实验一培养基的制备、消毒与灭菌及超净工作台的使用

微生物实验课注意事项课程简介：必修课，24学时考试成绩按以下公式计算：平时（60％）＋操作考试（40％）现在是1页\一共有22页\编辑于星期三课堂纪律严格遵守实验室规章制度严肃课堂纪律不允许无故旷课、早退（1次）迟到（3次）不能做与实验无关的事现在是2页\一共有22页\编辑于星期三实验室安全和卫生安全实验室严禁吸烟。注意用水、防电和防火正确使用化学试剂和仪器卫生每次实验需留下6位同学值日，协助保持实验室清洁现在是3页\一共有22页\编辑于星期三1、了解培养基的概念、种类和用途，明确培养基的配制原理。2、学习掌握培养基配制的一般方法和步骤。3、掌握高压蒸汽灭菌的原理和方法步骤。实验目的一、培养基的配制现在是4页\一共有22页\编辑于星期三

培养基(culturemedium)是指人工配制的、适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。自然界中微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究目的不同，所以培养基的种类很多，不同种类的培养基一般都应含有微生物生长所需的碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水六大营养要素，且各成分比例应合适。为了满足微生物生长繁殖或积累代谢产物的要求，还必须控制培养基合适的pH。

实验原理现在是5页\一共有22页\编辑于星期三常用凝固剂是琼脂，固体培养基琼脂加量通常为1.5%-2%；半固体培养基琼脂加量为0.5%-0.8%。实验原理常用培养基：牛肉膏蛋白胨培养基广泛用于细菌的培养；高氏一号培养基用于培养放线菌；麦芽汁培养基和豆芽汁培养基通常用于酵母菌的培养；马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养霉菌。现在是6页\一共有22页\编辑于星期三实验分组安排5-6人一组，配制牛肉膏蛋白胨固体培养基每组配500mL牛肉膏蛋白胨固体培养基斜面1支（每人），其余分装在两个500mL三角瓶。

现在是7页\一共有22页\编辑于星期三现在是8页\一共有22页\编辑于星期三现在是9页\一共有22页\编辑于星期三现在是10页\一共有22页\编辑于星期三现在是11页\一共有22页\编辑于星期三包扎：

加塞后，试管通常每7支一起，包上一层牛皮纸或两层报纸，用线绳扎紧。三角瓶加塞后也用牛皮纸包扎。

以活结形式扎紧，以便使用时容易解开。

用记号笔注明培养基名称、配制日期、配制人或实验组。灭菌时包牛皮纸、报纸现在是12页\一共有22页\编辑于星期三灭菌：

培养基灭菌一般采用压力蒸汽灭菌

通常灭菌条件为1.05kg/cm2,121℃灭菌20-30分钟；含糖量高的培养基，如马丁氏培养基则为0.56kg/cm2,115℃灭菌30分钟。现在是13页\一共有22页\编辑于星期三二、消毒与灭菌现在是14页\一共有22页\编辑于星期三现在是15页\一共有22页\编辑于星期三现在是16页\一共有22页\编辑于星期三紫外线灭菌----紫外线波长在200-300nm,具有杀菌作用，其中以265-266nm杀菌力最强。无菌室或无菌接种箱空气可用紫外线灯照射灭菌。现在是17页\一共有22页\编辑于星期三干热灭菌电烤箱1、干热灭菌2、压力蒸汽灭菌现在是18页\一共有22页\编辑于星期三干热灭菌1、装入待灭菌物品2、升温：接通电源，加热升温至160-170℃。3、恒温：保持160-170℃2小时。4、降温：切断电源，自然降温。5、开箱取物：待烤箱温度降到70℃以下以后，方可打开箱门，取出物品。箱内温度高于70℃，切勿自行打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。现