灭菌制剂上课

1第三章灭菌制剂和无菌制剂韶关学院医学院药学教研室2教学内容第一节

概述第二节

注射剂第三节

注射剂的制备第四节

输液第五节

注射用无菌粉末第六节

眼用制剂第七节

其他灭菌与无菌制剂

第八节灭菌与无菌制剂新进展3第一节概述一、基本概念灭菌和无菌制剂：直接注入体内或直接接触创伤面、粘膜等的一类制剂。灭菌(sterilization)：应用物理或化学等方法将物体上或介质中所有微生物繁殖体及其芽孢全部杀灭或除去的手段。灭菌法(thetechniqueofsterilization)：杀灭或除去所有微生物繁殖体和芽孢的方法或技术。4无菌(sterility)：在任一指定的物体、介质或环境中无任何活的微生物。无菌操作法(aseptictechnique)：在整个操作中利用或控制一定的条件，使产品避免被微生物污染的一项操作方法和技术。5消毒(disinfection)：以物理或化学等方法杀灭或除去病原微生物的手段。消毒剂：对病原微生物具有杀灭或除去作用的物质。防腐(antisepsis)：用物理或化学等方法抑制微生物的生长与繁殖，亦称抑菌。防腐剂：对微生物的生长与繁殖具有抑制作用的物质，亦称抑菌剂。6二、灭菌制剂与无菌制剂的定义与分类1、制剂分类按给药途径：无菌制剂和非规定无菌制剂(即限菌制剂)。按除去活微生物的制备工艺：无菌制剂分灭菌制剂和无菌制剂。广义上，无菌制剂和非无菌制剂都规定有染菌的限度，前者要求不得检出活菌，后者限制染菌的种类与数量。72、定义灭菌制剂：采用某一物理或化学方法将杀灭或除去所有活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。无菌制剂：采用某一无菌操作方法或技术制备的不含任何活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。8注射用制剂：注射剂、输液、注射粉针等；眼用制剂：滴眼剂、眼用膜剂、软膏剂、凝胶剂等；植入型制剂：植入片等；创面用制剂：溃疡、烧伤及外伤用溶液、软膏剂、气雾剂等；手术用制剂，止血海绵剂和骨蜡等。3无菌制剂种类9

灭菌与无菌技术药剂学中灭菌法可分为三大类：即物理灭菌、化学灭菌、无菌操作法。10一、物理灭菌法利用蛋白质与核酸具有遇热、射线不稳定的特性，采用加热、射线和过滤方法，杀灭或除去微生物的技术称为物理灭菌法，亦称物理灭菌技术。该技术包括干热灭菌、湿热灭菌、过滤灭菌法和射线灭菌。11在干燥的环境中加热灭菌的的技术。1、干热空气灭菌法系指用高温干热空气灭菌的方法。一般认为繁殖型细菌在100℃以上干热1小时即被杀死。耐热性细菌芽孢在120℃以下长时间加热也不死亡，在140℃前后则杀菌效率急剧增长。(一)干热灭菌法12(1)干热灭菌条件，有的药典规定为180℃，1小时以上；有的为160-170℃，2-4小时，此是大致的标准而已，必须通过实验，在保证灭菌完全同时对灭菌物品无损害的前提下，制订该物品的干热灭菌条件。(2)时间必须由灭菌物品全达到特定温度的计算。13(3)适用于耐高温的玻璃制品、金属制品以及不允许湿气透的油脂类(如油性软膏基质、注射用油等)和耐高温的粉末化学药品等。(4)热原经250℃30分钟，或200℃以上高温至少45分钟，可遭破坏。(5)缺点是穿透力弱，温度不易均匀，而且由于灭菌温度过高，不适用橡胶、塑料及大部分药品。142、火焰灭菌法系指火焰直接灼烧灭菌的方法。灭菌迅速、可靠、简便，适用于耐火材质(如金属、玻璃及瓷器等)的物品与用具，不适合于药物。15(二)湿热灭菌法由于蒸气比热大，穿透力强，容易使蛋白变性，同时还有作用可靠，操作简便等优点，湿热灭菌法是药物制剂生产中最常用的灭菌方法，本法包括热压灭菌法，流通蒸气灭菌法和低温间歇灭菌等方法。根据药品性质进行选用。16利用高压饱和水蒸气加热法杀灭微生物的方法。一般公认为最可靠的湿热灭菌法，其所需的温度及与温度相当的压力及时间如下：

116℃（67kPa）、40min；

121℃（97kPa）、30min；126℃（139kPa）、15min。湿热灭菌一般要求F0＝1－12分。1、热压灭菌法17热压灭菌适用于耐高温和耐高压蒸气的所有药物制剂、玻璃容器、金属容器、瓷器、橡皮塞、滤膜过滤器等。18热压灭菌用的灭菌器种类很多，但其基本结构大同小异。热压灭菌器密闭耐压，有排气口安全阀，压力表和温度计等部件。有的通蒸气加热，有的用煤气、电热或木炭等加热。常用的有手提式热压灭菌器等。1920热压灭菌器使用时应注意的问题：

(1)应先进行灭菌条件实验，确保灭菌效果。灭菌器的构造、被灭菌物体积、数量、排布均对灭菌的湿度有一定影响。21(2)必须将灭菌器内的空气排出。如果灭菌器内的空气存在，则压力表上所表示的压力是灭菌器内蒸气和空气二者的总压而非单纯的蒸气压力。结果压力虽然到达预定的水平，但温度达不到。若表指示一致。则有可能空气没有排尽，也可能压力表失灵，也可能不是饱和蒸气，应找出原因，加以解决。22(3)灭菌时间必须由全部药液温度达到所要求的温度时算起，在开始升温时，要求一定的预热时间。例如250-500ml输液瓶，预热时间为15-30分钟。23一般灭菌器上，均装有压力表和温度计，但通常是测定灭菌器内的温度，而不是被灭菌物内的温度，因此最好能设计直接测定被灭菌物内温度的装置。同时为了确保灭菌温度，常使用温度批示剂如利用某些熔点正好是灭菌所需温度的化学药品作指示，以判断灭菌湿度是否达到。24(4)灭菌完毕后，停止加热，一般必须使压力表所指示的压力逐渐下降到零，才能放出锅内蒸气，使锅内压力与大气压相等后，稍稍打开灭菌锅待10－15分钟，再全部打开。这样可避免内外压力差太大而使物品冲出锅外和使玻璃瓶炸裂。这点必须注意，以免发生工伤事故。为了缩短灭菌周期，也有对灭菌器内盛有溶液的容器喷雾水冷却，以加速冷却。25流通蒸气灭菌是不密闭的容器内，用蒸气灭菌。压力与大气压相等，即100℃的蒸气灭菌，时间30-60min。缺点：不能保证杀灭所有的芽孢，如破伤风等厌气性菌的芽孢，制备过程中要尽可能避免污染，这点必须充分注意。目前我国药厂生产注射剂，特别是1-2ml注射剂及不耐高热的品种，可考虑采用这种灭菌法。2、流通蒸气灭菌26煮沸灭菌法就是把安瓿或其他物品(如注射器、注射针头等)放入水中煮沸灭菌，一般是100℃，30-60min。此法灭菌效果差，必要时加入抑菌剂。3、煮沸灭菌法27低温间歇灭菌法：将待灭菌的制剂或药品，用60-80℃加热1小时，将其中的细菌繁殖体杀死，然后在室温或孵卵箱中放置24小时，让其中的芽孢发育成为繁殖体，再二次加热将其消灭为止。加热和放置需连续操作三次以上，至全部芽孢消灭为止。4、低温间歇灭菌法

28低温间歇灭菌法适用于必须用热法灭菌但又不耐较高温度的制剂或药品。缺点：时间长，消灭芽孢的效果不够完全。应用本法灭菌的制剂或药品，除本身具有抑菌能力者外，须加适量抑菌剂，以增加灭菌效力。29(1)微生物的种类和数量：各细菌对热的抵抗力相差很大，处于不同发育阶段，所需灭菌的湿度与时间也不相同，繁殖期的微生物对高温比衰老时期的抵抗力大。5、影响湿热灭菌的因素

30每个容器的细菌数，控制在10个以内为宜。最初菌数愈少，达到灭菌时间愈短。最初菌数增多也增加了耐热个体出现的几率。即使细菌全部杀灭，而注射液中细菌体过多，亦会引起临床上的不良反应，所以整个性产过过程应尽可能避免微生物污染，尽可能缩短生产过程，并力求在灌封后立即菌。芽孢＞繁殖体＞衰老体。

31(2)蒸气性质：蒸气有饱和、湿饱和、过热三种。(3)注射液的性质：注射液若含有营养物质，如糖类,蛋白质等，对微生物可能有一种保护作用，能增强其抗热性。32(4)pH：药液pH对细菌的活性也有影响。一般微生物在中性液中耐热性最大，在碱性溶液中次之；酸性不利于微生物的发育。所以，一般在生物碱盐类的注射液，因pH较低，用流通蒸气灭菌即可。33(5)药物的稳定性：温度增高，化学反应速度增加，时间愈长，起反应的物质愈多。因此，不能只看到灭菌杀死细菌的一面，也要看到保证药物有效性的一面。为此在能达到灭菌的前提下，可适当降低温度或缩短灭菌时间。实践证明在力求避免微生物污染和严格质量控制的条件下，维生素C注射液用流通蒸气灭菌15分钟，氯化钠注射液用115℃，30分钟是可行的。

34(三)射线灭菌系采用辐射、微波和紫外线杀死微生物和芽孢的方法。1、辐射灭菌系采用放射性同位素素(60Co和137Cs)放射的

射线杀死微生物和芽孢的方法。辐射灭菌剂量一般为2.5×104Gy(戈瑞)。35适合于热敏物料和制剂，常用于维生素、抗生素、激素、生物制品、中药材和中药制剂、医疗器械、药用包装材料及药用高分子材料等。特点是不升高产品温度，穿透力强，灭菌效率高，但设备贵，有潜在危险性，对某些药物(特别是溶液型)可能产生药效降低或产生毒性物质和发热物质等。362、微波灭菌系采用微波(频率为300MHz-300kMHz)照射产生热能杀死微生物和芽孢的方法。适合于液体和固体物料，对固体物料有干燥作用。特点是能穿透到介质和物料深部，表里加热一致，且具有低温、常压、高效、快速(2-3min)、低能耗、无污染、易操作、易维护，产品保质期长(可延长1/3以上)等。373、紫外线灭菌法一般用于灭菌的紫外线波长是200-300nm，灭菌力最强的是波长为254nm的紫外线。紫外线进行直线传播，其强度与距离平方成比例地减弱，并可被不同的表面反射。其穿透作用微弱，但较易穿透清洁空气及纯净的水，其中悬浮物或水中盐类增多时，则穿透程度显著下降。所以紫外线广泛作空气灭菌和表面灭菌之用。38(四)过滤除菌法过滤除菌法是使药物溶液通过无菌的特定滤器，除去活的或死的微生物而得到不含微生物的滤液。适于不耐热的药液的灭菌。39(1)能有效除净微生物，溶液通过滤器顺畅，滤器容易清洗，操作简便。(2)孔径大小必须足以阻止细菌和芽孢进入滤孔之内，大约为0.2μm。(3)采用微孔薄膜作灭菌滤器，一般选用孔径0.22μm的滤膜。过滤除菌的滤器要求：40二、化学灭菌法本法是指用化学药品直接作用于微生物而将其杀死，同时不应损害制品的质量，常用的方法有：(一)气体灭菌法(1)环氧乙烷环氧乙烷沸点为10.9℃，室温下为气体，在水中溶解度很大，1ml水中可溶195ml(20℃，760mmHg)，易穿透塑料，纸板及固体粉末，暴露于空气中环氧乙烷就可从这些物质消散，环氧乙烷对大多数固体呈惰性。41(2)甲醛甲醛溶液加热熏蒸，每立方米空间用40％甲醛溶液30m1室内相对湿度宜高，以增进甲醛气体灭菌效果。42(二)应用化学杀菌剂在制剂工业上应用化学杀菌剂，其目的在于减少微生物的数目，以控制无菌状况至一定水平。化学杀菌剂并不能杀死芽孢，仅对繁殖体有效。化学杀菌剂的效果，依赖于微生物的种类及数目，物体表面光滑或多孔与否，以及化学杀菌剂的性质。常用的有0.1％-0.2％新洁尔灭溶液，75％酒精等。由于化学杀菌剂常施用于物体表面，也要注意其浓度不要过高，以防其化学腐蚀作用。

43三、无菌操作法无菌操作法在技术上并非灭菌操作，是整个过程控制在无菌条件下进行的一种操作方法。适用于一些不耐热药物的注射剂、眼用剂、皮试液、海绵剂和创伤制剂的制备。44无菌操作场所：①无菌操作室；②层流洁净工作台；③无菌操作柜。45无菌操作柜分小型无菌操作与联合无菌操作两种。小型无菌操作柜又称单人无菌柜，式样有单面式与双面式两种。联合无菌操作柜是由几个小型操作柜联合制成，以使原料的精制，传递分装及成品暂时存放等工作全部在柜内进行。近年来，采用层流洁净工作台作无菌操作，使用方便，效果可靠。46(一)无菌操作前工作无菌操作前无菌操作室或无菌操作所用的一切用具、材料以及环境均须应用灭菌法灭菌：1)定期应用环氧乙烷、甲醛、丙二醇或乳酸等对空气进行较彻底的灭菌。每天工作前开启紫外线一小时，中午休息时间也要开0.5-1小时。2)用3%酚溶液、2%煤酚皂溶液、0.2％新洁尔灭溶液或75％酒精等用对室内的空间、用具(桌椅等)、地面、墙壁等喷洒或擦试。3)其它用具：尽量用热压灭菌法或干热灭菌法灭菌。47(二)无菌操作操作人员进入操作之前要洗澡并换上已经灭菌的工作服和清洁的鞋子，不使头发、内衣等露出来，以免造成污染机会。安瓿要150-180℃，2-3小时干热灭菌；橡皮塞要以121℃，1小时热压灭菌；有关器具、机器都要经过灭菌。用无菌操作法制备的注射剂，大多要加入抑菌剂。小量无菌制剂的制备，也可在无菌操作柜中进行。48(三)无菌检查法药剂或药品经灭菌或无菌操作法处理后，需经无菌检验证实已无微生物生存，方能使用。灭菌效果，应以杀死芽孢为标准(细菌的芽孢具有较强的的抗热力，不易杀死)。在药剂中选择灭菌方法，与微生物学上的要求不尽相同，要达到灭菌的目的，且要保证药稳定性。49法定的无菌检查法，包括有试管接种法和薄膜过滤法。薄膜过滤用于无菌检查的突出优点，在于可滤过较大量的样品可滤除抑菌性物质，滤过后的薄膜，即可直接接种于培养基管中，或直接用显微镜观察，故此法灵敏度高，不易产生假阴性结果，检测次数减少，节省培养基，操作比较简单。501、F与F0值在灭菌中的意义与作用

无菌检验往往难以检出极微量微生物，为了保证产品无菌，有必要对灭菌方法的可靠性进行验证是很必要的。主要原因：①灭菌温度多系测量灭菌器内的温度，不是灭菌物体内的温度；②无菌检验方法也在局限性，难以用现行的无菌检验法检出微量的微生物。

四

灭菌参数51D值为在一定温度下杀死被灭菌物品中微生物90％所需时间；也可定义为降低微生物一个十位数或一个对数值（如log100降低到log10）所需的时间。2、D值52微生物致死间曲线与D值微生物死亡速度属一级过程。dN/dt=-kt，即lgN0-lgNt=kt/2.303D=t=2.303(lg100-lg10)/k＝2.303/kD值因微生物的种类、环境、灭菌温度不同而各异。53

3、Z值在不同温度下对特定的微生物在特定介质或环境中求得D值后，Z值为降低一个lgD值所需升高的温度数，即灭菌时间减少到原来的1/10时所需升高的温度或在相同灭菌时间内，杀灭90%的微生物所需要提高的温度。Z=(T2-T1)/(lgD1-lgD2)，即D2/D1=10(T1-T2)/Z

544、F值与F0值

F(或F0)值可作用验证灭菌可靠性的参数。

(1)F值F为在一定温度(T)，给定Z值所产生的灭菌效果与参比温度(T0)给定Z值所产生的灭菌效果相同时所相当的时间(equivalenttime)，以分为单位。55F=

t

10(T-T0)/Z

t是测量被灭菌物温度的时间间隔，一般为0.5-1.0或更小，T是每个

t测量被灭菌的温度，T0是参比温度。

F值常用于干热灭菌,干热灭菌时Z=20℃，参比温度为170℃。56F0值为在一定灭菌温度(T)、Z值为10℃所产生的灭菌效果与121℃，Z值为10℃所产生的灭菌效果相同时所相当的时间(min)。(2)F0值57物理F0=

t

10(T-121)/Z也就是说F0是将各种灭菌温度使微生物的致死力转换为灭菌物品完全暴露于121℃使微生物致死效力。

F0值仅限于热压灭菌。58生物F0=D121℃×(lgN0-lgNt)Nt为灭菌后预计达到的微生物残存数，即染菌度概率(probabilityofnonsterility)，当Nt为10-6时(原有菌数的百万分之一)，可认为灭菌效果较可靠。生物F0可认为是121度热压灭菌时，杀灭容器内容物中全部微生物所需要的时间。59F0值的计算对于验证灭菌效果极为有用，当产品以121℃湿热灭菌时，灭菌器内的温度虽能迅速升到121℃，而被灭菌物品内部则不然，由于包装材料性能及其他因素影响而使升温度各异，而F0将随着产品温度(T)变化而呈指数的变化，故温度即使很小的差别(如0.1-1)将对F0

值产生显著的影响。同时要求测定灭菌物品内的实际温度，故用F0

来监测灭菌效果有重要的意义。由于F0

是将不同灭菌温度折算到相当于121℃湿热灭菌时的效力，故F0

值可作为灭菌过程的比较参数。

F0测定不管温度如何变化，t分钟内的灭菌效果相当于温度在121℃下灭菌F0分钟的效果，即它把所有温度下灭菌效果都转化成121℃下灭菌的等效值。灭菌过程中，只需记录被灭菌物的温度与时间，就可算出F0。6061影响F0值的因素：①容器大小、形状及热的穿透性等。②灭菌产品溶液的性质、填充量等。③容器在灭菌器中的数量及分布等。62四、空气净化技术(一)概述空气净化技术是以创造洁净的空气为主要目的的空气调节措施。空气净化分工业净化(尘埃粒子)和生物净化(尘埃粒子和微生物)。药物制剂行业中的空气净化需要生物净化，即在除掉空气中的各种尘埃的同时除掉各种微生物等。(二)洁净室空气净化标准1、含尘浓度：单位体积空气中所含粉尘的个数(计数浓度)或毫克量(重量浓度)。632、净化方法常见的可分为三类：(1)一般净化：指标是温度和湿度，采用初效过滤器。(2)中等净化：指标是温度、湿度、含尘量和尘埃粒子(0.15-0.25mg/m3，尘埃粒子不得大于1.0

m)，采用初、中效过滤器。(3)超净净化：指标是温度、湿度、含尘量和尘埃粒子，初、中、高效过滤器。64(1)药品生产管理规范中净化度标准洁净级别尘粒数(粒/升)粒径

0.5

m尘粒数(粒/英尺3)粒径

0.5

m温度(℃)相邻级别室间压差湿度(%)菌落数100

3.5

10018-26正压40-60<110000

350

10000<3100000

3500

100000<10＞100000

35000

1000000/3.洁净室的净化度标准65(三)浮尘浓度的测定方法1、光散射式粒子计数法2、滤膜显微镜计数法3、光电比色计数法66(四)空气净化技术1、过滤方式：表面过滤和深层过滤。2、空气过滤机理：拦截作用和吸附作用。3、影响空气过滤的主要因素：粒径、过滤风速、介质纤维直径和密实性、附尘。4、空气过滤器：板式、契式、袋式和折叠式。6768(五)洁净室的设计生产区域：一般生产区、控制区(10万级)、洁净区(1万级)和无菌区(100级)。1、洁净区基本布局：人流、物流和空气流69702、洁净室对人员、物件及内部结构的要求3、空气净化系统的设计及要求(1)空气净化系统的设计要求：高效空气净化系统采用三级过滤装置(初效－中效－高效)；中效空气净化系统采用二级过滤装置(初效－中效)。洁净室常采用侧面和顶部的送风方式，回风一般安装于墙下。71(2)气流要求：层流(100级)、乱流(紊流，1000-100000级)。层流：是指空气流线呈平行，又称平行流或单向流。由于层流的流线为单一方向且相互平行，各流线间的尘粒不易从一个流线扩散到另一流线上去。层流常用于100级的洁净区。层流分为垂直层流与水平层流。乱流的气流具有不规则的运动轨迹，习惯上也称紊流。72五、冷冻干燥技术(一)概述冷冻干燥(freezedrying)，亦称升华干燥。即含水溶液预先冰冻成固体，后在真空条件下使冰直接升华为蒸汽而进行干燥的方法。(二)冷冻干燥原理及曲线1、冷冻干燥原理当压力低于4.597mmHg时，不管温度如何变化，水只有以固态或气固存在。73WXYZW:常温常压药液X：常压低温含药冰Y：低压低温含药冰Z：低压常温含药固体742、冷冻干燥曲线及其分析板温产品温度75第二节注射剂

一、概述（一）注射剂指药物制成的供注入体内的灭菌溶液、乳浊液和混悬液，及供临用前配成溶液或混悬液的无菌粉末或浓缩液。76溶液型：适于易溶于水而且在水溶液中稳定的药物，如氯化钠注射液。乳剂型：水不溶性液体药物，如静脉注射脂肪乳剂等。混悬型：水难溶性药物或注射后要求延长药效作用的药物，可制成水或油的混悬液。注射用无菌粉末：系将供注射用的无菌粉末状药物装入安瓿或其他适宜容器中，临床前用适当的溶剂溶解或使混悬而成的制剂。77(二)一般质量要求1、无菌：不得含有任何活的微生物和芽孢。2、无热原：鲎试剂法和家兔法。3、澄明度：不得有肉眼可见的浑浊或异物。4、安全性：不引起对组织的刺激性和发生毒性反应。5、渗透压：与血浆等渗；输液要求等渗、等张性。6、pH:与血浆接近，4-9。7、稳定性：具有必要的物理和化学稳定性，以确保产品在储存期内安全有效。8、降压物质：符合规定，确保用药安全，如复方氨基酸注射液。78在注射液生产过程中常常遇到的问题是澄明度、化学稳定性、无菌及热原等问题。79(三)注射剂的特点1、剂量准确，作用快。2、适用于病情严重或不能口服用药的病人。3、适用于不宜口服的药物。4、发挥局部定位作用。5、注射给药不方便，且产生疼痛。6、制剂要求严格，生产过程复杂，费用高，需要有特殊的给药器械(注射器等)，严格无菌以及不同的注射技术。无针粉末注射剂81(四)常用的注射方法有如下几种：1、皮下注射(subcutaneousrout，SC)注射于真皮与肌肉之间的松软组织内，适用于剂量为2ml以内，而没有刺激性的注射剂，比口服给药吸收快而完全。注射后5-15分钟即生效。2、皮内注射(intradermalrout，ID)注射于表皮与真皮之间，一次剂量为0.2ml以内，常用于过敏试验或疾病诊断。3、肌肉注射(intramuscularroute，IM)注射于肌肉组织中，药量在5ml以内。由于肌肉血管丰富，药物的吸收比皮下更迅速完全。824、静脉注射(intravenousroute，IV)或静脉滴注注入静脉内，几毫升到几千毫升。对注射用药物要求澄明，无浑浊、沉淀，无异物和致热原。油溶液和混悬液或乳浊液会引起毛血细管栓塞，一般不宜采用静脉给药，但粒径<1

m的乳浊液可静脉给药。凡能导致红细胞溶解或使蛋白质沉淀的药液，均不宜静脉给药。为了使药液在血液中维持较长时间或不断补充大量液体，可采用静脉滴注法。835、脊椎腔注射(vertebracavalroute)注射于脊椎四周蜘蛛膜下腔内，药量在10ml以内。由于神经组织比较敏感，且脊椎液缓冲容量小、循环慢，对注射药液要求必须等渗，pH5.0-8.0，注射要缓慢。846、动脉内注射(intra-arterialroute)注入靶区动脉末端，如诊断动脉造影剂、肝动脉栓塞剂。7、其他：此外还有心内注射、穴位注射、鞘内注射、滑膜腔内注射和关节腔内注射(封闭针)。85二、注射剂的处方组分(一)注射用原料符合药典或国家药品质量标准。86(二)注射用溶剂1、注射用水：(1)注射用水为纯化水经蒸馏所得的蒸馏水(配制注射剂)，制备后于80℃以上密封保存，并在12小时内使用。；(2)灭菌注射用水(注射用无菌粉末的溶剂或注射剂的稀释剂)；(3)纯化水为将原水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法等制得的供药用的水(配制普通药剂的溶剂或试验用)。872、注射用油(油性注射剂只能供肌内注射)(1)植物油：主要为大豆油，其他麻油、茶油、花生油、玉米油、橄榄油、棉籽油、豆油、蓖麻油及桃仁油等。(2)油酸乙酯(aethylisoleas)：能与脂肪油混溶，贮藏会变色，加抗氧剂，如含37.5%没食子丙酯、37.5%BHT(二叔丁对甲酚)及25%BHA(二叔丁对甲氧酚)的混合抗氧剂用量为0.03%(v/v)效果最佳，可于150℃、1h灭菌。(3)苯甲酸苄酯(ascabin)：能与乙醇、脂肪油混溶。883、其他注射用非水溶剂(1)乙醇：能与水、甘油、挥发油等混溶，作注射溶剂浓度可达50％，但10％时可能会有溶血作用或疼痛感。(2)丙二醇(propyleneglycol,PG)：能与水、乙醇、甘油混溶，常用量10％-60％，皮下或肌注时有局部刺激性，可供静注或肌注。89(3)聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)：能与水、乙醇混溶，PEG300和PEG400均可做注射溶剂，由于PEG300的降解产物可能会致肾病变，因而PEG400更常用。(4)甘油(glycerin)：能与水、乙醇混溶，但在挥发油和脂肪油中不溶，由于粘度和剌激性较大，不能单独做注射溶剂用，常用浓度1％-50％。(5)二甲基乙酰胺(dimethylacetamide,DMA)：能与水、乙醇混溶，对药物的溶解范围大，为澄明中性溶液。连续使用时，应注意其慢性毒性。90(三)注射剂的主要附加剂1、注射剂附加剂的主要作用(1)增加药物的理化稳定性；(2)增加主药的溶解度；(3)抑制微生物生长；(4)减轻疼痛或对组织的刺激性等。912、常用附加剂pH和等渗调节剂、增溶剂、局麻剂、抑菌剂、抗氧剂等。(1)缓冲剂醋酸(0.22%),醋酸钠(0.8%)；枸橼酸(0.5%),枸橼酸钠(4.0%)；酒石酸(0.65%),酒石酸钠(1.2%)；磷酸氢二钠(1.7%),磷酸二氢钠(0.71%)；碳酸氢钠(0.005%),碳酸钠(0.06%)；乳酸(0.1%)。92(2)抑菌剂苯甲醇(1-2%)、羟丙丁酯和羟丙甲酯(0.01-0.015%)、苯酚(0.5-1.0%)、三氯叔丁醇(0.25-0.5%)、硫柳汞(0.001-0.02%)。(3)局麻剂利多卡因(0.5-1.0%)、盐酸普鲁卡因(1.0%)、苯甲醇(1-2%)、三氯叔丁醇(0.3-0.5%)。93(4)等渗调节剂氯化钠(0.5-0.9%)、葡萄糖(4-5%)、甘油(2.25%)。(5)抗氧剂亚硫酸钠(0.1-0.2%)、亚硫酸氢钠(0.1-0.2%，酸)、焦亚硫酸钠(0.1-0.2%，酸)、硫代硫酸钠(0.1%)。(6)螯合剂EDTA-2Na(0.01-0.05%)。94(7)增溶剂，润湿剂，乳化剂聚氧乙烯蓖麻油(1-65%)、聚山梨酯20(0.01%)、聚山梨酯40(0.05%)、聚山梨酯80(0.04-4.0%)、聚维酮(0.2-1.0%)、聚乙二醇-蓖麻油(7.0-11.5%)、卵磷脂(0.5-2.3%)、PluronicF-68(0.21%)。(8)助悬剂明胶(2.0%)、甲基纤维素(0.03-1.05%)、羧甲基纤维素(0.05-0.75%)、果胶(0.2%)。95(9)填充剂乳糖(1-8%)；甘氨酸(1-10%)；甘露醇(1-10%)。(10)稳定剂肌酐(0.5-0.8%)；甘氨酸(1.5-2.25%)；烟酰胺(1.25-2.5%)；辛酸钠(0.4%)。(11)保护剂乳糖(2-5%)；蔗糖(2-5%)；麦芽糖(2-5%)；人血白蛋白(0.2-2%)。96(四)注射剂的等渗与等张调节1、定义(1)等渗溶液(isoosmoticsolution)：系指与血浆渗透压相等的溶液，属于物理化学概念。(2)等张溶液(isotonicsolution)：系指渗透压与红细胞膜张力相等的溶液，属于生物学概念。972、渗透压的测定与调节溶液中质点数相等者为等渗。注入机体内的液体一般要求等渗，否则易产生刺激或溶血等。低渗溶血，高渗红细胞萎缩。常用的渗透压调节方法：冰点降低数据法和氯化钠等渗当量法。98(1)冰点降低数据法一般情况下，血浆冰点值为-0.52℃，根据物理化学原理，任何溶液的冰点降到-0.52℃，即与血浆等渗。W=(0.52-a)/b式中，W为配制等渗溶液需加入等渗调节的百分含量；a为药物溶液的冰点下降度数；b为用以调节的等渗剂1%溶液的冰点下降度数99例配制2%的盐酸普鲁卡因溶液100ml，用氯化钠调节等渗，求所需氯化钠的加入量。已知1%的盐酸普鲁卡因溶液的冰点下降度数0.12℃；1%氯化钠溶液的冰点下降度数0.58℃。总氯化钠需要降低的:0.52-0.12*2=0.28.氯化钠的浓度0.28/0.58=0.48(单位:%)100ml中需要加0.48克。100(2)氯化钠等渗当量法氯化钠等渗当量系指与1g药物呈等渗的氯化钠质量。0.9%的氯化钠溶液为等渗溶液.1g药物=XgNaCl，

0.9%NaCl=血浆渗透压

X=0.009V–EW=0.9%V–EW例题：配100ml的2%盐酸普鲁卡因溶液，需加NaCl多少使成等渗溶液？（1g盐酸普鲁卡因的氯化钠等渗当量为0.18g，0.9%NaCl=血浆渗透压）

X=0.9%×100（100×2%

）×0.18

=0.9

0.36

=

0.54g1023、等张调节在新产品的试制中，即使所配的溶液为等渗溶液，为了安全用药，亦应进行溶血试验，必要时加入氯化钠、葡萄糖等调节成等张溶液。由于等渗和等张溶液的定义不同，等渗溶液不一定等张，等张溶液不一定等渗。103第三节注射剂的制备一、注射剂的工艺流程注射剂一般生产过程包括：原辅料和容器的前处理、称量、配制、过滤、灌封、灭菌、质量检查、包装等步骤。总流程由制水、安瓿前处理、配料及成品四个部分组成，其中环境区域划分为控制区与洁净区。104105二、注射用水的质量要求及制备1、注射用水的质量要求注射用水为蒸馏水或去离子水经蒸馏所得，又称为重蒸馏水。质量要求：氯化物、硫酸盐、硝酸盐、亚硝酸盐、二氧化碳、易氧化物、不挥发物、重金属等项应符合药典规定，pH应为5.0-7.0，氨含量不超过0.00002%，热原检查应符合规定，并规定应于制备后12h内使用。1062、注射用水的制备原水处理：自来水

细过滤

电渗析或反渗透装置

阳离子树脂床

脱气塔

阴离子树脂床

混合树脂床蒸馏法制备：多效蒸馏水机或气压式蒸馏水机

热贮水器(80℃)

注射用水。107(1)原水处理原水处理处理方法有离子交换法、电渗析法及反渗透法。①离子交换法：利用阳、阴离子树脂可以除去绝大部分阳、阴离子，对热原、细菌也有一定的清除作用。其主要优点是水质化学纯度高，所需设备简单，耗能小，成本低。离子交换法处理原水的工艺，一般可采用阳床、阴床、混合床的组合形式。大型离子设备图109②电渗析法依据在电场作用下离子定向迁移及交换膜的选择性透过而设计，即阳离子交换膜装在阴极端，显示强烈的负电场，只允许阳离子通过；阴离子交换膜装在阳极端，显示强烈的正电场，只允许阴离子通过。当原水含盐量高达3000mg/L时，不宜采用离子交换法制备纯化水，但电渗析法仍适用。它不用酸碱处理，较离子交换法经济。110111③反渗透法(reverseosmosis)一般情况下，一级反渗透装置能除去一价离子90-95%，二价离子98-99%，同时能除去微生物和病毒，但除去氯离子的能力达不到药典要求；二级反渗透装置能彻底除去氯离子。有机物的排除率与其分子量有关，分子量大于300的化合物几乎全部除尽，故可除去热原。反渗透法除去有机物微粒、胶体物质和微生物的原理，一般认为是机械过筛作用。反渗透法制备注射用水的膜材：醋酸纤维膜和聚酰胺膜。112113(2)蒸馏法：主要有塔式和亭式蒸馏水器、多效蒸馏水器和气压式蒸馏水器。114115三、热原1、定义注射后能引起人体致热反应的物质，称热原(pyrogen)。致热能力最强的是革兰氏阴性杆菌，大致可认为热原＝内毒素＝脂多糖，分子量一般为1

106左右。1162、热原的性质(1)水溶性：能溶于水。(2)耐热性：60℃，1h不受影响，100℃也不分解，但在250℃，30-45min；200℃，60min；或180℃，3-4h可使热原彻底破坏。在通常注射剂的热压灭菌中热原不易被破坏。117(3)过滤性：热原体积小，约1-5nm，一般滤器均可通过，微孔滤膜也不能截留，但可被活性碳吸附。(4)不挥发性：本身不挥发，但可随水蒸气中的雾滴带入蒸馏水。(5)其他：能被强酸强碱破坏，也能被强氧化剂，如高锰酸钾或过氧化氢等破坏，超声波及某些表面活性剂如去氧胆酸钠也能使之破坏。1183、热原的主要污染途径(1)注射用水：是热原污染的主要来源；(2)原辅料；(3)容器、用具、管道与设备等；(4)制备过程与生产环境；(5)输液器具。1194、热原的去除方法(1)高温法；250℃，30min以上。(2)酸碱法；重铬酸钾硫酸清洗液或稀氢氧化钠液。(3)吸附法：活性碳用量0.05-0.5%(w/v)。(4)离子交换；10%的#301弱碱性阴离子交换树脂和8%#122弱酸性阳离子交换树脂，除去丙球注射液中热原。(5)凝胶过滤法；二乙氨基乙基葡聚糖凝胶(分子筛)。(6)反渗透法；通过三醋酸纤维膜除去热原。(7)超滤法；3.0~15nm超滤膜。(8)其他方法如二次以上湿热灭菌，或适当提高灭菌温度和时间，以及微波等。120四、注射剂的制备步骤（一）原辅料的准备计算原料用量

称量(两人核对)，可酌情增加投料量。原料(附加剂)实际用量=原料(附加剂)理论用量原料

成品标示量百分数/原料(附加剂)实际含量原料(附加剂)用量=实际配液量

成品含量％实际配液量=实际灌注量＋实际灌注时损耗量121（二）注射容器的处理安瓿的种类和式安瓿式样采用有颈安瓿和粉末安瓿，规格分1、2、5、10、20ml。SFDA已经强制推行曲颈易折安瓿。易折安瓿分色环易折安瓿和点刻痕易折安瓿。两室注射容器：下隔室装无菌粉末，上隔室盛溶剂，中间用特制的隔膜分开。123(2)安瓿的质量要求①应无色透明；②应具有低的膨胀系数、优良的耐热性；③熔点低；④不得有气泡、麻点及砂粒；⑤应具有足够的物理强度；⑥应具有高度的化学稳定性。124(3)安瓿的检查物理检查：外观、尺寸、应力、清洁度、物理稳定性等。化学检查：耐酸、碱性和中性检查。装药试验：安瓿与药液的相容性。(4)安瓿的切割和圆口125(5)安瓿的洗涤一般用离子交换水灌瓶蒸煮；质量较差的用0.5%醋酸水溶液。安瓿洗涤设备：喷淋式、超声波和气水喷射式安瓿洗涤机组。(6)安瓿的干燥和灭菌一般置于120-140℃干燥；180℃,1.5h干热灭菌。大生产中多采用隧道式烘箱，主要由红外线发射装置和安瓿传送装置组成。1.引瓶2.注循环水3.4.5.6.7超声清洗8.9空位10.11.12循环水冲洗13.吹气排水14.注新蒸馏水1516压气吹净17空位18吹气送瓶A.B.C.D.过滤器E.循环泵F.吹玻屑G.溢流回收127（三）注射液的配制与过滤A.注射液的配制(1)配制用具的选择与处理常用装有搅拌器的夹层锅配液，以便加热或冷却。配制用具的材料：玻璃、耐酸碱搪瓷、不锈钢、聚乙烯等。(2)配制方法：浓配法和稀配法。128(3)注意事项：①配制环境要清洁，一般并不要求无菌，但所用器具和原料及附加剂尽可能无菌；②配制剧毒药品，严格称量和核对，并谨防交叉污染；③对不稳定性药物应注调配顺序，有时还要控制温度的避光操作；④对不易滤清的药液可加入0.1-0.3%的活性碳处理，小量注射液可用纸浆混碳处理。129(1)影响过滤的因素液体的流动遵循Poiseuile公式：V=P

r4t/8

LV－过滤容量；P－操作压力；r－流过层中毛细管半径；t－过滤时间；

－液体粘度；L－毛细管长度；V/t－过滤速度。B.注射液的过滤130(2)过滤介质与助滤剂常用过滤介质：①滤纸(普通和分析用)；②脱脂棉(口服液体过滤)；③织物(精滤前的预滤，或注射剂脱碳过滤)；④烧结金属(注射剂初滤)；⑤多孔塑料(1、5、7

m，其中1

m可用于注射剂过滤)；⑥垂熔玻璃(广泛用于注射剂过滤)；⑦多孔陶瓷(主要用于注射剂精滤)；⑧微孔滤膜(主要用于注射剂精滤和除菌过滤)。131①硅藻土(主要成分二氧化硅)；②活性碳(有较强的吸附热原和微生物的能力，能吸附生物碱类药物)；③滑石粉(吸附性小，能吸附溶液中过量不溶性的挥发油和色素，适用于含粘液、树胶较多的液体)；④纸浆(有助滤和脱色作用，中药注射剂中应用较多)。常用的助滤剂：132(3)过滤装置①普通漏斗(玻璃和布氏)②垂熔玻璃滤器(垂熔玻璃漏斗、滤器和滤棒，口服液体过滤)3号和G2号常压过滤；4号和G3号减压或加压过滤；6号以及G5、G6号用于无菌过滤；垂熔漏斗使用后要用水抽洗，并以1%-2%硝酸钠硫酸液浸泡处理)。③砂滤棒(硅藻土滤棒和多孔素瓷滤棒)垂熔玻璃滤器133134④板框式压滤机(多用于注射剂预滤)135⑤微孔滤膜过滤器理化性质：热稳定性；化学性能稳定。纤维酯膜不适于酮类、酯类、乙醚-乙醇混合溶液以及强酸强碱；尼龙膜或聚四氟乙烯膜化学稳定性好。主要用于注射剂精滤和除菌过滤。优点：微孔孔径小，截留能力强；孔径大小均匀；滤速快；滤膜无介质的迁移；无交叉污染。缺点：易堵塞，有些滤膜化学性质不理想。136⑥压滤器⑦其他，如超滤装置、钛滤器、多孔聚乙烯烧管过滤器等。在注射液生产中，一般采用二级过滤：预滤(砂滤棒、垂熔玻璃漏斗、板框式压滤机或预滤膜)→精滤(滤膜)。137（四)注射液的灌封封口有拉封和顶封，主张拉封(对药液影响小)。灌封操作分手工灌封和机械灌封。注意事项：剂量准确；药液不沾瓶；通惰性气体时既不能使药液溅至瓶颈，又使安瓿空间空气除尽。出现问题：剂量不准；封口不严；出现大头、焦头、瘪头、爆头等。5、灭菌与检漏拉封手工灌封机械灌封西林瓶液体灌装线-德国Groninger公司(五）注射剂的灭菌和检漏对热不稳定的产品.在避菌条件较好的情况下生产的注射剂，一般1～5ml安瓿可用流通蒸气灭菌100℃30分钟，10～20ml安瓿使用100℃45分钟。要求按灭菌效果F0值大于8进行验证。检漏一般应用一种灭菌检漏两用灭菌器。或在灭菌后，趁热立即于灭菌锅内放入颜色水，安瓿遇冷内部压力收缩，颜色水即从漏气的毛细孔进入而被检出。140141五、注射剂的质量检查(一)澄明度检查：白点：为原料或安瓿产生；纤维：因环境污染所致；玻屑：由于割口灌封不当所造成。我国对澄明度检查的要求：取供试品，在黑色背景、20W照明荧光灯光源下，用目检视，应符合卫生部关于澄明度检查判断标准的规定。BY-1型澄明度检测仪：国产142(二)热原检查热原检查：法定的方法为家兔法。家兔对热原的反应和人是相同的。特点:费时较长，操作繁琐。体外热原试验法即鲎试验法。特点：灵敏度高，操作简单，实验费用少，可迅速得结果，当易出现“假阳性”。特别适用于某些不能用家兔进行的品种，如放射性制剂，肿瘤制剂等。其原理是利用鲎(Limuspolyphemus)的变形细胞溶解物(amebecytelysate)与内毒素之间的凝集反应。鲎试验法（细菌内毒素检查法）灵敏度高（0.0001μg内毒素）；操作简便；适用于某些不能用家兔进行热原检测的品种（抗肿瘤制剂、放射性制剂）对革兰氏阴性杆菌以外的细菌产生的内毒素不够灵敏。144(三)无菌检查任何注射剂在灭菌操作完成后，必须抽出一定数量的样品进行无菌试验，以确保制品的灭菌质量。通过无菌操作制备的成品更应注意无菌检查的结果。具体检查方法参看《中国药典》。145六、注射剂处方分析与制备(1)Vc注射液处方：维生素C104gEDTA-2Na0.05g

碳酸氢钠49.0g

亚硫酸钠2.0g

注射用水加至1000ml

制备：80％注射用水→通二氧化碳→分次缓慢加入碳酸氢钠→EDTA-2Na、亚硫酸钠→维生素C→pH6.0-6.2→注射用水全量→过滤→通二氧化碳灌封→100℃,15min流动蒸气灭菌。146处方：维生素B2(主药)2.575g

烟酰胺(助溶剂)77.25g

乌拉坦(局麻剂)38.65g

苯甲醇(抑菌剂)7.5ml

注射用水加至1000ml制备：烟酰胺、乌拉坦→适量射用水→活性碳0.1g→放置15min→脱碳→加注射用水至900ml，80-90℃→维生素B2→保温20min→室温，苯甲醇→0.1mol/LHCl调pH5.5-6.0→注射用水全量，10℃以下放置8h→过滤→灌封→100℃,15min流动蒸气灭菌。(2)VB2注射液147处方：醋酸可地松微晶25g主药氯化钠3g渗透压调节剂

吐温801.5g润湿剂，稳定剂羧甲基纤维素钠5g助悬剂硫柳汞0.01g抑菌剂注射水加至100ml分散溶媒设计依据：API微晶5-20微米,过大产生刺激,降低疗效，制备分散性良好的微晶是混悬型注射剂的关键;氯化钠调节使得与血浆等渗;CMCNa助悬,增加稳定性;吐温80,增加难溶性药物表面亲水性,便于分散,防止主药微晶在灭菌或贮藏时长大;硫柳汞抑菌剂（3）

醋酸可地松注射液148第四节输