胨培养基是培养腐生性细菌的常规培养基,也是微生物实验室中常备培养基,为天然培养基。它含有牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐,蛋白胨主要提供氮源、NaCl提供无机盐。牛肉膏5.0g食盐5.0gpH7.2-7.4蛋白胨10.0g自来水1000mL(加入1.5%-1.8%琼脂即成固体培养基)第3页/共11页三仪器材料
微波炉、高压灭菌器、玻璃器皿、PH试纸、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠、氢氧化钠。第4页/共11页四操作步骤一)、培养基的制备原则和要求1.药品纯净
,称量准确。2.所用器皿须洁净3.准确测定调节pH值.4.过滤培养基5.严格控制灭菌时间和温度.二)、培养基制备过程及方法称量--加热溶化--过滤--PH滴定--分装--灭菌第5页/共11页1)肉浸液肉汤(普通肉汤)的制法蛋白胨10g,氯化钠5g,磷酸氢二钾2g。牛肉粉或牛肉膏3g,水1000ml.PH7.4—7.6121.3度15磅高压15钟.2)营养琼脂培养基(普通琼脂)的制法普通肉汤1000ml琼脂粉15gPH7.4—7.6121.3度15磅高压15钟.3)半固体培养基的制法4)鲜血琼脂的制法第6页/共11页PH的滴定:1.酸度计法2.PH比色计法:第7页/共11页第8页/共11页五注意事项1.称量准确2.加热搅拌3.补足水分4.容器适合5.高压彻底6.空白培养第9页/共11页六作业与思考题(1)为什么微生物实验室所用的移液管口或滴管口的上端均需塞上一小段棉茬再用报纸包起来,经高压蒸汽灭菌后才能使用?(2)配制培养基时为什么要调节pH?(3)制作平板培养基的注意事项是什么?(4)培养基配好后,为什么必须马上进行高压蒸汽灭菌?如不能及时灭
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