复方氨林巴特妥注射液中氨基比林、安替比林和巴特妥的含量测定

复方氨林巴特妥注射液中氨基比林、安替比林和巴特妥的含量测定

氨基乙醇注射液。1仪器和试剂盒1.1仪器1.2药品与试剂苯乙胺的对照品、苯丙氨酸钠-2-苯甲酰胺(样品2)复方氨林巴比妥注射液(郑州羚锐锐制药有限公司,批号:070304,070305,070306)氨基比林对照品(批号:100503-200301中国药品生物制品检定所)、安替比林对照品(批号:100506-200301中国药品生物制品检定所)、巴比妥对照品(批号:1220-9201国家麻醉品实验室)甲醇为色谱纯,水为纯化水。2实验方法和结果2.1条件1用十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱,色谱柱型号为GracesmartRP2.2溶液的制备2.2.1对照品溶液的制备分别精密称取氨基比林对照品、安替比林和巴比妥对照品适量,加25%甲醇溶解,制成每1mL中分别含氨基比林对照品200μg、安替比林对照品80μg和巴比妥对照品36μg的对照品混合溶液,即得,作为对照品溶液。2.2.2安替比林的检测精密量取样品溶液2mL(约相当于氨基比林100mg,安替比林40mg,巴比妥18mg),置50mL量瓶中,加25%甲醇稀释至刻度,摇匀,取5mL置50mL量瓶中,加25%甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。2.2.3准分离溶液的制备2.3标准曲线的绘制精密吸取对照品溶液5、8、10、12、15μl分别注入高效液相色谱仪,记录峰面积。以峰面积Y为纵坐标,进样量X(μg)为横坐标绘制标准曲线。氨基比林、安替比林和巴比妥的回归方程(n=5)。(见图3~5)。2.4对照品溶液的制备按处方比例,精密称取氨基比林、安替比林和巴比妥对照品适量,同时加入相应的辅料,按对照品溶液的制备项下的方法制备低、中、高三个不同浓度的溶液,按上述色谱条件试验(见表1~3)。2.5林分密度和疗效精密吸取对照品溶液连续进样6次,记录峰面积,氨基比林、安替比林和巴比妥峰面积的RSD分别为0.1%、0.4%和1.7%。(见表4~6)。2.6内峰面积(rsd)精密吸取对照品溶液分别于0、2、4、6、8h进样,记录峰面积,氨基比林、安替比林和巴比妥峰面积的RSD分别为0.1%、0.1%和1.1%。2.7组不同林分氨基、安替比林和巴比妥峰面积的rsd精密量取样品(批号:070304)6份,按“2.2.2”项制备供试品溶液,按上述色谱条件测定,记录峰面积,氨基比林、安替比林和巴比妥峰面积的RSD分别为0.9%、0.9%、0.9%。2.8样品含量测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定,记录峰面积,以外标法计算3批样品中氨基比林、安替比林和巴比妥的含量(见表7)。3讨论3.1林分的最大吸收波长氨基比林的最大吸收波长在278nm,安替比林的最大吸收波长在240nm,而巴比妥的最大吸收在210nm,考虑到处方中氨基比林与安替比林、巴比妥含量相差悬殊(分别为50mg·mL3.2流动相及色谱比对经过比较甲醇-水,乙腈-水,乙腈-水-磷酸盐缓冲液,甲醇-水-磷酸盐缓冲液(55∶25∶20,磷酸盐缓冲液pH为7.8)等多种流动相做比较,发现甲醇-水-磷酸盐缓冲液(55∶25∶20,磷酸盐缓冲液pH为7.8)做流动相时峰面积较大,塔板数较高,分离度也较好,故选甲醇-水-磷酸盐缓冲液(55∶25∶20,磷酸盐缓冲液pH为7.8)为流动相,氨基比林、安替比林和巴比妥三组分分离度好,保留时间分别为5.6min、4.3和3.0min。3.3检测基因型的检测本法简单、快速、稳定性好,回收率高、重现性好,并且可排除处方中辅料对氨基比林、安替比林和巴比妥三组分含量测定的影响,适用于复方氨林巴比妥注射液中氨基比林和安替比林和巴比妥三组分的质量控制。