食品添加剂的测定-甜味剂的测定之糖精钠含量的测定

糖精钠含量的测定（液相色谱法）

技能点：标准溶液的配制糖精钠标准储备溶液的配制二糖精钠标准中间溶液的配制三糖精钠标准系列溶液的配制四目录仪器准备一仪器准备一仪器规格仪器规格常压烘箱容量瓶10mL、50mL、100mL干燥器刻度移液管1mL、5mL、10mL电子天平0.0001g烧杯100mL冰箱0℃~5℃玻璃棒移液枪洗瓶糖精钠标准储备溶液的配（1000mg/L）1.称量2.溶解3.定容4.贮存二1.称量糖精钠含量的测定准确称取糖精钠0.117g（精确到0.0001g）。糖精钠称量前需在120℃烘4h，去除结晶水，干燥器中冷却至室温。2.溶解糖精钠含量的测定糖精钠0.117g（精确到0.0001g）用少量水（GB/T6682规定的一级水）溶解，搅拌均匀，分多次洗进100mL容量瓶中。一级水3.定容糖精钠含量的测定定容至100mL一级水用水（GB/T6682规定的一级水）溶解并定容至100mL。4.贮存糖精钠含量的测定定容至100mL后转移至试剂瓶中，糖精钠标准储备液（1000mg/L）4℃糖精钠标准贮备液（1000mg/L）糖精钠储备液4℃贮存，保存期为6个月。糖精钠标准中间溶液的配制（200mg/L）三准确吸取糖精钠标准储备液10.0mL于50mL容量瓶中，用水定容。4℃定容至50mL贮备液糖精钠标准中间液（200mg/L）吸取10mL中间液4℃贮存，保存期为3个月。糖精钠标准系列工作溶液的配制四1.00mg/L5.00mg/L20.0mg/L100mg/L0mg/L10.0mg/L50.0mg/L200mg/L准确吸取糖精钠标准中间溶液0mL、0.05mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL、10.0mL，用水定容至10mL。临用现配。糖精钠含量的测定（液相色谱法）

技能点：测定原理与试剂配制测定原理一适用范围二试剂配制三目录测定原理样品经水提取，高脂肪样品经正己烷脱脂，高蛋白样品经蛋白沉淀剂沉淀蛋白，采用液相色谱分离.紫外检测器检测，外标法定量。一适用范围1.本法适用于食品中糖精钠的测定。2.测定依据：GB5009.28-2016第一法（液相色谱法）二试剂配制1.试剂2.仪器准备3.试剂配制4.标准品三（1）氨水（NH3·H2O）。（2）亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O]。（3）乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]。（4）无水乙醇（CH3CH2OH）。（5）正己烷（C6H14）。1.试剂（除另有说明，所用试剂均为分析纯）糖精钠含量的测定（6）甲醇（CH3OH）：色谱纯。（7）乙酸铵（CH3COONH4）:色谱纯。（8）甲酸（HCOOH）：色谱纯。（9）水：GB/T6682规定的一级水。（10）冰乙酸（CH3COOH）。仪器规格仪器规格电子天平0.001g量筒100mL移液枪洗瓶塑料离心管50mL试管水性微孔滤膜0.22μm烧杯250mL容量瓶1000mL玻璃棒刻度移液管1mL试剂瓶2.仪器准备糖精钠含量的测定（1）氨水溶液（1+99）：取1mL氨水，加到99mL水中，混匀。3.试剂配制：氨水溶液糖精钠含量的测定99mL水1mL氨水氨水溶液（1＋99）（2）亚铁氰化钾溶液（106g/L）：称取106g亚铁氰化钾，加入适量水溶解，用水定容至1000mL。3.试剂配制：亚铁氰化钾溶液糖精钠含量的测定一级水106g亚铁氰化钾106g亚铁氰化钾一级水定容至1000mL亚铁氰化钾溶液（106g/L）（3）乙酸锌溶液（220g/L）：称取220g乙酸锌溶于少量水中，加入30mL冰乙酸，用水定容至1000mL。3.试剂配制:乙酸锌溶液糖精钠含量的测定一级水220g乙酸锌一级水定容至1000mL乙酸锌溶液（220g/L）30mL冰乙酸（4）甲酸－乙酸铵溶液（2mmol/L甲酸+20mmol/L乙酸铵）：称取1.54g乙酸铵，加入适量水溶解，再加入75.2μL甲酸，用水定容至1000mL，经0.22μm水相微孔滤膜过滤后备用。3.试剂配制：甲酸-乙酸铵溶液糖精钠含量的测定一级水1.54g乙酸铵75.2μL甲酸一级水定容至1000mL甲酸—乙酸锌溶液0.22μm水相微孔滤膜过滤糖精钠（C6H4CONNaSO2，CAS号：128-44-9），纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。4.标准品糖精钠含量的测定糖精钠含量的测定（液相色谱法）

技能点：试样溶液的测定试样制备二试样提取三仪器参考条件四标准曲线的制作五试样溶液的测定六目录仪器准备一仪器准备一仪器规格仪器规格高效液相色谱仪超声波清洗仪35kHz电子天平0.001g离心机≥10000r/min恒温水浴锅100℃±1℃涡旋振荡器水性微孔滤膜0.22μm具塞离心管50mL容量瓶50mL刻度移液管1mL、2mL研磨机匀浆机试样制备二试样提取1.一般性试样2.含胶基的果冻、糖果等试样3.油脂、巧克力、奶油、油炸食品等高油脂试样三1.一般性试样糖精钠含量的测定定容至50mL准确称取2g（0.001g）50mL具塞离心管加水25mL50℃水浴超声20min冷却至室温加亚铁氰化钾溶液2mL8000r/min离心5min水相转移至50mL容量瓶残渣中加水20mL涡旋混匀涡旋混匀超声5min8000r/min离心5min待液相色谱测定50mL容量瓶适量上清液过0.22μm滤膜水相转移至50mL容量瓶2.含胶基的果冻、糖果等试样糖精钠含量的测定定容至50mL准确称取2g（0.001g）50mL具塞离心管加水25mL50℃超声20min冷却至室温加亚铁氰化钾溶液2mL8000r/min离心5min水相转移至50mL容量瓶残渣中加水20mL涡旋混匀涡旋混匀超声5min8000r/min离心5min待液相色谱测定70℃水浴加热溶解试样50mL容量瓶适量上清液过0.22μm滤膜水相转移至50mL容量瓶3.油脂、巧克力、奶油、油炸食品等高油脂试样糖精钠含量的测定定容至50mL准确称取2g（0.001g）50mL具塞离心管50℃超声20min冷却至室温加亚铁氰化钾溶液2mL、乙酸锌溶液2mL8000r/min离心5min残渣中加水20mL涡旋混匀涡旋混匀超声5min8000r/min离心5min待液相色谱测定60℃水浴加热约5min，不时振摇溶解脂肪弃去有机相水相转移至50mL容量瓶50mL容量瓶适量上清液过0.22μm滤膜水相转移至50mL容量瓶加氨水溶液25mL、乙醇1mL正己烷10mL仪器参考条件色谱柱：C18柱，4.6mm×250mm，5μm，或等效色谱柱。流动相：甲醇＋乙酸铵溶液=5＋95。流速：1mL/min。检测波长：230nm。进样量：10

μL。四标准曲线的制作将糖精钠（以糖精计）标准系列工作溶液注入液相色谱仪中，测定相应的峰面积，以糖精钠（以糖精计）标准系列工作溶液的质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。五试样溶液的测定将试样溶液注入液相色谱仪中，得到峰面积，根据