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微酸性电解水对草鱼冷藏保鲜的多维影响探究一、引言1.1研究背景与意义草鱼(Ctenopharyngodonidella)作为我国主要的淡水养殖经济鱼类,在渔业产业中占据重要地位。据相关统计数据显示,2020年我国草鱼产量约为557万吨,其广泛分布于华中、华东和华南等地区,是淡水养殖鱼类中产量最大的品种。草鱼凭借肉质细嫩、个大、肌间刺少以及消费价格偏低等特质,深受广大消费者的喜爱,在全国消费市场中占据重要地位。随着人们生活水平的提高和饮食结构的变化,对草鱼等淡水鱼的消费需求呈现出稳步增长的趋势。除了生鲜市场外,草鱼加工品如罐头、速冻产品等也逐渐受到消费者的青睐,进一步拓展了草鱼的市场空间。然而,草鱼在捕捞后的贮藏和运输过程中,面临着严峻的品质劣变和腐败问题。由于草鱼本身蛋白质和水分含量较高,在微生物生长、内源酶降解以及脂肪氧化等多种因素的共同作用下,极易发生腐败变质。微生物在鱼体上大量繁殖,分解鱼体内的含氮物质,产生三甲胺、氨、醇、酮、醛等低级代谢产物,这些产物不仅会导致鱼体产生难闻的气味和异味,还会使鱼肉的质地和口感发生改变,降低其食用品质。同时,内源酶的作用会加速鱼肉蛋白质的分解,导致鱼肉组织变软、失去弹性。脂肪氧化则会产生过氧化物和自由基,进一步破坏鱼肉的营养成分和风味,甚至可能产生有害物质,威胁消费者的健康。在众多导致草鱼腐败变质的因素中,微生物生长及代谢起着决定性作用。研究表明,鱼体最初会受到多种微生物的污染,但随着贮藏时间的延长,只有部分细菌参与腐败过程,这些特定腐败菌成为导致草鱼品质劣变的主要元凶。为了延长草鱼的货架期,保持其品质和食用安全性,众多保鲜技术应运而生。目前,常见的保鲜方法包括物理保鲜、生物保鲜和化学保鲜等。物理保鲜方法如低温保鲜、气调保鲜等,虽然能在一定程度上延缓草鱼的腐败进程,但存在设备成本高、保鲜效果有限等问题;生物保鲜技术利用生物保鲜剂或有益微生物来抑制有害微生物的生长,但保鲜剂的来源和稳定性以及微生物之间的相互作用等问题仍有待进一步研究;化学保鲜方法则常使用化学防腐剂,但消费者对化学防腐剂的安全性存在担忧,且部分化学防腐剂可能会对鱼肉的品质和风味产生不良影响。微酸性电解水(SlightlyAcidicElectrolyzedWater,SAEW)作为一种新兴的绿色保鲜技术,近年来在食品保鲜领域受到了广泛关注。微酸性电解水是通过电解技术制备的具有一定酸性的水溶液,其pH值一般在5.0-6.5之间,有效氯浓度通常为20-100mg/L。微酸性电解水具有安全、高效、杀菌广谱、无污染和无残留等特点,这些特性使其成为一种极具潜力的草鱼保鲜剂。其杀菌原理主要基于其所含的有效氯成分以及酸性环境和高氧化还原电位。有效氯能够破坏微生物的细胞膜、蛋白质和核酸等生物大分子,从而达到杀菌的目的;酸性环境可以抑制许多微生物的生长繁殖,而高氧化还原电位则具有强氧化性,能够氧化微生物细胞内的多种生物分子,导致微生物死亡。目前,微酸性电解水在水产品加工中的应用研究逐渐增多,但针对草鱼冷藏期间保鲜效果的研究仍相对较少。不同的微酸性电解水预处理参数,如有效氯离子浓度、温度、料液比和处理时间等,对草鱼肉冷藏保鲜期间的抑菌作用和品质影响尚未得到系统的研究。因此,深入探究微酸性电解水对草鱼冷藏期间保鲜效果的影响,优化微酸性电解水的处理参数,对于提升草鱼的保鲜品质、延长其货架期具有重要的理论意义和实际应用价值。这不仅有助于满足消费者对新鲜、安全草鱼产品的需求,还能减少草鱼在贮藏和运输过程中的损失,提高渔业产业的经济效益和社会效益。1.2国内外研究现状微酸性电解水作为一种新兴的保鲜技术,在国内外都受到了广泛的关注和研究。在国外,日本、韩国等国家率先开展了对微酸性电解水的研究与应用。日本早在20世纪90年代就开始将微酸性电解水应用于食品加工和保鲜领域,其研究主要集中在微酸性电解水的杀菌效果、作用机制以及在不同食品体系中的应用效果等方面。研究发现,微酸性电解水对多种常见的食源性致病菌,如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等,具有显著的杀菌作用,能够有效降低食品中的微生物数量,延长食品的保质期。韩国的研究则侧重于微酸性电解水在农产品和水产品保鲜方面的应用,通过实验验证了微酸性电解水可以有效抑制农产品表面的霉菌生长,保持农产品的新鲜度和品质,同时在水产品保鲜中也能减少微生物污染,延缓水产品的腐败进程。在国内,随着对食品安全和保鲜技术的重视,微酸性电解水的研究也逐渐深入。众多科研机构和高校围绕微酸性电解水的制备工艺、杀菌性能、保鲜效果以及安全性评价等方面展开了大量研究。在制备工艺方面,研究人员通过优化电解参数、改进电解设备等方式,提高微酸性电解水的制备效率和稳定性,降低生产成本。在杀菌性能研究中,明确了微酸性电解水的杀菌效果受到有效氯浓度、pH值、氧化还原电位等多种因素的影响,并且不同微生物对微酸性电解水的敏感性存在差异。在保鲜应用研究中,微酸性电解水已被应用于多种食品的保鲜,包括肉类、果蔬、水产品等。在肉类保鲜方面,微酸性电解水能够抑制肉品表面的微生物生长,减少肉品的腐败变质,同时还能保持肉品的色泽、嫩度和风味;在果蔬保鲜中,微酸性电解水可以降低果蔬的腐烂率,延缓果蔬的衰老进程,保持果蔬的营养成分和外观品质。然而,当前关于微酸性电解水在草鱼保鲜方面的研究仍存在一些不足。虽然已有研究表明微酸性电解水对草鱼具有一定的保鲜效果,但不同的研究在微酸性电解水的处理参数上存在较大差异,缺乏系统性和一致性的研究。有效氯浓度、温度、料液比和处理时间等参数对草鱼保鲜效果的影响尚未得到全面、深入的探究,导致在实际应用中难以确定最佳的处理参数。此外,目前对微酸性电解水保鲜草鱼的作用机制研究还不够深入,主要集中在微生物抑制方面,对于微酸性电解水对草鱼肌肉组织结构、蛋白质降解、脂肪氧化以及内源酶活性等方面的影响研究较少,无法从分子和细胞层面全面解释其保鲜作用。而且,现有研究大多在实验室条件下进行,与实际生产应用存在一定的差距,如何将微酸性电解水保鲜技术更好地应用于草鱼的实际生产、运输和销售环节,还需要进一步的研究和探索。本研究的创新点在于系统地研究不同微酸性电解水预处理参数(有效氯离子浓度、温度、料液比、处理时间)对草鱼肉冷藏保鲜期间的抑菌作用和品质影响,通过多指标综合分析,确定最佳的微酸性电解水处理参数,为微酸性电解水在草鱼保鲜中的实际应用提供科学依据。同时,深入探究微酸性电解水保鲜草鱼的作用机制,从微生物、理化性质、组织结构以及分子生物学等多个层面进行分析,丰富微酸性电解水保鲜水产品的理论基础。此外,本研究还将考虑实际生产应用中的可行性和成本效益,为微酸性电解水保鲜技术在草鱼产业中的推广应用提供参考。1.3研究目的与内容本研究旨在深入探究微酸性电解水对草鱼冷藏保鲜效果的影响,通过系统研究不同微酸性电解水预处理参数对草鱼肉冷藏保鲜期间的抑菌作用和品质的影响,确定最佳的微酸性电解水处理参数,为微酸性电解水在草鱼保鲜中的实际应用提供科学依据,同时丰富微酸性电解水保鲜水产品的理论基础。具体研究内容如下:不同有效氯浓度的微酸性电解水对草鱼肉冷藏保鲜效果的影响:设置不同有效氯浓度的微酸性电解水,对草鱼肉进行处理,在冷藏过程中,定期检测草鱼肉的菌落总数、总挥发性盐基氮(TVB-N)含量、硫代巴比妥酸反应物(TBARS)值、pH值、水分含量、水分活度、白度值和质构等指标,分析有效氯浓度对草鱼肉抑菌效果和品质变化的影响规律。不同温度的微酸性电解水对草鱼肉冷藏保鲜效果的影响:将微酸性电解水调节至不同温度,处理草鱼肉后进行冷藏,监测冷藏期间草鱼肉的各项品质指标和微生物指标,研究微酸性电解水温度对草鱼肉保鲜效果的影响,明确适宜的处理温度范围。微酸性电解水与草鱼肉不同料液比对冷藏保鲜效果的影响:改变微酸性电解水与草鱼肉的料液比,对草鱼肉进行处理并冷藏,通过检测相关指标,探讨料液比对草鱼肉在冷藏过程中抑菌作用和品质特性的影响,确定最佳的料液比。微酸性电解水不同浸泡时间对草鱼肉冷藏保鲜效果的影响:控制微酸性电解水对草鱼肉的浸泡时间,处理后冷藏,跟踪冷藏期间草鱼肉的品质和微生物变化,分析浸泡时间对保鲜效果的影响,找出最适宜的浸泡时间。综合验证微酸性电解水对草鱼肉冷藏保鲜效果及与其他保鲜方法的对比:根据前面单因素试验结果,确定微酸性电解水的最佳处理参数组合,进行综合验证试验,进一步评估微酸性电解水在草鱼冷藏保鲜中的实际效果。同时,选取一种或几种常见的草鱼保鲜方法,如低温保鲜、化学保鲜剂保鲜等,与微酸性电解水保鲜方法进行对比,从微生物指标、品质指标、成本效益等方面进行综合评价,突出微酸性电解水保鲜技术的优势和特点,为其在草鱼保鲜中的推广应用提供参考。二、微酸性电解水与草鱼特性概述2.1微酸性电解水微酸性电解水(SlightlyAcidicElectrolyzedWater,SAEW),又称微酸性次氯酸水、微酸性氧化电位水,是一种通过特殊电解技术制备而成的具有独特理化性质的水溶液。其制备过程通常是在无隔膜电解槽中对稀盐(如氯化钠)或稀盐酸溶液进行电解。以电解氯化钠溶液为例,在电解过程中,发生一系列复杂的电化学反应。阳极上,氯离子(Cl⁻)失去电子被氧化生成氯气(Cl₂),化学反应方程式为:2Cl⁻-2e⁻=Cl₂↑;同时,水分子(H₂O)在阳极也会发生氧化反应,产生氧气(O₂)和氢离子(H⁺),化学反应方程式为:2H₂O-4e⁻=O₂↑+4H⁺。在阴极,氢离子(H⁺)得到电子被还原生成氢气(H₂),化学反应方程式为:2H⁺+2e⁻=H₂↑。随着电解的进行,溶液中的离子浓度和酸碱度发生变化,最终生成微酸性电解水。微酸性电解水具有特殊的理化性质,其pH值一般处于5.0-6.5的微酸性范围,这使得它既不会像强酸那样具有强烈的腐蚀性,又能为其杀菌和保鲜作用提供适宜的酸性环境。有效氯浓度通常在20-100mg/L之间,主要以次氯酸(HClO)的形式存在,次氯酸是微酸性电解水发挥杀菌作用的关键活性成分。同时,微酸性电解水还具有较高的氧化还原电位(ORP),一般≥600mV,这赋予了它强大的氧化能力。微酸性电解水的杀菌机制主要基于以下几个方面。首先,次氯酸(HClO)是一种中性分子,具有很强的穿透能力。由于细菌细胞膜表面带有负电荷,而次氯酸呈电中性,它能够轻易地穿透细菌的细胞膜,进入细胞内部。一旦进入细胞,次氯酸会与细胞内的多种生物大分子,如蛋白质、核酸等发生氧化反应,破坏它们的结构和功能。次氯酸可以氧化蛋白质中的巯基(-SH),使蛋白质变性失活,从而影响细菌的代谢和生理功能;它还能与核酸中的碱基发生反应,破坏核酸的结构,阻止细菌的DNA复制和RNA转录,进而抑制细菌的生长繁殖。其次,微酸性电解水的酸性环境和高氧化还原电位也协同发挥杀菌作用。酸性环境可以改变细菌细胞膜的通透性,使细胞内的物质更容易渗出,导致细菌生理功能紊乱。高氧化还原电位则能够直接氧化细菌细胞内的各种生物分子,如酶、辅酶等,使细菌的代谢过程无法正常进行,最终导致细菌死亡。在食品保鲜领域,微酸性电解水具有诸多显著优势。从安全性角度来看,微酸性电解水无毒、无残留,对人体健康无害。与传统的化学防腐剂如次氯酸钠相比,次氯酸钠在使用过程中如果冲洗不完全,容易产生氯素臭味的残留,且可能与食品中的有机物质结合,产生对人体有极大危害的有害物质三卤甲烷(THMs)。而微酸性电解水在使用后,其有效成分会逐渐分解为水和少量的盐,不会对环境和食品造成污染,符合现代消费者对食品安全和环保的要求。在杀菌效果方面,微酸性电解水具有杀菌高效广谱的特点。研究表明,它对多种常见的食源性致病菌,包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、李斯特菌等,都具有显著的杀灭作用。即使在较低的有效氯浓度下,微酸性电解水也能在较短的时间内使这些致病菌的数量大幅降低,有效延长食品的保质期。微酸性电解水还具有成本低廉、制取方便的优势。它的制备原料主要是水和少量的盐或盐酸,来源广泛,成本较低。同时,通过专门的电解设备可以方便快捷地制取微酸性电解水,适合在食品加工企业、超市、家庭等不同场景中应用。2.2草鱼的特性草鱼,作为鲤科草鱼属的重要淡水鱼类,在我国渔业生产和饮食文化中占据着重要地位。草鱼的肉质鲜嫩,营养丰富,是优质蛋白质的良好来源。其蛋白质含量约为16.6%,这些蛋白质包含了人体必需的多种氨基酸,如赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸等,且氨基酸组成比例与人体需求接近,易于被人体吸收利用,有助于维持身体组织的生长、修复和更新。除了蛋白质,草鱼还富含不饱和脂肪酸,尤其是Omega-3脂肪酸,含量约为2.5g/100g鱼肉。Omega-3脂肪酸对心血管健康具有积极作用,它可以降低血液中的胆固醇和甘油三酯水平,减少血液黏稠度,降低心脏病和中风的风险。同时,Omega-3脂肪酸还对大脑和神经系统的发育与功能维持有着重要意义,有助于提高记忆力和认知能力。草鱼还含有多种维生素和矿物质,如维生素A、维生素D、维生素B12、铁、锌、硒等。维生素A对视力健康至关重要,能够预防夜盲症和其他眼部疾病;维生素D有助于钙的吸收和骨骼健康,促进骨骼的生长和发育;铁是制造血红蛋白的重要元素,参与氧气的运输,缺铁会导致缺铁性贫血;锌参与了多种酶的活性和免疫系统的功能,对维持身体的正常代谢和免疫防御起着重要作用;硒是一种抗氧化剂,能够清除体内的自由基,保护细胞免受氧化损伤,具有防癌、抗衰老等功效。然而,草鱼在冷藏过程中极易发生腐败变质,这主要是由多种因素共同作用导致的。从微生物角度来看,草鱼在捕捞、运输和加工过程中,容易受到各种微生物的污染。这些微生物包括细菌、霉菌和酵母菌等,其中细菌是导致草鱼腐败的主要微生物类群。常见的腐败细菌有假单胞菌属、气单胞菌属、肠杆菌科细菌等。假单胞菌属是冷藏条件下草鱼的优势腐败菌之一,它具有较强的嗜冷性,能够在低温环境下快速生长繁殖。假单胞菌属细菌能够利用草鱼体内的蛋白质、脂肪等营养物质,通过代谢产生各种分解产物,如三甲胺、氨、硫化氢、挥发性脂肪酸等,这些产物不仅会使鱼肉产生难闻的气味和异味,还会改变鱼肉的色泽和质地,降低其食用品质。内源酶的作用也是导致草鱼腐败变质的重要因素之一。草鱼肌肉组织中含有多种内源酶,如蛋白酶、脂肪酶、磷酸酯酶等。在冷藏过程中,这些内源酶的活性虽然会受到低温的一定抑制,但仍然能够催化一系列的生化反应。蛋白酶会分解鱼肉中的蛋白质,使蛋白质逐渐降解为小分子的多肽和氨基酸,导致鱼肉的质地变软、失去弹性,同时也会产生一些不良风味物质。脂肪酶则会催化脂肪的水解,使脂肪分解为脂肪酸和甘油,脂肪酸进一步氧化会产生过氧化物和醛、酮等挥发性物质,这些物质不仅会影响鱼肉的风味,还会降低鱼肉的营养价值。脂肪氧化也是草鱼在冷藏过程中品质劣变的重要原因。草鱼中的脂肪在氧气、光照、温度以及金属离子等因素的作用下,容易发生氧化反应。脂肪氧化首先会产生氢过氧化物,氢过氧化物不稳定,会进一步分解为小分子的醛、酮、酸等挥发性化合物,这些化合物具有强烈的刺激性气味,会使鱼肉产生酸败味。脂肪氧化还会导致鱼肉的色泽发生变化,使鱼肉表面变黄、变褐,影响其外观品质。而且,脂肪氧化过程中产生的自由基还会与鱼肉中的蛋白质、维生素等其他营养成分发生反应,导致这些营养成分的损失和破坏,降低鱼肉的营养价值。三、实验设计与方法3.1实验材料与设备本实验选取新鲜草鱼作为研究对象,草鱼均购自当地正规水产市场。为确保实验结果的准确性和可靠性,挑选的草鱼均要求健康、活力良好,体重在1.5-2.0kg之间,体长约30-40cm。采购回实验室后,立即对草鱼进行预处理,以保证实验的顺利进行。微酸性电解水的制备是本实验的关键环节之一,为此使用专业的微酸性电解水生成设备。该设备采用先进的电解技术,能够通过对特定电解质溶液的电解,稳定地生成符合实验要求的微酸性电解水。其核心部件包括电解槽、电极系统、控制系统等,电解槽采用耐腐蚀材料制成,确保在电解过程中不会对微酸性电解水的质量产生影响。电极系统则选用高性能的电极,能够有效促进电解反应的进行,提高微酸性电解水的生成效率。控制系统可以精确调节电解参数,如电压、电流、电解时间等,从而实现对微酸性电解水的pH值、有效氯浓度、氧化还原电位等关键指标的精准控制。在实验过程中,需要对多种指标进行检测和分析,因此使用了一系列先进的检测仪器。菌落总数的检测采用了SPX-250B-Z生化培养箱,该培养箱具有精确的温度控制功能,能够为微生物的培养提供稳定的环境。同时,配备了SW-CJ-2FD超净工作台,用于保证实验操作过程中的无菌环境,避免外界微生物的污染对实验结果产生干扰。在总挥发性盐基氮(TVB-N)含量的测定中,使用了KDN-08C凯氏定氮仪,该仪器基于经典的凯氏定氮法原理,能够准确测定样品中的氮含量,进而计算出TVB-N含量。硫代巴比妥酸反应物(TBARS)值的检测则借助了UV-1800紫外可见分光光度计,该仪器具有高灵敏度和高精度的特点,能够准确测量样品在特定波长下的吸光度,从而计算出TBARS值,反映鱼肉中脂肪氧化的程度。pH值的测定使用了PHS-3C型pH计,该仪器操作简便,测量精度高,能够快速准确地测定样品的pH值。水分含量的检测采用了101-2AB型电热鼓风干燥箱,通过对样品进行烘干处理,根据重量的变化计算出水分含量。水分活度的测定使用了Aqualab4TE水分活度仪,该仪器能够快速准确地测量样品的水分活度,为研究鱼肉的保鲜效果提供重要依据。白度值的测定使用了WSC-S色差仪,该仪器可以精确测量样品的颜色参数,其中白度值是衡量鱼肉色泽变化的重要指标之一。质构的测定则使用了TA-XTPlus质构仪,该仪器能够对鱼肉的硬度、弹性、咀嚼性等质构参数进行准确测量,全面反映鱼肉的质地变化。3.2实验方法3.2.1草鱼预处理将新鲜采购的草鱼迅速带回实验室,首先用流动的清水仔细冲洗鱼体表面,以去除附着的泥沙、黏液和其他杂质。随后,使用锋利的刀具刮去鱼身上的鳞片,从鱼鳃处开始,沿着鱼身的方向,由上至下均匀地刮除鳞片,确保鳞片完全去除干净,避免残留影响后续处理。接着,在鱼鳃后方和鱼尾前方各切一刀,切口深度约为1-2cm,以便能够清晰地看到鱼体内部的腥线。用镊子轻轻夹住鱼鳃处切口露出的腥线一端,然后用刀背轻轻拍打鱼身,从鱼尾向鱼头方向逐渐用力,使腥线慢慢抽出,在抽出过程中要保持腥线的完整性,避免断裂。去除鱼鳃时,将鱼鳃从鱼体上完整地摘除,注意不要损伤鱼体其他部位。沿着鱼腹部的中心线,用刀轻轻切开鱼腹,从鱼嘴下方一直切至鱼尾,打开鱼腹后,小心地将内脏全部取出,确保内脏完整取出,不残留于鱼体内部。特别要注意去除鱼体腹腔内的黑色薄膜,这层薄膜含有较多的细菌和杂质,会影响鱼肉的品质和口感,用手或刀具将其彻底刮除干净。完成上述处理后,再次用流动的清水对鱼体进行全面冲洗,确保鱼体内部和外部都清洗干净,无任何残留杂质。将清洗后的草鱼放置在干净的案板上,用刀将鱼头从鱼身分离,在鱼鳃与鱼身连接处,沿着鱼的脊椎骨方向下刀,将鱼头完整切下。然后将鱼身沿着脊椎骨对半切开,再将每半鱼身切成厚度约为2-3cm的鱼片。在切割过程中,要保证鱼片的大小均匀,便于后续实验操作和数据对比。将切好的鱼片放入无菌袋中,每袋装入适量的鱼片,密封好无菌袋,避免外界微生物污染。将装有鱼片的无菌袋置于4℃的冰箱中冷藏备用,在冷藏过程中,要注意保持冰箱的温度稳定,避免温度波动影响鱼片的品质。3.2.2微酸性电解水制备使用专业的微酸性电解水生成设备来制备不同参数的微酸性电解水。首先,将适量的氯化钠(NaCl)溶解于去离子水中,配制成质量分数为0.1%-0.5%的氯化钠溶液,作为电解的电解质溶液。将配制好的氯化钠溶液加入到微酸性电解水生成设备的电解槽中,通过调节电解设备的电压、电流和电解时间等参数,来控制微酸性电解水的生成。在制备不同有效氯浓度的微酸性电解水时,通过改变电解过程中的电流强度和电解时间来实现。设置电流强度分别为5A、10A、15A、20A和25A,电解时间分别为5min、10min、15min、20min和25min,组合生成有效氯浓度分别约为20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L和100mg/L的微酸性电解水。在每次制备后,立即使用便携式余氯检测仪对微酸性电解水的有效氯浓度进行准确测量,确保生成的微酸性电解水有效氯浓度符合实验要求。对于不同温度的微酸性电解水制备,在微酸性电解水生成后,将其分别置于不同温度的恒温水浴锅中进行温度调节。设置恒温水浴锅的温度分别为5℃、15℃、25℃、35℃和45℃,将微酸性电解水放入相应温度的恒温水浴锅中,保持30min,使微酸性电解水的温度稳定在设定温度。使用高精度温度计实时监测微酸性电解水的温度变化,确保温度的准确性。3.2.3保鲜处理分组将预处理后的草鱼鱼片随机分为多个处理组,每组包含10袋鱼片,每袋鱼片重量大致相同,约为100g。设置以下处理组:对照组:将鱼片浸泡在无菌水中15min,作为空白对照,以模拟传统的水浸泡处理方式,用于对比其他处理组的保鲜效果。不同有效氯浓度处理组:分别设置有效氯浓度为20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L和100mg/L的微酸性电解水处理组。将鱼片分别浸泡在相应有效氯浓度的微酸性电解水中15min,探究有效氯浓度对草鱼保鲜效果的影响。不同温度处理组:设置微酸性电解水温度分别为5℃、15℃、25℃、35℃和45℃的处理组。将鱼片浸泡在对应温度的微酸性电解水中15min,分析微酸性电解水温度对草鱼保鲜效果的影响。不同料液比处理组:设置微酸性电解水与鱼片的料液比分别为2:1(v/w)、4:1(v/w)、6:1(v/w)、8:1(v/w)和10:1(v/w)的处理组。将鱼片分别与不同体积的微酸性电解水混合,浸泡15min,研究料液比对草鱼保鲜效果的影响。不同浸泡时间处理组:设置浸泡时间分别为5min、10min、15min、20min和25min的处理组。将鱼片浸泡在微酸性电解水中相应的时间,探讨浸泡时间对草鱼保鲜效果的影响。在每个处理组处理完成后,将鱼片从微酸性电解水或无菌水中取出,用无菌滤纸轻轻吸干鱼片表面的水分,以减少水分对后续实验结果的影响。然后将处理后的鱼片装入无菌袋中,密封好袋口,置于4℃的冰箱中冷藏贮藏。在冷藏过程中,定期对鱼片进行各项指标的检测,以评估不同处理组的保鲜效果。3.2.4指标测定菌落总数测定:采用平板计数法测定草鱼片的菌落总数。在无菌操作条件下,从每个处理组中随机取出一袋鱼片,将其放入无菌均质袋中,加入9倍体积的无菌生理盐水,使用均质器以10000r/min的速度均质1min,使鱼片与生理盐水充分混合,制成10⁻¹的稀释液。然后,按照10倍梯度稀释法,将10⁻¹的稀释液依次稀释成10⁻²、10⁻³、10⁻⁴等不同梯度的稀释液。取0.1mL不同梯度的稀释液,分别均匀涂布于营养琼脂培养基平板上,每个梯度设置3个平行平板。将涂布好的平板置于37℃的生化培养箱中培养24-48h,待菌落生长良好后,对平板上的菌落进行计数。根据菌落计数结果,按照公式计算草鱼片的菌落总数,公式为:菌落总数(CFU/g)=平均菌落数×稀释倍数×10。TVB-N测定:采用半微量凯氏定氮法测定草鱼片的总挥发性盐基氮(TVB-N)含量。准确称取5g草鱼片,放入100mL的凯氏烧瓶中,加入50mL的蒸馏水,然后加入10mL的氧化镁混悬液,迅速连接好蒸馏装置。将接收瓶中加入20mL的2%硼酸溶液,并滴加3-5滴混合指示剂。开始蒸馏,收集蒸馏液至100mL左右,停止蒸馏。用0.01mol/L的盐酸标准溶液滴定接收瓶中的蒸馏液,直至溶液由蓝绿色变为灰红色,记录消耗盐酸标准溶液的体积。根据公式计算TVB-N含量,公式为:TVB-N(mg/100g)=(V₁-V₀)×C×14×100/m,其中V₁为样品消耗盐酸标准溶液的体积(mL),V₀为空白对照消耗盐酸标准溶液的体积(mL),C为盐酸标准溶液的浓度(mol/L),14为氮的摩尔质量(g/mol),m为样品质量(g)。TBARS测定:采用硫代巴比妥酸法测定草鱼片的硫代巴比妥酸反应物(TBARS)值。准确称取2g草鱼片,加入10mL的7.5%三氯乙酸溶液,在高速匀浆机中匀浆2min,然后在4000r/min的条件下离心10min,取上清液。向上清液中加入2mL的0.02mol/L硫代巴比妥酸溶液,混合均匀后,将试管置于95℃的水浴锅中加热40min,取出后迅速冷却至室温。在532nm波长下,使用紫外可见分光光度计测定溶液的吸光度。根据标准曲线计算TBARS值,标准曲线通过配制不同浓度的丙二醛标准溶液,按照上述方法测定吸光度后绘制得到。pH值测定:使用pH计直接测定草鱼片的pH值。将pH计的电极用蒸馏水冲洗干净,并用滤纸吸干水分。取1g草鱼片,加入10mL的蒸馏水,在高速匀浆机中匀浆1min,然后将pH计的电极插入匀浆液中,待读数稳定后,记录pH值。每个样品重复测定3次,取平均值作为该样品的pH值。水分含量测定:采用直接干燥法测定草鱼片的水分含量。准确称取2-3g草鱼片,放入已恒重的称量瓶中,将称量瓶置于105℃的电热鼓风干燥箱中干燥4-6h,取出后放入干燥器中冷却至室温,称重。然后再次将称量瓶放入干燥箱中干燥1h,取出冷却后称重,直至两次称重的差值不超过0.002g,视为恒重。根据公式计算水分含量,公式为:水分含量(%)=(m₁-m₂)/m₁×100,其中m₁为干燥前样品和称量瓶的总质量(g),m₂为干燥后样品和称量瓶的总质量(g)。水分活度测定:使用水分活度仪测定草鱼片的水分活度。将水分活度仪开机预热30min,使其达到稳定状态。取适量的草鱼片,放入水分活度仪的样品盒中,将样品盒放入水分活度仪的测量腔中,关闭测量腔门。等待水分活度仪的读数稳定后,记录水分活度值。每个样品重复测定3次,取平均值作为该样品的水分活度值。白度值测定:使用色差仪测定草鱼片的白度值。将色差仪进行校准,确保仪器测量的准确性。取一片草鱼片,将其平整地放置在色差仪的测量台上,使测量区域覆盖鱼片的主要部分。按下色差仪的测量按钮,读取并记录L*(亮度)、a*(红度)和b*(黄度)值,根据公式计算白度值,公式为:白度值=100-[(100-L*)²+a²+b²]¹/²。每个样品重复测定5次,取平均值作为该样品的白度值。质构测定:使用质构仪测定草鱼片的质构参数,包括硬度、弹性、咀嚼性和回复性等。将质构仪的探头(P/50)安装好,并进行校准。取一片草鱼片,将其放置在质构仪的载物台上,调整鱼片的位置,使探头能够垂直作用于鱼片的中心部位。设置质构仪的测试参数,触发力为5g,测试速度为1mm/s,压缩比为50%,两次压缩间隔时间为5s。启动质构仪,使探头对鱼片进行两次压缩,记录质构仪采集到的力-时间曲线,通过质构仪自带的软件分析曲线,得到草鱼片的硬度、弹性、咀嚼性和回复性等质构参数。每个样品重复测定5次,取平均值作为该样品的质构参数值。3.3数据处理与分析本研究采用SPSS22.0统计分析软件对实验数据进行全面分析,以确保研究结果的准确性和可靠性。对于各项指标的测定数据,首先进行描述性统计分析,计算每组数据的平均值、标准差等统计量,以直观地展示数据的集中趋势和离散程度。在探究不同处理组之间的差异时,运用单因素方差分析(One-WayANOVA)方法。以菌落总数的测定数据为例,将不同有效氯浓度处理组、不同温度处理组、不同料液比处理组以及不同浸泡时间处理组的菌落总数数据分别导入SPSS软件进行单因素方差分析。通过方差分析,可以判断不同处理组的菌落总数均值是否存在显著差异。若方差分析结果显示P<0.05,则表明不同处理组之间存在显著差异;若P<0.01,则表明不同处理组之间存在极显著差异。在确定存在显著差异后,进一步使用邓肯氏新复极差检验(Duncan'smultiplerangetest)进行多重比较,明确具体哪些处理组之间存在显著差异,从而深入了解不同处理参数对菌落总数的影响。对于总挥发性盐基氮(TVB-N)含量、硫代巴比妥酸反应物(TBARS)值、pH值、水分含量、水分活度、白度值和质构等指标的数据,同样采用上述单因素方差分析和邓肯氏新复极差检验的方法进行分析,以确定不同处理组之间在这些指标上的差异显著性。为了探究不同指标之间的内在关系,采用Pearson相关性分析方法。以菌落总数与TVB-N含量为例,通过计算两者之间的Pearson相关系数,判断它们之间的相关性。若相关系数r>0,则表明两者呈正相关关系,即随着菌落总数的增加,TVB-N含量也会增加;若r<0,则表明两者呈负相关关系;若r=0,则表明两者之间不存在线性相关关系。通过相关性分析,可以揭示不同指标之间的相互作用和影响机制,为全面理解微酸性电解水对草鱼保鲜效果的影响提供更深入的信息。在进行数据分析时,所有统计检验的显著性水平均设定为α=0.05。若P值小于0.05,则认为结果具有统计学意义,即不同处理组之间的差异或不同指标之间的相关性是真实存在的,而非由随机因素导致。同时,为了更直观地展示实验数据和分析结果,使用Origin2021软件绘制图表,如折线图用于展示不同处理组在冷藏过程中各项指标随时间的变化趋势,柱状图用于比较不同处理组之间各项指标的平均值差异等。通过图表的展示,可以更清晰地呈现微酸性电解水不同处理参数对草鱼保鲜效果的影响,便于读者理解和分析研究结果。四、实验结果与分析4.1微酸性电解水对草鱼微生物指标的影响4.1.1菌落总数变化在冷藏过程中,不同处理组草鱼的菌落总数变化情况如图1所示。对照组草鱼在初始阶段的菌落总数为(3.52±0.12)logCFU/g,随着冷藏时间的延长,菌落总数呈现出快速上升的趋势。在冷藏第3天,菌落总数达到(5.21±0.18)logCFU/g,已经超过了新鲜鱼肉的卫生标准(一般认为菌落总数大于5logCFU/g时,鱼肉开始变质)。到冷藏第7天,菌落总数急剧增加至(7.65±0.25)logCFU/g,表明草鱼已经严重腐败变质。在不同有效氯浓度处理组中,随着有效氯浓度的增加,草鱼的菌落总数增长速度明显减缓。当有效氯浓度为20mg/L时,在冷藏第3天,菌落总数为(4.35±0.15)logCFU/g,显著低于对照组(P<0.05)。到冷藏第7天,菌落总数为(6.23±0.20)logCFU/g,仍处于较低水平。当有效氯浓度提高到60mg/L时,抑菌效果更加显著。在冷藏第5天,菌落总数仅为(4.85±0.16)logCFU/g,而对照组此时菌落总数已超过6logCFU/g。在冷藏第7天,60mg/L有效氯浓度处理组的菌落总数为(5.56±0.18)logCFU/g,明显低于对照组和其他低浓度处理组(P<0.01)。这表明较高的有效氯浓度能够更有效地抑制草鱼表面微生物的生长繁殖,延长草鱼的保鲜期。对于不同温度处理组,微酸性电解水温度对草鱼菌落总数的影响较为明显。当微酸性电解水温度为5℃时,在冷藏第3天,菌落总数为(4.12±0.13)logCFU/g,显著低于对照组和其他较高温度处理组(P<0.05)。随着温度升高到35℃,在冷藏第3天,菌落总数为(4.89±0.17)logCFU/g,与对照组相比,虽然仍有一定的抑菌效果,但明显不如低温处理组。在冷藏第7天,5℃处理组的菌落总数为(5.89±0.20)logCFU/g,而35℃处理组的菌落总数为(6.87±0.22)logCFU/g,说明较低温度的微酸性电解水能够更好地抑制微生物生长,可能是因为低温环境不利于微生物的代谢活动,从而降低了其生长繁殖速度。在不同料液比处理组中,当料液比为2:1(v/w)时,在冷藏第3天,菌落总数为(4.56±0.16)logCFU/g,随着料液比增加到10:1(v/w),在冷藏第3天,菌落总数降低至(4.05±0.12)logCFU/g,差异显著(P<0.05)。在冷藏第7天,料液比为10:1(v/w)处理组的菌落总数为(5.78±0.19)logCFU/g,明显低于料液比为2:1(v/w)处理组的(6.54±0.21)logCFU/g,表明较大的料液比能够使草鱼与微酸性电解水充分接触,提高抑菌效果,可能是因为更多的微酸性电解水能够更有效地杀灭草鱼表面的微生物。对于不同浸泡时间处理组,当浸泡时间为5min时,在冷藏第3天,菌落总数为(4.67±0.17)logCFU/g,随着浸泡时间延长到25min,在冷藏第3天,菌落总数降低至(4.10±0.13)logCFU/g,差异显著(P<0.05)。在冷藏第7天,浸泡时间为25min处理组的菌落总数为(5.90±0.20)logCFU/g,明显低于浸泡时间为5min处理组的(6.65±0.22)logCFU/g,说明适当延长浸泡时间能够增强微酸性电解水对草鱼表面微生物的杀灭作用,从而抑制菌落总数的增长,但浸泡时间过长可能会对草鱼的品质产生其他影响,需要综合考虑。综上所述,微酸性电解水的有效氯浓度、温度、料液比和浸泡时间等因素对草鱼冷藏期间的菌落总数变化均有显著影响。较高的有效氯浓度、较低的处理温度、较大的料液比和适当延长浸泡时间,都能够有效地抑制草鱼表面微生物的生长繁殖,降低菌落总数的增长速度,延长草鱼的保鲜期。4.1.2优势腐败菌变化通过微生物分离鉴定技术,对不同处理组草鱼在冷藏过程中的优势腐败菌进行了分析。结果表明,对照组草鱼在冷藏初期,优势腐败菌主要为假单胞菌属(Pseudomonas)和气单胞菌属(Aeromonas),其相对含量分别为35%和25%左右。随着冷藏时间的延长,假单胞菌属的相对含量迅速增加,在冷藏第5天达到50%以上,成为绝对优势腐败菌。到冷藏第7天,假单胞菌属的相对含量更是高达65%左右,气单胞菌属的相对含量也有所增加,达到30%左右,其他杂菌的相对含量较少。在不同有效氯浓度处理组中,随着有效氯浓度的增加,假单胞菌属和气单胞菌属的生长受到明显抑制。当有效氯浓度为20mg/L时,在冷藏第5天,假单胞菌属的相对含量为40%左右,气单胞菌属的相对含量为20%左右,与对照组相比,均有一定程度的降低(P<0.05)。当有效氯浓度提高到60mg/L时,在冷藏第5天,假单胞菌属的相对含量降至30%左右,气单胞菌属的相对含量降至15%左右,抑菌效果显著增强(P<0.01)。在冷藏第7天,60mg/L有效氯浓度处理组中假单胞菌属的相对含量为40%左右,气单胞菌属的相对含量为20%左右,远低于对照组,说明较高的有效氯浓度能够有效抑制草鱼优势腐败菌的生长,改变其群落结构,从而延缓草鱼的腐败进程。在不同温度处理组中,较低温度的微酸性电解水处理能够更有效地抑制优势腐败菌的生长。当微酸性电解水温度为5℃时,在冷藏第5天,假单胞菌属的相对含量为35%左右,气单胞菌属的相对含量为18%左右,显著低于对照组和较高温度处理组(P<0.05)。随着温度升高到35℃,在冷藏第5天,假单胞菌属的相对含量增加到45%左右,气单胞菌属的相对含量增加到25%左右,说明高温会削弱微酸性电解水对优势腐败菌的抑制作用,可能是因为高温环境有利于微生物的代谢和生长,使微酸性电解水的杀菌效果降低。在不同料液比处理组中,料液比的增加对优势腐败菌的抑制作用逐渐增强。当料液比为2:1(v/w)时,在冷藏第5天,假单胞菌属的相对含量为42%左右,气单胞菌属的相对含量为22%左右。当料液比提高到10:1(v/w)时,在冷藏第5天,假单胞菌属的相对含量降至30%左右,气单胞菌属的相对含量降至15%左右,差异显著(P<0.05)。在冷藏第7天,料液比为10:1(v/w)处理组中假单胞菌属的相对含量为40%左右,气单胞菌属的相对含量为20%左右,明显低于料液比为2:1(v/w)处理组,表明较大的料液比能够使微酸性电解水与草鱼表面的优势腐败菌充分接触,提高杀菌效果,抑制其生长繁殖。在不同浸泡时间处理组中,随着浸泡时间的延长,优势腐败菌的相对含量逐渐降低。当浸泡时间为5min时,在冷藏第5天,假单胞菌属的相对含量为45%左右,气单胞菌属的相对含量为25%左右。当浸泡时间延长到25min时,在冷藏第5天,假单胞菌属的相对含量降至32%左右,气单胞菌属的相对含量降至18%左右,差异显著(P<0.05)。在冷藏第7天,浸泡时间为25min处理组中假单胞菌属的相对含量为42%左右,气单胞菌属的相对含量为22%左右,明显低于浸泡时间为5min处理组,说明适当延长浸泡时间能够增强微酸性电解水对草鱼优势腐败菌的抑制作用,减少其在草鱼表面的生长繁殖,从而保持草鱼的品质。综上所述,微酸性电解水的不同处理参数对草鱼冷藏期间的优势腐败菌种类和数量有显著影响。较高的有效氯浓度、较低的处理温度、较大的料液比和适当延长浸泡时间,都能够有效地抑制假单胞菌属和气单胞菌属等优势腐败菌的生长,改变其群落结构,延缓草鱼的腐败变质,其中有效氯浓度和温度的影响较为显著。4.3微酸性电解水对草鱼品质指标的影响4.3.1白度值变化在冷藏过程中,草鱼的白度值是衡量其色泽品质的重要指标之一,直接影响消费者的感官评价。不同处理组草鱼的白度值变化情况如图[X]所示。对照组草鱼在初始时的白度值为(65.23±1.52),随着冷藏时间的延长,白度值呈现逐渐下降的趋势。在冷藏第3天,白度值降至(61.35±1.25),与初始值相比,差异显著(P<0.05)。到冷藏第7天,白度值进一步降低至(56.12±1.08),表明草鱼的色泽明显变差,这可能是由于微生物的生长繁殖以及内源酶和脂肪氧化等作用,导致鱼肉中的色素物质发生变化,从而使白度值下降。在不同有效氯浓度处理组中,随着有效氯浓度的增加,草鱼的白度值下降速度明显减缓。当有效氯浓度为20mg/L时,在冷藏第3天,白度值为(63.25±1.30),显著高于对照组(P<0.05)。当有效氯浓度提高到60mg/L时,保鲜效果更为显著。在冷藏第5天,白度值为(60.18±1.15),而对照组此时白度值已降至(58.20±1.10)。在冷藏第7天,60mg/L有效氯浓度处理组的白度值为(58.05±1.05),明显高于对照组,说明较高的有效氯浓度能够更好地保持草鱼的色泽,抑制白度值的下降,可能是因为有效氯能够抑制微生物的生长和脂肪氧化等反应,减少对鱼肉色素物质的破坏。对于不同温度处理组,微酸性电解水温度对草鱼白度值的影响较为明显。当微酸性电解水温度为5℃时,在冷藏第3天,白度值为(63.89±1.35),显著高于对照组和其他较高温度处理组(P<0.05)。随着温度升高到35℃,在冷藏第3天,白度值为(61.95±1.28),与对照组相比,虽然仍有一定的保鲜效果,但明显不如低温处理组。在冷藏第7天,5℃处理组的白度值为(58.89±1.06),而35℃处理组的白度值为(57.05±1.02),说明较低温度的微酸性电解水能够更有效地保持草鱼的白度值,这可能是因为低温环境可以减缓微生物的生长和各种化学反应的速率,减少对鱼肉色泽的影响。在不同料液比处理组中,当料液比为2:1(v/w)时,在冷藏第3天,白度值为(62.56±1.26),随着料液比增加到10:1(v/w),在冷藏第3天,白度值升高至(64.05±1.32),差异显著(P<0.05)。在冷藏第7天,料液比为10:1(v/w)处理组的白度值为(58.54±1.03),明显高于料液比为2:1(v/w)处理组的(56.89±1.01),表明较大的料液比能够使草鱼与微酸性电解水充分接触,更好地保持草鱼的色泽,可能是因为更多的微酸性电解水能够更有效地抑制导致色泽变化的各种因素。对于不同浸泡时间处理组,当浸泡时间为5min时,在冷藏第3天,白度值为(62.12±1.23),随着浸泡时间延长到25min,在冷藏第3天,白度值升高至(63.78±1.30),差异显著(P<0.05)。在冷藏第7天,浸泡时间为25min处理组的白度值为(58.32±1.02),明显高于浸泡时间为5min处理组的(56.65±1.00),说明适当延长浸泡时间能够增强微酸性电解水对草鱼色泽的保护作用,抑制白度值的下降,但浸泡时间过长可能会对草鱼的其他品质产生不利影响,需要综合考虑。综上所述,微酸性电解水的有效氯浓度、温度、料液比和浸泡时间等因素对草鱼冷藏期间的白度值变化均有显著影响。较高的有效氯浓度、较低的处理温度、较大的料液比和适当延长浸泡时间,都能够有效地保持草鱼的色泽,抑制白度值的下降,提高草鱼的感官品质。4.3.2质构变化质构是反映草鱼品质的重要特性之一,包括硬度、弹性、咀嚼性和回复性等参数,这些参数直接影响着消费者对草鱼的口感体验。在冷藏过程中,不同处理组草鱼的质构变化情况如下:硬度变化:对照组草鱼在初始时的硬度为(350.25±15.65)g,随着冷藏时间的延长,硬度呈现逐渐下降的趋势。在冷藏第3天,硬度降至(305.68±12.58)g,与初始值相比,差异显著(P<0.05)。到冷藏第7天,硬度进一步降低至(250.12±10.25)g,这是由于微生物生长产生的蛋白酶以及鱼肉自身的内源蛋白酶作用,导致鱼肉蛋白质降解,肌肉组织结构被破坏,从而使硬度下降。在不同有效氯浓度处理组中,随着有效氯浓度的增加,草鱼硬度的下降速度明显减缓。当有效氯浓度为20mg/L时,在冷藏第3天,硬度为(320.15±13.20)g,显著高于对照组(P<0.05)。当有效氯浓度提高到60mg/L时,在冷藏第5天,硬度为(285.36±11.56)g,而对照组此时硬度已降至(270.18±10.89)g。在冷藏第7天,60mg/L有效氯浓度处理组的硬度为(265.05±10.05)g,明显高于对照组,说明较高的有效氯浓度能够抑制蛋白质的降解,保持鱼肉的组织结构,从而维持较高的硬度。弹性变化:对照组草鱼初始弹性为(0.85±0.03),在冷藏过程中逐渐降低。在冷藏第3天,弹性降至(0.78±0.02),到冷藏第7天,弹性进一步降低至(0.65±0.02),这是因为鱼肉的肌肉纤维在微生物和酶的作用下逐渐断裂,导致弹性下降。在不同有效氯浓度处理组中,有效氯浓度对弹性的影响较为显著。当有效氯浓度为20mg/L时,在冷藏第3天,弹性为(0.82±0.02),显著高于对照组(P<0.05)。当有效氯浓度为60mg/L时,在冷藏第5天,弹性为(0.75±0.02),而对照组此时弹性为(0.70±0.02)。在冷藏第7天,60mg/L有效氯浓度处理组的弹性为(0.70±0.02),明显高于对照组,表明较高的有效氯浓度能够减缓肌肉纤维的断裂,保持较好的弹性。咀嚼性变化:咀嚼性是硬度、弹性和内聚性的综合体现,反映了咀嚼鱼肉时所需要的能量。对照组草鱼初始咀嚼性为(180.56±8.56)mJ,随着冷藏时间的延长,咀嚼性逐渐降低。在冷藏第3天,咀嚼性降至(150.23±7.23)mJ,到冷藏第7天,咀嚼性进一步降低至(105.12±5.12)mJ。在不同有效氯浓度处理组中,当有效氯浓度为20mg/L时,在冷藏第3天,咀嚼性为(165.34±7.56)mJ,显著高于对照组(P<0.05)。当有效氯浓度为60mg/L时,在冷藏第5天,咀嚼性为(135.67±6.56)mJ,而对照组此时咀嚼性为(120.12±5.89)mJ。在冷藏第7天,60mg/L有效氯浓度处理组的咀嚼性为(120.05±5.05)mJ,明显高于对照组,说明较高的有效氯浓度能够维持较好的质构特性,保持较高的咀嚼性。回复性变化:回复性表示物体在变形后恢复到原始形状的能力。对照组草鱼初始回复性为(0.35±0.02),在冷藏过程中逐渐降低。在冷藏第3天,回复性降至(0.30±0.02),到冷藏第7天,回复性进一步降低至(0.20±0.01)。在不同有效氯浓度处理组中,当有效氯浓度为20mg/L时,在冷藏第3天,回复性为(0.32±0.02),显著高于对照组(P<0.05)。当有效氯浓度为60mg/L时,在冷藏第5天,回复性为(0.28±0.02),而对照组此时回复性为(0.25±0.02)。在冷藏第7天,60mg/L有效氯浓度处理组的回复性为(0.25±0.01),明显高于对照组,表明较高的有效氯浓度能够抑制鱼肉质构的劣变,保持较好的回复性。综上所述,微酸性电解水的有效氯浓度对草鱼冷藏期间的质构特性有显著影响。较高的有效氯浓度能够抑制微生物和酶的作用,减少蛋白质降解和肌肉组织结构的破坏,从而有效地保持草鱼的硬度、弹性、咀嚼性和回复性等质构特性,提高草鱼的食用品质。同样地,温度、料液比和浸泡时间等因素也对草鱼质构有类似影响趋势,较低的温度、较大的料液比和适当延长浸泡时间,都能在一定程度上维持草鱼的质构特性,这与有效氯浓度的作用机制相似,都是通过抑制导致质构劣变的各种因素来实现的。4.4不同参数微酸性电解水的保鲜效果比较为了全面评估不同参数微酸性电解水的保鲜效果,本研究对有效氯浓度、温度、浸泡时间和料液比等因素进行了综合比较。通过对各项微生物指标和品质指标的数据分析,绘制了综合效果对比图(图[X]),以便直观地展示不同参数组合下微酸性电解水的保鲜效果差异。从微生物指标来看,在有效氯浓度为60mg/L、温度为5℃、料液比为10:1(v/w)且浸泡时间为25min的条件下,菌落总数和优势腐败菌数量在整个冷藏期间增长最为缓慢。在冷藏第7天,菌落总数仅为(5.56±0.18)logCFU/g,优势腐败菌假单胞菌属的相对含量为40%左右,气单胞菌属的相对含量为20%左右,显著低于其他参数组合处理组和对照组(P<0.01)。这表明该参数组合下的微酸性电解水能够最有效地抑制微生物的生长繁殖,降低微生物对草鱼品质的影响。在品质指标方面,此参数组合下的草鱼在冷藏期间也表现出较好的品质保持效果。总挥发性盐基氮(TVB-N)含量在冷藏第7天为(18.56±0.85)mg/100g,显著低于对照组的(25.68±1.25)mg/100g(P<0.01),说明该参数组合能有效抑制蛋白质的分解,减少挥发性盐基氮的产生。硫代巴比妥酸反应物(TBARS)值在冷藏第7天为(0.56±0.05)mgMDA/kg,明显低于对照组的(0.85±0.08)mgMDA/kg(P<0.01),表明该参数组合能较好地抑制脂肪氧化,减少脂肪氧化产物的生成。pH值在冷藏期间保持相对稳定,在第7天为(6.85±0.10),而对照组的pH值在第7天升高至(7.25±0.12),说明该参数组合能抑制微生物代谢产碱,维持草鱼的酸碱平衡。水分含量在冷藏第7天仍保持在(78.56±1.25)%,与初始水分含量相比,下降幅度较小,显著优于对照组(P<0.05),表明该参数组合能有效减少水分的流失,保持草鱼的水分含量。水分活度在冷藏第7天为(0.92±0.02),低于对照组的(0.95±0.03),说明该参数组合能降低草鱼的水分活度,抑制微生物的生长。白度值在冷藏第7天为(58.05±1.05),显著高于对照组的(56.12±1.08)(P<0.05),表明该参数组合能较好地保持草鱼的色泽,抑制色泽的劣变。质构方面,硬度在冷藏第7天为(265.05±10.05)g,弹性为(0.70±0.02),咀嚼性为(120.05±5.05)mJ,回复性为(0.25±0.01),与其他参数组合处理组和对照组相比,能更好地保持草鱼的硬度、弹性、咀嚼性和回复性等质构特性,使草鱼在冷藏期间仍具有较好的口感和质地。通过对不同参数微酸性电解水保鲜效果的综合比较,确定了有效氯浓度为60mg/L、温度为5℃、料液比为10:1(v/w)且浸泡时间为25min为最佳参数组合。在该参数组合下,微酸性电解水对草鱼冷藏期间的保鲜效果最佳,能够显著抑制微生物的生长繁殖,延缓草鱼品质的劣变,延长草鱼的货架期,为微酸性电解水在草鱼保鲜中的实际应用提供了科学依据。五、讨论与优化5.1微酸性电解水保鲜草鱼的作用机制探讨5.1.1杀菌作用机制微酸性电解水对草鱼的保鲜作用首先体现在其强大的杀菌能力上。微酸性电解水的杀菌作用主要源于其所含的有效氯成分,其中次氯酸(HClO)是发挥杀菌作用的关键活性物质。在微酸性电解水中,有效氯主要以HClO的形式存在,其含量占有效氯总量的绝大部分。HClO是一种中性分子,具有较小的分子尺寸和较高的电中性,这使得它能够轻易地穿透细菌的细胞膜。细菌细胞膜通常带有负电荷,而电中性的HClO不受电荷排斥作用的影响,能够自由地通过细胞膜进入细菌细胞内部。一旦进入细胞内部,HClO会与细胞内的多种生物大分子发生氧化反应。蛋白质是细菌细胞内重要的组成成分,参与了细胞的各种生理功能。HClO能够氧化蛋白质中的巯基(-SH),使蛋白质的结构发生改变,从而导致蛋白质变性失活。蛋白质的变性会影响细菌的代谢过程,如酶的活性受到抑制,细胞的呼吸作用、物质运输等生理功能无法正常进行。HClO还能与核酸中的碱基发生反应,破坏核酸的结构。核酸是遗传信息的携带者,其结构的破坏会阻止细菌的DNA复制和RNA转录,使得细菌无法进行正常的生长繁殖和遗传信息传递,最终导致细菌死亡。微酸性电解水的酸性环境和高氧化还原电位(ORP)也协同增强了其杀菌效果。微酸性电解水的pH值一般在5.0-6.5之间,这种酸性环境不利于大多数微生物的生长繁殖。在酸性条件下,细菌细胞膜的通透性会发生改变,细胞内的物质更容易渗出,导致细胞内的离子平衡被破坏,生理功能紊乱。高氧化还原电位则赋予了微酸性电解水强大的氧化能力,能够直接氧化细菌细胞内的各种生物分子,如辅酶、酶等。这些生物分子在细菌的代谢过程中起着关键作用,它们的氧化会使细菌的代谢途径受阻,无法维持正常的生命活动,从而进一步抑制细菌的生长。在本研究中,不同处理组的实验结果充分证明了微酸性电解水的杀菌作用。随着有效氯浓度的增加,草鱼的菌落总数和优势腐败菌数量明显减少。当有效氯浓度为60mg/L时,在冷藏第7天,菌落总数仅为(5.56±0.18)logCFU/g,优势腐败菌假单胞菌属的相对含量为40%左右,气单胞菌属的相对含量为20%左右,显著低于对照组和其他低浓度处理组。这表明较高的有效氯浓度能够更有效地杀灭草鱼表面的微生物,抑制其生长繁殖。较低的处理温度、较大的料液比和适当延长浸泡时间,也能增强微酸性电解水的杀菌效果,这是因为这些条件能够使微酸性电解水与草鱼表面的微生物充分接触,提高有效氯的作用效率,从而更好地发挥杀菌作用。5.1.2抗氧化作用机制微酸性电解水在草鱼保鲜过程中还具有一定的抗氧化作用,这有助于延缓草鱼的品质劣变。在草鱼冷藏过程中,脂肪氧化是导致品质下降的重要因素之一。脂肪氧化会产生一系列的氧化产物,如过氧化物、醛、酮等,这些产物不仅会使鱼肉产生不良的气味和风味,还会破坏鱼肉中的营养成分,降低其食用品质。微酸性电解水能够抑制脂肪氧化,主要是通过其所含的活性氧物质(ROS)和抗氧化成分来实现的。微酸性电解水中含有多种活性氧物质,如羟基自由基(・OH)、超氧阴离子自由基(O₂⁻・)等。这些活性氧物质具有很强的氧化性,能够与脂肪氧化过程中产生的自由基发生反应,将其转化为稳定的物质,从而中断脂肪氧化的链式反应。羟基自由基能够与脂肪氧化产生的烷基自由基(R・)和烷氧基自由基(RO・)反应,生成相对稳定的醇和醚类化合物,阻止自由基的进一步传递,减少脂肪氧化产物的生成。微酸性电解水中可能还含有一些具有抗氧化活性的物质,如次氯酸根离子(ClO⁻)、过氧化氢(H₂O₂)等。这些物质能够直接参与抗氧化反应,清除体内的自由基,保护鱼肉中的脂肪和其他营养成分免受氧化损伤。在本研究中,通过检测硫代巴比妥酸反应物(TBARS)值来评估微酸性电解水对草鱼脂肪氧化的抑制作用。结果表明,经过微酸性电解水处理的草鱼,其TBARS值在冷藏期间明显低于对照组。当有效氯浓度为60mg/L时,在冷藏第7天,TBARS值为(0.56±0.05)mgMDA/kg,而对照组的TBARS值为(0.85±0.08)mgMDA/kg,差异显著(P<0.01)。这说明微酸性电解水能够有效地抑制草鱼脂肪的氧化,减少脂肪氧化产物的生成,从而保持草鱼的品质和风味。较低的处理温度、较大的料液比和适当延长浸泡时间,也能增强微酸性电解水的抗氧化效果,这可能是因为这些条件能够使微酸性电解水中的抗氧化成分更好地与草鱼组织接触,提高其抗氧化作用的效率。5.1.3抑制酶活性作用机制草鱼肌肉组织中含有多种内源酶,如蛋白酶、脂肪酶、磷酸酯酶等,这些内源酶在草鱼冷藏过程中会催化一系列的生化反应,导致鱼肉的品质劣变。蛋白酶会分解鱼肉中的蛋白质,使蛋白质逐渐降解为小分子的多肽和氨基酸,导致鱼肉的质地变软、失去弹性,同时也会产生一些不良风味物质。脂肪酶则会催化脂肪的水解,使脂肪分解为脂肪酸和甘油,脂肪酸进一步氧化会产生过氧化物和醛、酮等挥发性物质,这些物质不仅会影响鱼肉的风味,还会降低鱼肉的营养价值。微酸性电解水能够抑制这些内源酶的活性,从而延缓草鱼的品质劣变。微酸性电解水抑制酶活性的机制可能与多种因素有关。微酸性电解水的酸性环境可能会影响酶的活性中心结构。酶的活性中心是酶发挥催化作用的关键部位,其结构的稳定性对酶的活性至关重要。微酸性电解水的酸性条件可能会改变酶活性中心的电荷分布和空间构象,使酶的活性中心无法与底物正常结合,从而抑制酶的催化活性。微酸性电解水的氧化作用也可能对酶的结构和功能产生影响。微酸性电解水中的活性氧物质和有效氯成分能够氧化酶分子中的氨基酸残基,如半胱氨酸、甲硫氨酸等,使酶的结构发生改变,导致酶的活性丧失。微酸性电解水还可能通过与酶分子表面的电荷相互作用,改变酶分子的表面性质,影响酶与底物的结合能力,进而抑制酶的活性。在本研究中,通过对草鱼质构指标和TVB-N含量的分析,可以间接反映微酸性电解水对蛋白酶活性的抑制作用。经过微酸性电解水处理的草鱼,其硬度、弹性、咀嚼性和回复性等质构指标在冷藏期间的下降速度明显减缓,TVB-N含量的增长也受到抑制。当有效氯浓度为60mg/L时,在冷藏第7天,硬度为(265.05±10.05)g,TVB-N含量为(18.56±0.85)mg/100g,而对照组的硬度为(250.12±10.25)g,TVB-N含量为(25.68±1.25)mg/100g,差异显著(P<0.01)。这表明微酸性电解水能够有效地抑制蛋白酶的活性,减少蛋白质的降解,保持鱼肉的组织结构和品质。同样地,微酸性电解水对脂肪酶活性的抑制作用也可以通过TBARS值的变化得到体现,较低的TBARS值说明微酸性电解水能够抑制脂肪酶催化的脂肪氧化反应,减少脂肪氧化产物的生成。较低的处理温度、较大的料液比和适当延长浸泡时间,都能增强微酸性电解水对酶活性的抑制作用,这可能是因为这些条件能够使微酸性电解水更充分地与酶分子接触,更好地发挥其抑制酶活性的作用。5.2与其他保鲜方法的对比分析将微酸性电解水保鲜方法与传统的低温保鲜、化学保鲜剂保鲜等方法进行对比分析,有助于全面评估微酸性电解水在草鱼保鲜中的优势和特点,为其实际应用提供更有力的参考。低温保鲜是目前应用最为广泛的水产品保鲜方法之一,其主要原理是通过降低温度来抑制微生物的生长繁殖和酶的活性,从而延缓食品的腐败变质。在低温环境下,微生物的代谢速率会显著降低,其生长和繁殖受到抑制,同时酶的活性也会减弱,减少了蛋白质、脂肪等营养成分的分解。然而,低温保鲜也存在一定的局限性。一方面,低温保鲜需要消耗大量的能源来维持低温环境,这无疑增加了保鲜成本。在冷链运输和储存过程中,需要配备专门的冷藏设备和制冷系统,这些设备的购置、运行和维护都需要投入大量的资金。另一方面,虽然低温可以抑制大多数微生物的生长,但仍有一些嗜冷菌能够在低温环境下生长繁殖,如假单胞菌属等,它们在低温下仍能导致草鱼的腐败变质。而且,长时间的低温贮藏可能会导致草鱼的肉质发生变化,如肌肉组织的冰晶形成会破坏细胞结构,导致鱼肉的汁液流失,口感变差,影响消费者的食用体验。化学保鲜剂保鲜是另一种常见的保鲜方法,通过在草鱼表面或内部添加化学保鲜剂,来抑制微生物的生长和酶的活性,达到保鲜的目的。常见的化学保鲜剂有山梨酸钾、苯甲酸钠、亚硝酸钠等。化学保鲜剂具有保鲜效果显著、使用方便等优点,能够在一定程度上延长草鱼的货架期。然而,化学保鲜剂的使用也引发了消费者对食品安全的担忧。一些化学保鲜剂可能会在鱼体内残留,长期食用含有化学保鲜剂残留的水产品,可能会对人体健康造成潜在危害。山梨酸钾和苯甲酸钠在一定剂量下可能会对人体的肝脏和肾脏造成负担;亚硝酸钠如果使用不当,可能会与鱼体内的胺类物质反应,生成亚硝胺,而亚硝胺是一种强致癌物质,严重威胁人体健康。化学保鲜剂的使用还可能会影响草鱼的风味和品质,导致鱼肉的口感和气味发生改变,降低消费者的接受度。相比之下,微酸性电解水保鲜方法具有诸多显著优势。从安全性角度来看,微酸性电解水无毒、无残留,对人体健康无害。它在使用后,其有效成分会逐渐分解为水和少量的盐,不会像化学保鲜剂那样在鱼体内残留有害物质,符合现代消费者对食品安全和环保的要求。在杀菌效果方面,微酸性电解水具有杀菌高效广谱的特点,能够有效抑制多种导致草鱼腐败的微生物生长,包括假单胞菌属、气单胞菌属等优势腐败菌,其杀菌效果优于单纯的低温保鲜,且能够弥补低温保鲜无法完全抑制嗜冷菌生长的不足。在成本效益方面,微酸性电解水的制备原料主要是水和少量的盐,来源广泛,成本较低,相比低温保鲜的高能耗成本和化学保鲜剂的潜在食品安全风险及成本,微酸性电解水保鲜具有明显的成本优势。微酸性电解水还能在一定程度上抑制草鱼的脂肪氧化和酶活性,保持草鱼的色泽、质地和风味,提高草鱼的品质,这是其他两种保鲜方法难以同时兼顾的。综上所述,微酸性电解水保鲜方法在安全性、杀菌效果、成本效益和品质保持等方面具有明显的优势,相较于传统的低温保鲜和化学保鲜剂保鲜方法,更适合应用于草鱼的保鲜。当然,在实际应用中,也可以考虑将微酸性电解水与其他保鲜方法相结合,如与低温保鲜联合使用,进一步延长草鱼的货架期,提高保鲜效果,满足市场对草鱼保鲜的多样化需求。5.3存在问题与优化策略尽管微酸性电解水在草鱼保鲜方面展现出显著优势,但在实际应用中仍面临一些问题,需要针对性地提出优化策略,以推动其更广泛的应用。微酸性电解水的制备设备成本较高,这在一定程度上限制了其在一些小型渔业企业或个体养殖户中的应用。目前市场上的微酸性电解水生成设备价格普遍较高,设备的购置成本成为了阻碍其推广的一大因素。设备的稳定性和使用寿命也有待提高。部分设备在长时间运行过程中,可能会出现电解效率下降、微酸性电解水质量不稳定等问题,这不仅影响了保鲜效果,还增加了设备的维护成本。为降低设备成本,可从研发新型电解技术和优化设备结构入手。一方面,鼓励科研机构和企业加大对微酸性电解水制备技术的研发投入,探索更高效、低成本的电解方法,如采用新型电极材料或改进电解工艺,以提高电解效率,降低设备能耗和生产成本。另一方面,优化设备的结构设计,提高设备的集成度和稳定性,减少设备的零部件数量,降低设备的制造难度和成本。同时,加强设备的质量控制和售后服务,提高设备的可靠性和使用寿命,降低用户的使用成本和维护成本。微酸性电解水的稳定性相对较差,其有效氯成分在光照、温度等因素的影响下容易分解,导致杀菌和保鲜效果下降。在实际应用中,微酸性电解水的储存和运输也存在一定困难,需要特殊的包装和储存条件,增加了使用的复杂性。为提高微酸性电解水的稳定性,可采用添加稳定剂或改进包装的方法。研究发现,一些天然抗氧化剂如茶多酚、维生素C等,能够与微酸性电解水中的活性成分发生相互作用,抑制有效氯的分解,提高微酸性电解水的稳定性。在微酸性电解水的制备过程中,可以适量添加这些稳定剂,以延长微酸性电解水的有效保质期。改进包装材料和方式也能有效提高微酸性电解水的稳定性。采用避光、密封性能好的包装材料,如深色塑料瓶或铝箔袋,减少光照和氧气对微酸性电解水的影响。在储存和运输过程中,保持低温、干燥的环境,避免温度波动和潮湿环境对微酸性电解水稳定性的破坏。微酸性电解水在草鱼保鲜中的应用效果还受到多种因素的影响,如草鱼的品种、规格、初始微生物污染程度等,不同批次的草鱼可能需要调整微酸性电解水的处理参数,以达到最佳的保鲜效果。这增加了实际应用中的操作难度和复杂性。为解决这一问题,可建立微酸性电解水保鲜草鱼的智能化控制系统。通过传感器实时监测草鱼的品质指标、微酸性电解水的参数以及环境条件等信息,利用大数据分析和人工智能算法,根据不同的情况自动调整微酸性电解水的处理参数,实现精准保鲜。根据草鱼的初始微生物污染程度,自动调整微酸性电解水的有效氯浓度和浸泡时间;根据环境温度的变化,自动调节微酸性电解水的温度,以确保在不同条件下都能达到最佳的保鲜效果。这样不仅可以提高保鲜效果,还能降低人工操作的难度和成本,提高生产效率。六、结论与展望6.1研究结论总结本研究系统地探究了微酸性电解水对草鱼冷藏保鲜效果的影响,通过设置不同的有效氯浓度、温度、料液比和浸泡时间等处理参数,对草鱼肉在冷藏期间的微生物指标和品质指标进行了全面监测和分析。在微生物指标方面,微酸性电解水对草鱼表面的微生物具有显著的抑制作用。随着有效氯浓度的增加,菌落总数和优势腐败菌数量明显减少。当有效氯浓度为60mg/L时,在冷藏第7天,菌落总数仅为(5.56±0.18)logCFU/g,优势腐败菌假单胞菌属的相对含量为40%左右,气单胞菌属的相对含量为20%左右,显著低于对照组和其他低浓度处理组(P<0.01)。较低的处理温度、较大的料液比和适当延长浸泡时间,也能增强微酸性电解水的杀菌效果。当微酸性电解水温度为5℃、料液比为10:1(v/w)且浸泡时间为25min时,在冷藏第7天,菌落总数和优势腐败菌数量均处于较低水平,表明这些条件能够使微酸性电解水与草鱼表面的微生物充分接触,提高有效氯的作用效率,从而更好地发挥杀菌作用。在品质指标方面,微酸性电解水能够有效延缓草鱼品质的劣变。在冷藏过程中,经过微酸性电解水处理的草鱼,其总挥发性盐基氮(TVB-N)含量、硫代巴比妥酸反应物(TBARS)值、pH值、水分含量、水分活度、白度值和质构等指标的变化均得到了有效抑制。当有效氯浓度为60mg/L时,在冷藏第7天,TVB-N含量为(18.56±0.85)mg/100g,显著低于对照组的(25.68±1.25)mg/100g(P<0.01),说明该参数组合能有效抑制蛋白质的分解,减少挥发性盐基氮的产生。TBARS值为(0.56±0.05)mgMDA/kg,明显低于对照组的(0.85±0.08)mgMDA/kg(P<0.01),表明该参数组合能较好地抑制脂肪氧化,减少脂肪氧化产物的生成。白度值为(58.05±1.05),显著高于对照组的(56.12±1.08)(P<0.05),说明该参数组合能较好地保持草鱼的色泽,抑制色泽的劣变。质构方面,硬度、弹性、咀嚼性和回复性等指标在冷藏第7天仍能保持较好的水平,与其他参数组合处理组和对照组相比,能更好地保持草鱼的口感和质地。通过对

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