新教材2024高考生物二轮专题复习专题七生物技术与工程第3讲基因工程和生物技术的安全性与伦理问题教师用书

第3讲基因工程和生物技术的安全性与伦理问题

聚焦新课标：5.1基因工程是一种重组DNA技术；5.2蛋白质工程是基因工程的延伸；6.1

转基因产品的安全性引发社会的广泛关注；6.2中国禁止生殖性克隆人；6.3世界范围内应全

面禁止生物武器。

基础自查-明晰考位

纵引横连一一建网络

提醒：特设长句作答题,训练文字表达能力

转基因成果

转禁因产岛

对转基因产品安全性的争论亍手常用载体：质粒

的安全性生［探究实践：DNA的粗提取与鉴定

看待转基因技术」物

技H的基因的「筛选合适的目的基因

术笛感石丽之利用⑤获取和扩增目的基因

生

的

物「组成:⑥_______________________________

安

克隆人面临的伦理问题一I关注生殖性技茶因表达

基|用到的工具做：限制性内切核酸酶和

全DNA

我国禁止②眄L术我体的构建匕连接解

性

与操作

「植物：⑦____________________________

工

与在目的M因

因动物：显微注射法

伦等人受体细胞

L原核生物：Ca,♦处理法

理

问工H的基因「分子水平:⑧-------------------------

另类题怜冽与筌定L个体水平:饲喂或接种等

禁止生物L探究实践：DNA片段的扩增及电泳鉴定

程

武益「转基因抗虫、抗病、抗除草剂植物

致病能力强、攻击范围广通当产J-改良⑨____________________________________

提高动物的生长速率

L改善备产品的品质

操作手段：⑩____________________________

应用医药卫生厂生产药物

蛋白质

--------领应一彳乳腺生物反应器

结果：改造或制造新的蛋白质TS-

L生产克隆器官

应用：对胰岛东、干扰东、梅的改造1-食品工业：解、妖基酸、维生素

边角扫描一一全面清

提醒：判断正误并找到课本原话

1.切割质粒的限制性内切核酸酶均能特异性地识别6个核甘酸序列。（选择性必修3

Pn）（）

2.DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事。（选择性必修3P72“旁栏思考”）（）

3.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选的标记基因。（选择性必修3P72正

文）（）

4.目的基因就是指编码蛋白质的基因。（选择性必修3P76正文）（）

5.人畜食用Bt抗虫蛋白会中毒。（选择性必修3PH“相关信息”）（）

6.用PCR方法扩增H的基因时不必知道基因的全部序列。（选择性必修3P；7”相关信

息”）（）

7.基因表达载体中含有启动子和密码子。（选择性必修3P即正文和图36）（）

8.干扰素是我国批准生产的第一个基因工程药物。（选择性必修3Poo“资料卡”）（）

9.对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的。（选择性必修3PG正文）（）

10.转基因作为一项技术本身是中性的。（选择性必修3Pm正文）（）

11.治疗性克隆是指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为个体的克隆性技术。（选

择性必修3P侬正文）（）

考点梳理-整合突破

整合考点22“功能强大”的基因工程

任务驱动

任务1理解基因工程的理论基础

：①—是控制生物性状的遗

外湎其田4I：传丽J结构和功能单位；

R.簪懿瓢需；②遗传信息的传递都遵循

受体细胞内表达屈础；.

:③生物界「用一套

复重组DNA:、转录翻译蛋白质

制+目的基同厂（性状）

①DNA的基本组成总位都

是四种;

理论

②分子都遵循碱灵互

基因拼接砌DNA

补配对原则；

③双链DNA分子的空间结

构都是规则的

任务2理清基因工程的3种操作工具

住m识别双链DNA分子的某种特定核甘酸

嘤序列并使每一条链中特定部位的两个核

限制陶甘酸之间的①____断__开________

基

型产生②____________________

因

工作用在两个核甘酸之间形成③—

程"以连接两个DNA片段

DNA连

的接防-E.COHDNA连接酶：连接黏性末端

种类

举

_T4DNA连接陶：既能连接④____

本,也能连接⑤

工

具

载体

条件⑦

、对受体细胞无害

任务3掌握基因工程的操作步骤

~~-从①中获取

目的基因

的筛选与一利用PCR技术扩增

获取一通过化学方法人工合成

「目的基因

—复制原点

基因表达

一启动子：RNA聚合薜②

载体的构

组成的部位，砂动基因转录

建（核心

工作）一终止子：RNA聚合酶脱离部位，终止

③______________

一标记基因：鉴别受体细胞中是否含有目

的基因，从而将含有目的基

因的细胞筛选出来

广植物：④______、花粉

件通道法

将目的基

方法

因导入受・动物：⑤（导人受精卵）

体细胞

L微生物：转化法（用Ca?+处理，使细胞

成为感受态细胞）

厂复制水平：PCR检测

目的基因一转录水平：PCR检测

的检测Lj

一翻泽水平：抗原一抗体杂交

鉴定

一个体水平：抗性、耐件实验

任务4图解记忆蛋白质工程

预期蛋白质的功能

通过改造或①操作设计预期的③

货

手段

白推测应有的城基酸序列

质设计।

改造现仃蛋白质,找到并改变相对应的

工（基因）或

或制造出②程

结果合成新的基因

荻取所需要的蛋白质

任务5完善PCR技术原理与条件

含义聚合陶链式反应的缩写，是一种体外迅速

扩增DNA片段的技术

典DNA半保留品制

幽L模板DNA、引物、4种脱钝核甘酸、耐高

原

理温的DNA聚合酶

与

条

件/扩增DNA的合成方向总是从子链的5,端向3,

笳-端延伸

也是一小段能与DNA母链的一段碱基序列

互补配对的短单链核酸

目的

短时间内大量扩增目的基因

任务6完善PCR技术的过程

Gata3

，启动子区।t编码区非编码区

插入前53'

35'

,Gala3PyGFP

，启动子区|编码区幽1|编码区非编码区才

插入后

-------

加引物2

图甲

1234

大片段----------

小片段一

图乙

下列叙述正确的是（）

A.Ga，a3基因的启动子无法控制征尸基因表达

B.翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白

C.2号条带的小鼠足野生型，4号条带的小鼠足&53-G"，基因纯合子

D.若用引物1和引物3进行PCR,能更好地区分杂合子和纯合子

2.[2023•新课标卷]某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA连接酶为工具,

将目的基因（两端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组

表达载体。限制附的切割位点如图所示。

5'-GAATTC—3'5'-GGATCC—3'

3，-CTTAAG-5/3'—CCTAGG—5'

AA

前1前2

▼I

5f—CCCGGG-3/5Z—AGATCT—3Z

3，-GGGCCC-5,3'-TCTAGA—5'

Af

醯3酶1

卜.列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是（）

A.质粒和目的基因都用酶3切割，用E.coliDNA连接随连接

B.质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4DNA连接酶连接

C.质粒和目的基因都用海1和前2切割，用T4DNA连接睡连接

D.质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用后DNA连接酶连接

3.[2023•湖北卷]用氨节青霉素抗性基因（力〃/）、四环素抗性基因（足力作为标记基因

构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用大同限制酶酶切后的质粒，构建基因

表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（）

A.若用力加用酶切，目的基因转录的产物可能不同

B.若用用"I酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因

C.若用际力I酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否

D.若用如力I陋切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨节青霉素）和Tot的培养基中能

形成菌落

4.[2023•广东卷]“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解一分离一沉淀一鉴定。

下列叙述错误的是（）

A.裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质

B.分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等

C.沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度

D.鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色

评价2依托教材专练长句表述，提考能

5.（选择性必修3Pn“旁栏思考”）限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的DNA

分子？

6.（选择性必修3Pw正文拓展）天然的DNA分子是否可以直接用作基因工程载体？为什

么？

7.（选择性必修3%“相关信息”改编）PCR的引物实质是什么？

8.（选择性必修3%正文）为什么切割含有目的基因的DNA片段和载体要选用同一种限

制酶？是否只能用同一种限制酶？

9.（选择性必修3九正文）在用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中，为什

么一定要将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上？

10.（选择性必修3%正文）对天然蛋白质进行改造，你认为应该直接对蛋白质分子进行

操作，还是通过对基因的操作来实现？原因是什么？

评价3依托真题归类比较再探究，强素养

11.[2023•天津卷]基因工程：制备新型酵母菌

(1)已知醉母菌不能吸收淀粉，若想使新型醉母菌可以直接利用淀粉发酵，则应导入多步

分解淀粉所需的多种酶，推测这些酶生效的场所应该是(填“细胞内”和“细胞

外”)

(2)同源切割是一种代替限制海、DNA连接前将目的基因导入基因表达载体的方法。当目

的基因两侧的小段序列与基因表达载体上某序列相同时，就可以发生同源切割，将FI的基因

直接插入。研究人员，运用同源切割的方式，在目的基因两端加上一组同源序列A.B,己知

酵母菌体内D\A有许多A-3序列位点可以同源切割插入。构建完成的目的基因结构如图，则

应选择图中的引物_________对目的基因进行PCR。

A目的基因B

⑶已知酵母菌不能合成尿啥咤，因此尿啼咤合成基因(UGA)常用作标记基因，乂知尿喀

噬可以使5-氟乳清酸转化为对酵母菌有毒物质。

(i)导入目的基因的酵母菌应在的培养基上筛选培养。由于需要导入多种的基

因，需要多次筛选，因此在导入一种目的基因后，要切除UGA基因，再重新导入。研究人员

在UGA基因序列两端加上薛母菌DNA中不存在的同源C.C'序列，以便对UGA基因进行切除。

C.C'的序列方向将影响立割时同源序列的配对方式，进而决定DNA片段在切割后是否可以顺

利重连，如图，则应选择方式进行连接。

(ii)切去UGA基因的醉母菌应在的培养基上筛选培养。

(4)综上，目的基因、标记基因和同源序列在导入酵母菌的基因表达载体上的排列方式应

该如图o

目的目的

CUGAA基因BCACUGA基因C'

♦♦••

12.［2023•山东卷］科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，该

质粒的部分结构如图甲所示，其中V5编码序列表达标签短肽V5。

启动子J基因V5编码序列终止子

—「—一&链条带］.■条带1

_±J_____I一'」II］,链条带2—

RIR2~z.r~a..

注：Fl、F2、RI、R2表示引物抗J蛋抗'5抗体

白抗体

图甲图乙

(1)与图甲中启动子结合的酶是o除图甲中标出的结构外，作为载体，质

粒还需具备的结构有(答出2个结构即可)。

(2)构建重组质粒后，为了确定J基因连接到质粒中且插入方向正确，需进行PCR怆测，

若仅用一对引物，应选择图甲中的引物________o已知J基因转录的模板链位于b链，由此

可知引物F1与图甲中J基因的(填“链”或“b链”)相应部分的序歹J相同。

(3)重组质粒在受体细胞内正确表达后，用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白

是否表达以及表达水平，结果如图乙所示。其中，出现袋带1证明细胞内表达了,

条带2所检出的蛋白_________(填“是”或“不是”)日重组质粒上的J基因表达的。

13.［2023•广东卷］种子大小是作物重要的产量性状。研究者对野生型拟南芥(2〃=10)

进行诱变筛选到一株种子增大的突变体。通过遗传分析和测序，发现野生型DA\基因发生一

个碱基G到A的替换，突变后的基因为隐性基因，据此挂测突变体的表型与其有关，尸展相

关实验。

回答下列问题：

(1)拟采用农杆菌转化法将野生型""基因转入突变体植株，若突变体表型确由该突变造

成，则转基因植株的种子大小应与植株的种子大小相近。

(2)用PCR反应扩增D.41基因，用限制性核酸内切酶对PCR产物和________进行切割，

用DNA连接酶将两者连接。为确保插入的DA\基因可以正常表达，其上下游序列需具备

(3)转化后，T-DNA(其内部基因在减数分裂时不发生交换)可在基因组单一位点插入也可

以同时插入多个位点。在插入片段均遵循基因分离及自日组合定律的前提下，选出单一位点

插入的植株，并进一步获得目的基因稳定遗传的植株(如图)，用于后续验证突变基因与表型

的关系。

亘］农杆菌(T-DNA携带。A/基因和卡那也去抗性基因)

/花序汉没于农杆菌菌液进行转化

①农杆菌转化T。代植株并自交，将「代种子播种在选择培养基上，能够萌发并生长的阳

性个体即表示其基因组中插入了.

②「代阳性植株自交所得的T2代种子按单株收种弁播种于选择培养基，选择阳性率约

%的培养基中幼亩继续培养。

③将②中选出的T2代阳性植株_________（填“自交”“与野生型杂交”或“与突变体

杂交”）所得的丁3代种子按单株收种并播种于选择培养基，阳性率达到%的培养基

中的幼苗即为目标转基因植株。

为便于在后续研究中检测该突变，研究者利用PCR扩增野生型和突变型基因片段，再使

用限制性核酸内切酶X切割产物，通过核酸电泳即可进行突变检测，相关信息见下图，在电

泳图中将酶切结果对应位置的条带涂黑。

5OCTTTTCATT•••--El/XGGACTCTGCCTT……TTACAAGTTA3

牛型3，GGAAAAGTAA・””《CTCCTGAGACGGAA……AATGTTCAAT5115W1P）

5ccrrrrcATF--{AjAGGACiCTGCCrT……TTACAAGFTA3'

突变鼻3GGAAAAGIAA……IICCIGAGACGGAA•“…AATGrTCAAT5"501T'

10.50……（150hp）

限制性内切能XAAGG；NNNNNNCCrr

识别及切割序列TreeNNNNNNXKiAA（N代表任意核件酸）

核酸电泳图标准参照物野生型突变型

100bp(»

50l)p（bp指核甘酸对）

模拟预测-题组集训

题组预测一聚焦基因工程

1.[2023-山东青岛统考三模]免疫PCR是一种微量抗原检测系统，利用该技术可检测牛

乳中微量抗生素。大致检测步骤是，将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加

入DNA标记的抗体2,PCR扩增及产物检测。下列叙述错误的是（）

质定抗体1加入待检牛乳加入DNA标记的抗体2PCRfT增

A.图中的抗体1和抗体2均需要与抗生素特异性结合

B.第三次冲洗的目的是除去游离的抗体2以避免出现假阳性

C.在PCR扩增过程中，子链的合成均是从5'端向3,端延伸的

D.可用牛乳蛋白基因的DNA片段作为标记DNA与抗体2相连

2.[2023-广东省揭阳市高三质量测试]斑点印迹杂交是一种简单的DNA分子杂交技术,

其技术流程如图。据此分析，下列说法正确的是（）

将含有待测DNA片段

（用P表示）的质粒转

放射性同位索标记的

移到硝酸纤维索膜上

DNA片段（用q表示）

E"将标记的DNA

片段与膜上的质

粒进行杂交，然

后洗去未结合的

探针

将膜曝光在

显影胶片上

放射性自显影结果

A.放射性自显影技术可显示原培养皿中含目的基因的菌落位置

B.p和q片段能够杂交的主要原因是两单链的碱基排列顺序相同

C.p和q片段的杂交双链区域形成过程中有氢键和磷酸二酯键生成

D.斑点印迹杂交技术可用于检测目的基因是否在受体细胞中成功表达

3.[2023•山东青岛统考三模]（不定项）20世纪70年代，Fredsanger发明了双脱氧终止

法对DNA进行测序。其原理如图，在4支试管中分别加入4种脱氧核甘三磷酸（dNTP）和1种

双脱氧核甘二磷酸（ddNTP）；ddN"可以与dNTP竞争核有酸链延长位点，并终止DNA片段的

延伸。在4支试管中DNA键将会分别在A、G、C及T位置中止，并形成不同长度的DNA片段。

这些片段随后可被电泳分开并显示出来。下列说法中错误的是（）

5'（=13'

3，=|未知序列|

dATPdGTP.dCTP.dTTFn

-KidATP+ddCTP+ddGTP+<ldTTP

ACGT

A.这种测序方法需要引物和耐高温的DNA聚合前

B.电泳图谱中的箭头所指的DNA片段以鸟喋吟结尾

C.测得未知DNA的序列为5'—GATTCGAGCTGA—3;

D.ddNTP与dNTP竞争的延长位点是核甘酸链的5'末端

4.[2023•山东青岛统考一模]科研人员克隆了猪白细胞抗原基因（SLA-2基因），构建了

该基因的真核表达载体，进行了猪仔上皮细胞表达研究。实验的主要流程如下，请回答：

产抗原肽⑦

的旅肾上益显⑤

皮细胞弗选

猪肾上皮细胞

①PCR

SLA-2部有限制酶切点

基因的SLA-2基因

怨:斐青密索I大肠杆菌O

抗性基因------氨节青凉素

抗性基因«</1(1310)

复制Nell启动子」

原点质粒AXbal

NaI(2273)

Sa”3AI发制

质网BXh«I(2310)

原点Sau3A1(2450)

终止子

噫吟庭索抗性基因

(1)过程①中,PCR扩增SLA-2的原理是，下列4种引物中应选择的是—

a5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC

b5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC

c5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC

d5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC

(2)过程②将重组质粒导入大肠杆菌的目的是,该过程需

要用_________处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞。然后将大肠杆菌涂布在含有

(抗生素)的培养基上培养。

(3)科研中常用喋吟霉素对真核细胞进行筛选，一般选择最低致死浓度的前一个浓度作为

筛选浓度的原因是：既可以让大部分没有抗性的细胞死亡又不会让

。实验结果如图，根据实验结果最佳的噪吟霉素筛选浓度为

1^6

(n4>O

a

D2O

屈1

遂08(>O

蓼6Q

亮4Q

2O

O

(4)过程⑦研究人员用小鼠抗SLA抗原肽单克隆抗体检测肾上皮细胞生产的抗原肽，其原

理是，单克隆抗体能检测其是否具有正确的,从而是否具有生

物活性。

题组预测二聚焦蛋白质工程

5.[2023•北京市四中高三期中]快速、准确地确定蛋白质的三维空间结构，一直是生命

科学领域的研究热点和难点。人工智能程序AlphaFold2对大部分蛋白质结构的预测极为精

准，接近真实的蛋白质结构，达到了人类利用冷冻电镜等复杂仪器观察预测的水平。下列相

关叙述不正确的是()

A.蛋白质的叁基酸序列是预测其空间结构的重要基础

B.预测、设计并制造新蛋白质的技术属于蛋白质工程

C.结构预测能帮助揭示蛋白质分子间相互作用的机制

D.依据新蛋白质的氨基酸序列能推出唯一的基因序列

6.[2023•四川南充统考三模]胰岛素是治疗糖尿病的特效药，但天然胰岛素在人体内的

寿命只有几个小时。重症患者每天需要注射多次药物，增加了痛苦。通过蛋白质工程改变蛋

白质的空间结构，以延长蛋白质的半衰期，可得到长效胰岛素，还可以增强其•稳定性。下图

是通过蛋白质工程获得长效胰岛素的过程。请分析回答：

⑴构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键，图中构建新蛋白质模型的主要依据是

(2)通过人工合成DNA形成的新基因应与结合后，转移到一

中，才能准确表达。

(3)若要利用大肠杆菌生产上述长效胰岛素，需要用到的生物工程有

和发酵工程。

(4)图解中从新的胰岛素模型到新的胰岛素基因的基本思路是

专题拓展-素养落地22PCR技大中的引物的设计

知识拓展

1.设计引物的原则

引物是根据FI的基因特有的一段已知的核昔酸序列设计合成的，能与目的基因的模板链

通过碱基互补配对特异性地结合。设计引物的主要原则为①引物长度应大于16个核苜酸，可

防止随机结合；②引物与靶序列间的T不应过低；③引物不应有发夹结构，即不能有4bp以

上的回文序列；④2个引物间不应有4bp以上的互补序列或同源序列，在3,端不应有任何互

补的碱基；⑤引物中碱基的分布尽可能均匀，G+C含量接近50%。⑥引物5'端可以修饰,3'

端不可修饰。a.引物的5'端决定着PCR产物的长度，它对扩增特异性影响不大。因此，可

以被修饰而不影响扩增的特异性。引物5'端修饰包括：加随切位点，加标记荧光，引入点

突变、插入突变、缺失突变序列；引入启动子序列等。b.引物的延伸是从3'端开始的，不

能进行任何修饰。c.在引物的5'端连接一对限制前的识别序列，这样便于目的基因连接到

载体上。

模板1

y5'

限制陶引物2

限制酶

识别序列引物】岬序列

mini

5模板23'

引物5,端链接限制陋的识别序列（两种引物两种限制陋）

双酶切优点：防止自连

a酶

前a睥b情

■质粒）

含有目的基丽DNA片段

------双酶切

|DNA连接福

2.引物的处理由于引物延伸从3'端开始，3'端不能进行任何修饰，引物5,端对扩增

特异性影响不大，因此，可给予修饰而不影响扩增特异性。引物5,端修饰包括加酶切位点、

标记生物素、荧光等。为了使经PCR扩增的目的基因能与运载体正常结合，需要在2种引物

的5'端添加不同的限制隈的识别序列。在2种引物的5'端上添加不同的限制酣识别序列，

是为了保证目的基因定向插入运载体并可避免目的基因自身环化。

3.引物具有以下儿个特点：引物能与D5IA模板通过碱基互补配对结合；2种引物之间不

能互补配对；某一引物不能自身折叠出现局部碱基互补配对；需要在2种引物的5'端添加

不同的限制前的识别序列；引物不能太短。

专项提升

1.请回答基因工程方面的有关问题

⑴通过PCR技术可在DNA分子中专一性扩增出某目的基因，其原因是

（2）请回答基因工程方面的有关问题：设计引物是PCR技术关键步骤之一某同学设计的2

组引物都不合理，请分别说明理由。

此引物1*LT~1-LTT-

第1组引物CAGGCT

［引物n•——一一一---------

AGCCTG

「弓I物】•।।~।~।~।Illi~r-

第2组引物AACTGCAGTT

［引物-----riii.---------------

CGACTGATTA

设计的2组引物部分碱基序列

第1组：_____________________________________________________________________

第2组：_____________________________________________________________________

(3)科研过程中，可用PCR技术检测受体细胞是否成力转入了目的基因。提取转化后的细

胞的全部DNA分子，用目的基因的引物扩增。扩增完毕后，检测发现扩增产物中除目的基因

外，还有其他不同大小片段的非目的基因片段，可能的原因一般有_________。

①模板受到污染；②退火温度过高；③引物太短；④延伸温度偏低。

2.［2023•山东淄博统考一模］重叠延伸PCR技术是采用具有互补末端的引物，使PCR

产物形成了重叠链，从而在随后的扩增反应中通过重置链的延伸，将不同来源的扩增片段重

叠拼接起来的技术，可通过定点诱变在体外改造DNA分子，并将改造后的目的基因导入质粒

构建目的基因表达载体。

①

5，

53引

物

AT

1.cTA

3GC

CG

II

GC

CG混

GC合

TA后

5^加

引

明U

热

物

的

y变

AB3

AT性

TA退

Gr

CG火

1—

GC

CG

GC

TA

引

«

D3

(1)上图所示的重叠延伸PCR技术中，PCR1的引物是。PCR4可获得

大量定点诱变目的基因，比时的引物为oPCR3时模板DNA不能选择DNA

分子③的原因是____________________________________________________________

(2)为使重叠延伸PCR技术改造后的目的基因(该基因序列不含图中限制酶的识别字歹U)

能与载体正确连接，PCR4时，应在基因上、下游引物的_________端分别添加限制酶

____________的酶切位点。

(3)将目的基因、质粒及大肠杆菌混合，温育•段时间后涂在含四环素的平板上培养，■

段时间后平板上长出菌落。这些菌落的菌体内(填“一定”或“不一定”)含有目

的基因，理由是。

考点梳理-整合突破

整合考点23生物技术的安全性与伦理问题

任务驱动

任务1理清治疗性克隆与生殖性克隆的关系

型

项目、\治疗性克隆生殖性克隆

区目的从胚胎中获取_________用于医学研究和治疗用于生育，获得人的复制品

别水平细胞水平________水平

联系都属于_________生殖；产生的新个体或新组织，_________相同

任务2比较试管要人和设计试管婴儿的异同点

体外受精

亘

（1）试管婴儿主要是解决不孕