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2025年大学生物(生物分离工程基础)试题及答案
(考试时间:90分钟满分100分)班级______姓名______第I卷(选择题共30分)答题要求:请从每小题的四个选项中选出一个正确答案,将其序号填在题后的括号内。(总共10题,每题3分)1.生物分离工程中,下列哪种方法不属于膜分离技术?()A.超滤B.反渗透C.离子交换D.微滤2.蛋白质等生物大分子在离子交换色谱中,其保留时间与下列哪种因素关系不大?()A.离子强度B.pH值C.温度D.色谱柱长度3.以下哪种物质在亲和色谱中可作为配基?()A.氯化钠B.葡萄糖C.抗体D.乙醇4.离心分离中,沉降系数的单位是()A.sB.gC.cmD.mol/L5.凝胶过滤色谱中,最先被洗脱出来的物质是()A.大分子物质B.小分子物质C.中等分子物质D.都有可能6.生物分离工程中,萃取操作主要用于分离()A.气体混合物B.固体混合物C.液体混合物D.气液混合物7.以下哪种不是常用的反萃取剂?()A.氢氧化钠B.盐酸C.乙醇D.硫酸8.结晶过程中,晶核形成的速率与下列哪种因素无关?()A.过饱和度B.温度C.搅拌速度D.溶液颜色9.干燥过程中,物料表面温度达到()时开始发生升华现象。A.熔点B.沸点C.露点D.三相点10.生物分离工程中,常用的吸附剂不包括()A.活性炭B.硅胶C.离子交换树脂D.氧化铝第II卷(非选择题共70分)二、填空题(每空2分,共20分)1.生物分离工程的主要任务是从发酵液、酶反应液或动植物细胞培养液等中分离、纯化生物产品,包括______、______、______等过程。2.离子交换树脂由______、______和______三部分组成。3.亲和色谱的基本原理是利用生物大分子之间的______作用,将具有特殊亲和力的一对分子中的一方作为配基固定在载体上,另一方作为______进行分离。三、简答题(每题10分,共20分)1.简述超滤的原理及应用。2.说明离心分离的主要类型及各自的特点。四、分析题(每题1分,共15分)材料:在蛋白质分离过程中,采用了离子交换色谱法。在某一实验中,使用了阳离子交换树脂,流动相为pH7.0的缓冲液,样品中含有多种蛋白质。随着洗脱过程的进行,发现其中一种蛋白质很快被洗脱下来,而其他蛋白质保留时间较长。问题:1.请分析该蛋白质很快被洗脱下来的原因。(5分)2.若要改变该蛋白质的保留时间,可以采取哪些措施?(5分)3.从该实验结果可以推断该蛋白质的什么性质?(5分)五、综合题(共15分)材料:有一批发酵液含有目标蛋白质,杂质主要为多糖类物质。现要对该发酵液进行分离纯化,获得高纯度的目标蛋白质。问题:1.请设计一个初步的分离纯化方案,并说明每一步骤的目的。(10分)2.如何检测最终产品的纯度?(5分)答案:一、选择题1.C2.D3.C4.A5.A6.C7.C8.D9.D10.C二、填空题1.细胞分离、蛋白质分离、产品精制2.骨架、活性基团、可交换离子3.特异性亲和、目标分子三、简答题1.超滤原理:以压力为推动力,利用超滤膜的孔径大小不同,截留大于膜孔径的大分子物质,而让小分子物质透过。应用:用于蛋白质、酶、多糖等生物大分子的浓缩、分离和纯化,以及去除发酵液中的细胞碎片等杂质。2.离心分离主要类型及特点:差速离心,根据颗粒沉降速度不同分离,适用于分离大小和密度差异较大的颗粒;密度梯度离心,在密度梯度介质中离心,根据颗粒密度不同分层,可用于分离不同密度的生物大分子等;等密度离心,根据颗粒密度不同分离,常用于分离细胞器、病毒等。四、分析题1.该蛋白质很快被洗脱下来可能是因为其带正电荷较少,与阳离子交换树脂的亲和力较弱,在流动相的作用下更容易被洗脱下来。2.可以改变缓冲液的pH值,使蛋白质所带电荷发生变化,从而改变其与树脂的亲和力;也可以改变离子强度,影响蛋白质与树脂的结合。3.从该实验结果可以推断该蛋白质带正电荷较少,在pH7.0时与阳离子交换树脂亲和力较弱。五、综合题1.方案:首先采用离心去除发酵液中的细胞等固体杂质;然后用超滤去除小分子杂质和部分多糖;接着采用离子交换色谱进一步分离蛋白质和多糖,去除多糖杂质;最后用凝胶过滤色谱进行精制,去除残留的小分子杂质。目的:离心去除固体杂质,便于后续操作;超滤初步分离大分子和小分子杂质及部分多糖;离子交换色谱利用电荷差异分离蛋
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