2026年分子诊断三基三严考试题库及答案

2026年分子诊断三基三严考试题库及答案一、基础知识（一）单选题1.下列哪种核酸分子的二级结构为双螺旋结构？A.mRNAB.tRNAC.rRNAD.DNA答案：D解析：DNA分子具有典型的双螺旋二级结构，而mRNA、tRNA、rRNA的结构各有特点，并非双螺旋结构。mRNA是单链，tRNA呈三叶草形，rRNA与蛋白质结合形成核糖体。2.以下哪种酶可用于DNA的体外合成？A.逆转录酶B.DNA聚合酶C.RNA聚合酶D.限制性内切酶答案：B解析：DNA聚合酶能以DNA为模板，在引物的引导下，将脱氧核苷酸逐个添加到引物的3'OH端，实现DNA的体外合成。逆转录酶是以RNA为模板合成DNA；RNA聚合酶用于转录合成RNA；限制性内切酶用于切割DNA。3.人类基因组中编码蛋白质的基因约占总基因组的比例是：A.1%2%B.5%10%C.20%30%D.50%以上答案：A解析：人类基因组中，真正编码蛋白质的基因只占总基因组的1%2%，其余大部分为非编码序列，这些非编码序列在基因调控等方面发挥着重要作用。4.核酸杂交技术的原理是：A.核酸分子的变性与复性B.核酸分子的酶切C.核酸分子的复制D.核酸分子的转录答案：A解析：核酸杂交是指具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下（如适当的温度、离子强度等），按碱基互补配对原则形成双链的过程，其基础是核酸分子的变性与复性。变性是使双链解开成单链，复性则是单链重新结合成双链。5.下列哪种碱基不属于DNA的组成成分？A.腺嘌呤（A）B.鸟嘌呤（G）C.尿嘧啶（U）D.胞嘧啶（C）答案：C解析：DNA的组成碱基有腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胞嘧啶（C）和胸腺嘧啶（T），而尿嘧啶（U）是RNA的特有碱基。（二）多选题1.常见的基因诊断技术包括：A.聚合酶链反应（PCR）B.荧光原位杂交（FISH）C.基因芯片技术D.测序技术答案：ABCD解析：PCR是一种广泛应用的体外扩增特定DNA片段的技术，可用于基因的定性和定量分析；FISH可以将特定的核酸探针与染色体或组织切片上的核酸进行杂交，用于检测染色体的异常和基因的定位；基因芯片技术能同时对大量基因进行检测和分析；测序技术则可以准确测定DNA或RNA的碱基序列，是基因诊断的重要手段。2.影响DNA变性的因素有：A.温度B.离子强度C.pH值D.核酸的长度答案：ABCD解析：温度升高可使DNA双链解开，达到一定温度时发生变性；离子强度会影响DNA分子的稳定性，低离子强度可促进DNA变性；过酸或过碱的pH值环境也会破坏DNA的氢键，导致变性；核酸的长度越长，解开双链所需的能量越高，变性相对困难。3.以下关于限制性内切酶的描述正确的是：A.能识别特定的DNA序列B.具有特异性的切割位点C.可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D.切割后产生的末端都是黏性末端答案：ABC解析：限制性内切酶能够识别特定的DNA序列，并在特异性的切割位点进行切割。根据酶的组成、作用方式等可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。切割后产生的末端有黏性末端和平末端两种，并非都是黏性末端。4.基因治疗的策略有：A.基因置换B.基因增补C.基因干预D.自杀基因治疗答案：ABCD解析：基因置换是用正常基因替换突变基因；基因增补是将正常基因导入体内，补偿缺陷基因的功能；基因干预是通过抑制有害基因的表达来治疗疾病；自杀基因治疗是将自杀基因导入肿瘤细胞等特定细胞，使其产生毒性产物导致细胞死亡。5.下列属于RNA功能的有：A.传递遗传信息B.参与蛋白质合成C.催化生物化学反应D.调节基因表达答案：ABCD解析：mRNA可以将DNA上的遗传信息传递到蛋白质合成场所，起着传递遗传信息的作用；tRNA和rRNA参与蛋白质的合成过程；某些RNA具有酶的活性，能够催化生物化学反应，如核酶；此外，一些非编码RNA还可以在转录水平、转录后水平等调节基因的表达。（三）判断题1.所有的基因突变都会导致疾病的发生。（×）解析：基因突变并不一定都会导致疾病发生。有些基因突变可能发生在非编码区，或者虽然发生在编码区但不影响蛋白质的功能，或者产生的变异对机体没有明显影响，甚至有些突变可能赋予机体新的优势。2.PCR反应中需要模板、引物、dNTP、DNA聚合酶和缓冲液等成分。（√）解析：模板是待扩增的DNA序列；引物是与模板特定区域互补的短链DNA，引导DNA聚合酶的起始合成；dNTP是合成DNA的原料；DNA聚合酶催化脱氧核苷酸的聚合反应；缓冲液提供适宜的反应环境，维持反应体系的pH值和离子强度等。3.基因芯片技术只能用于检测基因的表达水平。（×）解析：基因芯片技术除了用于检测基因的表达水平外，还可用于基因突变检测、单核苷酸多态性（SNP）分析、基因分型等多个方面。4.线粒体DNA只通过母系遗传。（√）解析：线粒体存在于细胞质中，在受精过程中，受精卵的细胞质主要来自卵子，因此线粒体DNA主要通过母系遗传给子代。5.Southern印迹杂交是用于检测RNA的技术。（×）解析：Southern印迹杂交主要用于检测DNA，将DNA样品经酶切、电泳分离后转移到膜上，再与标记的核酸探针进行杂交。而用于检测RNA的类似技术是Northern印迹杂交。二、基本技能（一）单选题1.在PCR反应中，引物的设计原则不包括：A.引物长度一般为1825个碱基B.引物的GC含量应在40%60%之间C.引物3'端可以有多个连续的G或CD.避免引物自身形成二级结构答案：C解析：引物3'端应避免有多个连续的G或C，因为这样可能导致引物与模板非特异性结合，增加错配的概率。引物长度一般为1825个碱基，GC含量在40%60%之间，同时要避免引物自身形成二级结构，以保证引物能有效地与模板结合并引导PCR反应的进行。2.进行核酸提取时，常用的有机溶剂是：A.乙醇B.异丙醇C.酚/氯仿D.丙酮答案：C解析：酚/氯仿是核酸提取中常用的有机溶剂，它可以使蛋白质变性并与核酸分离，通过离心后，蛋白质位于有机相，核酸位于水相，从而实现核酸的初步纯化。乙醇和异丙醇常用于核酸的沉淀，而丙酮一般不用于核酸提取。3.在荧光定量PCR中，Ct值的含义是：A.达到荧光阈值时的循环数B.荧光信号的强度C.扩增产物的浓度D.反应体系的温度答案：A解析：Ct值即循环阈值，是指在荧光定量PCR反应中，荧光信号达到设定的荧光阈值时所经历的循环数。Ct值与模板的起始拷贝数呈反比关系，可以用于定量分析。4.以下哪种方法可用于检测SNP？A.变性高效液相色谱（DHPLC）B.脉冲场凝胶电泳（PFGE）C.等密度离心D.密度梯度离心答案：A解析：变性高效液相色谱（DHPLC）可以检测DNA序列的微小差异，能有效检测SNP。脉冲场凝胶电泳主要用于分离大片段DNA；等密度离心和密度梯度离心常用于细胞组分、生物大分子等的分离和纯化，并非用于SNP检测。5.基因芯片杂交实验中，杂交温度的选择通常根据：A.探针的长度和GC含量B.样本的浓度C.芯片的类型D.杂交时间的长短答案：A解析：探针的长度和GC含量会影响其与靶序列的杂交稳定性，一般来说，探针越长、GC含量越高，所需的杂交温度越高。样本浓度主要影响杂交信号的强度；芯片类型与杂交温度的选择没有直接关系；杂交时间的长短是根据杂交实验的要求和条件来确定的，而不是决定杂交温度的因素。（二）多选题1.下列关于PCR技术操作的注意事项正确的有：A.操作过程应严格避免污染B.引物和模板的浓度要适当C.反应体系的配制应在冰上进行D.PCR循环参数要根据不同的模板和引物进行优化答案：ABCD解析：PCR技术灵敏度高，操作过程中任何外来DNA的污染都可能导致假阳性结果，因此要严格避免污染；引物和模板的浓度合适才能保证PCR反应的高效和特异性；反应体系的配制在冰上进行可以减少引物和模板的非特异性结合；不同的模板和引物其特性不同，需要对PCR循环参数如变性温度、退火温度、延伸时间等进行优化，以获得最佳的扩增效果。2.核酸凝胶电泳的实验步骤包括：A.制备凝胶B.上样C.电泳D.染色及观察答案：ABCD解析：首先需要制备合适浓度的凝胶，如琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶；然后将核酸样品与上样缓冲液混合后加入到凝胶的加样孔中；接着接通电源进行电泳，使核酸分子在电场中移动；最后用合适的染料对凝胶进行染色，在紫外灯下或其他检测设备下观察核酸条带的位置和大小。3.在基因测序操作中，可能遇到的问题有：A.信号强度不一致B.序列模糊不清C.存在引物二聚体峰D.测序结果出现杂峰答案：ABCD解析：信号强度不一致可能是由于模板量不均匀、测序反应条件不稳定等原因导致；序列模糊不清可能是由于模板质量不佳、测序反应不完全等；引物二聚体峰是由于引物自身相互配对形成二聚体，影响测序反应；测序结果出现杂峰可能是模板不纯、存在污染或者有多个模板同时被测序等原因造成。4.荧光原位杂交（FISH）技术操作包括以下步骤：A.制备探针B.标本预处理C.杂交D.检测和分析答案：ABCD解析：首先要制备与目标序列互补的核酸探针，可对其进行标记以便后续检测；对标本进行预处理，如固定、通透等，使探针能够进入细胞与核酸结合；然后将探针与处理好的标本进行杂交反应；最后通过荧光显微镜等设备对杂交信号进行检测和分析，确定目标序列的位置和数量等信息。5.限制酶消化实验的操作要点有：A.选用合适的限制酶B.控制反应温度和时间C.保证酶的活性D.使用合适的缓冲液答案：ABCD解析：要根据实验目的和DNA序列特点选用合适的限制酶；不同的限制酶有其最适反应温度和时间，需要严格控制；酶的活性受多种因素影响，如温度、pH值、保存条件等，要保证酶处于活性状态；合适的缓冲液能提供适宜的离子强度和pH值，有利于限制酶发挥作用。（三）判断题1.在PCR实验中，增加循环数一定会提高扩增产物的量。（×）解析：在PCR反应的早期，随着循环数的增加，扩增产物的量呈指数增长，但当反应达到平台期后，即使再增加循环数，扩增产物的量也不会继续显著增加，反而可能由于非特异性扩增等因素导致产物的质量下降。2.核酸提取时，使用的离心机转速越高越好。（×）解析：离心机转速应根据具体的实验要求和样品类型来选择，过高的转速可能会导致核酸断裂、损伤，也可能使其他杂质过度沉淀影响核酸的纯度，因此并非转速越高越好。3.荧光定量PCR实验中，内参基因的作用是校正加样误差和反应效率差异。（√）解析：内参基因是在各种组织和细胞中表达相对稳定的基因，在荧光定量PCR实验中，通过同时检测内参基因和目标基因的表达情况，可以消除加样误差以及不同样本之间反应效率的差异，使定量结果更准确可靠。4.基因芯片实验中，样本标记后可以直接进行杂交。（×）解析：样本标记后通常需要进行纯化等处理，去除未标记的物质、多余的标记物等，以减少非特异性杂交，提高杂交的特异性和准确性，然后再进行杂交实验。5.在测序实验中，只要得到清晰的测序峰图就可以确定准确的序列。（×）解析：虽然清晰的测序峰图是获得准确序列的重要基础，但还需要对测序结果进行多方分析和验证，如与已知序列进行比对、排除可能的测序错误、验证重复测序结果等，以确保序列的准确性。三、基本理论（一）单选题1.分子诊断在肿瘤诊断中的主要应用不包括：A.肿瘤的早期诊断B.肿瘤的分型和分期C.肿瘤的治愈判断D.肿瘤的预后评估答案：C解析：分子诊断可通过检测肿瘤相关基因的变化，用于肿瘤的早期诊断，发现潜在的肿瘤细胞；也能对肿瘤进行分型和分期，为治疗方案的选择提供依据；还可用于肿瘤的预后评估，预测患者的生存情况和复发风险等。但目前分子诊断技术不能直接用于判断肿瘤是否治愈，肿瘤的治愈判断需要结合患者的临床表现、影像学检查等多方面因素。2.以下关于遗传性疾病的分子诊断描述错误的是：A.可以明确致病基因B.能进行产前诊断C.可以治愈所有遗传性疾病D.有助于遗传咨询答案：C解析：分子诊断技术可以通过检测患者的基因序列，明确导致遗传性疾病的致病基因；在产前通过采集胎儿的样本进行分子诊断，能够判断胎儿是否患有某些遗传性疾病；同时，明确致病基因有助于遗传咨询，为患者及其家属提供遗传信息和建议。然而，目前分子诊断虽然为遗传性疾病的诊断和研究提供了有力手段，但并不能治愈所有的遗传性疾病。3.感染性疾病的分子诊断优势在于：A.检测速度快B.特异性高C.能检测到难以培养的病原体D.以上都是答案：D解析：与传统的培养等方法相比，分子诊断技术检测感染性疾病速度更快，能够在短时间内得出结果；具有较高的特异性，可以准确地识别病原体；而且对于一些难以培养或生长缓慢的病原体，分子诊断技术也能有效地进行检测。4.表观遗传学改变主要包括：A.DNA甲基化B.组蛋白修饰C.非编码RNA调控D.以上都是答案：D解析：表观遗传学是指在不改变DNA序列的情况下，对基因表达进行调控的现象。主要的表观遗传学改变包括DNA甲基化，它可以影响基因的转录活性；组蛋白修饰，如甲基化、乙酰化等，可以改变染色质的结构和功能，影响基因的表达；非编码RNA调控，如miRNA、lncRNA等可以在转录水平和转录后水平调控基因表达。5.基因多态性与疾病的关系不包括：A.增加疾病的易感性B.影响药物的疗效C.决定疾病的发生D.影响疾病的预后答案：C解析：基因多态性是指在人群中，不同个体的基因序列存在一定的差异。某些基因多态性可以增加个体对疾病的易感性，使个体更容易患上某种疾病；也会影响药物在体内的代谢和疗效，导致不同个体对同一药物的反应不同；还可能影响疾病的预后情况。但基因多态性一般不是决定疾病发生的唯一因素，疾病的发生是基因与环境因素共同作用的结果。（二）多选题1.分子诊断在个性化医疗中的应用包括：A.疾病的早期诊断和预警B.指导治疗方案的选择C.评估药物疗效和不良反应D.疾病的预防和遗传咨询答案：ABCD解析：分子诊断可以在疾病早期检测到基因和分子水平的变化，实现疾病的早期诊断和预警；通过检测与疾病相关的基因和分子标志物，能够指导临床医生选择更合适的治疗方案；可以预测患者对药物的反应，评估药物疗效和不良反应；对于有遗传倾向的疾病，分子诊断还可用于疾病的预防和为患者及其家属提供遗传咨询。2.肿瘤分子诊断中常用的生物标志物有：A.癌胚抗原（CEA）B.甲胎蛋白（AFP）C.人类表皮生长因子受体2（HER2）D.结直肠癌相关基因（KRAS）答案：ABCD解析：癌胚抗原（CEA）和甲胎蛋白（AFP）是临床上常用的肿瘤标志物，在多种肿瘤的诊断、病情监测和预后评估中发挥重要作用；人类表皮生长因子受体2（HER2）与乳腺癌等肿瘤的发生、发展和预后密切相关，也是靶向治疗的重要靶点；结直肠癌相关基因（KRAS）的突变状态可指导结直肠癌的治疗方案选择。3.关于基因诊断的临床应用前景，以下说法正确的有：A.提高疾病诊断的准确性B.实现疾病的早期诊断C.推动个性化医疗的发展D.可能引发伦理和法律问题答案：ABCD解析：基因诊断能够检测到疾病在基因水平的变化，提高疾病诊断的准确性；在疾病尚未出现明显临床症状时，就可以通过检测基因异常实现早期诊断；为个性化医疗提供了依据，根据患者的基因信息制定更精准的治疗方案；同时，基因诊断涉及到个人的基因隐私、基因歧视等问题，可能会引发一系列伦理和法律问题。4.感染性疾病分子诊断的方法有：A.PCR技术B.核酸杂交技术C.基因测序技术D.蛋白质芯片技术答案：ABC解析：PCR技术可以快速扩增病原体的核酸，用于检测病原体的存在；核酸杂交技术能特异性地识别病原体的核酸序列；基因测序技术可以准确测定病原体的基因序列，用于病原体的鉴定和分型。而蛋白质芯片技术主要用于检测蛋白质，不是感染性疾病分子诊断的主要方法。5.表观遗传学在疾病发生发展中的作用包括：A.参与肿瘤的发生发展B.影响神经系统疾病的发生C.与心血管疾病的发病相关