2025年江苏省职业院校技能大赛高职组(检验检疫技术)参考试题(附答案)

2025年江苏省职业院校技能大赛高职组(检验检疫技术)参考试题(附答案)一、理论考核（总分100分）（一）单项选择题（每题2分，共20分）1.依据GB4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》，进行菌落总数测定时，若10⁻³、10⁻⁴、10⁻⁵三个稀释度的平均菌落数分别为235、27、2，则最终报告的菌落总数应为（）A.2.3×10⁴CFU/gB.2.7×10⁴CFU/gC.2.5×10⁴CFU/gD.2.4×10⁴CFU/g2.某进口水产品中检测出孔雀石绿残留，其判定依据应为（）A.GB31658.1-2021《动物性食品中四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物残留量的测定》B.GB31656.11-2021《水产品中孔雀石绿残留量的测定》C.GB2763-2021《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》D.GB2762-2017《食品安全国家标准食品中污染物限量》3.使用原子吸收光谱仪测定铅含量时，若出现吸光度值偏低且不稳定，最可能的原因是（）A.乙炔气流量过大B.空心阴极灯预热时间不足C.样品溶液pH值过高D.比色皿未用待测液润洗4.关于实验室高压蒸汽灭菌器的使用，下列操作错误的是（）A.灭菌前检查水位是否在安全线以上B.灭菌物品之间留出间隙，避免堆叠C.灭菌结束后立即打开放气阀快速降压D.记录灭菌温度、压力及持续时间5.依据GB2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》，山梨酸钾在蜜饯中的最大使用量为（）A.1.0g/kgB.0.5g/kgC.2.0g/kgD.0.3g/kg6.检测金黄色葡萄球菌时，Baird-Parker平板上典型菌落的特征是（）A.黑色有光泽，周围有白色沉淀环B.红色菌落，周围有透明溶血环C.蓝绿色菌落，边缘有扩散生长现象D.白色光滑菌落，无溶血现象7.进行ELISA检测时，若包被抗体浓度过高，可能导致的结果是（）A.假阴性B.假阳性C.标准曲线斜率降低D.显色时间延长8.关于食品中水分测定（直接干燥法），下列说法错误的是（）A.适用于水分含量较高且易挥发成分少的样品B.称量瓶需在干燥器中冷却至室温后称重C.恒重要求两次称量差值不超过2mgD.含糖量高的样品需采用减压干燥法9.某批次进口奶粉中阪崎肠杆菌检测结果为阳性，根据GB10765-2021《婴儿配方食品》，该产品应（）A.允许销售，但需标注“微生物指标异常”B.进行辐照灭菌后重新检测C.判定为不合格，作退货或销毁处理D.降低等级后低价销售10.实验室质量控制中，空白试验的目的是（）A.验证仪器精密度B.消除试剂和环境带来的系统误差C.提高检测灵敏度D.确定方法检出限（二）判断题（每题1分，共10分）1.检测沙门氏菌时，三糖铁琼脂（TSI）斜面变红、底层变黄且有产气，可初步判定为沙门氏菌阳性。（）2.原子荧光光谱法可同时测定砷、汞、硒等多种重金属元素。（）3.食品中黄曲霉毒素B₁的测定可采用高效液相色谱-荧光检测法。（）4.微生物检测用培养皿需经121℃高压灭菌15分钟，玻璃吸管需经160℃干热灭菌2小时。（）5.进行菌落总数测定时，若平板上有片状菌落生长，该平板数据仍可用于计算。（）6.实验室生物安全柜使用完毕后，需用75%乙醇擦拭内壁，无需开启紫外灯消毒。（）7.气相色谱仪中，氢火焰离子化检测器（FID）适用于检测有机氯农药残留。（）8.食品添加剂“阿斯巴甜”属于天然甜味剂，可不限量用于所有食品。（）9.检测大肠菌群时，LST肉汤管产气即可判定为阳性，无需进一步验证。（）10.实验室间比对是验证检测结果准确性的有效手段之一。（）（三）简答题（每题8分，共40分）1.简述GB4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》中MPN法的操作流程。2.列举3种食品中常见的致病微生物及其主要危害，并说明其检测标准。3.说明原子吸收光谱仪测定铅含量时，样品前处理的主要步骤及注意事项。4.简述ELISA检测试剂盒的组成及关键操作环节（以检测黄曲霉毒素为例）。5.依据《进口食品境外生产企业注册管理规定》，进口食品经检验检疫发现微生物指标不合格时，应如何处理？（四）案例分析题（30分）某进口企业申报一批来自泰国的冷冻虾仁（200箱，每箱5kg），经检验检疫机构抽样检测，发现：①菌落总数为5.6×10⁶CFU/g（标准限值≤5×10⁵CFU/g）；②副溶血性弧菌检测阳性（标准要求不得检出）；③铅含量为0.8mg/kg（标准限值≤0.5mg/kg）。问题：1.分析该批次产品不合格的具体项目及判定依据。（10分）2.简述检验检疫机构对不合格进口食品的后续处理流程。（10分）3.提出企业预防类似不合格问题的改进措施。（10分）二、实操考核（总分100分）项目一：食品中菌落总数的测定（40分）实验材料：某品牌即食海苔（50g）、生理盐水、营养琼脂培养基、无菌平皿、移液枪（1mL、10mL）、试管、高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱等。操作要求：1.样品前处理：称取10g样品，加入90mL生理盐水，制成1:10样品匀液。2.梯度稀释：取1mL1:10匀液至9mL生理盐水，依次稀释至10⁻⁴、10⁻⁵、10⁻⁶。3.平板接种：每个稀释度接种2个平板，每皿1mL，倾注营养琼脂（46±1℃），摇匀冷凝。4.培养与计数：36±1℃培养48±2小时，记录各平板菌落数，计算最终结果并报告。评分标准：-样品称量与匀液制备（5分）：称量准确（±0.1g），无菌操作规范（未污染）。-梯度稀释（10分）：移液体积准确（±0.05mL），稀释倍数正确，试管标记清晰。-平板接种（10分）：培养基温度适宜（46±1℃），倾注量均匀，无气泡，平板倒置正确。-培养条件（5分）：温度、时间符合标准（36±1℃，48±2小时）。-计数与报告（10分）：选择合适稀释度（菌落数30-300），计算准确（保留两位有效数字），报告格式规范（如“5.2×10⁴CFU/g”）。项目二：原子吸收光谱法测定奶粉中铅含量（30分）实验材料：奶粉样品、硝酸（优级纯）、高氯酸（优级纯）、铅标准溶液（1000μg/mL）、原子吸收光谱仪（石墨炉法）、马弗炉、容量瓶（50mL）等。操作要求：1.样品前处理（湿法消化）：称取0.5g样品于消化管，加5mL硝酸+1mL高氯酸，静置过夜后加热消化至无色透明，冷却定容至50mL。2.标准曲线绘制：配制0、5、10、20、30μg/L的铅标准系列溶液，测定吸光度并绘制标准曲线。3.样品测定：设置仪器参数（波长283.3nm，干燥温度120℃，灰化温度450℃，原子化温度2300℃），测定样品吸光度，计算铅含量。评分标准：-样品消化（10分）：试剂添加量准确，消化完全（无黑色颗粒），定容体积正确（±0.1mL）。-标准溶液配制（8分）：稀释倍数正确，移液误差≤2%，标准系列浓度覆盖样品范围。-仪器操作（7分）：参数设置正确，空白校正完成，进样体积准确（20μL±1μL）。-结果计算（5分）：标准曲线线性良好（R²≥0.999），样品浓度计算准确（保留三位小数），报告单位规范（mg/kg）。项目三：ELISA法检测牛奶中黄曲霉毒素M₁（30分）实验材料：牛奶样品、黄曲霉毒素M₁ELISA检测试剂盒（含包被板、标准品、酶标二抗、显色液、终止液）、洗板机、酶标仪（450nm）、离心机等。操作要求：1.样品处理：取牛奶5mL，3000r/min离心10分钟，取上清液1mL，按试剂盒要求稀释。2.加样：每孔加入50μL标准品或样品，再加50μL酶标二抗，37℃温育30分钟。3.洗板：弃液后用洗涤液洗板5次，拍干。4.显色：每孔加50μL显色液A和50μL显色液B，37℃避光反应15分钟。5.终止与测定：加50μL终止液，酶标仪读取450nm吸光度值，计算样品浓度。评分标准：-样品处理（5分）：离心条件正确（3000r/min，10min），稀释倍数准确（±2%）。-加样与温育（10分）：加样体积准确（50μL±2μL），温育时间（30±2min）和温度（37±1℃）符合要求。-洗板操作（8分）：洗板次数（5次）和时间（每次30s）达标，无残留液体。-显色与测定（7分）：显色时间（15±2min）和避光条件符合要求，酶标仪校正完成，标准曲线计算正确（半定量或定量结果）。参考答案一、理论考核（一）单项选择题1.A2.B3.B4.C5.A6.A7.B8.A9.C10.B（二）判断题1.×（需结合其他生化试验）2.√3.√4.√5.×（片状菌落视为污染，需重新检测）6.×（需开启紫外灯消毒30min）7.×（FID适用于含碳有机物，有机氯常用ECD）8.×（阿斯巴甜为合成甜味剂，有使用范围和限量）9.×（需转接BGLB肉汤验证）10.√（三）简答题1.MPN法操作流程：①样品梯度稀释（10倍系列稀释）；②取3个连续稀释度，每个稀释度接种3管LST肉汤（每管1mL）；③36±1℃培养24±2小时，观察产气情况；④根据产气阳性管数，查MPN表得到MPN值；⑤必要时转接BGLB肉汤验证产气。2.示例：①沙门氏菌（危害：引起急性肠胃炎，检测标准GB4789.4-2016）；②金黄色葡萄球菌（危害：产生肠毒素，引起食物中毒，检测标准GB4789.10-2016）；③副溶血性弧菌（危害：引发腹泻、呕吐，检测标准GB4789.7-2013）。3.前处理步骤：①称样（0.5-2g）；②湿法消化（加硝酸-高氯酸混合酸，加热至澄清）；③赶酸（加热至近干，避免碳化）；④定容（用0.5%硝酸定容至50mL）。注意事项：通风橱操作，控制加热温度（避免暴沸），空白试验同步进行。4.试剂盒组成：包被板（固相抗体）、标准品、酶标抗体、显色液（TMB/H₂O₂）、终止液（硫酸）、洗涤液（PBS-Tween）。关键环节：包被抗体浓度（影响灵敏度）、温育时间（30-60min）、洗板次数（5-6次，避免交叉污染）、显色时间（15-30min，避光）。5.处理流程：①出具《检验检疫处理通知书》；②监督企业作退运或销毁处理；③记录境外生产企业违规信息，纳入信用管理；④向输出国官方通报不合格情况；⑤必要时启动风险预警，暂停该企业产品进口。（四）案例分析题1.不合格项目及依据：①菌落总数超标（标准GB10136-2015《食品安全国家标准动物性水产制品》规定即食水产品≤5×10⁵CFU/g）；②副溶血性弧菌检出（GB31607-2021《食品安全国家标准散装即食食品中致病菌限量》规定不得检出）；③铅超标（GB2762-2017规定水产制品≤0.5mg/kg）。2.处理流程：①签发《检验检疫不合格证明》；②监督企业在20日内完成退运或销毁（需提供处理照片、视频等证明）；③将不