高效液相色谱法测定室尘中多环芳烃

高效液相色谱法测定室尘中多环芳烃

多环芳烃（pahs）是指以浓环形式连接的化合物。它的数量很多，分布广泛，与人类密切相关。这是发现的最多的事故。到目前为止,已有16种被认定为可疑致癌物人类大部分时间都是在室内度过,室内环境质量与人类的健康息息相关。Rudel和Perovich关于室内降尘中PAHs的暴露水平,国外已有一定报道。在我国,针对室内环境中PAHs浓度的调查研究还很少,相关研究基本侧重于室外环境中PAHs的浓度检测经典的高效液相色谱(HPLC)1材料和方法1.1材料表面1.1.1荧光检测和pda检测美国Waters2695高效液相色谱仪配有Waters2475荧光检测器(FLD)和2996二极管阵列检测器(PDA);WatersC1.1.2色谱分析co-射线衍射16种PAHs混合标准物质:萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并(a)蒽、屈、苯并(b)荧蒽、苯并(k)荧蒽、苯并(a)芘、二苯并(a,h)蒽、苯并(g,h,i)芘、茚并(1,2,3-cd)芘,浓度均为200μg/ml,购于美国Cerilliant公司。乙腈(Merck公司)、丙酮均为色谱纯。流动相用水为超纯水(18.0MΩ)。1.2方法1.2.1流动相梯度洗脱流动相流速1.2ml/min,柱温30℃,进样量10μl,用乙腈-水作流动相进行梯度洗脱(表1)。依据文献及一些多环芳烃纯品的最佳激发波长和发射波长1.2.2标准曲线的绘制将16种多环芳烃混合标准用乙腈稀释成浓度均为0.5、1、5、10、50ng/ml标准系列,进样10μl进行色谱测定,记录色谱图,以相对应的浓度为横坐标(X),对应的峰面积为纵坐标(Y),线性回归绘制标准曲线。1.2.3提取室尘、提取液、水1010用配有纸质吸尘袋的真空吸尘器采集室尘,转入预先清洗过的玻璃瓶中,用聚四氟乙烯胶带密封后,铝箔纸包裹避光,-20℃冰箱保存。实验室分析前,称取过100目筛后的过筛室尘50mg于10m具塞试管中,加入丙酮1.5ml,超声提取30min,于离心机4000r/min离心15min,取上清液1ml。重复萃取1次,再取上清液1ml,合并上清液,低温浓缩至干,加入0.1ml乙腈,充分溶解转移至仪器进样瓶,保存于-20℃待测。1.2.4溶液中pahs含量的确定将样品过100目筛,装在瓷坩埚中,放入马弗炉800℃焙烧1h后保存在干燥器内作为空白样品。称取50mg空白样品,分别加入各种PAHs含量均为0、5、25ng的标液。按样品处理方法进行提取、分析,根据测出量与加入量之比求出样品的加标回收率。1.2.5方法的精度测试称取6份空白样品,每份50mg,加入同等量的标准物质,按实验方法进行样品处理和测定,计算方法的相对标准偏差。2结果2.1线性范围及检出限由表3可见,15种PAHs物质测定浓度均在0.5~50.0ng/ml范围内,线性关系良好,相关系数均在0.999以上,色谱图见图1、图2。2.2加标回收率实验为评价方法的准确度,采用优化的的分离和测定条件对15种多环芳烃化合物进行加标回收率实验。15种多环芳烃各加入5ng和25ng的加标回收率分别在68.75%~110.36%和62.45%~104.53%。基本满足测试要求(表4、5;图3,4)2.3方法的精度由表6可见,15种多环芳烃测定的相对标准偏差在1.35%~5.89%之间,精密度良好。2.4种多环芳烃组用本法测定实际样品中的多环芳烃,结果显示15种多环芳烃化学物质的检出率都在100%,且都在标准曲线的设定浓度范围之内(表7)。15种PAHs的色谱峰都得到很好的分离(图5)。3荧光分离器的工作流程通过对流动相组成、流速、温度等试验条件进行优化,确定了本文测定多环芳烃的合适流动相梯度分离条件,15种PAHs物质得到良好的分离。因为要在较短的时间内检出15种PAHs,如果完全依据各物质的最佳激发波长和发射波长,以及其检测灵敏度编辑检测器测定程序,必须频繁更换激发波长和发射波长以及相应的增益,这样的程序在实际测定时造成极大的基线波动,因此本实验综合考虑各PAHs的检测灵敏度、相应保留时间以及基线的稳定性等多种因素,编辑了PAHs测定的荧光检测器运行程序。在样品中,除苊烯没有荧光,其余15种PAHs物质上机测定浓度各自都在0.5~50ng/ml时,可以满足测定要求,有较好的灵敏度和线性关系。因各种室内降尘中多环芳烃成分与含量复杂,在做加标回收率时,本实验采取将某一样品放入马弗炉800℃焙烧1h预先挥发去原样品中的有机物质作为空白样品,在空白样品中加入一定量的PAHs标液进行测定。多环芳烃的组分复杂,样品的预处理是非常重要的环节,根据文献报道,多环芳烃的萃取多采用二氯甲烷或丙酮。在实验过程中,发现用二氯甲烷萃取室内降尘中的多环芳烃时,因二氯甲烷的比重大,在离心沉淀时细小的室尘很难与其分离,上清液浑浊,所以本方法选用了丙酮。在实际样品测定过程中,发现有的样品中部分PAHs浓度较高,在样品定容的过程中要根据实际情况决定,在满足测定灵敏度的前提下,定容体积最好大一些,这样对柱子的污染情况也会好一些。在实验过程中还可以根据实际情况减少称样量,例如,本实